성별 확인 호르몬 요법을 모방한 쥐 모델 수립

우리의 연구는 트랜스젠더 남성의 경우 테스토스테론을, 트랜스젠더 여성의 경우 항안드로겐과 함께 에스트로겐을 사용하는 트랜스젠더를 위한 성별 확인 호르몬 요법을 복제하기 위한 동물 모델을 개발했습니다. 우리는 이러한 치료를 받는 사람들이 일반 인구만큼 환경 화학 물질에 취약한지, 호르몬 치료의 장기적인 부작용이 있는지 조사하고 있습니다. 이 모델은 호르몬 치료를 받는 트랜스젠더의 화학 물질에 대한 잠재적으로 다른 감수성과 부작용을 평가할 수 있는 데이터와 도구를 현재 사용할 수 있기 때문에 해당 분야에서 독특합니다.

우리 연구에서 중요한 발견은 호르몬 요법의 성공을 평가하기 위한 마커로 성별 특이적 간 CPS를 사용하는 것입니다. 우리 연구에서 처음으로 개발된 이 접근 방식은 모델의 정확성과 효율성을 확인하는 귀중한 도구를 제공합니다.

우리의 프로토콜은 호르몬 요법의 장기적인 효과를 이해하는 데 있어 격차를 해소합니다. 또한 식품 및 환경 화학 물질에 대한 일상적인 노출이 시간이 지남에 따라 호르몬 치료의 효과와 상호 작용하거나 변화시킬 수 있는지 여부를 조사합니다.

앞으로 모델이 장기 테스트에 적합한지 탐색하고, 치료 효과를 더 잘 평가하기 위해 좁은 행동 테스트와 같은 추가 바이오마커를 조사할 것입니다.

[강사] 먼저 주사 부위의 피부를 꼬집고 들어 올려 참기름에 녹인 테스토스테론과 에스트라디올, 시프로테론 아세테이트를 투여합니다. 1밀리리터 주사기의 바늘을 동물의 등과 평행하게 삽입합니다. 바늘이 내부에 들어가면 모델에 따라 테스토스테론 100마이크로리터 또는 에스트라디올과 시프로테론 아세테이트 200마이크로리터를 천천히 주입합니다. 2주간의 치료 후, 마취된 각 쥐를 가열 패드 위에 누운 자세로 눕힙니다. 다음으로, 21게이지 바늘이 달린 5밀리리터 주사기를 준비하여 진공이 제거되었는지 확인합니다. 손가락을 사용하여 심장을 찾습니다. 흉벽을 부드럽게 청소하고 갈비뼈 5와 6 사이의 구부러진 팔꿈치와 정렬된 지점에서 몸과 수직인 측면 흉벽에 바늘을 조심스럽게 삽입합니다. 바늘이 심실에 도달하면 혈액이 모세관을 통해 주사기로 들어갑니다. 혈액이 채취될 때까지 주사기 피스톤을 천천히 지속적으로 집어넣습니다. 희생 제사 후 각 동물을 해부대 위에 누운 자세로 앞다리가 위쪽을 향하고 뒷다리가 아래쪽을 향하도록 합니다. 팔다리를 핀으로 고정한 다음 동물의 복부 표면에 소독액을 뿌려 해부를 준비합니다. 가위를 사용하여 치골에서 상복부까지 정중선을 따라 자릅니다. 정중선 복부 복부 절개에서 각 뒷다리의 내측 표면을 따라 측면 절단을 두 번 하고 복부 내장을 노출시킵니다. 수컷 쥐의 경우 복강 내 음낭 주머니에 위치한 고환을 절제합니다. 음낭을 눌러 고환이 튀어나오도록 하고 부드럽게 잡습니다. 펜치를 사용하여 내장 지방을 잡은 다음 고환을 내장에서 조심스럽게 잘라냅니다. 조직병리학적 분석을 위해 Bois 용액에 보관하기 전에 고환의 무게를 측정하십시오. 암컷 쥐의 경우 자궁을 섬세하게 잡습니다. 양쪽 자궁 뿔 끝에 있는 난소를 식별하고 주변 내장 지방 조직에서 잘라냅니다. 절제 후 난소의 무게를 측정하십시오. 다음으로 집게로 간을 잡고 부러지지 않도록 합니다. 펜치를 사용하여 검상돌기를 잡고 가위로 다이어프램을 완전히 자릅니다. 가위를 사용하여 간을 횡격막에서 분리합니다. 겸자로 검상돌기를 들어 올리고 복강에서 간을 추출합니다. 절제 후 간의 무게를 측정하고 적절하게 보관하십시오. 가위를 사용하여 동물의 목을 따라 수직으로 자릅니다. 피부와 근육 조직을 제거하여 갑상선이 있는 기관을 노출시킵니다. 갑상선을 제거하기 위해 기관 끝을 부드럽게 다듬습니다. 고환을 제거한 후 고환의 후방 가장자리에 부착되어 음낭 안에 있는 부고환을 잡습니다. 정액을 채취하려면 가위를 사용하여 지방과 결합 조직을 제거하여 오른쪽 부고환의 꼬리를 청소하십시오. 나머지 부분에서 꼬리를 분리하여 DMEM 1밀리리터가 들어 있는 페트리 접시에 넣습니다. 가위로 꼬리를 자르고 과거 피펫을 사용하여 내용물을 부드럽게 흐르게 하고 방출을 용이하게 합니다. 이제 수집된 액체를 15밀리리터 튜브로 옮기고 DMEM으로 부피를 10밀리리터로 조정하여 희석 계수를 1:10으로 만듭니다. 내용물을 피펫팅하여 균질화하고 현탁액을 만듭니다. 부드럽게 흔든 후 10마이크로리터의 서스펜션을 가져와 Neubauer 챔버에 로드합니다.