Name: Mechanotransduction-driven, human-like hypertrophic scarring의 마우스 모델 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-11-29T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 54 s
Description: 배우세요 마우스에서 기계적 긴장을 이용해 인간 유사 비후성 흉터 모델을 만드는 방법을. 이 프로토콜은 상처 치유와 섬유증 연구에 활용됩니다.

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<ol><li>Mony, M. P., Harmon, K. A., Hess, R., Dorafshar, A. H., Shafikhani, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+updated+review+of+hypertrophic+scarring%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">An updated review of hypertrophic scarring.</a> Cells. 12 (5), 678(2023).</li>
<li>Limandjaja, G. C., Niessen, F. B., Scheper, R. J., Gibbs, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypertrophic+scars+and+keloids%3A+Overview+of+the+evidence+and+practical+guide+for+differentiating+between+these+abnormal+scars%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Hypertrophic scars and keloids: Overview of the evidence and practical guide for differentiating between these abnormal scars.</a> Exp Dermatol. 30 (1), 146-161 (2021).</li>
<li>Cao, X., Sun, L., Luo, Z., Lin, X., Zhao, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aquaculture+derived+hybrid+skin+patches+for+wound+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Engineered+Regeneration%22%5BJournal%5D)">Aquaculture derived hybrid skin patches for wound healing.</a> Engineered Regeneration. 4 (1), 28-35 (2023).</li>
<li>Ishise, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypertrophic+scar+contracture+is+mediated+by+the+trpc3+mechanical+force+transducer+via+nfkb+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Hypertrophic scar contracture is mediated by the trpc3 mechanical force transducer via nfkb activation.</a> Sci Rep. 5 (1), 11620(2015).</li>
<li>Padmanabhan, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Allometrically+scaling+tissue+forces+drive+pathological+foreign-body+responses+to+implants+via+rac2-activated+myeloid+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">Allometrically scaling tissue forces drive pathological foreign-body responses to implants via rac2-activated myeloid cells.</a> Nat Biomed Eng. 7 (11), 1419-1436 (2023).</li>
<li>Kussie, H. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Avenanthramide+and+%CE%B2-glucan+therapeutics+accelerate+wound+healing+via+distinct+and+nonoverlapping+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Wound+Care+%28New+Rochelle%29%22%5BJournal%5D)">Avenanthramide and β-glucan therapeutics accelerate wound healing via distinct and nonoverlapping mechanisms.</a> Adv Wound Care (New Rochelle). 13 (4), 155-166 (2024).</li>
<li>Chen, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disrupting+biological+sensors+of+force+promotes+tissue+regeneration+in+large+organisms%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Disrupting biological sensors of force promotes tissue regeneration in large organisms.</a> Nat Commun. 12 (1), 5256(2021).</li>
<li>Chen, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+boundary+conditions+in+determining+cell+alignment+in+response+to+stretch%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Role of boundary conditions in determining cell alignment in response to stretch.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 115 (5), 986-991 (2018).</li>
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<li>Aarabi, S., Longaker, M. T., Gurtner, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypertrophic+scar+formation+following+burns+and+trauma%3A+New+approaches+to+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Med%22%5BJournal%5D)">Hypertrophic scar formation following burns and trauma: New approaches to treatment.</a> PLoS Med. 4 (9), e234(2007).</li>
<li>He, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanical+stretch+promotes+hypertrophic+scar+formation+through+mechanically+activated+cation+channel+piezo1%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Dis%22%5BJournal%5D)">Mechanical stretch promotes hypertrophic scar formation through mechanically activated cation channel piezo1.</a> Cell Death Dis. 12 (3), 226(2021).</li>
<li>Weng, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ellipsoidal+porous+patch+with+anisotropic+cell+inducing+ability+for+inhibiting+skin+scar+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Engineered+Regeneration%22%5BJournal%5D)">Ellipsoidal porous patch with anisotropic cell inducing ability for inhibiting skin scar formation.</a> Engineered Regeneration. 3 (3), 262-269 (2022).</li>
<li>Lawrence, J. W., Mason, S. T., Schomer, K., Klein, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+and+impact+of+scarring+after+burn+injury%3A+A+systematic+review+of+the+literature%5BTitle%5D)+AND+%22J+Burn+Care+Res%22%5BJournal%5D)">Epidemiology and impact of scarring after burn injury: A systematic review of the literature.</a> J Burn Care Res. 33 (1), 136-146 (2012).</li>
<li>Ziolkowski, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Psychosocial+and+quality+of+life+impact+of+scars+in+the+surgical%2C+traumatic+and+burn+populations%3A+A+scoping+review+protocol%5BTitle%5D)+AND+%22BMJ+Open%22%5BJournal%5D)">Psychosocial and quality of life impact of scars in the surgical, traumatic and burn populations: A scoping review protocol.</a> BMJ Open. 9 (6), e021289(2019).</li>
<li>Gauglitz, G. G., Korting, H. C., Pavicic, T., Ruzicka, T., Jeschke, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypertrophic+scarring+and+keloids%3A+Pathomechanisms+and+current+and+emerging+treatment+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Hypertrophic scarring and keloids: Pathomechanisms and current and emerging treatment strategies.</a> Mol Med. 17 (1-2), 113-125 (2011).</li>
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<li>Ogawa, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+applications+of+basic+research+that+shows+reducing+skin+tension+could+prevent+and+treat+abnormal+scarring%3A+The+importance+of+fascial%2Fsubcutaneous+tensile+reduction+sutures+and+flap+surgery+for+keloid+and+hypertrophic+scar+reconstruction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nippon+Med+Sch%22%5BJournal%5D)">Clinical applications of basic research that shows reducing skin tension could prevent and treat abnormal scarring: The importance of fascial/subcutaneous tensile reduction sutures and flap surgery for keloid and hypertrophic scar reconstruction.</a> J Nippon Med Sch. 78 (2), 68-76 (2011).</li>
<li>Chen, K., Henn, D., Gurtner, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Holy+grail+of+tissue+regeneration%3A+Size%5BTitle%5D)+AND+%22Bioessays%22%5BJournal%5D)">Holy grail of tissue regeneration: Size.</a> Bioessays. 44 (9), e2200047(2022).</li>
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<li>Chen, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pullulan-collagen+hydrogel+wound+dressing+promotes+dermal+remodelling+and+wound+healing+compared+to+commercially+available+collagen+dressings%5BTitle%5D)+AND+%22Wound+Repair+Regen%22%5BJournal%5D)">Pullulan-collagen hydrogel wound dressing promotes dermal remodelling and wound healing compared to commercially available collagen dressings.</a> Wound Repair Regen. 30 (3), 397-408 (2022).</li>
<li>Mascharak, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preventing+engrailed-1+activation+in+fibroblasts+yields+wound+regeneration+without+scarring%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Preventing engrailed-1 activation in fibroblasts yields wound regeneration without scarring.</a> Science. 372 (6540), eaba2374(2021).</li>
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<li>Wang, P. H., Huang, B. S., Horng, H. C., Yeh, C. C., Chen, Y. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wound+healing%5BTitle%5D)+AND+%22J+Chin+Med+Assoc%22%5BJournal%5D)">Wound healing.</a> J Chin Med Assoc. 81 (2), 94-101 (2018).</li>
<li>Azmat, C. E. Martha Council. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wound+closure+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Statpearls%22%5BJournal%5D)">Wound closure techniques.</a> Statpearls. , StatPearls Publishing LLC. Treasure Island (FL). (2024).</li>
<li>Tunca, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cryosurgery+to+remove+perichondrium+for+the+rabbit+ear+hypertrophic+scar+model%3A+A+simplified+method%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Dermatovenerol+Alp+Pannonica+Adriat%22%5BJournal%5D)">Cryosurgery to remove perichondrium for the rabbit ear hypertrophic scar model: A simplified method.</a> Acta Dermatovenerol Alp Pannonica Adriat. 28 (2), 57-59 (2019).</li>
<li>Sun, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+timing+of+postoperative+radiotherapy+on+hypertrophic+scar+in+a+rabbit+model%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Sci+Monit%22%5BJournal%5D)">The effects of timing of postoperative radiotherapy on hypertrophic scar in a rabbit model.</a> Med Sci Monit. 26, e921263(2020).</li>
<li>Zu, W., Jiang, B., Liu, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+a+long-term+hypertrophic+scar+model+by+injection+of+anhydrous+alcohol%3A+A+rabbit+model%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Exp+Pathol%22%5BJournal%5D)">Establishment of a long-term hypertrophic scar model by injection of anhydrous alcohol: A rabbit model.</a> Int J Exp Pathol. 102 (2), 105-112 (2021).</li>
<li>Molina, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Angiogenic+gene+characterization+and+vessel+permeability+of+dermal+microvascular+endothelial+cells+isolated+from+burn+hypertrophic+scar%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Angiogenic gene characterization and vessel permeability of dermal microvascular endothelial cells isolated from burn hypertrophic scar.</a> Sci Rep. 12 (1), 12222(2022).</li>
<li>Li, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+highly+simulated+scar+model+developed+by+grafting+human+thin+split-thickness+skin+on+back+of+nude+mouse%3A+The+remodeling+process%2C+histological+characteristics+of+scars%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Res+Commun%22%5BJournal%5D)">A highly simulated scar model developed by grafting human thin split-thickness skin on back of nude mouse: The remodeling process, histological characteristics of scars.</a> Biochem Biophys Res Commun. 526 (3), 744-750 (2020).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>100mL PYREX 그리핀 비커</td><td>Milipore Signma</td><td>CLS1000100</td><td></td></tr><tr><td>Aesculap Exacta 미니 트리머</td><td>Aesculap</td><td></td><td></td></tr><tr><td>AutoClip 시스템</td><td>정밀 수술 기구</td><td>12020-00</td><td></td></tr><tr><td>BD 브랜드 이소프로필 알코올 면봉</td><td>Fisher Scientific</td><td>13-680-63</td><td></td></tr><tr><td>부프레노르핀 SR(0.5mg/mL)</td><td>부프레넥스, 인디비오르 Inc.</td><td>12496-0757-1</td><td></td></tr><tr><td>C57/BL6 여성 (6&ndash; 8주령)</td><td>The Jackson Laboratory</td><td>000664</td><td></td></tr><tr><td>Covidien sterile gauze</td><td>Fisher Scientific</td><td>2187</td><td></td></tr><tr><td>Covidien TelfaTM Non-adherent pads</td><td>Fisher Scientific, Covidien</td><td>1961</td><td></td></tr><tr><td>Dental surgical ruler</td><td>DoWell Dental Products</td><td>S1070</td><td></td></tr><tr><td>Depilatory cream (Nair Hair Remover Lotion)</td><td>Church& Dwight, CVS</td><td>339823</td><td></td></tr><tr><td>에탄올 70% 솔루션</td><td>Fisher Scientific</td><td>64-17-5</td><td></td></tr><tr><td>Excel</td><td>Microsoft 협력</td><td>Microsoft.com</td><td>소프트웨어 프로그램&nbsp;</td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>ImageJ, Wayne Rasband</td><td>imagej.net</td><td>소프트웨어 프로그램&nbsp;</td></tr><tr><td>흡입 마취 시스템</td><td>VetEquip</td><td>922130</td><td></td></tr><tr><td>아이리스 가위 4&frac12; in. 스테인리스</td><td>McKesson</td><td>43-2-104</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane, USP</td><td>Dechra Veterinary Products</td><td>17033-094-25</td><td></td></tr><tr><td>Kaka industrial MUB-1</td><td>Kaka Industrial&nbsp;</td><td>173207</td><td>메이커 스페이스나 제작 작업장이 없는 경우에만 필요합니다&nbsp;</td></tr><tr><td>Leone Rapid Palatal Expander- 13 mm</td><td>Great Lakes Dental Technologies</td><td>125-004</td><td>장치를 확장하고 연결하는 데 필요한 열쇠는 상자에 이 제품과 함께 제공됩니다.</td></tr><tr><td>접착 구멍이 있는 액체 방수 드레이프 75 x 90cm 6 x 9cm</td><td>Omnia S.p.A.</td><td>12.T4362</td><td></td></tr><tr><td>Medequip Depot Silk Black Braided Sutr 6-0 Rx</td><td>Medequip Depot D707N, Fisher Scientific</td><td>NCO835822</td><td></td></tr><tr><td>바늘 홀더 5 in. 톱니 모양의 턱</td><td>McKesson</td><td>43-2-842</td><td></td></tr><tr><td>Prism 9</td><td>GraphPad Holdings, LLC</td><td>graphpad.com</td><td>소프트웨어 프로그램&nbsp;</td></tr><tr><td>Puralube 안과 연고</td><td>Dechra, NDC</td><td>17033-211-38</td><td></td></tr><tr><td>R 스튜디오 데스크탑</td><td>RStudio PBC</td><td>rstudio.com</td><td>소프트웨어 프로그램&nbsp;</td></tr><tr><td>수술용 피부 마커</td><td>McKesson</td><td>19-1451_BX</td><td></td></tr><tr><td>Tegaderm, 3 M</td><td>VWR</td><td>56222-191</td><td>폼 접착 드레싱&nbsp;</td></tr><tr><td>Thermo-peep 가열 패드</td><td>K& H, 아마존</td><td></td><td></td></tr><tr><td>티슈 펜치 4&frac34; 인치 스테인리스 1 x 2 이빨</td><td>Mckesson</td><td>43-2-775</td><td></td></tr><tr><td>Vetbond (3 M)</td><td>Saint Paul, MN</td><td>1469SB</td><td></td></tr></tbody></table>

mechanotransduction-driven, human-like hypertrophic scarring의 마우스 모델

A Mouse Model of Mechanotransduction-driven, Human-like Hypertrophic Scarring

HTS 프로토콜의 효과적인 사용을 명확하게 입증하고 성공적인 "긍정적인" 결과를 식별하기 위해 그림 3A와 같이 모델을 설정했습니다. 대표적인 연구에서는 두 그룹이 있었습니다: No Stretch Control(n = 6) 및 Mechanical Stretch HTS 그룹(n = 6)은 절개 부위를 가로질러 인간과 유사한 수준의 기계적 변형을 유도하여 그림 3B,C에서 볼 수 있듯이 HTS를 생성했습니다. 그림 3A-C에 제시된 실험 계획 내에서, POD 5, 9, 15, 19의 흉터에 대한 총체적인 사진이 촬영되었다. 흉터는 ImageJ로 추적되었으며 서로 다른 시점에서 흉터의 평균 너비를 분석했습니다(그림 3D). 평균 흉터 너비는 그림 3E에서 시간과 그룹 간에 대해 그래프로 표시되었습니다. 스트레치와 컨트롤 간에 흉터가 크게 다르지 않은 POD 5에 기계적 변형을 적용한 후, 스트레치 그룹은 대조군보다 훨씬 더 넓은 흉터를 보였으며 POD 9에서 0.99mm의 최대 너비에 도달했습니다(p = 0.045). 대조군에 비해 흉터 너비가 현저히 넓어졌으며 POD 15(p = 0.043) 및 19(p = 0.045)에서 계속되었습니다. HTS 장치가 흉터의 적절한 촬영을 방해하기 때문에 HTS 장치를 제거해야 하는 날(즉, HTS 장치가 최대 팽창에 도달하여 다시 부착해야 하거나 제거하는 동안)에만 총 사진을 촬영하는 것이 좋습니다. 이 프로토콜에서는 여러 시점에 걸친 이미지 및 흉터 너비 분석을 통해 판독기가 모델의 상처 진행 상황을 보다 명확하게 볼 수 있습니다.
HTS 조직의 분석은 섬유성 마커에 대한 IHC 염색, 조직학적 흉터 영역을 검사하기 위한 H&amp;E 및 Trichrome 염색, 흉터의 콜라겐 구조를 평가하기 위한 picrosirius red 염색 및 상처 분석을 위한 기타 방법과 같은 여러 가지 방법으로 수행될 수 있습니다. 8,21,24,25,27,28 (그림 4). 그림 4는 융기된 흉터 조직(그림 4A), 부속 구조 및 모낭의 손실(그림 4B), 기계적 로딩 방향의 콜라겐 섬유 정렬(그림 4C) 및 콜라겐 소용돌이(그림 4F)와 같은 HTS 조직의 조직학적 특징을 보여줍니다. 또한 그림 4는 쥐 HTS의 비만 세포 밀도 및 혈관 구조에 대한 면역조직화학적 염색을 보여주고 이를 인간 HTS 조직과 비교합니다(그림 4D,E,G,H). 또한, 조직을 채취 및 준비하여 절제 직후 생물정보학 코어로 가져가는 경우 HTS 흉터를 단세포 분석으로 분석할 수 있습니다.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67156/67156fig01.jpg"> 
그림 1: HTS 장치 및 마우스의 등쪽 준비. (A) HTS 장치를 만들기 위한 13mm 구개 확장기의 변형 과정, (1) 초기 확장기 구조를 보여주고, (2) 장치가 평평하게 놓일 때 팔의 경우 위쪽 팔의 경우 위쪽으로, 아래쪽 팔의 경우 아래쪽 팔의 경우 아래로 90° 굽힘, (3) 이제 팔이 장치의 몸체와 완벽하게 평행한 초기 굽힘의 결과, (4) 측정과 함께 최종 장치를 형성하기 위해 팔을 구부리는 것; 암은 (90) 최종 장치에서 볼 수 있듯이 페이지 안으로 5° 구부러져야 합니다. (B) 확장되지 않은 각도와 확장된 각도에서 완전히 조립된 HTS 장치. (C) 마우스의 등받이를 준비하기 위한 순차적 단계: (1) 털이 있는 초기 상태, (2) 면도 후, (3) 제모 페이스트 도포 후. (D) 등쪽 절개 절차: (1) 절개 부위에 2cm 가이드라인 표시, (2) 절개, (3) 상처 봉합, (4) 텔파 거즈 적용, (5) 접착 드레싱으로 고정. (E) (1) 절개 부위 및 (2) 절개 부위를 봉합한 후의 전체적인 사진. 약어 : HTS = 비대성 흉터. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67156/67156fig01large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67156/67156fig02.jpg"> 
그림 2: HTS 장치 위치 지정 및 스트레칭. (A) 절개 부위와 적절한 정렬을 보장하기 위해 마우스의 등쪽에 HTS 장치를 올바르게 배치하는 그림. 왼쪽 이미지는 후방 위치에서 본 장치 배치를 보여줍니다. 오른쪽 이미지는 측면으로 본 장치 배치를 보여줍니다. (B) HTS 장치의 부착 그림: (1) 초기 배치, (2) 봉합사 위치, (3) 피부 스테이플 위치. (C) 라벨이 붙은 HTS 장치 키로 HTS 장치를 늘리는 시연: (1) 시작 구성, (2) 장력 적용, (3) 비대성 흉터 형성을 촉진하기 위해 치유 절개 부위에 일관된 기계적 변형을 가하도록 설계된 최종 확장 상태, 2mm 확장 적용. (D) HTS 장치 키에 라벨이 표시된 HTS 장치에 장력을 가하는 총 사진. (E) 붕대를 완전히 감은 쥐의 거친 사진. 약어 : HTS = 비대성 흉터. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67156/67156fig02large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67156/67156fig03.jpg"> 
그림 3: 흉터를 발생시키기 위한 기계적 변형의 적용. (A) 절개 부위(POD 0) 생성부터 기계적 변형 적용(POD 4) 및 스트레칭 기간(POD 5에서 POD 19까지)을 거쳐 조직 이식(POD 19)에 이르는 실험 절차의 타임라인. (B) 두 그룹의 그림: 스트레치 제어 없음 및 기계적 스트레치 HTS 그룹. (C) No Stretch Control과 Stretch HTS 그룹 간의 조직 반응 차이를 나타내는 단면 개략도. (D) 수술 후 며칠(POD 5, 9, 15, 19)에 No Stretch Control 및 Stretch HTS 그룹의 흉터를 대표하는 총 이미지로, 비후성 흉터는 노란색 점선으로 표시되어 있습니다. (E) 시간 경과에 따른 평균 흉터 너비의 정량적 분석, No Stretch와 Stretch 그룹 간의 흉터 발달에 상당한 차이가 있음을 보여주며, 오차 막대는 표준 편차를 나타냅니다. 중요한 차이점은 별표(*)로 표시됩니다. 통계 분석은 양방향 분산 분석(ANOVA)을 사용하여 수행되었습니다. *p &lt; 0.05의 값은 통계적으로 유의한 것으로 간주되었습니다. 약어: HTS = 비대성 흉터; POD = 수술 후일. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67156/67156fig03large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67156/67156fig04.jpg"> 
그림 4: 흉터의 조직학. 이 쥐 흉터 조직학은 이전에 발표된 연구9,26에서 2주간의 기계적 스트레스 후 수확되었습니다. (A) 더 큰 이미지는 흉터 단면의 H&amp;E 조직학적 이미징을 보여주고, 오른쪽 하단은 흉터 단면의 트리크롬 조직학적 이미징으로 흉터 영역이 어떻게 올라가는지를 보여줍니다. (B) 더 큰 이미지는 흉터 단면의 H&amp;E 조직학적 이미징을 보여주고, 오른쪽 하단은 흉터 단면의 트리크롬 조직학적 이미징으로, 흉터 영역이 부속기 구조와 모낭의 손실을 어떻게 보여주는지 보여줍니다. (C) 더 큰 이미지는 흉터 단면의 피크로시리우스 적색 이미징을 보여주고, 오른쪽 하단은 흉터 단면의 트리크롬 조직학적 이미징으로, 기계적 하중 방향으로 정렬된 콜라겐 섬유를 보여줍니다. (D) 더 큰 이미지는 쥐 HTS 조직에서 CD117 면역조직화학의 이미징을 보여주고, 오른쪽 하단은 인간 조직에서 CD117 면역조직화학의 이미징을 보여주며, 인간 HTS 조직과 유사한 비만 세포 밀도를 보여줍니다. (E) 더 큰 이미지는 쥐 HTS 조직에서 혈관 구조의 CD31 면역조직화학의 이미징을 보여주고, 오른쪽 하단은 인간 조직에서 CD117 면역조직화학의 이미징을 보여주며, 이는 인간 HTS 조직과 유사한 비만 세포 밀도를 보여줍니다. (F) 오른쪽 하단 이미지에서 성숙한 인간 비후성 흉터에서 볼 수 있는 콜라겐 소용돌이는 쥐 H&amp;E 이미징에서 원으로 표시된 영역에서 24주 후에 로드된 쥐 흉터에서도 볼 수 있습니다. (G) 대조군 (절개 + 스트레치 없음), 스트레치 컨트롤 그룹 (절개 없음 + 스트레치) 및 스트레치 HTS 그룹의 흉터의 대표적인 총 이미지. (H) 대조군(절개 + 스트레치 없음)과 스트레치 HTS 그룹을 비교한 면역조직화학을 보여줍니다. 섬유화 마커 pEPF, aSMA 및 YAP에 DAPI와 함께 공동 염색을 사용하면 HTS 그룹에서 섬유 마커가 증가합니다. A-F 는 Aarabi, S. et al.9에서 각색되었습니다. G,H 는 Mascharak, S. et al.에서 각색되었습니다. FASEB26 의 허가를 받아 재인쇄했습니다.약어: HTS = 비대성 흉터; H&amp;E = 헤마톡실린 및 에오신; pEPF = Engrailed-positive 섬유아세포; aSMA = 알파-평활근 액틴; YAP = 예 관련 단백질; DAPI = 4',6-디아미디노-2-페닐린돌. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67156/67156fig04large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>

Mechanotransduction-driven, human-like hypertrophic scarring의 마우스 모델

Hypertrophic scarring (HTS) is an abnormal process of wound healing that results in excessive scar tissue formation. Over the past decade, we have ...

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Research

연구

JoVE Journal

Bioengineering

생명공학

마우스의 가로 대동맥 수축 (TAC)은 심장 비대 및 심장 마비 개발을 기본 메커니즘을 연구하기 위해 일반적으로 사용되는 실험적인 모델입니다. 여기, 우리는 절차가 생쥐에서 심장 비대의 재현성 학위를 만들 수있는 대동맥을 수축에 대해 설명합니다.

마우스의 가로 대동맥 수축

생리와 병리 설정에서 치료 화합물을 평가하는 데 사용할 수있는 피부 상처 치유의 쥐 모델.

상처 치유의 생쥐 모델

포유류가 발달하는 동안, 임신 초기의 피부 상처는 흉터 없이 아물다. 여기에서는 E16.5(흉터가 없는) 및 E18.5(흉터가 있는) 마우스 배아의 피부 등쪽에서 흉터가 없는 태아의 상처 치유에 대한 신뢰할 수 있고 재현 가능한 모델에 대해 자세히 설명합니다.

흉터 상처 수리의 마우스 태아의 피부 모델

이 프로토콜의 목표는 단계별로 설명 하는 최소 침 습 가로 대동맥 수축 (TAC) 생쥐에서의 기술. 삽 관 법 그리고 일반적으로 사용 되는 표준 절차 필수는 환기의 제거, 최소 침 습 전술 수술 절차를 간소화 하 고 동물에 긴장을 감소 시킨다.

왼쪽된 심 실 비 대의 유도 대 한 생쥐에서 최소 침 습 가로 대동맥 수축의 기술

여기 우리 현재 인간 iPS 세포 cardiomyocytes 기니 돼지 모델에서에서 파생 된 심장 근육 패치 이식 뒤 왼쪽된 심 실 cryoinjury의 유도 대 한 프로토콜.

기니 돼지 모델에서 심근 손상 후 심장 근육 패치 hiPSC 파생의 이식

여기서 우리는 대동맥 수축의 잘 확립 된 마우스 모델에서 탈밴드 수술 대동맥의 단계별 프로토콜을 설명합니다. 이 절차는 비대의 좌심실 역 리모델링 및 회귀의 근본적인 메커니즘을 연구할 뿐만 아니라 심근 회복을 가속화할 수 있는 새로운 치료 옵션을 테스트할 수 있습니다.

설치류에서 대동맥 탈밴드에 의해 왼쪽 심실 역 리모델링 공부

이 프로토콜은 생체 외 조건에서 유사한 시험관 내 인간 비대 흉터 조직 모델을 만들기 위해 거대 분자 crowding의 사용을 설명합니다. 혼잡한 거대 분자 환경에서 재배될 때, 인간의 피부 섬유아세포는 흉터 조직을 닮은 표현형, 생화학, 생리학 및 기능적 특성을 나타낸다.

거대 분자 군중을 사용하여 인간의 절단 비대 흉터의 시험관 내 모델

이 연구의 목적은 화상 상처 치유의 뮤린 모델을 개발하는 것이었습니다. 예열된 황동 템플릿을 사용하여 마우스의 등불 피부에 열 화상이 유도되었다. 연소된 조직은 유전적으로 유사한 기증자 마우스의 꼬리에서 수확한 피부 이식으로 파괴되고 겹쳐졌습니다.

동종 유전자 이식편으로 재구성된 화상 상처의 뮤린 모델

이 연구는 중증 대동맥 협착증 또는 저형성 좌심 증후군과 같은 선천성 심장 결함에서 볼 수 있는 내피에서 중간엽으로의 전이 유도 섬유증의 동물 모델을 제시하여 상세한 조직학적 조직 평가, 조절 신호 경로 식별 및 치료 옵션 테스트를 가능하게 합니다.

내피에서 중간엽으로의 전환 연구를 위한 신생아 이종성 쥐 심장 이식 모델

이 논문은 1-3분 이내에 95% 에탄올을 마우스 자궁에 주입하여 사망률이 매우 낮고 자궁 내 유착을 최소화하면서 신뢰할 수 있고 재현 가능한 얇은 자궁내막을 생산하기 위한 자세한 프로토콜에 대해 설명합니다.

얇은 자궁내막의 마우스 모델 구축

배우세요 마우스에서 기계적 긴장을 이용해 인간 유사 비후성 흉터 모델을 만드는 방법을. 이 프로토콜은 상처 치유와 섬유증 연구에 활용됩니다.

Mechanotransduction-driven, human-like hypertrophic scarring의 마우스 모델

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