Name: Mycobacterium tuberculosis Immune Receptor SLAMF1과의 상호 작용 연구를 위한 형광 분석 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-02-28T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 42 s
Description: 배우세요 Mycobacterium tuberculosis와 SLAMF1 면역 수용체의 상호 작용을 형광 분석으로 평가하는 방법을. 인간 단핵구 유래 대식세포를 사용하여 병원체 인식 메커니즘을 연구합니다.

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<li>Fu, Y., Zhao, J., Chen, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insights+into+the+molecular+mechanisms+of+protein-ligand+interactions+by+molecular+docking+and+molecular+dynamics+simulation%3A+A+case+of+oligopeptide+binding+protein%5BTitle%5D)+AND+%22Comput+Math+Methods+Med%22%5BJournal%5D)">Insights into the molecular mechanisms of protein-ligand interactions by molecular docking and molecular dynamics simulation: A case of oligopeptide binding protein.</a> Comput Math Methods Med. 2018, 7604567(2018).</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>Alexa Fluor 488 2차 항체</td><td>인비트로젠</td><td>A21121</td><td>형광 현미경용</td></tr><tr><td>항-SLAMF1 FITC 항체&nbsp;</td><td>e바이오사이언스</td><td>11-1509-42</td><td>유세포 분석용</td></tr><tr><td>항-SLAMF1 PE 항체&nbsp;</td><td>바이오레전드</td><td>306308</td><td>유세포 분석용</td></tr><tr><td>항-SLAMF1 1차 항체&nbsp;</td><td>바이오레전드</td><td>306302</td><td>형광 현미경용</td></tr><tr><td>아쿠아 폴리/마운트</td><td>폴리사이언스</td><td>18606-20</td><td>마운팅 미디어</td></tr><tr><td>CD14 마이크로비드</td><td>밀테니 바이오텍</td><td>130-097-052</td><td>단핵구 분리용</td></tr><tr><td>커버슬립 12mm</td><td>HDA</td><td>-</td><td>현미경에 의한 상호작용 분석용</td></tr><tr><td>EGS</td><td>써모피셔 사이언티픽&nbsp;</td><td>21565</td><td>가교 처리용</td></tr><tr><td>FACS캔토 II</td><td>BD 바이오사이언스</td><td>338960</td><td>BD FACSDiva 소프트웨어가 있는 유세포 분석기</td></tr><tr><td>태아 소 혈청&nbsp;</td><td>나토코르</td><td>-</td><td>대식세포 배양을 위한 비활성화 및 조사</td></tr><tr><td>피콜 파크 플러스</td><td>사이티바</td><td>17144003</td><td>PBMC 분리용</td></tr><tr><td>피지/ImageJ</td><td>오픈 소스 소프트웨어</td><td>-</td><td>현미경 사진용 분석용</td></tr><tr><td>플로우조 7.6.2&nbsp;</td><td>트리 스타</td><td>-</td><td>유세포 분석용</td></tr><tr><td>포름알데히드</td><td>머 크</td><td>K47740803613</td><td>가교 처리용</td></tr><tr><td>유리 슬라이드</td><td>글라스 클라스</td><td>-</td><td>현미경에 의한 상호작용 분석용</td></tr><tr><td>글리신</td><td>시그마</td><td>지8898</td><td>가교 처리용</td></tr><tr><td>이미저.A2</td><td>칼 자이스</td><td>430005-9901-000</td><td>Colibri 7 조명 모듈이 있는 형광 현미경</td></tr><tr><td>아이마크</td><td>바이오 RAD</td><td>1681130</td><td>마이크로플레이트 흡광도 리더&nbsp;</td></tr><tr><td>L-글루타민</td><td>시그마 알드리치</td><td>49419</td><td>대식세포 배양용</td></tr><tr><td>M. 결핵, 균주 H37Rv, 감마선 조사된 전체 세포&nbsp;</td><td>BEI 리소스, NIAID, NIH</td><td>NR-14819</td><td>상호작용 분석용</td></tr><tr><td>M. tuberculosis, 균주 H37Rv, 전체 세포 용해물</td><td>BEI 리소스, NIAID, NIH</td><td>NR-14822</td><td>대식세포 자극 및 상호작용 분석용</td></tr><tr><td>네오퓨지 13R</td><td>치유력</td><td>네오퓨지 13R</td><td>단백질 추출을 위한 고속 냉장 원심분리기</td></tr><tr><td>페니실린/스트렙토마이신</td><td>깁코</td><td>15140122</td><td>대식세포 배양용</td></tr><tr><td>PMSF</td><td>써모피셔 사이언티픽</td><td>36978</td><td>단백질 분리용</td></tr><tr><td>폴리-D-라이신</td><td>시그마 알드리치</td><td>A-003-M</td><td>커버슬립 처리용</td></tr><tr><td>프로테아제 억제제 칵테일</td><td>시그마 알드리치&nbsp;</td><td>P8340</td><td>단백질 분리용</td></tr><tr><td>로다민 B&nbsp;</td><td>시그마 알드리치&nbsp;</td><td>21955</td><td>M. tuberculosis 염색용</td></tr><tr><td>RPMI 1640</td><td>깁코</td><td>11875093</td><td>대식세포 배양용</td></tr><tr><td>소르발 ST 16/16R 원심분리기</td><td>써모피셔 사이언티픽</td><td>75004240</td><td>PBMC 및 단핵구 분리용</td></tr></tbody></table>

mycobacterium tuberculosis immune receptor slamf1과의 상호 작용 연구를 위한 형광 분석

Fluorescence Assays for the Study of Mycobacterium tuberculosis Interaction with the Immune Receptor SLAMF1

이 연구에서는 인간 대식세포에서 M. tuberculosis와 면역 수용체 SLAMF1의 상호 작용을 평가할 수 있는 프로토콜이 제공됩니다(그림 1). 이를 위해 건강한 기증자로부터 말초 혈액을 채취했습니다. 그런 다음 밀도 구배 배지에서 원심분리를 통해 PBMC를 분리하고 단핵구를 자기 양성 선택(≥95% 순도, 그림 2A,B)으로 분리했습니다. 분리된 단핵구를 단핵구 유래 대식세포를 얻기 위해 2시간 동안 플라스틱 배양 플레이트에 부착한 후 ON으로 배양했습니다. 그 후,10 이전에 보고된 바와 같이 SLAMF1 표면 발현을 유도하기 위해 초음파 처리된 M. tuberculosis(Mtb Ags)로 대식세포를 자극하고, 유세포 분석으로 표면 SLAMF1 수준을 확인했습니다(그림 ...

Mycobacterium tuberculosis Immune Receptor SLAMF1과의 상호 작용 연구를 위한 형광 분석

The evaluation of direct interaction between pathogens and immune receptors usually involves sophisticated techniques or implies the use of transgenic ...

fluorescence-assays-for-study-mycobacterium-tuberculosis-interaction

Research

연구

JoVE Journal

Immunology and Infection

면역학 및 감염학

출처: 바베로, A. M., et.al. 결 핵균 과 면역 수용체 SLAMF1의 상호작용 연구를 위한 형광 분석법. J. Vis. 경험 ( ( (2025)이 영상은 대식세포 수용체와 결핵균 항원 간의 상호작용을 연구하기 위한 형광 기반 분석 방식을 시연합니다. 커버슬립에 있는 형광 표지된 항원은 대식세포 단백질 추출물과 함께 배양하고, 가교 결합, 항체 표지로 하며, 겹치는 형광 신호로 시각화됩니다.

대식세포 수용체와 박테리아 항원의 상호작용을 조사하기 위한 형광 기반 분석

Source: Barbero, A. M., et al. Fluorescence Assays for the Study of Mycobacterium tuberculosis Interaction with the Immune Receptor SLAMF1. J. Vis. Exp. (2025)This video demonstrates the procedure for labeling host immune receptors that bind bacterial surface antigens, enabling their detection through flow cytometry.

Analysis of Macrophage Receptor Interactions with Pathogenic Bacteria Using Flow Cytometry

이 비디오는 Mycobacterium tuberculosis 감염의 생체 내 검출을 위한 리포터 효소 형광(REF) 이미징을 보여줍니다. 감염된 마우스는 REF 이미징을 위해 복강내 기질을 주입합니다. 박테리아 β-락타마제 효소에 의해 가수분해되면 기질은 형광을 방출하며, 이를 감지하면 감염 평가에 도움이 됩니다.

Reporter Enzyme Fluorescence Imaging for In Vivo Tracking of Bacterial Infection(세균 감염의 생체 내 추적을 위한 Reporter Enzyme Fluorescence Imaging)

우리는 endomembrane 파열을 추적하는 방법을 설명하면 세포 내 박테리아에 의해...

액포 파열의 단일 세포 측정은 세포 내 병원균에 의해 발생

여기서는 작은 간섭 합성 RNA(siRNA), 화학 화합물 및 진균 결핵 돌연변이 라이브러리의 고처리량/고함량 스크린에 적용되는 표현성 분석을 설명합니다. 이 방법은 자동 공초점 현미경 검사를 사용하여 형광으로 표지된 숙주 세포 내의 형광표지 진균 결핵의 검출에 의존합니다.

고처리량/고함량 스크리닝에 적용된 세포내 진균의 정량화를 위한 현미경 표티픽 분석

우리는 세포를, 결핵균에 대해 신규 한 화합물을 발견 타겟팅 및 인스 국물 포유 동물 숙주 세포에 대해 박테리아뿐만 아니라 세포 독성이 증가하는 모듈 높은 처리량 스크리닝 시스템을 개발 하였다.

세포 내 타겟팅 억제제의 효능 및 세포 독성 검사를위한 시스템<em&gt; 결핵균</em

차세대 항결핵 약물을 위한 초기 약물 개발 과정을 개선할 수 있는 새로운 모델과 분석이 매우 바람직합니다. 여기에서는 고처리량 스크리닝에 쉽게 적용할 수 있는 결핵균에 대한 약물 효능을 평가하기 위한 빠르고 저렴한 BSL-2 호환 분석에 대해 설명합니다.

높은 처리량을 지원 분석은 대식 세포 계대에 대한 약물 효능을 평가하기<em&gt; 결핵균</em

결핵균 (M. 결핵) 기자 효소 형광 (REF)를 사용 하 여 감염 된 쥐의 광학 이미징을 설명 합니다. 이 프로토콜 pathogenesis, 치료 및 백신 연구에 대 한 전 임상 동물 모델에 M. 결핵 의 과민 하 고 특정 탐지를 촉진 한다.

기자 효소 형광와 쥐에서 이미징 결핵균

이 연구는 박테리아 생존력을 신속하게 평가하기 위해 형광 및 발광을 사용하여 최근에 생성된 이중 리포터 균주를 사용하여 Mycobacterium abscessus 에 대한 고처리량 스크리닝을 위한 분석을 개발했습니다. 이 프로토콜은 이 약물 내성 박테리아에 대한 신약을 스크리닝하려는 연구자들과 관련이 있습니다.

Mycobacteria에 대한 고처리량 약물 스크리닝을 위한 분석 개발

여기서는 BSL-2 승인 마이코박테리움 결핵 증의 감쇠 체내 영상 프로토콜을 제시합니다. 영구 폐 창을 이용한 쥐 폐 내 스트레스. 이 접근법은 동일한 폐 미세환경 내에서 세균 위치, 혈관 역학, 대식세포 흡수 등 초기 숙주-병원체 상호작용의 종단적 단일 세포 분해 분석을 가능하게 합니다.

초기 혈관 내 감염 중 쥐 폐에서 희석된 위영양성 결핵 균의 생명체 내 영상

배우세요 Mycobacterium tuberculosis와 SLAMF1 면역 수용체의 상호 작용을 형광 분석으로 평가하는 방법을. 인간 단핵구 유래 대식세포를 사용하여 병원체 인식 메커니즘을 연구합니다.

Mycobacterium tuberculosis Immune Receptor SLAMF1과의 상호 작용 연구를 위한 형광 분석

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