Name: Monocyte-Macrophage Assay를 이용한 적혈구 항체 유의성 예측(Prediction of Red Blood Cell Antibody Significance Using the Monocyte-Macrophage Assay) (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-02-07T14:40:00.000+00:00
Duration: 11 min 27 s
Description: 학습하세요 단핵세포-대식세포 분석법을 이용한 적혈구 항체 임상적 중요성 예측 방법을. M2 대식세포가 M1보다 더 높은 탐식 지수를 보여 정확한 예측이 가능합니다.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Tong, T. N., Branch, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+a+monocyte+monolayer+assay+to+evaluate+Fc%CE%B3+receptor-mediated+phagocytosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Use of a monocyte monolayer assay to evaluate Fcγ receptor-mediated phagocytosis.</a> J Vis Exp. (119), e55039(2017).</li>
<li>Tong, T. N., Cen, S., Branch, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+monocyte+monolayer+assay%3A+Past%2C+present+and+future%5BTitle%5D)+AND+%22Transfus+Med+Rev%22%5BJournal%5D)">The monocyte monolayer assay: Past, present and future.</a> Transfus Med Rev. 33 (1), 24-28 (2019).</li>
<li>Frias Boligan, K., Sandhu, G., Branch, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+to+evaluate+the+potential+clinical+significance+of+antibodies+to+red+blood+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc%22%5BJournal%5D)">Methods to evaluate the potential clinical significance of antibodies to red blood cells.</a> Curr Protoc. 2 (8), e504(2022).</li>
<li>Lemay, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+first+case+of+severe+acute+hemolytic+transfusion+reaction+caused+by+anti-Sc2%5BTitle%5D)+AND+%22Transfusion%22%5BJournal%5D)">The first case of severe acute hemolytic transfusion reaction caused by anti-Sc2.</a> Transfusion. 58 (11), 2506-2512 (2018).</li>
<li>Tong, T. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+utility+of+a+monocyte+monolayer+assay+in+the+assessment+of+intravenous+immunoglobulin-associated+hemolysis%5BTitle%5D)+AND+%22Transfusion%22%5BJournal%5D)">The utility of a monocyte monolayer assay in the assessment of intravenous immunoglobulin-associated hemolysis.</a> Transfusion. 60 (12), 3010-3018 (2020).</li>
<li>Srivastava, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SCAR%3A+the+high-prevalence+antigen+013.008+in+the+Scianna+blood+group+system%5BTitle%5D)+AND+%22Transfusion%22%5BJournal%5D)">SCAR: the high-prevalence antigen 013.008 in the Scianna blood group system.</a> Transfusion. 61 (1), 246-254 (2021).</li>
<li>Branch, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potentially+clinically+significant+anti-Dib+identified+by+monocyte+monolayer+assay+before+transfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Transfusion%22%5BJournal%5D)">Potentially clinically significant anti-Dib identified by monocyte monolayer assay before transfusion.</a> Transfusion. 61 (1), 331-332 (2021).</li>
<li>Italiani, P., Boraschi, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+monocytes+to+M1%2FM2+macrophages%3A+Phenotypical+vs.+functional+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">From monocytes to M1/M2 macrophages: Phenotypical vs. functional differentiation.</a> Front Immunol. 5, 514(2014).</li>
<li>Mills, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((M1+and+M2+macrophages%3A+Oracles+of+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Crit+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">M1 and M2 macrophages: Oracles of health and disease.</a> Crit Rev Immunol. 32 (6), 463-488 (2012).</li>
<li>Atri, C., Guerfali, F. Z., Laouini, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+human+macrophage+polarization+in+inflammation+during+infectious+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Role of human macrophage polarization in inflammation during infectious diseases.</a> Int J Mol Sci. 19 (6), 1801(2018).</li>
<li>Bertani, F. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Classification+of+M1%2FM2-polarized+human+macrophages+by+label-free+hyperspectral+reflectance+confocal+microscopy+and+multivariate+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Classification of M1/M2-polarized human macrophages by label-free hyperspectral reflectance confocal microscopy and multivariate analysis.</a> Sci Rep. 7, 8965(2017).</li>
<li>Murray, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macrophage+polarization%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Physiol%22%5BJournal%5D)">Macrophage polarization.</a> Annu Rev Physiol. 79, 541-566 (2017).</li>
<li>Cohn, C., Delaney, M., Johnson, S. T., Katz, L. M., Schwartz, J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCohn%2C+C+%22Technical+Manual%22">Technical Manual</a>. , 21st Ed, American Association for the Advancement of Blood and Biotherapeutics. Maryland, USA. (2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1X PBS, pH 7.4, Ca2+/Mg2+</td><td>Wisent Bioproducts 없음&nbsp;</td><td>311-425-CL</td><td>4도 또는 실내 온도에서 보관&nbsp;</td></tr><tr><td>AccutaseTM</td><td>STEMCELL 기술&nbsp;</td><td>7920</td><td>세포 박리 용액</td></tr><tr><td>ACK Lysis Buffer&nbsp;</td><td>스템셀 테크놀로지스&nbsp;</td><td>07850, 07800</td><td>4도</td></tr><tr><td>항인간 글로불린</td><td>NOVACLONE, Immunocor에 보관하십시오.&nbsp;</td><td>IAT</td><td>테스트를 위한 N/A NOVACLONE Anti-IgG&nbsp;</td></tr><tr><td>안티-RH(D) (WinRho. SDF CDN)</td><td>Saol Therapeutics&nbsp;</td><td>1003092</td><td>Rh 면역 글로빈의 어떤 상업적인 출처라도 충분할 것입니다&nbsp;</td></tr><tr><td>셀 스크레이퍼</td><td>UofT Medstore</td><td>83.395</td><td>셀 분리&nbsp;</td></tr><tr><td>셀 스트레이너 70uM 나일론</td><td>팔콘</td><td>352350</td><td>셀 필터&nbsp;</td></tr><tr><td>챔버 슬라이드 Nunc. Lab-TekTM II 커버 포함, RS 유리 슬라이드 멸균&nbsp;</td><td>써모 피셔 사이언티픽&nbsp;</td><td></td><td>MMA용 154534 챔버 슬라이드&nbsp;</td></tr><tr><td>커버슬립&nbsp;</td><td>VWR</td><td>48393-081</td><td>24 x 50 mm</td></tr><tr><td>Cytiva Ficoll Paque Plus, 밀도 1.077 g/L</td><td>Thermo Fisher Scientific&nbsp;</td><td>17-1440-03</td><td>전혈에서 PBMCS 분리; 밀도 구배 매체</td></tr><tr><td>Elvanol 장착 매체</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Dulbecco' Ca2+/Mg2+, 15%(w/v) 폴리비닐 수지 및 30%(v/v) 글리세린이 없는 S PBS(D-PBS).</td></tr><tr><td>신선한 전혈 (ACD 튜브) 또는 버피 코트</td><td>캐나다 혈액 서비스는</td><td></td><td>최대 36시간 동안 실내 온도에서 쉴 수 있습니다&nbsp;</td></tr><tr><td>인간 재조합 GM-CSF</td><td>STEMCELL 기술&nbsp;</td><td>78015.1</td><td>M1 대식세포의 분극을 위한 사이토카인</td></tr><tr><td>인간 재조합 IFN-gamma</td><td>STEMCELL Technologies&nbsp;</td><td>M1 대식세포의 분극을 위한</td> <td>78020</td> 사이토카인</tr><tr><td>인간 재조합 IL-4</td><td>STEMCELL 기술&nbsp;</td><td>78045.1</td><td>M2 대식세포의 분극을 위한 사이토카인</td></tr><tr><td>인간 재조합 M-CSF</td><td>줄기세포 기술&nbsp;</td><td>78057.1</td><td>M2 대식세포의 분극을 위한 사이토카인</td></tr><tr><td>ID-CellStab</td><td>Bio-Rad</td><td>005650 05740</td><td>RBC 세포 저장/안정화 솔루션&nbsp;</td></tr><tr><td>절연 매체&nbsp;</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>PBS Ca2+ 및 Mg2+ 무료 + FBS 2% + 1mM EDTA</td></tr><tr><td>Lipopolysaaracide (LPS)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>L3024-5MG</td><td>Cytokine for polarization of M1 macrophages</td></tr><tr><td>Methanol (100%)</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>슬라이드 고정&nbsp;</td></tr><tr><td>단핵구 분리 키트 줄기세포 EasySep 인간 단핵구 농축 키트(CD16 고갈 없음)</td><td>스템셀 테크놀로지스&nbsp;</td><td>19058</td><td>PBMC</td></tr><tr><td>Poly-D-ysine</td>에서 단핵구 분리&nbsp;<td>열방대학 메드스토어&nbsp;</td><td>P6407</td><td>세포 부착 솔루션&nbsp;</td></tr><tr><td>Rh(D) 양성 R2R2 RBCs</td><td>캐나다 혈액 서비스</td><td>N/A</td><td>또한 상업적으로 사용 가능한</td></tr><tr><td>RPMI-1640</td><td>Wisent Bioproducts&nbsp;</td><td>350-000-CL</td><td>에는 10% 열 비활성화 FBS, 1mM 글루타맥스 보충제, 1mM HEPES 및 1% 페니실린/스트렙토마이신이 보충되었습니다. 4도에서 보관하십시오.&nbsp;</td></tr><tr><td>Trypan Blue 솔루션&nbsp;</td><td>써모 피셔 사이언티픽&nbsp;</td><td>15250061</td><td>세포 계수 솔루션&nbsp;</td></tr></tbody></table>

monocyte-macrophage assay를 이용한 적혈구 항체 유의성 예측(prediction of red blood cell antibody significance using the monocyte-macrophage assay)

Prediction of Red Blood Cell Antibody Significance Using the Monocyte-Macrophage Assay

그림 1의 결과는 문헌과 일치하며 대식세포가 M0 상태에서 후속 M1/M2 상태로 성공적으로 분극되었음을 나타냅니다. M1 및 M2 대식세포를 8일(성장 인자 6일, 편광 2일) 동안 배양하고 anti-D 또는 anti-k opsonized 적혈구를 테스트했습니다(그림 2). M2 대식세포는 M1에 비해 높은 식세포 지수를 보이며, 적혈구는 anti-D(대조군) 또는 anti-k에 의해 oponized됩니다. 이 결과는 M-MA를 사용하여 수행된 다른 예비 테스트와 일치합니다(표 1 참조). M2 대식세포는 강력한 RBC 항체가 있더라도 M1 대식세포 또는 단핵구에 비해 식세포가 매우 높습니다(그림 2B). 표 1은 임상적으로 유의한 것으로 간주되는 특이성을 가진 4개의 서로 다...

Monocyte-Macrophage Assay를 이용한 적혈구 항체 유의성 예측(Prediction of Red Blood Cell Antibody Significance Using the Monocyte-Macrophage Assay)

Derived from monocytes in the bone marrow, macrophages are large, innate immune cells that play a major role in clearing dead cells, debris, tumor cells, ...

prediction-red-blood-cell-antibody-significance-using-monocyte

Research

연구

JoVE Journal

Immunology and Infection

면역학 및 감염학

이 비디오는 말초 혈액의 1차 단핵구를 활용하여 poly D 항체 옵소니화 R2R2 적혈구를 이용한 Fcγ 수용체 매개 식세포작용을 평가하는 단핵구 단층 분석을 보여줍니다.

단핵구 단층에서 Fcγ 수용체 주도 식세포작용 연구를 위한 분석

단핵구 유래 대 식세포는 타고난 면역 시스템의 중요한 세포입니다. 여기, 우리는 사용하기 쉬운...

<em&gt; 체외</em인간 대식 세포의 분화와 양극화의 이질성을 연구&gt; 모델

이 프로토콜은 진핵 세포에서 전체 세포 MALDI-TOF 질량 분석법을 사용하는 방법을 설명합니다. 여기에서는 대식세포의 미세환경에 대한 반응으로 대식세포의 다중 활성화 상태를 분석하여 이 기술의 정확성을 보여줍니다.

전체 셀 MALDI-TOF 질량 분석은 대 식세포의 활성화의 다양한 모드를 분석 할 수있는 정확하고 빠른 방법입니다

여기에서 우리는 적혈구에 대한 항체에 의해 유도 된 보체 활성화를 측정하기위한 두 가지 분석을 설명합니다. 현재의 분석을 통해 가장 큰 장점은 양적 및 쉬운 해석하는 성격이다.

적혈구에 대한 항체에 의한 보체 활성의 정량 검출하는 방법

우리는 인간 대 식세포의 세대를위한 간단하고 효율적인 프로토콜을 제시한다. 버피 코트는 이중 밀도 구배 원심 분리에 의해 처리되고 격리 된 단핵구는 테프론 코팅 된 세포 배양 가방에서 대 식세포로 분화된다. 이 대 식세포의 수율을 극대화하고 다음 실험을 위해 세포 수확을 용이하게한다.

인간의 두 그라데이션 원심 분리하여 단핵구와 테프론 코팅 세포 배양 가방에서 대 식세포로 분화의 분리

단핵구 단층 분석법(MMA)은 포유류 말초 전혈에서 얻은 분리된 1차 단핵구를 사용하여 Fcγ 수용체(FcγR) 매개 식세포작용을 평가하는 체외 분석법입니다.

단핵구 단층 분석의 사용은 Fcγ 수용체 - 매개 식균 작용을 평가하기

이 프로토콜은 유행 세포 계측법에 의한 성체 마우스 중추 신경계에서 대 식세포 모집단의 분석을 제공하며, 이들 세포에 의해 표현되는 다중 마커의 연구에 도움이됩니다.

유동 세포 계측법에 의한 중추 신경계에서 유래 된 대장 세포 및 단구 세포 유래 대 식세포의 분석

여기 선물이 monocyte 하위 집합 전체 혈액 cytometry에 의해 특성화에 대 한 프로토콜. 이 하위 게이트 그들의 표현의 표면 마커를 평가 하는 방법을 설명 하 고 (염증 성) M1 및 M2 마커 (염증)의 식 평가의 예를 포함 됩니다.

전체 혈액에 의해 인간 Monocyte 하위 집합의 Flow Cytometry 분석

여기에서 우리는 마우스 모형에 있는 혈액 단핵구의 화학전술 활동을 정량화하고, 혈액 단핵구에 영양, 약리학 및 유전 내정간섭의 효력을 평가하고 혈액 단핵구 파생된 대식세포특성화하기 위하여 프로토콜을 제시합니다 단핵구 화학 유도제 단백질-1 (MCP-1)을 사용하여 마우스 모델 - 로드 지하 막 유래 젤 플러그.

생체 내에서 단핵구 화학 적 활동의 정량화 및 혈액 단핵구 유래 대식세포의 특성화

사이토카인 방출 분석 참조 시약을 사용하면 면역 치료용 단클론 항체의 재현성 및 표준화된 체외 안전성 프로파일을 얻을 수 있습니다. 여기에서는 사이토카인 방출 분석을 참조 시약 패널과 함께 사용하여 일부 치료용 단클론 항체의 안전성을 예측하는 방법을 설명합니다.

reference reagent를 사용하여 단클론 항체 안전성 예측을 위한 cytokine 방출 분석의 견고성 확인

단핵구와 대식세포는 건강과 질병에 중요한 매우 가소성 및 재프로그래밍 가능한 면역 세포입니다. 그들은 특정 분화 프로그램과 표현형을 채택하여 광범위한 자극을 감지하고 반응합니다. 당사는 대식세포 분극 및 재프로그래밍을 연구하기 위해 in-vitro 모델을 표준화하여 연구를 위한 유용한 도구를 제공합니다.

In-vitro assay를 위한 human monocyte-derived Macrophage의 재프로그래밍 모델

학습하세요 단핵세포-대식세포 분석법을 이용한 적혈구 항체 임상적 중요성 예측 방법을. M2 대식세포가 M1보다 더 높은 탐식 지수를 보여 정확한 예측이 가능합니다.

Monocyte-Macrophage Assay를 이용한 적혈구 항체 유의성 예측(Prediction of Red Blood Cell Antibody Significance Using the Monocyte-Macrophage Assay) (동영상) | JoVE Journal

Monocyte-Macrophage Assay를 이용한 적혈구 항체 유의성 예측(Prediction of Red Blood Cell Antibody Significance Using the Monocyte-Macrophage Assay)

더 많은 동영상 탐색