Patch-Clamp Techniques for Single Endolysosomal Vesicle Analysis

Hsuan-Ti Wang; Cheng-Chang Chen

doi:10.3791/67519

단일 Endolysosomal 소포 분석을 위한 Patch-Clamp 기법

JoVE Journal
Biology

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Biology

Patch-Clamp Techniques for Single Endolysosomal Vesicle Analysis

단일 Endolysosomal 소포 분석을 위한 Patch-Clamp 기법

Full Text

1,210 Views

05:47 min

April 4, 2025

DOI: 10.3791/67519-v

Hsuan-Ti Wang¹, Cheng-Chang Chen^1,2

¹Clinical Laboratory Sciences and Medical Biotechnology, College of Medicine,National Taiwan University, ²Department of Laboratory Medicine,National Taiwan University Hospital

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

이 프로토콜은 수동 endolysomal patch-clamp system을 사용하여 세포 내 소포의 이온 채널 활성을 직접 측정하는 방법을 자세히 설명합니다. 엔도리소좀(endolysosome)을 확대하고 이러한 소포를 수동으로 분리하는 방법을 설명합니다. 이 접근 방식을 통해 연구원은 절차를 정확하게 복제하고 적용할 수 있습니다.

엔도리소좀 구획(Endolysosomal compartments)은 세포에서 가장 작은 소기관입니다. 기존의 전기생리학적 기법은 전압 및 전류 변화를 직접 측정할 수 없습니다. 엔돌리소좀 패치 클램프 기법을 사용하면 직접 기록이 가능하여 이전에 이온 채널에서 연구할 수 있습니다.

주요 실험적 과제는 모든 화합물이 리소좀을 효과적으로 확대하는 것은 아니라는 것입니다. 적합한 세포를 식별하는 것은 어렵고, 이상적인 리소좀을 사용하더라도 성공적인 이온 채널 기록이 보장되지 않습니다. 우리는 엔도리소좀 막에서 직접 전기생리학적 기록을 가능하게 하는 엔도리소좀 패치 클램프 기술을 개발했습니다.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos