Calendula officinalis L.의 성장 및 꽃 발달 중 플라보노이드 함량.

여기에서는 금잔화에서 플라보노이드를 정량적으로 측정하기 위한 직접 분석 기술인 염화알루미늄 비색법을 제시합니다. 이 접근법은 금잔화 추출물을 염화알루미늄 시약으로 처리하여 착색 된 복합체를 형성하는 것과 관련된 간단한 화학 반응을 사용합니다. 분광 광도계를 사용하여 평가된 색상 강도는 플라보노이드 농도와 관련이 있습니다.

우리의 연구는 접근 가능하고 신뢰할 수 있는 비색 방법을 사용하여 총 플라보노이드를 정량화하여 식물화학 실험실에서 데이터 분석을 촉진하고 치료 특성을 가진 화합물 연구를 지원합니다.

금송화의 플라보노이드 함량은 최적의 수확 시기를 식별하고 의약 및 상업적 잠재력을 극대화하기 위해 꽃 발달 중에 연구됩니다.

당사의 프로토콜은 소량의 샘플을 사용하여 플라바노이드를 정량화하고 용매 사용을 최적화하며 식물 물질을 사용한 분석이 제한되는 민감하고 효율적인 마이크로 기술입니다.

[강사] 시작하려면 식물 재료를 섭씨 40도의 강제 공기 오븐에서 48시간 동안 건조시킵니다. 건조되면 오븐에서 꺼내 건조된 재료를 종이 봉투에 옮기고 실온에서 어둡게 보관하십시오. 분쇄를 준비하기 위해 액체 질소를 사용하여 식물 재료를 얼립니다. 그런 다음 균일한 질감이 될 때까지 도자기 절구에 냉동 재료를 갈아줍니다. 각 샘플에서 분쇄된 물질 25mg의 무게를 측정하여 샘플을 준비합니다. 계량된 물질에 500마이크로리터의 80% 메탄올을 첨가합니다. 플라보노이드를 추출하려면 혼합물을 섭씨 70도에서 1시간 동안 배양합니다. 배양 후, 혼합물을 731g에서 13분 동안 원심분리합니다. 이제 얻은 추출물 150마이크로리터를 취하고 37마이크로리터의 80% 메탄올을 첨가하여 분취량을 준비합니다. 추출물 50마이크로리터를 취하고 1몰 아세트산칼륨 100마이크로리터와 10% 염화알루미늄 100마이크로리터를 첨가합니다. 증류수를 사용하여 혼합물의 총 부피를 최대 5밀리리터까지 만들어 용액을 완성합니다. 분광 광도계의 흡광도 파장을 415 나노 미터로 설정하고 용액의 흡광도를 측정합니다. 밀리리터당 50, 100, 175 및 350mg 범위의 케르세틴 용액을 준비하여 검량선을 생성합니다. 보정 샘플을 준비하려면 검량선의 마지막 지점에서 500마이크로리터의 케르세틴 용액을 피펫팅하고 100마이크로리터의 10% 염화알루미늄과 100마이크로리터의 1몰 아세테이트 칼륨을 용액에 첨가합니다. 그런 다음 80% 메탄올 1.5밀리리터와 증류수 2.8밀리리터를 추가합니다. 교정 용액을 실온에서 40분 동안 그대로 둡니다. 분광 광도계의 흡광도 파장을 415 나노 미터로 설정하고 교정 샘플의 흡광도를 측정하여 교정 곡선을 구성합니다. 마지막으로 건조 물질 그램당 플라보노이드 농도와 플라보노이드 함량을 계산합니다. 이 표는 식물당 플라보노이드 농도와 플라보노이드 생산이 금송화 꽃 머리의 초기 새싹 형성부터 만개, 열매 발달에 이르기까지 어떻게 달라지는지를 요약한 것입니다. 8단계와 11단계 사이에 더 높은 수준의 총 플라보노이드 농도가 관찰되었으며, 이는 꽃받침이 분리된 새싹과 완전히 열린 꽃 머리에 해당합니다. 꽃받침이 결합된 새싹과 같은 초기 단계와 노화된 꽃 머리와 같은 후기 단계에서는 플라보노이드 농도가 완전히 열린 꽃 머리에 비해 22%에서 27% 낮았습니다. 이 그림은 꽃 발달 단계에 걸쳐 금송화 꽃 머리, 설절 꽃 및 관형 꽃의 건조 물질에서 총 플라보노이드 농도를 측정한 것을 보여줍니다. 결과는 다양한 꽃 구조와 단계 간의 플라보노이드 농도 변화를 이해하는 것이 금송화 꽃 머리의 플라보노이드 함량을 최대화하기 위한 최적의 수확 시기를 결정하는 데 유용하다는 것을 시사합니다.