Name: Isolation And Dendritic Cell-Uptake of Small Extracellular Vesicles from Echinococcus granulosus(Echinococcus granulosus에서 작은 세포외 소포의 분리 및 수지상 세포 흡수) (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-03-28T13:15:00.000+00:00
Duration: 9 min 4 s
Description: 학습하세요 Echinococcus granulosus에서 분리한 작은 세포외 소포가 수지상 세포에 의해 흡수되는 과정과 면역조절 메커니즘을 탐구하는 방법입니다. 이 기술은 기생충-숙주 상호작용 연구와 백신 개발에 활용됩니다.

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<table><tbody><tr><td>1.5mL 튜브</td><td>Henso</td><td>N14059</td><td></td></tr><tr><td>24웰 플레이트&nbsp;</td><td>JetBiofil</td><td>CAP011024</td><td>폴리스티렌, 평평한 바닥, 멸균</td></tr><tr><td>6웰 플레이트&nbsp; &nbsp;</td><td>헨소메디컬(주)</td><td>N14221</td><td>평평한 모양의 바닥, PS 소재, 멸균</td></tr><tr><td>70mm 폴리프로필렌 세포 여과기</td><td>Biologix Group Limited</td><td>15-1070</td><td>멸균</td></tr><tr><td>알시안 블루 8 GX 염료&nbsp;</td><td>Santa Cruz</td><td>sc-214517B</td><td></td></tr><tr><td>자동 CO2 인큐베이터</td><td>Nuarire</td><td>UN-5100E/G DH</td><td></td></tr><tr><td>소 혈청 알부민</td><td>위너 실험실</td><td>1443151</td><td></td></tr><tr><td>CD11c 단클론 항체-PECy5&nbsp; &nbsp; 100 & 마이크로; g</td><td>eBioscience</td><td>15-0114-82</td><td>클론(N418)</td></tr><tr><td>CD40 단클론항체-FITC 100 & micro; g</td><td>eBioscience</td><td>11-0402-82</td><td>클론(HM40-3)</td></tr><tr><td>CD80 단클론 항체-APC 100 & micro; g</td><td>eBioscience</td><td>17-0801-82</td><td>클론 (16-10A-1)</td></tr><tr><td>CD86 단클론 항체-FITC&nbsp; 100 & micro; g</td><td>eBioscience</td><td>11-0862-82</td><td>클론(GL-1)</td></tr><tr><td>원심분리기</td><td>Thermo Scientific</td><td>IEC CL31R Multispeed</td><td></td></tr><tr><td>공초점 현미경</td><td>Nikon</td><td>Nikon 공초점 현미경 C1</td><td></td></tr><tr><td>원추형 튜브 15mL 직경 17 x 120mm</td><td>Citotest</td><td>4610-1865</td><td></td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Sigma</td><td>107K4034</td><td></td></tr><tr><td>D-Glucose</td><td>Merk</td><td>1.78343</td><td></td></tr><tr><td>디메틸 설폭사이드&nbsp;</td><td>Anedra</td><td>6646</td><td></td></tr><tr><td>태아 소 혈청 500mL</td><td>Sigma-Aldrich&nbsp; &nbsp;</td><td>12352207</td><td></td></tr><tr><td>유세포 분석 시스템</td><td>BD Biosciences</td><td>BD FACSCanto&trade; II</td><td></td></tr><tr><td>접힌 모세관 제타 세포&nbsp;</td><td>Malvern Panalytical</td><td>DTS1070</td><td></td></tr><tr><td>겐타마이신 황산염</td><td>Sigma</td><td>G1264</td><td></td></tr><tr><td>글루타르알데히드 용액</td><td>Fluka</td><td>49630</td><td></td></tr><tr><td>Hepes</td><td>Gibco</td><td>11344041</td><td></td></tr><tr><td>Hypodermic&nbsp; 바늘 21G x 1"25/8</td><td>Weigao</td><td></td><td>멸균</td></tr><tr><td>Hypodermic&nbsp; 바늘 25G x 5/8"</td><td>Weigao</td><td></td><td>메 마른</td></tr><tr><td>도립 현미경&nbsp;</td><td>라이카</td><td>DMIL LED 플루오&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>케타민</td><td>홀리데이</td><td></td><td></td></tr><tr><td>지질다당류&nbsp; 그</td>람 음성 박테리아 대장균 K12에서 추출한 <td>5mg Invitrogen</td><td>tlrl-rslps</td><td>LPS. TLR2/4 작용제</td></tr><tr><td>로페라마이드 염산</td>염 <td>시그마-알드리치</td><td>5.08162</td><td></td></tr><tr><td>중간 199&nbsp;</td><td>Gibco</td><td>11150059</td><td></td></tr><tr><td>메틸렌 블루</td><td>아네드라</td><td>6337</td><td></td></tr><tr><td>MHC 클래스 I(H2kb) 단클론 항체-PE 100 & g</td><td>eBioscience</td><td>12-5958-82</td><td>클론 (AF6-88.5.5.3)</td></tr> <tr><td>MHC 클래스 II (IA/IE) 단클론 항체-FITC&nbsp; 100 & micro; g</td><td>eBioscience</td><td>11-5321-82</td><td>클론(M5/114.15.2)</td></tr> <tr><td>현미경</td><td>Olympus</td><td>CX31</td><td></td></tr><tr><td>마우스 재조합 쥐 Flt3L.</td><td>PrepoTech</td><td>250-31L-10UG</td><td></td></tr><tr><td>Nanodrop</td><td>Thermo Scientific</td><td>ND-One</td><td></td></tr><tr><td>파라포름알데히드</td><td>한천 Scientific</td><td>R1018</td><td></td></tr><tr><td>페니실린 G 나트륨염</td><td>Sigma</td><td>P3032-10MU</td><td></td></tr><tr><td>PKH26</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>MINI26</td><td></td></tr><tr><td>인산염 일염기성 인산칼륨</td><td>완</td><td></td><td>충 식염수(PBS)</td></tr><tr><td>RBC 용해 완충액 100mL</td><td>Roche</td><td>11814389001</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 배지&nbsp; 1640 1x 500mL</td><td>Sigma-Aldrich(Gibco)</td><td>11875093</td><td></td></tr><tr><td>나트륨 카코딜레이트&nbsp; &nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C0250</td><td></td></tr><tr><td>염화나트륨</td><td>Anedra</td><td>7647-14-5</td><td>인산염 완충 식염수(PBS)용</td></tr> 인산<tr><td>이염기나트륨(무수) p. a.</td><td>Biopack</td><td>1639.07</td><td>인산염 완충 식염수(PBS)</td></tr><tr><td>용 스트렙토마이신 황산염</td><td>Sigma</td><td>S9137</td><td></td></tr> 주<tr><td>사기 10mL</td><td>브레멘</td><td></td><td>멸균</td></tr><tr><td>두꺼운 벽 폴리카보네이트 튜브</td><td>Beckman Coulter</td><td></td><td>13 x 55 mm, 공칭 용량 4 mL</td></tr><tr><td>투과 전자 현미경</td><td>Jeol</td><td>JEOL JSM 100CX II</td><td></td></tr><tr><td>초원심분리기</td><td>Beckman</td><td>Optima LE-80k&nbsp;</td><td>90 Ti 로터</td></tr><tr><td>자일라진</td><td>리치몬드</td><td></td><td></td></tr><tr><td>제타사이저 나노&nbsp;</td><td>말번&nbsp;</td><td>Nano ZSizer-ZEN3600</td><td>동적 광 산란 및 제타 전위 측정 수행</td></tr></tbody></table>

isolation and dendritic cell-uptake of small extracellular vesicles from echinococcus granulosus(echinococcus granulosus에서 작은 세포외 소포의 분리 및 수지상 세포 흡수)

Isolation And Dendritic Cell-Uptake of Small Extracellular Vesicles from Echinococcus granulosus

그림 1에는 E. granulosus 유충 단계의 순수 배양을 유지하기 위한 주요 단계, sEV의 분리 및 특성화, 쥐 수지상 세포에 의한 흡수를 요약한 순서도가 나와 있습니다. E. granulosus protoscoleces 및 metacestodes에서 높은 sEV 생산을 달성하기 위해 이전에 실험실에서 개발된 체외 배양 방법을 사용하여 연구된 기생충의 생존 및 대사 항상성을 극대화했습니다(그림 2).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67559/67559fig1v2.jpg"> 
그림 1: E. granulosus sEV 및 BMDC를 얻기...

Isolation And Dendritic Cell-Uptake of Small Extracellular Vesicles from Echinococcus granulosus(Echinococcus granulosus에서 작은 세포외 소포의 분리 및 수지상 세포 흡수)

The secretion of extracellular vesicles by cestodes is crucial for enabling cellular communication not only among parasites but also with host tissues. In ...

isolation-dendritic-cell-uptake-small-extracellular-vesicles-from

Research

연구

JoVE Journal

Immunology and Infection

면역학 및 감염학

출처: 왓슨, DC, et.al. 대장균 및 기타 박테리아로부터 세포외 소포의 확장 가능한 분리 및 정제. J. Vis. 경험. (2021년)이 비디오는 유전자 조작 박테리아의 외막에서 파생된 세포외 소포(EV)의 분리 및 농축을 보여줍니다. 이 과정에는 박테리아를 배양하여 EV를 방출한 다음 세포와 잔해물을 제거하기 위한 순차적 원심분리 및 여과 단계가 포함됩니다. 마지막으로, 한외여과는 다운스트림 분석을 위해 EV를 농축하는 데 사용됩니다.

박테리아로부터 외막 유래 세포외 소포의 분리 및 농축

이 동영상은 뇌 면역 세포인 미세아교세포에서 유래한 세포외 소포체 또는 EV를 분리하기 위해 크기 배제 크로마토그래피(SEC)를 기반으로 하는 방법을 설명합니다. EV는 면역 반응을 조절하는 매개체를 전달하는 분자 화물 역할을 합니다. 따라서 분리된 EV는 뉴런 면역 반응 중 미세아교세포-뉴런 누화를 연구하기 위한 체외 모델로 사용할 수 있습니다.

SEC 기반 Microglia 유래 세포 외 소포의 분리: Microglia Conditioned Culture Media에서 세포 외 소포를 분리하는 기술

Peyer의 패치에있는 셀의 특정 subpopulations (조달청), 창자 관련 림프의 조직의 주요 유도 사이트의 면역 기능을 이해 증가 관심이 있습니다. 여기 흐름 cytometric 분석 및 immunostaining을위한 PP cryosections위한 단일 셀 준비를 PP 준비 병렬 프로토콜을 설명합니다.

림프구와 손쥐 Peyer의 패치에서 수지상 세포를 분리하고 Immunostaining

이 프로토콜은 항원 밀도 단일 세포 현탁액을 원심 분리하고 그 세포 집단의 마지막 자석 및 / 또는 FACS 정렬 뒤에 조직의 소화 효소의 여러 단계를 통해 인간 흉선에서 제시 세포 분리하는 방법을 자세히 설명.

인간의 흉선에서 골수 수지상 세포와 상피 세포의 분리

여기 분리 하 고 그들의 phenotypical 및 기능 특성의 평가 대 한 인간의 여성 재생산 지역에 다른 해 부 격실에서 수지상 세포를 정화 하는 방법을 설명 합니다. 이 메서드는 다른 면역 세포 또는 다른 점 막 조직에서 수지상 세포를 분리 적용할 수 있습니다.

Phenotypical 및 기능 연구에 대 한 인간의 여성 생식 관에서 수지상 세포의 고립

여기, 선물이 성인 Schistosoma 나무에서 체 외에서 배양된 매체에 extracellular 소포 (EVs) 격리를 설명 하는 프로토콜.

절연 및 Extracellular 소포 특성 성인 Schistosoma 나무 에서

본 보고서는 마이크로글리아 또는 혈액 대식세포로부터 세포외 소포(EV) 격리에 대한 연대순 요구 사항을 강조합니다. Microglia-파생된 EV는 혈액 대식세포 유래 EV가 시험관내 분석에서 C6 신경교종 세포 침입의 대조군에서 연구된 동안 신경이대 발생의 조절자로 평가되었다. 목표는 특정 미세 환경에서 면역 중재자로서 이러한 EV 기능을 더 잘 이해하는 것입니다.

면역 세포 유래 세포 외 소포의 특성화 및 세포 환경에 대한 기능적 영향 연구

우리는 세 번째 세대 렌티 바이러스 벡터를 사용하여 Echinococcus granulosus 의 다른 발달 단계에서 신속한 일시적인 형질 도입 기술을 설명합니다.

Echinococcus granulosus의 스트로빌화 된 형태의 일시적인 형질 도입

박테리아는 생리 활성 생물학적 분자를 운반하는 나노 미터 크기의 세포 외 소포 (EV)를 분비합니다. EV 연구는 생물 발생, 미생물-미생물 및 숙주-미생물 상호 작용 및 질병에서의 역할, 잠재적 인 치료 응용 프로그램을 이해하는 데 중점을 둡니다. EV 연구의 표준화를 촉진하기 위해 다양한 박테리아로부터 EV를 확장 가능한 분리를 위한 워크플로우가 제시됩니다.

대장균 및 다른 박테리아로부터의 세포외 소포의 확장 가능한 분리 및 정제

제안된 프로토콜에는 세포 배양 상층액에서 세포외 소포를 분리하는 동안 내독소 오염을 방지하는 방법과 이를 적절하게 평가하는 방법에 대한 지침이 포함되어 있습니다.

암 세포주에서 유래한 낮은 내독소 함량 세포외 소포의 분리

학습하세요 Echinococcus granulosus에서 분리한 작은 세포외 소포가 수지상 세포에 의해 흡수되는 과정과 면역조절 메커니즘을 탐구하는 방법입니다. 이 기술은 기생충-숙주 상호작용 연구와 백신 개발에 활용됩니다.

Isolation And Dendritic Cell-Uptake of Small Extracellular Vesicles from Echinococcus granulosus(Echinococcus granulosus에서 작은 세포외 소포의 분리 및 수지상 세포 흡수) (동영상) | JoVE Journal

Isolation And Dendritic Cell-Uptake of Small Extracellular Vesicles from Echinococcus granulosus(Echinococcus granulosus에서 작은 세포외 소포의 분리 및 수지상 세포 흡수)

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