2025년 2월 28일
간질의 예기치 않은 돌연사(SUDEP)의 메커니즘은 이해가 부족하고 현재 모델에서 해석하기 어렵습니다. 형질전환 토끼는 이러한 메커니즘에 대한 통찰력을 제공할 수 있습니다. 우리는 사망으로 이어질 수 있는 심각한 사건을 평가하기 위해 형질전환 토끼 키트에서 장기적이고 지속적인 뇌파 및 심전도 기록 방법을 설명합니다.
[강사] 시작하려면 마취된 키트를 직장 온도계를 통해 제어되는 적외선 가열 패드 위에 바로 누운 자세로 놓습니다. 3리터 백이 있는 회전 커넥터를 통해 비재호흡 Jackson-Reese 회로에 연결된 맞춤형 0.5D 프린팅 안면 마스크에 코와 입을 넣습니다. 귀나 발에 맥박 산소 측정기를 사용하여 마취 깊이를 모니터링합니다. 키트 양쪽에 접착식 수술용 수건을 놓고 큰 수술용 드레이프로 덮습니다. 드레이프에 적절한 크기의 구멍을 뚫어 복부와 가슴을 노출시킵니다. 임플란트를 수술 부위에 열고 각 임플란트 앵커 구멍에 비흡수성 앵커 봉합사를 배치하여 각 봉합사에 5-6센티미터의 꼬리를 남깁니다. 식립할 준비가 될 때까지 따뜻한 멸균 식염수가 담긴 그릇에 임플란트를 넣습니다. 메스를 사용하여 백선을 따라 피부를 통해 3cm 절개합니다. 그리고 근육을 조심스럽게 절개하여 복막강을 엽니다. 그런 다음 임플란트를 복강의 두개골 부분에 삽입하고 절개 부위 왼쪽에 위치시킵니다. 투관침을 사용하여 양성 심전도(ECG)와 EEG 와이어를 복강과 절개 부위 왼쪽으로 약 3-4센티미터 떨어진 피부 밖으로 터널링합니다. 절개 부위 오른쪽으로 2cm 떨어진 음극 ECG 와이어를 터널링하여 임플란트가 와동 내에 편안하게 안착될 수 있도록 합니다. 이제 앵커 봉합사로 임플란트를 복강의 복부 벽에 고정하여 장이 갇히지 않도록 합니다. 그리고 흡수성 봉합사로 복벽을 단속된 패턴으로 닫습니다. 그런 다음 비흡수성 봉합사로 피부 절개 부위를 중단된 패턴으로 봉합합니다. 음성 ECG를 터널링하여 첫 번째 갈비뼈 수준에서 오른쪽 상부 가슴으로 피하로 연결됩니다. 피하 주머니를 무뚝뚝하게 해부하여 약 10센티미터의 와이어를 느슨하게 감습니다. 여분의 전선을 자르고 노출된 끝을 비흡수성 봉합사로 절연 전선에 묶은 후 루프를 만듭니다. 두 개의 비흡수성 봉합사로 루프를 근육에 고정합니다. 그런 다음 양성 ECG 리드를 왼쪽 아래 갈비뼈로 터널링하고 시연된 단계를 반복하여 근육에 고정하고 절개 부위를 닫습니다. 노출된 EEG 와이어를 멸균 알루미늄 호일로 감쌉니다. 멸균되지 않은 조수가 멸균 드레이프와 다리 타이를 제거하도록 하십시오. 안면 마스크와 회로 사이의 회전 커넥터를 돌려 안면 마스크가 제자리에 단단히 유지되도록 하면서 키트를 엎드린 자세로 돌립니다. 지속적인 마취 모니터링을 유지하기 위해 필요에 따라 맥박 산소 측정기와 도플러 모니터를 조정하십시오. 그런 다음 도플러 탐침을 심장 위에 놓습니다. 왼쪽 아래에 멸균 접착 타월을 놓고 조수는 전선이 들어 있는 알루미늄 호일 패킷을 잡습니다. 알루미늄 패킷에서 와이어를 부드럽게 제거하고 멸균 필드에 놓고 멸균 수건으로 드레이핑 과정을 완료합니다. 두피의 정중선을 따라 3cm 절개를 하여 두개골을 노출시킵니다. 투관침을 사용하여 왼쪽에서 두개골까지 EEG 리드를 피하 터널링합니다. 그런 다음 메스를 사용하여 노출된 두정골에서 골막을 청소하고 긁어냅니다. 휴대용 드릴을 멸균 초음파 커버에 삽입하고 1mm 드릴 버를 드릴에 안내합니다. 다음으로, 람다 앞쪽 약 0.5cm, 시상 봉합사 측면 0.5cm의 두정골에 양측 버 구멍을 뚫습니다. 가는 집게를 사용하여 버 구멍에 나사를 넣습니다. 그런 다음 드라이버를 사용하여 나사를 두개골의 약 절반 정도까지 삽입합니다. 이제 목 뒤쪽을 따라 피하 주머니를 직설적으로 해부하여 약 10센티미터의 와이어를 느슨하게 감습니다. 여분의 전선을 자르고 팁에서 절연체를 벗겨내고 전선을 늘립니다. 노출된 와이어 끝에 루프를 만들려면 작은 루프를 남기고 매듭을 묶습니다. 고리를 나사 위에 놓고 나사를 두개골에 조여 와이어가 나사와 접촉하도록 합니다. 접지선을 왼쪽에 놓고 녹음선을 오른쪽에 놓습니다. 이제 치과용 아크릴을 사용하여 나사와 와이어를 두개골에 고정합니다. 마지막으로 통증 완화를 위해 각 절개 부위에 부피바카인을 피하 주사합니다. 그리고 각 절개 부위를 소량의 피부 접착제로 덮습니다. 모든 와이어가 제자리에 있으면 분석 소프트웨어를 사용하여 원격 측정 신호를 평가하여 신호 충실도를 확인합니다. 키트가 진정되는 동안 EEG 신호가 낮은 진폭으로 나타날 것으로 예상하십시오. 임플란트 수술은 15개의 토끼 키트에서 성공적으로 수행되었으며 12개는 실험 종점까지 생존했습니다. 키트를 집 케이지로 반환한 직후의 원격 측정 기록은 키트가 마취에서 회복됨에 따라 개선된 낮은 진폭의 EEG 신호를 보여주었습니다. ECG 신호 형태는 흉터와 와이어 안정화로 인해 수술 후 처음 며칠 동안 약간 변경되었습니다. 그러나 전반적으로 신호 품질은 시간이 지나도 견고하게 유지되었습니다. 이식된 원격 측정 시스템을 통해 뇌파 검사, 온도, 가속도, 심전도 및 신호 품질을 포함한 여러 생체 전위를 기록할 수 있습니다.
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본 연구에서는 형질전환 토끼 키트를 사용하여 뇌전증의 급사(SUDEP) 기전을 탐구합니다. 사망으로 이어질 수 있는 중대한 사건을 평가하기 위해 장기간 연속 뇌파(EEG) 및 심전도(ECG) 기록 방법을 설명합니다.
신생아 형질전환 토끼 키트에서 EEG(뇌파)와 ECG(심전도) 원격 측정법을 동시에 적용함으로써, SUDEP(급성 영아 돌연사 증후군) 기전과 관련된 신경 및 심장 전기생리학의 고충실도 종단적 모니터링이 가능해집니다. 이 접근 방식은 설치류 모델보다 인간과 생리학적 정렬이 더 밀접한 시스템에서 질병 관련 부정맥 및 발작 사건을 포착함으로써 전임상 모델링의 결정적인 공백을 메워줍니다. 이 방법은 뇌전증 및 심장 기능 장애와 연관된 이온 통로병증에 대한 표적 검증 및 기전적 위험 제거의 예측 신뢰도를 높여줍니다.
이 텔레메트리(telemetry) 적용 토끼 모델은 뇌전증 및 심성 부정맥 연구를 위한 초기 발견 단계와 전임상 검증 단계를 연결하여, 리드 물질 발굴 및 기전 연구를 지원합니다.