천연 마이크로바이옴을 가진 실험용 마우스를 위한 시설의 운영 및 생물 봉쇄 절차: 면역표현형 분석 절차

영양이 면역 체계에 미치는 영향을 조사합니다. 그리고 우리는 특히 칼로리 제한과 단식 요법의 노화 방지 및 항염증 효과와 이러한 과정에서 미생물총(microbiota)의 역할에 관심이 있습니다. 와일들링 마우스는 실험실 마우스 균주의 잘 특성화된 유전적 배경과 자유롭게 돌아다니는 마우스의 자연 마이크로바이옴을 결합합니다.

그러나 이 와일들링 마우스의 자연 마이크로바이옴에는 바이러스, 박테리아 및 기생충이 포함되어 있어 축산 시설에 문제가 되고 있습니다. QUEST Center for Responsible Research의 기여는 Russell과 Burch가 알고 있는 3가지 R, 교체, 개선 및 감소를 강화하는 6가지 R 프레임워크를 개발한 것입니다. 이 프레임워크는 전임상 연구의 재현성과 투명성을 향상시키는 것을 목표로 합니다.

그리고 실험 결과는 더 신뢰할 수 있고 신뢰할 수 있으며 궁극적으로 임상 맥락으로 번역할 수 있다는 아이디어입니다. 지난 4년 동안 우리는 독특한 생물 격리 절차를 통해 야생 쥐를 위한 시설의 개념을 개발했습니다. 우리는 연구자들과 우리의 전문 지식을 공유하여 그들이 천연 마이크로바이옴을 가진 쥐를 연구에 포함할 수 있도록

뇌졸중은 노화된 사람들에게 가장 흔합니다. 면역 체계는 감염 입자와 싸우고 이질적인 미생물총(microbiota)과 함께 살아가는 기억 세포를 가지고 있습니다. 따라서 와일들링 마우스에서 뇌졸중을 모델링하는 것은 환자의 상태를 더 잘 반영하는 설치류의 정제된 모델입니다.

에어리어 팬츠, 코사크, 일회용 신발 커버로 갈아입은 후 에어 샤워기 대기실에서 신발과 양말을 벗습니다. 지역 양말과 Tyvek 작업복, 헤어네트, 면 장갑, 니트릴 장갑 및 안면 마스크를 포함한 전신 개인 보호 장비를 착용하십시오. 접착 바닥재를 통해 에어 샤워 착용 구역 양말에 들어갑니다.

에어 샤워를 하는 동안 팔을 들어 360도 회전을 합니다. 에어 샤워기를 나와 반대편에 있는 에어리어 슈즈를 신습니다. 밀폐되고 개별적으로 환기되는 케이지에 있는 방에서 마우스를 시술실로 옮깁니다.

마취된 쥐를 소독된 테이블에 엎드려 놓고 목덜미를 잡고 목 정맥을 압박합니다. 한 손을 사용하여 엄지와 검지로 마우스의 머리를 고정합니다. nictitating membrane 아래 눈의 내측 안각에 45도 각도로 새로운 모세혈관을 삽입합니다.

혈액이 흐르기 시작할 때까지 안와 뒤쪽에 있는 부비동막을 통해 모세혈관을 축 방향으로 회전합니다. EDTA 한 방울이 들어 있는 채혈 튜브에 최소 15마이크로리터의 혈액을 수집합니다. 모세 혈관을 제거하기 전에 목덜미의 손잡이를 느슨하게 하여 조직으로의 출혈을 최소화하십시오.

깨끗한 거즈 패드나 면봉을 사용하여 출혈을 멈추고 지혈을 확인합니다. 튜브를 약간 돌려 흔들지 않고 혈액과 EDTA를 혼합하고 혈액 샘플을 얼음에 보관합니다. 혈액 채취를 완료한 후 장갑을 교체하고 모든 재료와 표면을 소독합니다.

LAF 객실 앞에 위치한 접근 층류 공기 흐름(LAF)에서 새 보호복을 착용하십시오. 샘플 용기를 소독하고 LAF 객실의 유리 벽에 있는 슬라이딩 도어를 통해 제거합니다. 샘플 용기를 두 사람에게 옮긴 후 모든 표면을 소독합니다.

LAF 캐빈의 유리벽에 있는 슬라이딩 도어를 통해 직접 접촉하지 않고 와일들링 지역에서 소독된 샘플 용기를 받습니다. 그런 다음 일회용 작업복과 지역 신발을 지정된 구역 내에 두십시오. 헤어네트, 고무장갑, 안면 마스크를 폐기하십시오.

에어 샤워는 즉시 양말 부위에 넣으십시오. 팔을 들어 올리고 에어 샤워를 하면서 360도 회전을 수행합니다. 에어 샤워기는 그대로 두고 세탁물 수집기에 양말을 넣으십시오.

개인 양말, 신발, 일회용 신발 커버를 착용하십시오. 탈의실 세탁물 수거점에 지역 의류를 맡기고 일반 옷으로 갈아입습니다.