Mechanotransduction-driven, human-like hypertrophic scarring의 마우스 모델

비대성 흉터는 과도한 흉터 조직 형성을 초래하는 비정상적인 상처 치유 과정입니다. 인간과 유사한 섬유화 모델을 만드는 것은 흉터를 예방하고 재생을 촉진하는 치료법을 개발하는 데 도움이 될 수 있습니다. 지난 10년 동안 우리는 기계적 자극이 세포 반응으로 전환되는 기계적 전달이 과도한 흉터 형성을 유발한다는 것을 입증했습니다.

우리는 기계적 자극을 억제하고 대형 동물 모델에서 치유와 재생을 촉진한다는 것을 발견했으며, 생체 의학 임플란트에 대한 이물질 반응에서도 그 중요성을 확인했습니다. 부상 후 생쥐는 피부가 헐렁하고 얇기 때문에 인간보다 흉터가 적으며, 상처를 수축시키는 근층인 근육 판니큘러스 카르노수스(musculus panniculus carnosus)가 있습니다. 우리는 치유되는 상처에 인간 수준의 기계적 변형을 적용하여 인간과 같은 비대성 흉터 모델을 만드는 마우스 모델을 개발했습니다.

당사의 프로토콜은 단순성, 재현성 및 생체 모방으로 유명합니다. 상처에 기계적 장력을 가함으로써 화상이나 화학적 손상 모델에 의존하는 대신 생리학적 기계적 전달 경로를 활용하여 인간과 유사한 비후성 흉터를 안정적으로 유도할 수 있습니다. 이는 비대성 흉터가 신체에 어떻게 형성되는지를 안정적으로 반영하여 매우 번역할 수 있습니다.

전반적으로 우리 연구실은 장기 시스템 전반의 섬유증을 줄이기 위해 기계적 신호 전달을 약리학적으로 표적으로 삼는 방법을 연구하고 있습니다. 구체적으로 말하자면, 이 모델을 사용하여 조직 재생 골격, 상처 드레싱, 스테로이드와 같은 다른 흉터 방지 요법을 살펴볼 것이다. 시작하려면 마취된 마우스를 작동 표면에 놓습니다.

마취 유지를 위해 마우스 코를 콧방울 구멍에 삽입합니다. 발가락 꼬집음에 대한 반응 부족으로 마취의 깊이를 확인합니다. 21게이지 바늘을 사용하여 1kg당 0.05mg의 부프레노르핀을 어깨에 피하주사하여 수술 후 통증 치료를 합니다.

요오드 또는 클로르헥시딘 기반 스크럽과 알코올 면봉을 번갈아 가며 3회씩 쥐의 등쪽을 소독합니다. 이제 메스를 사용하여 표시된 부위를 따라 전체 두께의 등쪽 정중선을 절개합니다. 상처를 이등분하여 간단한 중단 패턴으로 5-0 봉합사로 절개 부위를 닫습니다.

Telfa 거즈를 3cm x 1cm 조각으로 자릅니다. 거즈 조각을 필름 접착 드레싱의 중앙에 놓고 거즈가 절개 부위를 덮도록 등쪽에 적용합니다. 그런 다음 반으로 자른 드레싱을 복부에 놓고 등쪽 드레싱과 만날 때까지 둘레로 감쌉니다.

상처를 드레싱한 후 마우스를 별도의 멸균 케이지에 넣고 마취제에서 완전히 회복될 때까지 모니터링합니다. 등쪽 정중선 절개를 만든 지 4일 후, 마우스를 마취하고 작업 플랫폼에 놓습니다. 집게를 사용하여 도구를 복부 쪽에 대해 좌우로 작업하여 마우스의 복부에서 드레싱을 분리합니다.

도구를 랩과 피부 사이에 두어 피부에서 드레싱을 들어 올리십시오. 그런 다음 가위를 사용하여 드레싱을 잘라냅니다. 알코올 면봉으로 등쪽을 청소하십시오.

절개 부위에 상처 탈구나 감염 징후가 있는지 검사합니다. 다음으로, 비대성 흉터 또는 HTS 장치의 팔에 의료용 접착제를 가볍게 코팅합니다. 한 손으로 마우스 등쪽의 피부를 가로 방향으로 약간 팽팽하게 만듭니다.

그런 다음 다른 손의 도움을 받아 HTS 장치를 등쪽에 놓고 절개 부위가 각 팔에서 등거리에 있고 피부가 두 팔 사이에 균일하게 팽팽하게 당겨지도록 합니다. 건조 후 장치의 각 팔 주위와 피부를 통해 4개의 봉합사를 고정하여 바늘이 절개 부위를 향해 나오도록 합니다. 이제 장치의 팔에 세 개의 스킨 스테이플을 놓고 피부에 고정합니다.

그런 다음 Telfa 거즈 조각을 필름 접착 드레싱의 중앙에 놓고 마우스의 등쪽에 적용하여 거즈가 절개 부위를 덮도록 합니다. 복부에 반으로 자른 드레싱을 놓고 등쪽 드레싱과 만날 때까지 둘레로 감쌉니다. 다음날, 해부 가위를 사용하여 상처의 봉합사를 제거합니다.

HTS 장치를 처음 늘리려면 HTS 장치 키를 장치에 삽입하고 피부가 팽팽해지지만 찢어질 위험이 없을 때까지 장치를 확장하여 장치를 확장합니다. 마지막으로 앞에서 설명한 대로 마우스에 붕대를 감습니다. 스트레치 그룹 마우스는 대조군에 비해 훨씬 더 넓은 흉터를 보였으며, 수술 후 9일째에 최대 흉터 너비가 0.99mm였으며 수술 후 15일과 19일에는 훨씬 더 넓게 유지되었습니다.