Name: Attine Ants Gardens의 미생물군: 주사 전자 현미경을 통한 미생물 풍경 시각화 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-10-04T14:50:00.000+00:00
Duration: 7 min
Description: 탐색하세요 주사 전자 현미경을 활용한 Attine 개미 곰팡이 정원의 미생물군 생태계를 연구하는 최적화된 프로토콜을 통해 미생물과 곰팡이의 상호작용 및 바이오필름 구조를 시각화하는 방법을 배우세요.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body> Fungus-Growing Ant cultures에서 미생물 군집의 미시적 SEM 분석

생태계는 특정 지리적 위치(즉, 환경)의 과정에 의해 상호 연결된 유기체로 구성됩니다. 유기체는 시간이 지남에 따라 환경과 상호 작용하며, 여기에서 복잡하고 이질적인 공간 패턴이 나타납니다. 공간 패터닝은 생태적 다양성과 안정성, 그리고 궁극적으로 생태계 기능을 결정한다 1,2,3,4. 습지, 사바나, 산호초, 건조 생태계와 같은 거시적 생태계에서 공간적 패턴은 자원의 흐름 및 집중과 상관관계가 있습니다. 자원 최적화, 공간적 이질성 및 패터닝을 허용하면 동질적인 생태계보다 더 탄력적인 생태계를 만들 수 있다2. 군집 생태학의 기초가 되는 유기체의 공간적 지역화는 미생물 세계로도 번역됩니다.
미생물 생태계는 미세서식지 전체에 걸쳐 무작위적이고 균질하게 혼합된 유기체와는 거리가 멀며, 그 기능의 많은 부분을 정의하는 공간적 패턴을 보인다 5,6,7. Winogradsky 기둥에서 환경 및 숙주 관련 미생물군에 이르기까지, 이러한 생태계는 공간에서 이질적으로 조직되어 있으며, 공간 배열은 서로 다른 표현형 반응을 이끌어냅니다. 동거 종은 상호 작용하고 서로의 생리에 영향을 미칠 가능성이 더 큽니다. 따라서 공동체 공간 조직은 그 구성 자체라기보다는 생태계 속성과 생태적 틈새를 구분한다 5,7,8. 이러한 개념을 설명하면, 공간 패턴의 변화는 치태, 충치, 잇몸 질환 9,10, 염증성 장 질환11, 낭포성 섬유증 폐 감염, 만성 상처 감염12,13, 결장직장암 및 선종14의 병리학적 진행과 상관관계가 있는 것으로 보인다.
미생물 생물지리학(microbial biogeography, 미시적 규모에서 시공간을 가로지르는 생물다양성 분포 및 패턴화에 대한 연구)의 범위 하에서, 미생물 생태계에 대한 지식은 미생물의 공간적 패턴을 이해함으로써 큰 이점을 얻을 수 있다 6,13,15,16,17. 우리는 카리스마 있는 곰팡이 성장 아틴 개미(Hymenoptera: Formicidae: Myrmicinae: Attini: Attina) 군체의 핵심에서 발견되는 곤충이 만든 미생물 생태계의 공간적 패턴을 조사했습니다. Leucocoprinae (Basidiomycota : Agaricaceae) 또는 Pterulaceae (Basidiomycota : Agaricales) 18 , 19 , 20 , 21 , 22 계통의 담자균류 곰팡이를 중심으로 한 "미생물 정원"이 있습니다. 정원은 개미가 통합한 대부분 식물 기반 기질을 대사하여 자라는 얽힌 균사 그물망에서 나오는 해면질 구조입니다(그림 1). 여기에는 attine 속에 따라 건조 식물 부분, 곤충 부스러기 및 사체, 갓 자른 잎, 씨앗 및 꽃 부분23,24이 포함될 수 있습니다. 외부 초식성 장과 유사하게, 정원은 효소 및 화학적으로 다루기 힘든 고분자를 불안정한 영양 자원으로 변환하여 개미에게 필수 아미노산, 지질 및 용해성 설탕21 , 25 , 26 , 27 , 28 을 제공합니다.
잎을 자르는 속 Atta와 Acromyrmex의 정원을 위해 수행 된 초 구조, 효소 및 전사체 분석은 이러한 환경이 기질 분해 및 영양 패치의 연속체를 구조화한다는 것을 시사합니다26 , 29 , 30 , 31 , 32 . 정원의 젊은 부분은 파편화 된 후 갓 통합 된 기질로 인해 더 어두운 경향이 있습니다. 이렇게 최근에 추가된 기질은 종종 가장자리에서 군집화되는데, 이 기질은 개미 일개미에 의해 절단되고 균사체 덩어리가 접종됩니다. 절단된 가장자리에서 방사되는 곰팡이 균사는 기판 29,32,33 위로 퍼집니다. 기질 분해가 진행됨에 따라 균사 풍부도가 증가하여 희끄무레하고 대사 활성 영역이 생성됩니다30 , 31 , 32 . 더 많이 분해 된 기질과 풍부한 미생물군29,32을 가진 오래된 영역은 갈색 색조와 더 높은 습도를 나타내는 경향이 있습니다. 작업자는이 영역의 조각을 제거하여 폐기물 더미로 분리하고 곰팡이 공생체 34 , 35 , 36 에 해를 끼치는 기질도 취합니다. 쓰레기 더미는 물리적으로 정원에서 떨어져 있지만 풍부한 서식지 미생물29 , 32 , 37 , 38 , 39 에 의해 지속적인 기질 분해 및 영양 순환의 지점입니다.
주로 Enterobacter, Klebsiella, Pantoea, Pseudomonas 및 Serratia로 구성된 미생물군도 정원에 서식하며 다양한 attine 곰팡이 배양 시스템에서 공유하는 것으로 보입니다. 곰팡이 대사를 보완할 수 있는 대사 경로를 암호화하는 미생물총(microbiota)은 잠재적으로 정원의 생리적 반응에 참여할 수 있습니다 40,41,42,43,44. 메타유전체학(metagenomic) 데이터는 미생물총(microbiota)이 존재한다는 것을 나타냈을 뿐만 아니라41,42, 잎개미의 곰팡이 배양에 대한 주사전자현미경(SEM) 분석에서도 식물 기질 위에 대부분 막대 모양의 박테리아가 있음을 보여주었다32. 박테리아 (셀룰로 분해 균주 포함)는 전체 정원에서 분리되었지만, 정원의 오래된 부분과 폐기물 더미뿐만 아니라 창시자 여왕이 운반 한 초기 펠릿에서만 시각화되었습니다29,32. 또한 미생물총(microbiota)이 이들의 대사 능력(42)에 의해 제안되고 시험관 내에서 관찰된 바와 같이 생체내(즉, 정원 및 폐기물)에 생물막을 형성할 수 있는지 여부는 불확실했습니다 44.
여기에서 우리는 SEM을 사용하여 정원 지역 전반에 걸친 미생물군 공간 조직을 더 자세히 이해하고 미생물총-기질과 미생물군-균사 물리적 상호 작용을 자세히 설명했습니다. SEM은 초점 깊이가 더 큰 이미지를 제공함으로써 고해상도로 3차원 현미경 구조를 관찰할 수 있으므로 정원 미생물총(microbiota) 공간 패턴을 철저히 분석할 수 있습니다. 이러한 이질적이고 섬세한 곰팡이 기반 샘플을 고정, 탈수, 건조, 스퍼터 코팅 및 이미징하는 단계를 자세히 설명합니다. 사오스뮴 테트록사이드(OsO4)를 사용하여 후고정 단계를 제거하고 탈수 시간을 줄임으로써 SEM 분석을 위한 정원 및 폐기물 샘플을 준비하기 위한 프로토콜 32,33,45를 단순화했습니다. 이 적응된 프로토콜은 균사 구조 패턴과 미생물군 및 생물막 공간 조직을 보존하며 다른 섬세한 미생물 생태계 및 생물막에 적용할 수 있습니다.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67334/67334fig01v2.jpg"> 
그림 1: Attine 미생물 정원. 정원은 개미가 통합한 대부분 식물 기반 기질을 대사하여 자라는 균사가 얽힌 그물망으로 인한 스펀지 같은 구조입니다. 또한 정원에 서식하는 미생물총(microbiota)은 곰팡이 대사를 보완할 수 있는 대사 경로를 암호화합니다. 균유전체학 데이터와 이전의 주사 전자 현미경 분석은 그 존재를 나타내었지만, 우리는 그것의 공간적 조직과 기질 및 곰팡이 균사와의 물리적 상호 작용에 대한 지식이 거의 없었습니다. 우리는 SEM을 사용하여 미생물총(microbiota)과 생물막의 공간 조직과 패터닝을 밝혔습니다. Mariana Barcoto의 삽화(Barcoto 및 Rodrigues 94에서 각색된 정원 및 미생물군), Mariana Barcoto 및 Enzo Sorrentino의 사진. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67334/67334fig01largev2.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>

<table><tbody><tr><td>2mL 튜브</td><td>Axygen</td><td>MCT-200-C-BRA</td><td>샘플 고정 및 탈수</td></tr> 염화<tr><td>칼슘 무수</td><td>Merck</td><td>C4901</td><td>CaCl2 무수 Karnovsky' s 고정성</td></tr><tr><td>임계점 건조기</td><td>Leica</td><td>EM CPD 300</td><td>임계점 건조용</td></tr><tr><td>양면 탄소 전도성 테이프, 12 mm (W) X 5 M (L)</td><td>전자 현미경 과학</td><td>77819-12</td><td>시료 장착용</td></tr><tr><td>곤충학 겸자</td><td>정원 시료 조작용</td><td>특정 공급업체</td><td></td> 없음</tr><tr><td>에틸 알코올(=에탄올), 순수(&ge; 99.5%)</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>459836</td><td>탈수</td></tr><tr><td>겸자</td>용 <td>특정 공급업체</td><td></td> 없음 <td>정원 샘플을 조작하기 위해</td></tr><tr><td>유리 비커</td><td>특정 공급업체</td><td></td> 없음 <td>탈수용</td></tr><tr><td>유리 페트리 접시</td> 정원 <td>샘플을 조작하기 위해</td>특정 <td>공급업체</td><td></td> 없음</tr><tr><td>유리 피펫</td> 특정 <td>공급업체</td><td></td> 없음 <td>샘플 수정 및 탈수</td></tr><tr><td>글루타르알데히드(수성 글루타르알데히드 EM 등급 25%)</td><td>전자 현미경 과학</td><td>16220</td><td>카르노프스키를 준비하기 위해 s 고정</td></tr><tr><td>골드 타겟&nbsp;</td><td>테드 펠라, Inc.</td><td>8071</td> 금 염산<td>으로 스퍼터 코팅</td></tr><tr><td></td><td>Sigma-Aldrich</td><td>320331</td><td>용액 조정용 pH</td></tr><tr><td>이미지 편집기</td><td>Photoshop</td><td>모든 버전</td><td>이미지 조정</td></tr><tr><td>파라포름알데히드(파라포름알데히드 20% 수용액 EM 등급)</td><td>전자 현미경 과학</td><td>15713</td><td>카르노프스키를 준비하기 위해' s 고정</td></tr><tr><td>Propilene 수신자</td><td>특정 공급업체</td><td></td> 없음 <td>살아있는 개미 군집을 유지하기 위해</td></tr><tr><td>주사 전자 현미경</td><td>JEOL&nbsp;</td><td>IT300 SEM</td><td>샘플 이미징용&nbsp;</td></tr><tr><td>소듐 카코딜레이트 트리하이드레이트</td><td>시그마-알드리치</td><td>C0250</td><td>소듐 카코딜레이트 완충액 제조용</td></tr><tr><td>주걱</td><td>특정 공급업체</td><td></td> 없음 <td>정원 샘플을 조작하기 위해</td></tr> 직경 <tr><td>15mm x 10mm 높이의 표본 용기</td><td>Ted Pella, Inc.</td><td>4591</td><td>임계점 건조용</td></tr><tr><td>스퍼터 코팅기</td><td>Baltec&nbsp;</td><td>SCD 050</td><td>골드</td></tr><tr><td>스텁 (알루미늄 마운트, 플랫 엔드 핀) 12.7 mm x 8 mm&nbsp;</td><td>전자 현미경 Sciences</td><td>75520</td><td>시료 장착용</td></tr></tbody></table>

attine ants' gardens의 미생물군: 주사 전자 현미경을 통한 미생물 풍경 시각화

Microbiota of Attine Ants' Gardens: Visualizing a Microbial Landscape by Scanning Electron Microscopy

여기에서는 곰팡이 균사, 기질, 미생물군 및 생물막과 같은 attine 정원 및 폐기물 샘플의 구성 요소를 시각화하기 위한 단순화된 프로토콜을 제시했습니다. SEM은 정원과 폐기물이 미생물총(microbiota) 구조 패턴을 어떻게 비계로 삼는지에 대한 이해를 높였습니다(그림 3). attine 정원에서 곰팡이 균사는 기질 표면의 일부를 덮고있는 가지 모양의 구조입니다. 진균 균사는 탈수와 파열에 매우 민감한 경향이 있기 때문에 사용자는 균사 측면에 따라 시료 전처리 결과를 평가할 수 있습니다. 이전 작품 32,33,45에서도 관찰된 바와 같이, 균사는 관형 측면을 나타냅니다. 손상되지 않은 튜브 모양의 균사는 효과적인 시료 준비를 나타냅니다(그림 3A 및 그림 4C). 균사가 리본 모양일 때, 이러한 평탄화는 아마도 이 기술의 인공물일 수 있습니다(그림 4C).
식물 기질 표면은 표피층(cuticle layer)과 표피층(epidermal layer), 기공(stomata)과 상체(trichome)로 인식될 수 있습니다. 이러한 구조는 기질이 아직 곰팡이 균사와 미생물총(microbiota)에 의해 군집화되지 않았을 때 더 잘 인식할 수 있습니다(그림 3A 및 그림 4C). 기질이 군집화되면 미생물군 및/또는 곰팡이 균사가 표면을 덮어 특정 식물 구조를 쉽게 식별할 수 없습니다(그림 3A). 미생물총(microbiota)은 곰팡이 균사 또는 기질에 군집화할 수 있으며, 이들 각각은 겉보기에 뚜렷한 공간 조직으로 되어 있습니다. 그림 3에서 이러한 공간 패턴은 개략적으로 설명되고 식별된 각 SEM 이미지에 박싱되었습니다. 이는 SEM 결과와 해석 간의 연결을 용이하게 할 수 있습니다.
최면 군집화 미생물총(microbiota)은 덜 일반적으로 관찰되며, 발견될 경우 고립되거나 균사 표면에 부착된 작은 그룹으로 발생하는 막대 또는 구균 세포로 구성됩니다. "레이스 직물" 구조처럼 보이는 생물막 외다당류 매트릭스(EPS)는 작은 덩어리로 균사를 둘러싸고 있는 것을 관찰할 수 있습니다(그림 3A). 상당히 더 흔한 것은 기질 식민지 미생물총(microbiota)으로, 다른 attine 개미 종의 정원에서 발견됩니다. 집락화 패턴은 기질 열화 단계에 의해 어느 정도 정의되는 것으로 보입니다. 따라서 아직 분해되지 않은 기질에 군집화하는 동안 미생물총(microbiota)은 개별 세포로 발생하거나 작은 그룹으로 모일 수 있습니다. 미생물총(microbiota)은 미시적 열화 징후가 나타날 때(즉, 식물 표피층/표피층 및 기타 식물 구조를 식별할 수 없고 고랑과 움푹 들어간 곳이 많은 경우) 기질을 층을 이룰 수 있습니다.
이러한 "미생물 매트"에서 세포의 형태는 EPS 매트릭스가 없을 때 더 잘 인식할 수 있습니다. 미생물 세포가 EPS 매트릭스에 내장되어 있는 경우 그 형태를 쉽게 구별할 수 없습니다. 그들의 공간 조직에 따르면, 우리는 생물막을 "퍼짐" 또는 "3차원"으로 특성화했습니다. 생물막이 확산되면 미생물 세포와 EPS 매트릭스가 간헐적으로 기질 표면을 덮어 1-3 세포 두께의 평평한 층을 형성합니다(그림 3B). 생물막이 3차원일 때 미생물 세포와 EPS 매트릭스가 쌓여 여러 세포 두께의 클러스터를 형성합니다. 악화된 기질(예: 오래된 정원 및 폐기물)로 구성된 정원 지역은 미생물군을 고랑과 움푹 들어간 곳에 숨겨 두꺼운 군집을 형성합니다(그림 3C). 특히, 폐기물 샘플에서 광범위하게 분해된 기질에는 모든 영역에서 형태학적으로 가장 다양한 미생물총(microbiota)이 풍부하게 서식하고 있습니다. 효모는 이 군집에 더 많은 복잡성을 더하여 생물막을 통해 원핵생물과 물리적으로 상호 작용합니다. Atta sexdens 및 Acromyrmex sp. 폐기물 샘플에서 EPS 매트릭스는 막대 모양 및 구형의 원핵생물뿐만 아니라 방추형 및 구형 효모를 둘러싼 눈에 띄는 섬유소 그물망을 형성하는 것이 관찰되었습니다(그림 3C).
얽힌 균사 그물망으로 인해 정원의 스폰지 구조는 샘플을 더 고르게 코팅하기 위해 추가 스퍼터링이 필요합니다. 이러한 단계는 이미지를 왜곡하고 해상도를 방해하는 전자 산란을 방지합니다(그림 4A). 샘플 준비 단계는 대부분의 정원 구조를 보존하여 미생물총의 공간적 분포와 조직을 밝혔습니다. 그러나 곰팡이 균사 및 EPS 매트릭스와 같은 구조는 탈수에 매우 민감하고 특히 SEM의 경우 보존하기가 매우 어렵다는 점을 다시 한 번 강조할 가치가 있습니다. 균사 구조는 비교적 잘 보존되었지만, 일부 정원 샘플에서 시각화된 생물막에는 EPS 매트릭스의 일부 구조적 구성 요소가 부족할 수 있다고 생각하는 것이 합리적입니다. 일부 샘플에서는 미생물총(microbiota)을 둘러싸고 있는 다당류의 가장 매끄러운 바깥층이 보존되었지만(그림 3A, B), 일부 샘플에서는 미생물총(microbiota) 형태학적 특징이 보존되었지만 EPS 매트릭스는 없었습니다. 그러나 EPS 매트릭스가 실제로 없었는지 또는 샘플 준비 중에 제거되었는지 여부는 명확하지 않습니다.
한편으로는, 생물막 매끄러운 층을 제거하면 정확한 생물막 구조에 대한 이해가 손상됩니다. 다른 한편으로는, 우리의 주요 연구 초점인 층 아래에 거주하는 세포의 형태, 공간 구성 및 물리적 상호 작용을 밝힙니다. 이전 연구에서는 사산화 오스뮴 (OsO4) 증기를 주요 고정제로 사용하여 곰팡이 균사와 생물막 매트릭스의 보존을보고했습니다44 , 50 , 51 , 52 , 53 , 54 . 그런 다음 신선한 정원 샘플을 OsO4 증기로 고정하는 비교 실험을 수행했는데, 이는 분명히 생물막의 매끄러운 측면을 보존했습니다(그림 4B). 그러나 이 방법은 균사와 미생물총(microbiota)을 광범위하게 평평하게 만들었습니다. 이러한 평탄화는 앞서 설명한 정원의 일반적인 공간적 측면(29,33,32,45)을 상실하는 결과를 낳았고, 따라서 정원의 구조적 패턴에 대한 추가 연구를 제한했다. OsO4로 고정하면 미생물 형태와 분포를 구별하고 세포 구조를 기술적 인공물과 구별하기가 어려워져 데이터 해석이 복잡해졌습니다.
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67334/67334fig03v2.jpg"> 
그림 3: 미생물총(Microbiota) 아키텍처 패턴. 미생물총(microbiota)은 곰팡이 균사와 기질을 뚜렷한 공간 조직으로 군집화합니다. 이러한 공간 패턴은 개략적으로 설명되었으며 식별된 각각의 SEM 이미지에서 박스화되었습니다(그림에서 흰색 사각형으로 구분됨): (A) 최면 집락화 미생물총(microbiota)은 고립된 세포 또는 작은 그룹의 세포로 구성되며, 일부 샘플에서 생물막 외다당류 매트릭스가 검출될 수 있습니다. (B) 기질 집락화 미생물총(microbiota)은 기질 전체에 퍼져 있으며, EPS 매트릭스는 세포를 덮고 있어 세포의 형태를 쉽게 구별할 수 없습니다. (C) 기질 집락화 미생물총(microbiota)이 3차원 그룹을 형성하고, 단일체 또는 다형태학적 생물막을 구성하며, 경우에 따라 EPS 매트릭스를 입증합니다. 삽화: 마리아나 바르코토 약기 : EPS = exopolysaccharidic matrix. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67334/67334fig03largev2.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67334/67334fig04v2.jpg"> 
그림 4: 무익한 이미징. 저품질 이미지가 비효율적인 결과를 렌더링하거나 아키텍처 패턴의 해석을 방해합니다. (A) 전자 산란은 이미지를 왜곡하여 해상도를 방해하고 결과적으로 형태 식별을 방해합니다. 이는 스퍼터 코팅된 샘플에서 한 번만 자주 관찰되었으며 추가 코팅에 의해 감소했습니다. (B) 사산화 오스뮴 (OsO4) 증기를 주요 고정제 44,50,51,52,53,54로 사용하여 신선한 정원 샘플을 고정하면 생물막의 매끄러운 측면이 보존 된 것으로 보입니다. 그러나 그것은 광범위한 균사와 미생물군을 평평하게 만들어 정원 건축 패턴을 손상시켰습니다. (C) Karnovsky의 고정제를 사용한 시료 전처리는 OsO4를 사용한 제제와 비교할 때 대부분의 균사 구조, 미생물군 분포 및 정원의 공간 패턴을 보존하여 더 높은 품질의 이미지를 생성했습니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67334/67334fig04largev2.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>

Attine Ants' Gardens의 미생물군: 주사 전자 현미경을 통한 미생물 풍경 시각화

In macroscale ecosystems, such as rainforests or coral reefs, the spatial localization of organisms is the basis of our understanding of community ...

microbiota-attine-ants-gardens-visualizing-microbial-landscape

Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

이 동영상은 흰개미의 hindgut에 거주 미생물의 종 DNA를 추출하기위한 기술을 보여줍니다. 굿 미생물 커뮤니티를 시각화하는 데 유용합니다 젖은 마운트 슬라이드의 준비도 그림이고, 종의 풍부한 굿 환경을 통해 투어가 주어집니다.

마이트의 굿 미생물 (Zootermopsis Angusticollis)에서 DNA를 추출하고 굿 미생물을 떠올리

흰개미 - 굿 미생물 커뮤니티 미생물 사이의 복잡한 상호 작용을 공부하고있는 훌륭한 시스템입니다 왜 제라드 레드 버터는 설명합니다. 호스트 곤충과 lignocellulose - 굴욕 굿 미생물 사이의 기존의 공생 관계는 물론 굴욕적인 식물 바이오 매스 및 바이오 연료 생성 이러한 미생물의 산업 사용으로 설명합니다.

인터뷰 - 마이트의 H​​indgut에서 미생물 커뮤니티를 조사

제라드 레드 버터는 흰개미의 hindgut 생활 거주의 다양성을 통해 자연 도보를 위해 소요 - 250 종을 포함하는 microenvironment는 세계 어디서도 발견했습니다. 제라드가이 시스템에 의해 전시 공생은 다층이며 흰개미와 굿 주민 사이의 관계뿐만 아니라 관련된뿐 아니라 창자 미생물 서로 공생의 복잡한 웹 관련되어있다는 것을 보여준다.

공생의 레이어 - 마이트의 H​​indgut의 미생물 커뮤니티를 떠올리

여기, 우리는 공간 및 일시적으로 틱 용기 수정된 전체 마운트 제자리 교 잡 방법을 사용 하 여 가능한 microbiota의 존재를 평가 하기 위해 프로토콜을 제시.

제자리에 전체 산 교 잡에 의해 틱 용기에 Microbiota의 시각화

이 간소화된 프로토콜은 조직을 고정하는 것에서부터 시투 혼성화에서 형광을 함유한 미생물을 염색하는 것까지 복잡한 조직 샘플에서 박테리아를 감지하고 이미지화하는 워크플로우를 자세히 설명합니다.

시투 혼성화, 렉틴 염색 및 이미징에서 형광을 통한 장내 미생물군유립 상호 작용의 시각화

이 프로토콜은 실시간으로 개인 replisomes하여 DNA 복제를 시각화하기위한 간단한 단일 분자 형광 현미경 기술을 보여줍니다.

형광 현미경과 함께 머릿속으로 단일 분자의 DNA 복제

극저온 전자 현미경은 스캐닝 (SEM) 또는 전송 (TEM) 중 하나는, 널리 높은 수분 함량 1 생체 시료 또는 기타 자료의 특성에 사용됩니다. SEM / 집중 이온 빔 (FIB)는 샘플에 대한 관심의 기능을 식별하고 극저온 TEM에 전송을위한 얇은 전자 투명한 얇은 판을 추출하는 데 사용됩니다.

집중 이온 빔의 극저온 전자 현미경 표본 준비하여 의미

조혈 줄기 및 전구 세포 (HSPCs) 및 골수 틈새 시장 사이의 상호 작용의 본질은 제대로 이해된다. 맞춤형 하드웨어 변형 및 다단계 획득 프로토콜은 생체 화상 골수 영역 내에 홈 표지 HSPCs 추적 상호 작용과 움직임 이광자 및 공 초점 현미경의 사용을 허용한다.

성인 마우스 두개골 골수에서 조혈 줄기 및 전구 세포의 생체 내 4 차원 추적에서

천공된 간 정현파 내피 세포는 다양한 질병, 독소 및 생리학적 상태의 영향을 많이 받는 생물학적으로 중요한 필터 시스템입니다. 이러한 변화는 간 기능에 큰 영향을 미칩니다. 우리는 이러한 세포에서 fetestrations의 크기와 수를 측정하는 표준화 방법을 설명합니다.

주사 전자 현미경으로 간 사인 내피 세포의 분석 및 그들의 Fenestrations위한 표준화 된 방법

여기에 표시된 것은 탈세포화된 심장 조직에서 세포외 기질 미세 구조를 시각화하는 방법입니다.

침연 (macerated) 조직의 전자 현미경을 스캔하면 세포 외 매트릭스를 시각화하기

탐색하세요 주사 전자 현미경을 활용한 Attine 개미 곰팡이 정원의 미생물군 생태계를 연구하는 최적화된 프로토콜을 통해 미생물과 곰팡이의 상호작용 및 바이오필름 구조를 시각화하는 방법을 배우세요.

Attine Ants' Gardens의 미생물군: 주사 전자 현미경을 통한 미생물 풍경 시각화

더 많은 동영상 탐색