Name: Isolation of Live Myeloid and Epithelial Cell Populations from the Mouse Lung(쥐 폐에서 살아있는 골수성 및 상피 세포 집단의 분리) (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-31T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 2 s
Description: 학습하세요 쥐 폐에서 살아있는 골수성 및 상피 세포 집단을 분리하는 방법을. 바이러스 감염 후 폐 조직 복구와 면역-상피 세포 상호작용 연구에 활용할 수 있습니다.

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<meta charset="utf8"></head><body>유세포 분석을 위한 Isolation of Immune and Non-Immune Cells from Mouse Lungs (유세포 분석을 위한 마우스 폐에서 면역 및 비면역 세포 분리)

<ol><li>Wanner, A., Salathé, M., O'Riordan, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mucociliary+clearance+in+the+airways%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Mucociliary clearance in the airways.</a> Am J Respir Crit Care Med. 154 (6), 1868-1902 (1996).</li>
<li>Mason, R. J., Williams, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Type+II+alveolar+cell.+Defender+of+the+alveolus%5BTitle%5D)+AND+%22Am+Rev+Respir+Dis%22%5BJournal%5D)">Type II alveolar cell. Defender of the alveolus.</a> Am Rev Respir Dis. 115 (1), 81-91 (1977).</li>
<li>Fehrenbach, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alveolar+epithelial+type+II+cell%3A+defender+of+the+alveolus+revisited%5BTitle%5D)+AND+%22Respir+Res%22%5BJournal%5D)">Alveolar epithelial type II cell: defender of the alveolus revisited.</a> Respir Res. 2 (1), 33-46 (2001).</li>
<li>Basil, M. C., Alysandratos, K. -D., Kotton, D. N., Morrisey, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+repair+and+regeneration%3A+Advanced+models+and+insights+into+human+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Lung repair and regeneration: Advanced models and insights into human disease.</a> Cell Stem Cell. 31 (4), 439-454 (2024).</li>
<li>Hussell, T., Bell, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alveolar+macrophages%3A+plasticity+in+a+tissue-specific+context%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">Alveolar macrophages: plasticity in a tissue-specific context.</a> Nat Rev Immunol. 14 (2), 81-93 (2014).</li>
<li>Gschwend, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alveolar+macrophages+rely+on+GM-CSF+from+alveolar+epithelial+type+2+cells+before+and+after+birth%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Alveolar macrophages rely on GM-CSF from alveolar epithelial type 2 cells before and after birth.</a> J Exp Med. 218 (1), e20210745(2021).</li>
<li>Gillich, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Capillary+cell-type+specialization+in+the+alveolus%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Capillary cell-type specialization in the alveolus.</a> Nature. 586 (7831), 785-789 (2020).</li>
<li>Schyns, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-classical+tissue+monocytes+and+two+functionally+distinct+populations+of+interstitial+macrophages+populate+the+mouse+lung%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Non-classical tissue monocytes and two functionally distinct populations of interstitial macrophages populate the mouse lung.</a> Nat Commun. 10 (1), 3964(2019).</li>
<li>Chakarov, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two+distinct+interstitial+macrophage+populations+coexist+across+tissues+in+specific+subtissular+niches%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Two distinct interstitial macrophage populations coexist across tissues in specific subtissular niches.</a> Science. 363 (6432), eaat3773(2019).</li>
<li>Tsukui, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collagen-producing+lung+cell+atlas+identifies+multiple+subsets+with+distinct+localization+and+relevance+to+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Collagen-producing lung cell atlas identifies multiple subsets with distinct localization and relevance to fibrosis.</a> Nat Commun. 11 (1), 1920(1920).</li>
<li>Aegerter, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influenza-induced+monocyte-derived+alveolar+macrophages+confer+prolonged+antibacterial+protection%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Immunol%22%5BJournal%5D)">Influenza-induced monocyte-derived alveolar macrophages confer prolonged antibacterial protection.</a> Nat Immunol. 21 (2), 145-157 (2020).</li>
<li>Johansson, C., Kirsebom, F. C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophils+in+respiratory+viral+infections%5BTitle%5D)+AND+%22Mucosal+Immunol%22%5BJournal%5D)">Neutrophils in respiratory viral infections.</a> Mucosal Immunol. 14 (4), 815-827 (2021).</li>
<li>Li, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monocyte-derived+alveolar+macrophages+autonomously+determine+severe+outcome+of+respiratory+viral+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Immunol%22%5BJournal%5D)">Monocyte-derived alveolar macrophages autonomously determine severe outcome of respiratory viral infection.</a> Sci Immunol. 7 (71), eabj5761(2022).</li>
<li>Moll, H. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+transplantation+of+syngeneic+lung+adenocarcinoma+cells+to+study+PD-L1+expression%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Orthotopic transplantation of syngeneic lung adenocarcinoma cells to study PD-L1 expression.</a> J Vis Exp. (143), e58101(2019).</li>
<li>Warshamana, G. S., Corti, M., Brody, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TNF-%CE%B1%2C+PDGF%2C+TGF-%CE%B21+expression+by+primary+mouse+bronchiolar-alveolar+epithelial+and+mesenchymal+cells%3A+TNF-%CE%B1+induces+TGF-%CE%B21%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Mol+Pathol%22%5BJournal%5D)">TNF-α, PDGF, TGF-β1 expression by primary mouse bronchiolar-alveolar epithelial and mesenchymal cells: TNF-α induces TGF-β1.</a> Exp Mol Pathol. 71 (1), 13-33 (2001).</li>
<li>Corti, M., Brody, A. R., Harrison, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+primary+culture+of+murine+alveolar+type+II+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Cell+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Isolation and primary culture of murine alveolar type II cells.</a> Am J Respir Cell Mol Biol. 14 (3), 309-315 (1996).</li>
<li>Quantius, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influenza+virus+infects+epithelial+stem%2Fprogenitor+cells+of+the+distal+lung%3A+Impact+on+Fgfr2b-driven+epithelial+repair%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">Influenza virus infects epithelial stem/progenitor cells of the distal lung: Impact on Fgfr2b-driven epithelial repair.</a> PLoS Pathog. 12 (5), e1005544(2016).</li>
<li>Wu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcardiac+perfusion+of+the+mouse+for+brain+tissue+dissection+and+fixation%5BTitle%5D)+AND+%22BIO+Protoc%22%5BJournal%5D)">Transcardiac perfusion of the mouse for brain tissue dissection and fixation.</a> BIO Protoc. 11 (8), e3988(2021).</li>
<li>Morton, J., Snider, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+for+collection+and+processing+of+lungs+from+aged+mice+for+histological+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Pathobiol+Aging+Age+Relat+Dis%22%5BJournal%5D)">Guidelines for collection and processing of lungs from aged mice for histological studies.</a> Pathobiol Aging Age Relat Dis. 7 (1), 1313676(2017).</li>
<li>Bijgaart, R. J. E., van den Kong, N., Maynard, C., Plaks, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ex+vivo+live+imaging+of+lung+metastasis+and+their+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Ex vivo live imaging of lung metastasis and their microenvironment.</a> J Vis Exp. (108), e53741(2016).</li>
<li>Shi, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+purification+of+immune+cells+from+the+liver%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Immunopharmacol%22%5BJournal%5D)">Isolation and purification of immune cells from the liver.</a> Int Immunopharmacol. 85, 106632(2020).</li>
<li>Short, K. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influenza+virus+damages+the+alveolar+barrier+by+disrupting+epithelial+cell+tight+junctions%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Respir+J%22%5BJournal%5D)">Influenza virus damages the alveolar barrier by disrupting epithelial cell tight junctions.</a> Eur Respir J. 47 (3), 954-966 (2016).</li>
<li>Laidlaw, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD4%2B+T+cell+help+guides+formation+of+CD103%2B+lung-resident+memory+CD8%2B+T+cells+during+influenza+viral+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">CD4+ T cell help guides formation of CD103+ lung-resident memory CD8+ T cells during influenza viral infection.</a> Immunity. 41 (4), 633-645 (2014).</li>
<li>D'Agostino, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+for+isolation+and+characterization+of+lung+tissue-resident+memory+T+cells+and+airway-trained+innate+immunity+after+intranasal+vaccination+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol for isolation and characterization of lung tissue-resident memory T cells and airway-trained innate immunity after intranasal vaccination in mice.</a> STAR Protoc. 3 (2), 101652(2022).</li>
<li>Waal, A. M., de Hiemstra, P. S., Ottenhoff, T. H., Joosten, S. A., vander Does, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+epithelial+cells+interact+with+immune+cells+and+bacteria+to+shape+the+microenvironment+in+tuberculosis%5BTitle%5D)+AND+%22Thorax%22%5BJournal%5D)">Lung epithelial cells interact with immune cells and bacteria to shape the microenvironment in tuberculosis.</a> Thorax. 77 (4), 408-416 (2022).</li>
<li>Bhattacharya, J., Westphalen, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macrophage-epithelial+interactions+in+pulmonary+alveoli%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Immunopathol%22%5BJournal%5D)">Macrophage-epithelial interactions in pulmonary alveoli.</a> Semin Immunopathol. 38 (4), 461-469 (2016).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>슬립 팁이 있는 1mL 주사기</td><td>VWR</td><td>BD309659</td><td></td></tr><tr><td>1.7mL 마이크로 원심분리기 튜브</td><td>DOT Scientific</td><td>RN1700-GMT</td><td></td></tr><tr><td>10mL 피펫(일회용)</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-567-603</td><td></td></tr><tr><td>BD Luer-Lok Tip이 있는 10mL 주사기</td><td>VWR</td><td>75846-756</td><td></td></tr><tr><td>123 count eBeads 계수 비드</td><td>Thermo Scientific</td><td>01-1234-42</td><td></td></tr><tr><td>12채널 피펫 (30-300ul)</td><td>USA Scientific&nbsp;</td><td>7112-3300</td><td></td></tr><tr><td>16% 파라포름알데히드</td><td>VWR</td><td>100503-917</td><td></td></tr><tr><td>23 G 바늘과 일반 베벨</td><td>VWR</td><td>305194</td><td></td></tr><tr><td>27 G 바늘과 일반 베벨</td><td>VWR</td><td>BD305109</td><td></td></tr><tr><td>5 mL 피펫 (일회용)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>170373</td><td></td></tr><tr><td>50 mL 원심분리 튜브</td><td>Olympus&nbsp;</td><td>28-108</td><td></td></tr><tr><td>96-웰 라운드 바닥판</td><td>Corning</td><td>3797</td><td></td></tr><tr><td>ACK 용해 버퍼</td><td>Gibco</td><td>A100492-01</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 anti-mouse CD11c</td><td>BioLegend</td><td>117311</td><td></td></tr><tr><td>Anti-F4/80 Rat Monoclonal 항체 (PE (Phycoerythrin)/Cy7)</td><td>BioLegend</td><td>123114</td><td></td></tr><tr><td>APC anti-mouse CD64 (Fc&gamma; RI)</td><td>BioLegend</td><td>139306</td><td></td></tr><tr><td>APC/Cyanine7 안티 마우스 CD45</td><td>BioLegend</td><td>103115</td><td></td></tr><tr><td>BD Insyte Autoguard 차폐 IV 카테터</td><td>VWR</td><td>381423</td><td></td></tr><tr><td>Brilliant Violet 421 안티 마우스 I-A/I-E (MHC-II)</td><td>BioLegend</td><td>107632</td><td></td></tr><tr><td>Brilliant Violet 421 안티 마우스/인간 CD11b</td><td>BioLegend</td><td>101235</td><td></td></tr><tr><td>Brilliant Violet 605 안티-마우스 Ly-6C</td><td>BioLegend</td><td>128036</td><td></td></tr><tr><td>Brilliant Violet 711 안티-마우스 CD45</td><td>BioLegend</td><td>103147</td><td></td></tr><tr><td>C57BL/6J 마우스&nbsp;</td><td>Jackson Laboratories</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cd140a (PDGFRA) 단클론 항체 (APA5), PE-Cyanine7, eBioscience</td><td>Life Technologies</td><td>25-1401-82</td><td></td></tr><tr><td>CD170 (Siglec F) 단클론 항체 (1RNM44N), PE</td><td>Life Technologies</td><td>12170280</td><td></td></tr><tr><td>세포 여과기</td><td>Corning</td><td>352350</td><td></td></tr><tr><td>원심분리기</td><td>Eppenodorf</td><td>원심분리기 5910R</td><td></td></tr><tr><td>소 췌장에서 추출한 Deoxyribonuclease I (DNase)</td><td>Millipore Sigma</td><td>DN25-100MG</td><td>-20 &deg에 저장된 원액으로 DPBS에서 20 mg/mL로 재구성; C</td></tr><tr><td>Dispase</td><td>VWR</td><td>76176-668</td><td>한 번 해동하고 -20°C에서 1mL 부분 표본으로 보관; C</td></tr><tr><td>해부 겸자(Dumont #7)</td><td>정밀 과학 도구</td><td>11297-00</td><td></td></tr><tr><td>해부 가위</td><td>정밀 과학 도구</td><td>14060-09</td><td></td></tr><tr><td>DPBS</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>14190250</td><td></td></tr><tr><td>eBioscience 고정 키트</td><td>Life Technologies</td><td>00-5523-00</td><td></td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Life Technologies</td><td>AM9260G</td><td></td></tr><tr><td>에탄올</td><td>VWR</td><td>TX89125170HU</td><td></td></tr><tr><td>FBS</td><td>GeminiBio</td><td>100-106</td>은 <td>한 번 해동하고 -20 °C에서 분취액으로 장기 저장 전에 열 비활성화됩니다. C</td></tr><tr><td>FITC 안티-마우스 CD31 항체</td><td>BioLegend</td><td>102406</td><td></td></tr><tr><td>Gibco RPMI 1640 Medium</td><td>Fisher Scientific</td><td>11-875-093</td><td></td></tr><tr><td>유리 슬라이드</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-552-3</td><td></td></tr><tr><td>졸업 저수지</td><td>USA Scientific&nbsp;</td><td>1930-2235</td><td></td></tr><tr><td>아이스 버킷</td><td>코닝</td><td>432128</td><td></td></tr><tr><td>케타민 하이드로콜로라이드 주사(100mg/mL)</td><td>데크라</td><td></td><td>케타민과 자알라진 안락사 혼합물은 30mg/mL 케타민 염산염 및 4.5mg/mL 자일라진을 최대 1개월 동안 멸균 DPBS로 보관할 수 있습니다.</td></tr><tr><td>Liberase</td><td>Millipore Sigma</td><td>5401119001</td><td>-20°C에서 저장 용액으로 DPBS에서 5mg/mL로 재구성; </td></tr><tr><td>C 96웰 플레이트용 뚜껑</td><td>Fisher Scientific</td><td>07-201-731</td><td></td></tr><tr><td>오비탈 인큐베이터 셰이커</td><td>Barnstead Lab-Line</td><td>SHKE4000</td><td></td></tr><tr><td>p1000 피펫</td><td>Eppenodorf</td><td>3123000063</td><td></td></tr><tr><td>p1000 팁</td><td>USA Scientific&nbsp;</td><td>1122-1830</td><td></td></tr><tr><td>p200 피펫</td><td>Eppenodorf</td><td>3123000055</td><td></td></tr><tr><td>p200 팁</td><td>USA Scientific&nbsp;</td><td>1110-1700</td><td></td></tr><tr><td>PE 안티-마우스 CD326 (Ep-CAM)</td><td>BioLegend</td><td>118206</td><td></td></tr><tr><td>PerCP/Cyanine5.5 안티-마우스 CD104 항체</td><td>BioLegend</td><td>123614</td><td></td></tr><tr><td>PerCP/Cyanine5.5 안티-마우스 Ly-6G</td><td>BioLegend</td><td>127616</td><td></td></tr><tr><td>Pipet-Aid&nbsp;</td><td>Drummond</td><td>4-000-101</td><td></td></tr><tr><td>정제된 안티 마우스 CD16/32 </td><td>BioLegend</td><td>101302</td><td>텍스트에서 "Fc 블록"으로 언급 </td></tr> 됨 <tr><td>스프레이 병</td><td>VWR</td><td>23609-182</td><td></td></tr><tr><td>봉합사 (크기 2-0)</td><td>VWR</td><td>100190-026</td><td></td></tr><tr><td>언더패드</td><td>VWR</td><td>56617-014</td><td></td></tr><tr><td>Xysed (자일라진 100mg/mL)</td><td>Pivetal</td><td></td><td>위의 케타민 하이드로콜로라이드 노트를 참조하십시오.&nbsp;</td></tr><tr><td>좀비 아쿠아 고정식 생존 가능성 키트</td><td>BioLegend</td><td>423102</td><td></td></tr></tbody></table>

isolation of live myeloid and epithelial cell populations from the mouse lung(쥐 폐에서 살아있는 골수성 및 상피 세포 집단의 분리)

Isolation of Live Myeloid and Epithelial Cell Populations from the Mouse Lung

성공적인 분해는 90%-95%의 생존율을 가진 약 20-2,500만 개의 세포를 얻을 수 있습니다. 약 25,000개의 계수 구슬이 폐의 8% 분획에 추가되면 구슬은 수집된 이벤트의 1%-3%를 손상시켜야 합니다. singlet에 대한 게이팅 후 세포의 약 90%-95%가 Zombie Aqua 음성(생존력 표시)이어야 합니다(그림 2A, 그림 3A).
CD45+ 세포 중 CD64+F4/80+ 세포는 대식세포로 정의됩니다(그림 2B). 기준선에서 폐에 있는 모든 대식세포의 80%-90%는 AM(Siglec-F+CD11c+)으로 정의되고 나머지는 IM(Siglec-F-CD11c-)으로 분류...

Isolation of Live Myeloid and Epithelial Cell Populations from the Mouse Lung(쥐 폐에서 살아있는 골수성 및 상피 세포 집단의 분리)

The lung is continuously exposed to pathogens and other noxious environmental stimuli, rendering it vulnerable to damage, dysfunction, and the development ...

isolation-live-myeloid-epithelial-cell-populations-from-mouse

Research

연구

JoVE Journal

Immunology and Infection

면역학 및 감염학

여기, 우리는 murine 폐동맥 내피 세포의 격리와 문화 프로토콜을 설명합니다. 이 방법은 정비사 및 효소 폐 조직 분리뿐만 아니라 안티 - PECAM - 1과 대부분 microvascular 원산지 순수한 내피 세포 인구를 생산 자성 비즈에 복합 백신 ICAM - 2 항체를 사용하여 2 단계 정화 과정으로 구성됩니다.

신생아 마우스의 폐 내피 세포의 분리 및 문화

이 문서에서 우리는 murine 주민 폐 mesenchymal 줄기 세포 (MSC 폐), 그들의 확장, 특성화 및 immunomodulatory 속성의 분석의 절연을 보여줍니다.

Hoechst의 분리 및 특성 낮은 CD45 부정적인 마우스 폐 Mesenchymal 줄기 세포

마우스 폐 돌기 세포의 고도 정화 준비가 설명되어 있습니다. 구체적인 중점이 종래의 돌기 세포 집합의 고립에 제공됩니다.

마우스 폐에 돌기 세포의 분리

우리는 흐름 cytometric 부정적인 선택하여 기본 손쥐 유형 II 폐포 상피 세포 (AECII)의 급속한 절연을 설명합니다. 이 AECII 높은 생존 능력과 정결을 표시하고 면역 또는 전염성 질환과 같은 호흡기 질환에서의 역할에 대한 기능과 분자 연구 광범위한 적합합니다.

기능 및 분자 연구 기본 손쥐 유형 II 폐포 상피 세포의 흐름 Cytometric 절연

이 비디오는 쥐의 폐에 서식하는 면역 세포를 식별하는 체외 기술을 보여줍니다. 쥐의 폐 조직에서 표적 면역 세포를 분리한 후, 선천성 및 적응 면역 세포의 특정 마커에 대해 형광단 표지 항체 칵테일을 사용하여 표면 표지됩니다. 또한 단핵구, 대식세포 및 수지상 세포는 세포 내 마커를 사용하여 표지됩니다. 그런 다음 유세포 분석을 사용하여 다양한 면역 세포 유형을 식별합니다.

쥐의 폐에 서식하는 선천적 및 적응적 면역 세포를 식별하는 In vitro 방법

이 프로토콜은 소화 효소, 밀도 구배 분리, 수지 밀착성 및 CD146 + 자성 비드의 선택을 이용하여, 래트에서 일차 폐 상주 간엽 기질 세포를 얻기위한 분리 기술을 설명한다.

CD146의 분리<sup&gt; +</sup쥐 폐에서&gt; 주민 폐 중간 엽 기질 세포

이 프로토콜은 허혈성 뇌졸중의 뮤린 모델인 일시적 중간 대뇌동맥 폐색 후 폐 환경에서 면역 세포 조성, 사이토카인 프로파일, 및 케모카인 프로파일의 변화를 확인하기 위한 유세포 분석기의 사용을 기술한다.

폐 환경에서 면역 세포 및 전염증성 중재자의 특성화

이 기사는 인간 폐의 근위 및 원위 영역으로부터 생존 가능한 상피 세포의 농축을 허용하는 조직 해리 및 세포 분획화 접근법에 대한 상세한 방법론을 제공한다. 본원에서 이러한 접근법은 3D 오가노이드 배양 모델의 사용을 통한 폐 상피 전구 세포의 기능적 분석에 적용된다.

오가노이드 배양을 위한 인간 폐 상피 전구 세포의 분리 및 농축

이 기사에서는 신생아 마우스에서 일차 폐 내피 세포를 분리하고 배양했습니다.

일차 마우스 폐 내피 세포의 분리

아래에 설명된 프로토콜은 특이적 레티노이드 자가형광을 사용하고 형광 활성화 세포 분류를 사용하여 매우 이질적인 폐 세포 집단에서 레티노이드 함유 세포를 분리하는 간단하고 효과적인 방법입니다.

세포 분류에 의한 폐 레티노이드 함유 세포의 분리

이 프로토콜은 신생아, 유아, 성인 쥐 폐(감염 여부 모두)에서 생존 가능한 폐포 유형 II 상피세포(AECII)를 분리하는 유동 세포분석 기반 방법을 제시합니다. 이 접근법은 AECII의 분자 및/또는 기능 연구를 통해 폐 염증 및 감염 시 AECII의 역할을 규명할 수 있게 합니다.

감염성 실험 환경에 적응하는 신생아, 유아, 성체 쥐 폐에서 폐포 유형 II 상피세포 분리

학습하세요 쥐 폐에서 살아있는 골수성 및 상피 세포 집단을 분리하는 방법을. 바이러스 감염 후 폐 조직 복구와 면역-상피 세포 상호작용 연구에 활용할 수 있습니다.

Isolation of Live Myeloid and Epithelial Cell Populations from the Mouse Lung(쥐 폐에서 살아있는 골수성 및 상피 세포 집단의 분리)

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