2024년 8월 9일
Neurite outgrowth assay는 재생 신경 세포 과정에 대한 정량적 가치를 제공합니다. 이 반자동 소프트웨어의 장점은 마스크를 생성하여 세포체와 신경돌기를 별도로 분할하고 신경돌기 길이, 분지점 수, 세포체 클러스터 면적 및 세포 클러스터 수와 같은 다양한 파라미터를 측정한다는 것입니다.
우리 연구실에서는 in vitro 모델을 사용하여 신경돌기 성장과 분지가 어떻게 통증 인식을 조절할 수 있는지 연구합니다. 노화가 진행되는 동안 남성과 여성에 따라 통증 반응이 다르다는 것은 잘 알려진 사실이기 때문에 이 과정의 분자적 기초를 파헤치려고 합니다. 최근에는 알파-3와 핵세포질 단백질이 만성 통증의 말기에 관여한다는 사실을 연구했습니다.
우리는 척추 손상 후 신경병증 통증이 감소한 알파-3 마우스를 importin 연구했습니다. 좌골 신경통 병변 후, 섬유의 표적을 놓치면 신경병증성 통증을 유발할 수 있습니다. 축삭이 어떻게 재생되고 올바른 목표에 도달할 수 있는지 이해하는 것은 기초 및 임상 연구에서 뜨거운 주제입니다.
이 프로토콜을 사용하면 얼굴 대비 및 면역세포화학 이미지 모두에서 신경돌기 성장과 분지를 정량화할 수 있습니다. 정량화는 단일 뉴런에 국한되지 않지만 신경돌기 그물도 가능합니다. 마지막으로, 이 소프트웨어는 반자동이기 때문에 분석에 유용한 시간 절약 도구입니다.
신경돌기 성장 및 분지를 측정하면 손상 및 재생에서 병리학 및 약물 효능에 이르기까지 다양한 조건에서 신경 세포의 행동을 모니터링할 수 있습니다. 따라서 이러한 매개변수를 측정하기 위한 표준화된 방법론은 향후 연구에서 중요한 역할을 합니다. 우리의 미래 연구는 해리 배양에서 전체 외식물 배양에 이르기까지 다양한 실험 환경에서 신경돌기 돌출 및 분지와 함께 알파-3를 수입하는 방법에 중점을 둡니다.
축삭 재표적화의 분자적 기초를 이해하는 것은 신경병증성 통증 분야의 돌파구가 될 것입니다.
본 연구는 인비트로(in vitro) 모델을 사용하여 통증 조절 맥락에서 신경돌기 성장 및 분지를 조사합니다. 연구의 초점은 importin alpha-3가 관여하는 분자 기전과 척수 손상 후 만성 통증에 미치는 영향에 맞추어져 있습니다. 본 프로토콜은 신경돌기 발달을 정량화하여, 다양한 병리적 및 치료적 조건에서 신경세포의 행동을 조사하는 중요한 도구를 제공합니다.
표준화된 반자동 신경돌기 성장 정량화는 뉴런 형태의 견고하고 재현 가능한 측정을 가능하게 함으로써 신경생물학 중심의 약물 발견 과정에서 발생하는 결정적인 병목 현상을 해결합니다. 이러한 기능은 초기 단계 스크리닝의 예측 신뢰도를 높이며, 신경 재생 및 신경병성 통증 표적에 대한 기전적 위험 제거(de-risking)를 지원합니다. 이 플랫폼의 확장성과 교차 모달리티 호환성은 포트폴리오 전반의 표현형 분석에 재사용 가능한 자산으로서의 가치를 제공합니다.
이 반자동 정량 분석 플랫폼은 신경생물학 파이프라인의 초기 발견 단계부터 리드 물질 발굴 및 전임상 검증 단계까지 통합적으로 적용됩니다.