Name: 낮은 DNA 단편화 지수로 고품질 정자를 준비하기 위한 U자형 수평 수영 기술 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-03-28T12:45:00.000+00:00
Duration: 9 min 16 s
Description: 배우세요 U자형 수평 수영 기술을 이용하여 DNA 단편화 지수가 낮은 고품질 정자를 선별하는 방법을. 미세유체 기술과 촉각성 운동을 활용한 이 기법은 불활동 정자와 불순물을 제거하여 생식 의학 연구에 활용됩니다.

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<ol><li>Villeneuve, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spermatozoa+isolation+with+Felix+outperforms+conventional+density+gradient+centrifugation+preparation+in+selecting+cells+with+low+DNA+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Andrology%22%5BJournal%5D)">Spermatozoa isolation with Felix outperforms conventional density gradient centrifugation preparation in selecting cells with low DNA damage.</a> Andrology. 11 (8), 1593-1604 (2023).</li>
<li>World Health Organization. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22WHO+laboratory+manual+for+the+examination+and+processing+of+human+semen%22">WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen</a>. , World Health Organization. Geneva. (2021).</li>
<li>Fernandes, N. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+sperm+recovery+rate+after+density+gradient+centrifugation+with+two+media+for+in+vitro+fertilization%5BTitle%5D)+AND+%22JBRA+Assist+Reprod%22%5BJournal%5D)">Comparative sperm recovery rate after density gradient centrifugation with two media for in vitro fertilization.</a> JBRA Assist Reprod. 27 (1), 25-28 (2023).</li>
<li>Dai, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sperm+enrichment+from+poor+semen+samples+by+double-density+gradient+centrifugation+in+combination+with+swim-up+for+IVF+cycles%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Sperm enrichment from poor semen samples by double-density gradient centrifugation in combination with swim-up for IVF cycles.</a> Sci Rep. 10 (1), 2286(2020).</li>
<li>Hoa, N. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effectiveness+of+sperm+preparation+using+density+mini-gradient+and+single-layer+centrifugation+for+oligospermia+samples%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Inform+Med%22%5BJournal%5D)">The effectiveness of sperm preparation using density mini-gradient and single-layer centrifugation for oligospermia samples.</a> Acta Inform Med. 30 (2), 100-104 (2022).</li>
<li>Le, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+sperm+preparation+techniques+on+sperm+survivability+and+DNA+fragmentation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Int+Med+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of sperm preparation techniques on sperm survivability and DNA fragmentation.</a> J Int Med Res. 50 (5), 1-11 (2022).</li>
<li>Baldini, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+fast+and+safe+technique+for+sperm+preparation+in+ICSI+treatments+within+a+randomized+controlled+trial+%28RCT%29%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Biol+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">A fast and safe technique for sperm preparation in ICSI treatments within a randomized controlled trial (RCT).</a> Reprod Biol Endocrinol. 18 (88), 1-9 (2020).</li>
<li>Gode, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+microfluid+sperm+sorting+chip+and+density+gradient+methods+for+use+in+intrauterine+insemination+cycles%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil+Steril%22%5BJournal%5D)">Comparison of microfluid sperm sorting chip and density gradient methods for use in intrauterine insemination cycles.</a> Fertil Steril. 112 (5), 842-848.e1 (2019).</li>
<li>Simchi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selection+of+high-quality+sperm+with+thousands+of+parallel+channels%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Chip%22%5BJournal%5D)">Selection of high-quality sperm with thousands of parallel channels.</a> Lab Chip. 21 (12), 2464-2475 (2021).</li>
<li>Shapouri, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+between+the+Felix+electrophoretic+system+of+sperm+isolation+and+conventional+density+gradient+centrifugation%3A+a+multicentre+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Assist+Reprod+Gen%22%5BJournal%5D)">A comparison between the Felix electrophoretic system of sperm isolation and conventional density gradient centrifugation: a multicentre analysis.</a> J Assist Reprod Gen. 40 (1), 83-95 (2023).</li>
<li>De los Santos, M. J., et al. Revised guidelines for good practice in IVF laboratories. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDe+los+Santos%2C+MJ+%22Human+Reproduction%22">Human Reproduction</a>. 31 (4), ESHRE Guideline Group on Good Practice in IVF Labs. 685-686 (2015).</li>
<li>Montag, M., Morbeck, D. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMontag%2C+M+%22Principles+of+IVF+Laboratory+Practice%3A+Optimizing+performance+and+outcomes%22">Principles of IVF Laboratory Practice: Optimizing performance and outcomes</a>. , Cambridge University Press. Cambridge, UK. (2017).</li>
<li>Duan Li, F., Li, X., Ma, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sperm+DNA+fragmentation+index+affects+pregnancy+outcomes+and+offspring+safety+in+assisted+reproductive+technology%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Sperm DNA fragmentation index affects pregnancy outcomes and offspring safety in assisted reproductive technology.</a> Sci Rep. 14 (1), 356(2024).</li>
<li>Denissenko, P., Kantsler, V., Smith, D. J., Kirkman-Brown, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+spermatozoa+migration+in+microchannels+reveals+boundary-following+navigation%5BTitle%5D)+AND+%22P+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Human spermatozoa migration in microchannels reveals boundary-following navigation.</a> P Natl Acad Sci USA. 109 (21), 8007-8010 (2012).</li>
<li>Ahmadkhani, N., Saadatmand, M., Kazemnejad, S., Abdekhodaie, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Qualified+sperm+selection+based+on+the+rheotaxis+and+thigmotaxis+in+a+microfluidic+system%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Eng+Lett%22%5BJournal%5D)">Qualified sperm selection based on the rheotaxis and thigmotaxis in a microfluidic system.</a> Biomed Eng Lett. 13 (4), 671-680 (2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>7% 폴리비닐 피롤리돈 용액</td><td>Vitrolife 스웨덴 AB</td><td>10111</td><td>ICSI</td></tr><tr><td>흡인기</td><td>LABOTECT-</td><td></td><td>흡인자</td></tr><tr><td>생물학적 청정 작업대</td><td>쑤저우 Antai&nbsp;</td><td>-</td><td>생물학적 클린 작업대</td></tr><tr><td>배반포 배양 배지</td><td>Vitrolife Sweden AB</td><td>10132</td><td>배반포 배양 배지</td></tr><tr><td>분열 배양 배지&nbsp;</td><td>Vitrolife Sweden AB</td><td>10128</td><td>절단 배양 배지&nbsp;</td></tr><tr><td>CO2 인큐베이터</td><td>Thermo Scientific-CO2</td><td></td> <td>인큐베이터</td></tr><tr><td>배양유</td><td>Vitrolife Sweden AB</td><td>10029</td><td>OVOIL</td></tr><tr><td>일회용 플라스틱 이송 피펫</td><td>BD Falcon</td><td>357575</td><td>일회용 플라스틱 이송 피펫</td></tr> 비<tr><td>료 배지</td><td>Vitrolife Sweden AB</td><td>10136</td><td>G-IVF PLUS</td></tr><tr><td>ICSI 수술시</td><td>BD Falcon</td><td>351006</td><td>페트리 접시</td></tr><tr><td>인스턴트 히알루로니다제</td><td>Vitrolife 스웨덴 AB</td><td>10017</td><td>인스턴트 히알루로니다제</td></tr><tr><td>도립 현미경</td><td>NIKON&nbsp;</td><td>-</td><td>도립 현미경</td></tr><tr><td>IVF 워크스테이션</td><td>덴마크 K-SYSTEM-IVF</td><td></td> <td>워크스테이션</td></tr><tr><td>Makler 계수 챔버</td><td>Sefi Medical Instruments</td><td></td><td>Makler 계수 챔버</td></tr><tr><td>마이크로 운영 체제</td><td>NIKON&nbsp;</td><td>-</td><td>마이크로 운영 체제</td></tr><tr><td>난모세포 처리 매체</td><td>Vitrolife Sweden AB</td><td>10130</td><td>G-MOPS PLUS</td></tr><tr><td>광학 현미경</td><td>OLYMPUS-</td><td></td><td>광학 현미경</td></tr><tr><td>위상차 현미경&nbsp;</td><td>NIKON</td><td>-</td><td>위상차 현미경&nbsp;</td></tr><tr><td>정자 계수 보드&nbsp;</td><td>Markler</td><td>-</td><td>정자 계수 보드&nbsp;</td></tr><tr><td>정자 구배 분리 용액</td><td>Vitrolife 스웨덴 AB</td><td>10138</td><td>SpermGrad</td></tr><tr><td>정자 핵 DNA 무결성 키트</td><td>심천 HuaKang&nbsp;</td><td>-</td><td>정자 핵 DNA 무결성 키트(SCD)</td></tr> <tr><td>실체 현미경&nbsp;</td><td>NIKON</td><td>-</td><td>실체 현미경&nbsp;</td></tr><tr><td>탁상용 원심분리기</td><td>HETTICH</td> <td>탁</td><td>상용 원심분리기</td></tr><tr><td>온도 조절 시험관 랙</td><td>GRANT</td> <td>-</td> <td>온도 조절 시험관 랙</td></tr><tr><td>트라이 가스 인큐베이터</td><td>ASTEC</td> <td>-</td> <td>트라이 가스 인큐베이터</td></tr></tbody></table>

낮은 dna 단편화 지수로 고품질 정자를 준비하기 위한 u자형 수평 수영 기술

U-Shaped Horizontal Swimming Technique for Preparing High-Quality Sperm with Low DNA Fragmentation Index

UHS 및 DGC 방법을 사용하여 21개 샘플의 처리를 최적화하고 두 방법 간의 정자 DNA 단편화 지수를 비교했습니다. ICSI 접시에서 UHS 트랙을 사용하는 방법은 정자에 손상을 줄 수 있는 DGC를 대체할 수 있습니다. 진행성 운동성이 좋은 고품질 정자는 U자형 트랙의 가장자리를 따라 부드럽게 헤엄치므로(그림 2) ICSI 바늘이 개별적으로 쉽게 잡을 수 있습니다. UHS 트랙을 사용하여 분리된 고품질 정자는 DFI가 더 낮습니다(그림 3).
그림 3에 제시된 데이터를 생성하기 위해 DGC 및 UHS 방법으로 분리된 고품질 정자의 DFI는 정자 염색질 분산(SCD) 방법을 사용하여 감지되었습니다. 그 결과, DGC로 분리된 고품질 정자의 DFI는 5.5% ± 3.2%로 높았던 반면, UHS 방식으로 분리된 고품질 ...

낮은 DNA 단편화 지수로 고품질 정자를 준비하기 위한 U자형 수평 수영 기술

Human semen is a complex mixture comprising progressively motile spermatozoa, non-progressively motile spermatozoa, immotile spermatozoa, cell debris, and ...

u-shaped-horizontal-swimming-technique-for-preparing-high-quality

Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

이것은 zebrafish에 대한 높은 처리량 정자 cryopreservation 프로토콜입니다. 정자는이 프로토콜을 사용하면 이후의 체외 수정에 25 % 다산의 평균을 가지고 있으며, 수년 동안 안정 cryopreserved.

높은 처리량 Zebrafish의 정자 Cryopreservation에 대한 방법과 체외에서 수정

이 비디오 기사는 양질의 형광을 달성하기 위해 정액 샘플을 처리하는 방법을 단계적으로,...

형광 현장에서</em인간의 정자에서> 하이브리드화 (물고기) 프로토콜

Xenopus laevis 미성숙 난모세포를 조작하는 방법, 난자에서 난자로의 체외 성숙 및 세포질 내 정자 주입을 설명합니다. 이 프로토콜은 일부 모계 단백질의 분해와 수정 시 관심 유전자의 과발현을 허용하므로 초기 배아 발달에서 특정 요인의 역할을 연구하는 데 가치가 있습니다.

조작 및<em&gt; 체외</em의&gt; 성숙<em&gt; 아프리카 발톱 개구리 laevis의</em세포질 내 정자 주입에 이어&gt; 난 모세포, 배아 발달을 연구하는

배수성 조작 수정 된 프로토콜은 초기 배아 세포질 분열에 한 사이클 실속을 유도하는 열 쇼크를 사용한다. 이 프로토콜은 제브라에서 설명되지만, 다른 종에도 적용 할 수있다.

열 충격이 치료와 제브라 피쉬 배아의 배수성 조작

유럽 장 어 성숙 및 정자 cryopreservation 프로토콜 지난 수 년에 걸쳐 개선 되었습니다. 이 문서는 성숙과 메탄올 cryoprotectant로 유도 대 한 인간의 융 생식 샘 자극 호르몬 (hCG)을 사용 하 여 사용할 수 있는 최상의 프로토콜을 설명 합니다.

처리와 치료의 남성 유럽 뱀장어 (앵귈라 앵귈라) 호르몬 성숙 및 정자 Cryopreservation

여기, 우리는 spermatozoan 막 무결성, 정자의 수정 능력와 관련 된 세포 기능을 평가 하는 방법론을 제시. 우리 정자 세포 막의 fluorimetric 평가 대 한 세 가지 기술에 설명: 특정 형광 프로브, 형광 현미경 검사 법, 그리고 고급 정자 전용 cytometry 동시 얼룩. 방법론을 결합의 예제도 제공 됩니다.

정자 세포 막의 평가 대 한 Fluorimetric 기법

이 논문에서 우리 밀도 그라데이션 원심 분리 기술 및 정자 생리학 연구에 응용 프로그램의 성능에 설명 하고자 합니다.

조밀도 기온 변화도 원심 분리를 사용 하 여 차동 품질의 정자 컬렉션

핵 표면 퍼짐은 만피증 도중 염색체 사건을 공부하기 위한 필수적인 공구입니다. 여기서 우리는 제브라피쉬 정자세포로부터 의한 1단계 진행 중에 메오성 염색체를 준비하고 시각화하는 방법을 시연한다.

제브라피쉬 정자세포에서 메오틱 염색체 스프레드 의 준비

이 프로토콜은 이온 채널 활동을 직접 기록하는 것을 목표로 전체 세포 구성에서 포유류 정자 세포의 전기 기록을 수행하는 방법을 설명합니다. 이 방법은 여러 정자 이온 채널의 전기 생리학적 프로파일을 설명하는 데 중요한 역할을 했으며 분자 정체성과 조절을 밝히는 데 도움이 되었습니다.

포유류 정자 세포의 원형질막을 가로지르는 전기 전류 기록

여기에서는 마우스에서 ROSI(round spermatid injection)를 수행하는 방법, 유망한 임상 응용 기술을 가진 기술이며 배아 발달의 기전을 조사하기 위한 유용성을 소개합니다.

마우스 라운드 Spermatid 주입

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