가역적 일방적 요관 폐색의 미성숙한 쥐 모델(An Immature Murine Model of Reversible Unilateral Ureteral Obstruction)

이 연구는 신장 손상 회복을 조사하고 폐쇄 후 신장 복구 연구에서의 신뢰성과 적용을 평가하기 위해 미성숙 쥐에서 가역적 UU 모델을 확립합니다. 이 접근법의 주요 고려 사항은 요관 손상이 염증을 유발하여 잠재적으로 유착, 폐쇄 및 재개통 실패로 이어질 수 있으므로 수술 중 요관 손상을 최소화하는 것입니다. 우리는 특히 미성숙 RUU 신장의 맥락에서 폐쇄 해제 후 신장 기능 및 신장 손상의 동적 회복에 초점을 맞출 것입니다.

[해설자] 시작하려면 멸균된 가위를 사용하여 실리콘 튜브를 약 1cm 길이로 자릅니다. 나중에 사용할 수 있도록 튜브 벽의 한쪽을 따라 세로 절개를 합니다. 다음으로, 발가락 꼬집음 시 페달 철수 반사와 같은 반사 반응이 없는지 확인하여 쥐의 적절한 마취를 확인합니다. 각막 건조를 방지하기 위해 수의학 안과 연고를 눈에 바르십시오. 쥐의 복부를 xiphoid process에서 치골 결합까지 제모하여 양측으로 정중선까지 확장합니다. 그런 다음 가열된 수술 패드 위에 쥐를 누운 자세로 놓고 고무 로프로 팔다리를 고정합니다. 그런 다음 멸균 천공 시트를 드레이프하여 멸균 필드를 유지합니다. 이제 복부를 따라 정중선 피부 절개를 하여 검상하 부위에서 배꼽 바로 아래로 확장하여 신장과 상부 요관을 노출시킵니다. 수술용 가위로 정중선을 따라 피하 조직과 근막을 절개합니다. 피부와 밑에 있는 조직을 한 층씩 꼼꼼하게 해부합니다. 조직 겸자를 사용하여 후복막 공간을 완전히 노출시킵니다. 가역적 편측성 요관 폐쇄의 경우 먼저 멸균 면봉을 사용하여 장을 복강 오른쪽으로 후퇴시킵니다. 건조를 방지하기 위해 식염수에 적신 거즈로 요관을 덮으십시오. 현미경 겸자를 사용하여 왼쪽 요관을 해부하고 동원하여 주변 조직에서 약 1.5cm를 제거합니다. 그런 다음 풀린 요관 아래에 1cm 길이의 실리콘 튜브를 놓습니다. 집게를 사용하여 튜브 내부를 완전히 둘러싸도록 합니다. 3-0 실크 실을 사용하여 실리콘 튜브와 요관의 중간 부분을 결찰하고 요관 폐쇄를 유도합니다. 요관의 세로 축을 따라 실리콘 튜브를 점차적으로 당겨 안전하지만 미끄러지지 않는 결찰을 보장합니다. 복막강 내에서 장을 조심스럽게 재배치하여 긴장이나 장애물 없이 적절한 정렬을 보장합니다. 곡선 절단 바늘이 있는 3-0 비흡수성 봉합사를 사용하여 복부 근육과 근막층을 연속적으로 봉합합니다. 그런 다음 실행 중인 4-0 비흡수성 봉합사로 피부를 봉합하여 해부학적 정렬과 균일한 장력을 보장합니다. 완화 수술을 위해서는 먼저 메스날을 사용하여 실리콘 튜브의 매듭을 조심스럽게 해부합니다. 실리콘 튜브와 실크 봉합사를 제거하고 생리 식염수로 복강을 세척하여 유착 및 감염 위험을 최소화합니다. 장을 재배치하고 4-0 비흡수성 봉합사를 사용하여 복벽 절개 부위를 층으로 봉합합니다. 그런 다음 쥐를 7일 동안 회복실로 옮기기 전에 피부를 봉합합니다. 수술 후 14일째에 신장을 반으로 나누어 신장 샘플을 수집합니다. 조직병리학적 검사를 위해 절반을 4% 파라포름알데히드에 보관하고, 나머지 절반을 액체질소에 급속 동결하여 후속 분자 분석을 위해 섭씨 영하 80도에서 보관합니다. 외과적 후속 조치를 위해 화면 평가를 수행합니다. 편측 요관 폐쇄 후 신장의 형태가 크게 변했으며, UUO 신장은 천연 신장에 비해 비대하고 부어오른 것으로 나타났습니다. 폐색이 풀린 후 신장 크기는 줄어들었지만 원래 신장보다 더 크게 유지되었습니다. 요관 폐쇄는 메틸렌 블루 주사를 이용하여 확인하였으나, 막힌 요관을 통과하지 못하였다. 폐색이 풀린 후 결찰 부위의 요관은 붉게 물든 색을 나타내고 연동 운동을 보였습니다. 조직학적 분석은 자연 신장에서 온전한 신장 구조를 보여주는 반면, UUO 신장은 내강 내에서 세뇨관 위축, 공포화 및 세포 파편을 나타냈습니다. RUUO 신장은 UUO 신장보다 손상된 세뇨관이 적어 부분적인 회복을 보였습니다. Masson의 삼색 염색은 파란색으로 염색된 콜라겐 섬유의 증가로 표시되는 UUO 신장의 심각한 간질 섬유증을 나타냈습니다. R-UUO 신장은 UUO 신장에 비해 감소된 섬유증을 보였습니다. 신장 손상 점수는 원주민 그룹에 비해 UUO 그룹에서 유의하게 증가했습니다. RUUO 그룹은 UUO 그룹보다 신장 손상 점수가 낮았지만 천연 신장보다 유의하게 높았습니다. UUO 그룹은 다른 모든 그룹에 비해 가장 큰 신장 무게와 부피를 나타냈습니다. RUUO 그룹은 신장 무게와 부피가 감소했지만 대조군 수준으로 완전히 돌아가지는 않았습니다.