Name: Neurite Outgrowth 측정을 위한 새로운 반자동 소프트웨어의 표준화 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-08-09T14:50:00.000+00:00
Duration: 5 min 28 s
Description: 학습하세요 반자동 소프트웨어를 활용한 neurite outgrowth 측정 방법으로, importin alpha-3가 신경돌기 성장 및 통증 조절에 미치는 영향을 분석합니다. 이 표준화된 프로토콜은 신경재생 연구에 필수적인 도구입니다.

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<meta charset="utf8"></head><body>정확한 신경돌기 성장을 위한 고급 실시간 이미징 기법

<ol><li>Terenzio, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Locally+translated+mTOR+controls+axonal+local+translation+in+nerve+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Locally translated mTOR controls axonal local translation in nerve injury.</a> Science. 359, 1416-1421 (2018).</li>
<li>Marvaldi, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+axon+outgrowth+and+improved+long-distance+axon+regeneration+in+sprouty2+deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Enhanced axon outgrowth and improved long-distance axon regeneration in sprouty2 deficient mice.</a> Dev Neurobiol. 75, 217-231 (2015).</li>
<li>Kalinski, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deacetylation+of+Miro1+by+HDAC6+blocks+mitochondrial+transport+and+mediates+axon+growth+inhibition%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Deacetylation of Miro1 by HDAC6 blocks mitochondrial transport and mediates axon growth inhibition.</a> J Cell Biol. 218, 1871-1890 (2019).</li>
<li>Marvaldi, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Importin+%CE%B13+regulates+chronic+pain+pathways+in+peripheral+sensory+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Importin α3 regulates chronic pain pathways in peripheral sensory neurons.</a> Science. 369, 842-846 (2020).</li>
<li>Gangadharan, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuropathic+pain+caused+by+miswiring+and+abnormal+end+organ+targeting%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Neuropathic pain caused by miswiring and abnormal end organ targeting.</a> Nature. 606, 137-145 (2022).</li>
<li>Testa, L., Dotta, S., Vercelli, A., Marvaldi, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Communicating+pain%3A+emerging+axonal+signaling+in+peripheral+neuropathic+pain%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neuroanat%22%5BJournal%5D)">Communicating pain: emerging axonal signaling in peripheral neuropathic pain.</a> Front Neuroanat. 18, (2024).</li>
<li>Thongrong, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sprouty2+and+-4+hypomorphism+promotes+neuronal+survival+and+astrocytosis+in+a+mouse+model+of+kainic+acid+induced+neuronal+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Hippocampus%22%5BJournal%5D)">Sprouty2 and -4 hypomorphism promotes neuronal survival and astrocytosis in a mouse model of kainic acid induced neuronal damage.</a> Hippocampus. 26, 658-667 (2016).</li>
<li>Yaron, A., Schuldiner, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Common+and+divergent+mechanisms+in+developmental+neuronal+remodeling+and+dying+back+neurodegeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">Common and divergent mechanisms in developmental neuronal remodeling and dying back neurodegeneration.</a> Curr Biol. 26, R628-R639 (2016).</li>
<li>Maor-Nof, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Axonal+degeneration+is+regulated+by+a+transcriptional+program+that+coordinates+expression+of+pro-+and+anti-degenerative+factors%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Axonal degeneration is regulated by a transcriptional program that coordinates expression of pro- and anti-degenerative factors.</a> Neuron. 92, 991-1006 (2016).</li>
<li>Bromberg, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+neurite+outgrowth+by+Gi%2Fo+signaling+pathways%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Biosci%22%5BJournal%5D)">Regulation of neurite outgrowth by Gi/o signaling pathways.</a> Front Biosci. 13, 4544-4557 (2008).</li>
<li>Girouard, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collapsin+response+mediator+protein+4+%28CRMP4%29+facilitates+wallerian+degeneration+and+axon+regeneration+following+Sciatic+nerve+injury%5BTitle%5D)+AND+%22eNeuro%22%5BJournal%5D)">Collapsin response mediator protein 4 (CRMP4) facilitates wallerian degeneration and axon regeneration following Sciatic nerve injury.</a> eNeuro. 7, (2020).</li>
<li>van Erp, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-related+loss+of+axonal+regeneration+is+reflected+by+the+level+of+local+translation%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Age-related loss of axonal regeneration is reflected by the level of local translation.</a> Exp Neurol. 339, 113594(2021).</li>
<li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Driving+axon+regeneration+by+orchestrating+neuronal+and+non-neuronal+innate+immune+responses+via+the+IFN%CE%B3-cGAS-STING+axis%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Driving axon regeneration by orchestrating neuronal and non-neuronal innate immune responses via the IFNγ-cGAS-STING axis.</a> Neuron. 111, 236-255 (2023).</li>
<li>Kaselis, A., Treinys, R., Vosyliūtė, R., Šatkauskas, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DRG+axon+elongation+and+growth+cone+collapse+rate+induced+by+Sema3A+are+differently+dependent+on+NGF+concentration%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Mol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">DRG axon elongation and growth cone collapse rate induced by Sema3A are differently dependent on NGF concentration.</a> Cell Mol Neurobiol. 34, 289-296 (2014).</li>
<li>Maier, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differentiated+NSC-34+motoneuron-like+cells+as+experimental+model+for+cholinergic+neurodegeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Neurochem+Int%22%5BJournal%5D)">Differentiated NSC-34 motoneuron-like cells as experimental model for cholinergic neurodegeneration.</a> Neurochem Int. 62, 1029-1038 (2013).</li>
<li>Nango, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Highly+efficient+conversion+of+motor+neuron-like+NSC-34+cells+into+functional+motor+neurons+by+Prostaglandin+E2%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Highly efficient conversion of motor neuron-like NSC-34 cells into functional motor neurons by Prostaglandin E2.</a> Cells. 9, 1741(2020).</li>
<li>Kim, H., Caspar, W. T., Shah, S. B., Hsieh, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+proinflammatory+cytokines+on+axonal+outgrowth+from+adult+rat+lumbar+dorsal+root+ganglia+using+a+novel+three-dimensional+culture+system%5BTitle%5D)+AND+%22Spine+J%22%5BJournal%5D)">Effects of proinflammatory cytokines on axonal outgrowth from adult rat lumbar dorsal root ganglia using a novel three-dimensional culture system.</a> Spine J. 15, 1823-1831 (2015).</li>
<li>Frey, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+in+vitro+assay+to+study+induction+of+the+regenerative+state+in+sensory+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">An in vitro assay to study induction of the regenerative state in sensory neurons.</a> Exp Neurol. 263, 350-363 (2015).</li>
<li>Zhang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebellar+injury+and+impaired+function+in+a+rabbit+model+of+maternal+inflammation+induced+neonatal+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Learn+Mem%22%5BJournal%5D)">Cerebellar injury and impaired function in a rabbit model of maternal inflammation induced neonatal brain injury.</a> Neurobiol Learn Mem. 165, 106901(2019).</li>
<li>Pemberton, K., Mersman, B., Xu, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+ImageJ+to+assess+neurite+outgrowth+in+mammalian+cell+cultures%3A+Research+data+quantification+exercises+in+undergraduate+neuroscience+lab%5BTitle%5D)+AND+%22J+Undergrad+Neurosci+Educ%22%5BJournal%5D)">Using ImageJ to assess neurite outgrowth in mammalian cell cultures: Research data quantification exercises in undergraduate neuroscience lab.</a> J Undergrad Neurosci Educ. 16, A186-A194 (2018).</li>
<li>Marvaldi, L., Hausott, B., Auer, M., Leban, J., Klimaschewski, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Novel+DRAK+inhibitor%2C+SC82510%2C+promotes+axon+branching+of+adult+sensory+neurons+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Neurochem+Res%22%5BJournal%5D)">A Novel DRAK inhibitor, SC82510, promotes axon branching of adult sensory neurons in vitro.</a> Neurochem Res. 39, 403-407 (2014).</li>
<li>Quarta, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peripheral+nerve+regeneration+and+NGF-dependent+neurite+outgrowth+of+adult+sensory+neurons+converge+on+STAT3+phosphorylation+downstream+of+neuropoietic+cytokine+receptor+gp130%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Peripheral nerve regeneration and NGF-dependent neurite outgrowth of adult sensory neurons converge on STAT3 phosphorylation downstream of neuropoietic cytokine receptor gp130.</a> J Neurosci. 34, 13222-13233 (2014).</li>
<li>Woitke, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adult+hippocampal+neurogenesis+poststroke%3A+More+new+granule+cells+but+aberrant+morphology+and+impaired+spatial+memory%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Adult hippocampal neurogenesis poststroke: More new granule cells but aberrant morphology and impaired spatial memory.</a> PLoS One. 12, e0183463(2017).</li>
<li>Xiao, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+dendritic+spine+detection+using+convolutional+neural+networks+on+maximum+intensity+projected+microscopic+volumes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Meth%22%5BJournal%5D)">Automated dendritic spine detection using convolutional neural networks on maximum intensity projected microscopic volumes.</a> J Neurosci Meth. 309, 25-34 (2018).</li>
<li>Pool, M., Thiemann, J., Bar-Or, A., Fournier, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NeuriteTracer%3A+A+novel+ImageJ+plugin+for+automated+quantification+of+neurite+outgrowth%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Meth%22%5BJournal%5D)">NeuriteTracer: A novel ImageJ plugin for automated quantification of neurite outgrowth.</a> J Neurosci Meth. 168, 134-139 (2008).</li>
<li>Wang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HCA-Vision%3A+Automated+neurite+outgrowth+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22SLAS+Disc%22%5BJournal%5D)">HCA-Vision: Automated neurite outgrowth analysis.</a> SLAS Disc. 15, 1165-1170 (2010).</li>
<li>Whitlon, D. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+high+content+screen+detects+compounds+that+promote+neurite+regeneration+from+cochlear+spiral+ganglion+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Novel high content screen detects compounds that promote neurite regeneration from cochlear spiral ganglion neurons.</a> Sci Rep. 5, 15960(2015).</li>
<li>Rishal, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((WIS-neuromath+enables+versatile+high+throughput+analyses+of+neuronal+processes%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">WIS-neuromath enables versatile high throughput analyses of neuronal processes.</a> Dev Neurobiol. 73, 247-256 (2013).</li>
<li>Smith, D. S., Pate Skene, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Transcription-dependent+switch+controls+competence+of+adult+neurons+for+distinct+modes+of+axon+growth%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">A Transcription-dependent switch controls competence of adult neurons for distinct modes of axon growth.</a> J Neurosci. 17, 646-658 (1997).</li>
<li>Gardiner, N. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preconditioning+injury-induced+neurite+outgrowth+of+adult+rat+sensory+neurons+on+fibronectin+is+mediated+by+mobilisation+of+axonal+%CE%B15+integrin%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Preconditioning injury-induced neurite outgrowth of adult rat sensory neurons on fibronectin is mediated by mobilisation of axonal α5 integrin.</a> Mol Cell Neurosci. 35, 249-260 (2007).</li>
<li>Hauck, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heat+shock+factor+1+directly+regulates+transsulfuration+pathway+to+promote+prostate+cancer+proliferation+and+survival%5BTitle%5D)+AND+%22Commun+Biol%22%5BJournal%5D)">Heat shock factor 1 directly regulates transsulfuration pathway to promote prostate cancer proliferation and survival.</a> Commun Biol. 7, 9(2024).</li>
<li>Zhu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+WIPI4+in+neurodegeneration+causes+autophagy-independent+ferroptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Loss of WIPI4 in neurodegeneration causes autophagy-independent ferroptosis.</a> Nat Cell Biol. 26, 542-551 (2024).</li>
<li>Reggiani, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((BET+inhibitors+drive+Natural+Killer+activation+in+non-small+cell+lung+cancer+via+BRD4+and+SMAD3%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">BET inhibitors drive Natural Killer activation in non-small cell lung cancer via BRD4 and SMAD3.</a> Nat Commun. 15, 2567(2024).</li>
<li>Ackerman, H. D., Gerhard, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bile+acids+induce+neurite+outgrowth+in+NSC-34+cells+via+TGR5+and+a+distinct+transcriptional+profile%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceuticals%22%5BJournal%5D)">Bile acids induce neurite outgrowth in NSC-34 cells via TGR5 and a distinct transcriptional profile.</a> Pharmaceuticals. 16, 174(2023).</li>
<li>Tuttle, R., Matthew, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurotrophins+affect+the+pattern+of+DRG+neurite+growth+in+a+bioassay+that+presents+a+choice+of+CNS+and+PNS+substrates%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Neurotrophins affect the pattern of DRG neurite growth in a bioassay that presents a choice of CNS and PNS substrates.</a> Development. 121, 1301-1309 (1995).</li>
<li>Wurster, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+monitoring+and+analysis+of+fungal+growth%2C+viability%2C+and+mycelial+morphology+using+the+IncuCyte+NeuroTrack+processing+module%5BTitle%5D)+AND+%22mBio%22%5BJournal%5D)">Live monitoring and analysis of fungal growth, viability, and mycelial morphology using the IncuCyte NeuroTrack processing module.</a> mBio. 10 (3), e00673-e00719 (2019).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Collagenase A</td><td>Merck / Roche</td><td>10103586001</td><td></td></tr><tr><td>Dispase II (중성 프로테아제, 등급 II)</td><td>Merck / Roche</td><td>4942078001</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco의 변형된 독수리 매체</td><td>Merck / Sigma</td><td>D5796</td><td></td></tr><tr><td>Fetal bovin serum&nbsp;</td><td>Merck / Sigma</td><td>F7524</td><td></td></tr><tr><td>Ham's F-12 영양 혼합물 (1X)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>21765029</td><td></td></tr><tr><td>Ham's F12 w/ L-Glutamine</td><td>Euroclone</td><td>ECM0135L</td><td></td></tr><tr><td>Hanks' Balanced Salt Solution</td><td>Euroclone</td><td>ECM0507L</td><td></td></tr><tr><td>HBSS (10X), 칼슘 없음, 마그네슘 없음, 페놀 레드</td> 없음 <td>ThermoFisher Scientific</td><td>14185045</td><td></td></tr><tr><td>HyClone 특화 소 태아 혈청(미국)</td><td>Cytiva</td><td>SH30071.03</td><td></td></tr><tr><td>Incucyte, 뉴로트랙 분석 소프트웨어&nbsp;</td><td>Sartorius</td><td>9600-0010</td><td></td></tr><tr><td>L-15 Medium (Leibovitz)</td><td>Millipore/Sigma</td><td>L5520</td><td></td></tr><tr><td>라미닌 마우스 단백질, 천연</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>23017015</td><td></td></tr><tr><td>L-Cysteine</td><td>Merck / Sigma</td><td>C7352</td><td></td></tr><tr><td>Leibovitz의 L-15 medium w/o L-glutamine</td><td>Euroclone</td><td>ECB0020L</td><td></td></tr><tr><td>mouse NGF 2.5S (>95%)</td><td>Alomone Labs</td><td>N-100</td><td></td></tr><tr><td>Neurobasal Medium [-] 글루타민</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>21103049</td><td></td></tr><tr><td>NSC-34</td><td>CELLutions Biosystems Inc (캐나다 온타리오)</td><td>CLU140</td><td></td></tr><tr><td>파파야 라텍스 파파인</td><td>Sigma</td><td>P4762</td><td></td></tr><tr><td>페니실린-스트렙토마이신(5,000 U/mL)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>15070063</td><td></td></tr><tr><td>Percoll ( 밀도 1.130 g/mL)</td><td>Cytiva</td><td>17089101</td><td></td></tr><tr><td>Poly-D-Lysine 용액 (1mg/mL)</td><td>EMD Millipore/Merck</td><td>A-003-E</td><td></td></tr><tr><td>Poly-L-Lysine 용액 (0-01%)</td><td>Sigma</td><td>P4832</td><td></td></tr><tr><td>재조합 인간 NT-3</td><td>PeproTech</td><td>450-03</td><td></td></tr><tr><td>레티노산</td><td>Merck / Sigma</td><td>R2625</td><td></td></tr><tr><td>Trypsin-EDTA 용액</td><td>Sigma</td><td>T3924</td><td></td></tr><tr><td>&beta;-Tubulin III (Tuj1) 항체</td><td>Merck / Sigma</td><td>T8660</td><td></td></tr></tbody></table>

neurite outgrowth 측정을 위한 새로운 반자동 소프트웨어의 표준화 

Standardization of a Novel Semi-Automatic Software for Neurite Outgrowth Measurement

Neurite Outgrowth 측정을 위한 새로운 반자동 소프트웨어의 표준화 

Effective live-imaging techniques are crucial to assess neuronal morphology in order to measure neurite outgrowth in real time. The proper measurement of ...

standardization-novel-semi-automatic-software-for-neurite-outgrowth

Research

연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

시냅스에서 신경 전달 물질 수용체 클러스터의 풍부한 강력히 시냅스 강도에 영향을 미칩니다. 이 방법에서는 단일 시냅스 해상도로 가로, 세로, 높이로 fluorescently-라벨이 신경 전달 물질 수용체를...

에서 시냅틱 형광의 자동 부량<em&gt; C. elegans</em

이 비디오는 건강하고 암이 있는 인간 췌장 조직 추출물에 노출된 등뿌리 신경절과 장신경총 뉴런의 형태학적 변화를 연구하기 위한 체외 신경 가소성 분석을 보여줍니다. 이 분석을 통해 신경돌기 성장, 분기 패턴 및 신경 세포 크기를 연구할 수 있습니다.

체외 췌장 신경 가소성 분석: 건강하고 암이 있는 인간 췌장 조직 추출물에 노출된 위장관 뉴런의 변화 연구

신경 가소성은 위장 (GI) 요로의 점점 인식하지만, 충분히 이해 기능입니다. 여기, 인간의 췌장 질환의 예에서, 우리는 형태 학적 및 기능적 수준에서 위장관의 신경 가소성 연구를위한 생체 외 신경 가소성의 분석을 제시한다.

췌장 신경 가소성 시뮬레이션 :<em&gt; 체외</em&gt; 이중 신경 가소성 분석

분화된 인간 신경 줄기세포(hNSCs)에서 miRNA의 변화를 특성화하기 위한 목적으로 3차원 시스템에서의 hNSC 분화, miRNA PCR 어레이에 의한 microRNA 발현 변화 평가, miRNA 표적 예측을 위한 컴퓨터 분석 및 이중 루시페라제 분석에 의한 검증에 대해 설명합니다.

3 차원 문화, 마이크로 RNA의 분석 및 추정 적 표적 유전자에 인간의 신경 줄기 세포 라인의 차별화

이 보고에서는, 우리는 EGFP 및 관심있는 단백질과 공동 으로 transfecting에 의해 배아 쥐 피질 뉴런에 있는 neurite outgrowth를 공부하기 위한 간단한 프로토콜을 기술합니다.

1 차적인 뉴런에 있는 Neurite 파생을 공부를 위한 향상된 녹색 형광 단백질 기지를 둔 분석

제시된 프로토콜은 작은 분자 화합물의 neurite 아웃성장 분석 및 신경 독성 평가를 위한 방법을 설명합니다.

인간 신경 전구 세포 유래 뉴런을 가진 Neurite 아웃growth 분석 및 신경 독성 평가

여기서, 우리는 1 차 마우스 도파민 뉴런에 신경 α-synuclein 축적을 연구하기 위하여 상세한 프로토콜을 제시합니다. 뉴런의 인광α-시뉴클레인 골재는 미리 형성된 α-시뉴클레인 피브릴로 유도된다. 면역형으로 표지된 세포와 편견없는 이미지 분석의 자동화된 이미징은 α-synuclein 축적을 억제하는 약물의 중간-고처리량 스크리닝에 적합한 강력한 프로토콜을 만듭니다.

1 차 배아 마우스 중뇌 도파민 뉴런에서 사전 형성 된 피브릴 유도 α-시뉴클레인 축적 연구

우리는 자동화된 화상 진찰 및 분석과 호환되는 인간 유도만능 줄기 세포 (hiPSC) 배양 및 신경 분화의 자동화를 보여줍니다.

통합 된 라이브 셀 모니터링을 통해 인간 유도 만능 줄기 세포 유래 피질 및 도파민 뉴런의 자동화 된 생산

여기서 우리는 쥐 실질니그라 파스 콤팩트카에서 도파민성 뉴런 수의 반정적 측정을 위한 자동화된 방법을 제시한다.

자동 이미지 분석을 사용하여 설치류 모델의 실질적인 Nigra에서 도파민성 뉴런 밀도의 반정량 측정

제시된 것은 2D 형광 심상에서 신경 수지상 분기의 방향을 간단하고 직접 자동적으로 측정할 수 있는 계산 도구입니다.

수지상 가지 및 방향자동 식별

수지상 가시는 대부분의 흥분성 시냅스의 시냅스 후 구획입니다. 수지상 척추 형태의 변화는 신경 발달, 노화, 학습 및 많은 신경 및 정신 장애 중에 발생하며, 이는 신뢰할 수 있는 수지상 척추 분석의 중요성을 강조합니다. 이 프로토콜은 자동 3차원 뉴런 재구성 소프트웨어를 사용하여 수상돌기 척추 형태를 정확하고 재현성 있게 정량화하는 방법을 설명합니다.

자동 3차원 뉴런 재구성 소프트웨어를 사용한 수지상 척추 정량화

학습하세요 반자동 소프트웨어를 활용한 neurite outgrowth 측정 방법으로, importin alpha-3가 신경돌기 성장 및 통증 조절에 미치는 영향을 분석합니다. 이 표준화된 프로토콜은 신경재생 연구에 필수적인 도구입니다.

Neurite Outgrowth 측정을 위한 새로운 반자동 소프트웨어의 표준화

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