Name: 인간 모유 유래 세포외 소포의 신속한 분리 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-11-14T12:50:00.000+00:00
Duration: 4 min 35 s
Description: 배우세요 인간 모유에서 세포외 소포를 신속하게 분리하는 방법을. 초고속 여과법은 초원심분리보다 시간을 단축하면서도 높은 입자 농도와 유사한 크기의 소포를 얻어 임상 적용 가능성을 제공합니다.

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<ol><li>Galley, J. D., Besner, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+therapeutic+potential+of+breast+milk-derived+extracellular+vesicles%5BTitle%5D)+AND+%22Nutrients%22%5BJournal%5D)">The therapeutic potential of breast milk-derived extracellular vesicles.</a> Nutrients. 12 (3), 745(2020).</li>
<li>Martin, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+breast+milk-derived+exosomes+attenuate+cell+death+in+intestinal+epithelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Innate+Immun%22%5BJournal%5D)">Human breast milk-derived exosomes attenuate cell death in intestinal epithelial cells.</a> Innate Immun. 24 (5), 278-284 (2018).</li>
<li>Hock, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Breast+milk-derived+exosomes+promote+intestinal+epithelial+cell+growth%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pediatr+Surg%22%5BJournal%5D)">Breast milk-derived exosomes promote intestinal epithelial cell growth.</a> J Pediatr Surg. 52 (5), 755-759 (2017).</li>
<li>Alexander, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exosome-delivered+microRNAs+modulate+the+inflammatory+response+to+endotoxin%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Exosome-delivered microRNAs modulate the inflammatory response to endotoxin.</a> Nat Commun. 6, 7321(2015).</li>
<li>Lasser, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+saliva%2C+plasma%2C+and+breast+milk+exosomes+contain+RNA%3A+Uptake+by+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22J+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Human saliva, plasma, and breast milk exosomes contain RNA: Uptake by macrophages.</a> J Transl Med. 9, 9(2011).</li>
<li>Chan, C. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Type+I+interferon+sensing+unlocks+dormant+adipocyte+inflammatory+potential%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Type I interferon sensing unlocks dormant adipocyte inflammatory potential.</a> Nat Commun. 11 (1), 2745(2020).</li>
<li>Miyake, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+breast+milk+exosomes+attenuate+intestinal+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatr+Surg+Int%22%5BJournal%5D)">Human breast milk exosomes attenuate intestinal damage.</a> Pediatr Surg Int. 36 (2), 155-163 (2020).</li>
<li>Gao, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+developments+in+isolating+methods+for+exosomes%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Bioeng+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Recent developments in isolating methods for exosomes.</a> Front Bioeng Biotechnol. 10, 1100892(2022).</li>
<li>Patel, G. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+analysis+of+exosome+isolation+methods+using+culture+supernatant+for+optimum+yield%2C+purity+and+downstream+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Comparative analysis of exosome isolation methods using culture supernatant for optimum yield, purity and downstream applications.</a> Sci Rep. 9 (1), 5335(2019).</li>
<li>Gandhi, J., Naik, M. N., Mishra, D. K., Joseph, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proteomic+profiling+of+Aspergillus+flavus+endophthalmitis-derived+extracellular+vesicles+in+an+in+vivo+murine+model%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Mycol%22%5BJournal%5D)">Proteomic profiling of Aspergillus flavus endophthalmitis-derived extracellular vesicles in an in vivo murine model.</a> Med Mycol. 60 (9), myac064(2022).</li>
<li>Palinski, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lysosome+purinergic+receptor+p2x4+regulates+neoangiogenesis+induced+by+microvesicles+from+sarcoma+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Dis%22%5BJournal%5D)">Lysosome purinergic receptor p2x4 regulates neoangiogenesis induced by microvesicles from sarcoma patients.</a> Cell Death Dis. 12 (9), 797(2021).</li>
<li>Tantengco, O. aG., Radnaa, E., Shahin, H., Kechichian, T., Menon, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cross+talk%3A+Trafficking+and+functional+impact+of+maternal+exosomes+at+the+feto-maternal+interface+under+normal+and+pathologic+statesdagger%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Reprod%22%5BJournal%5D)">Cross talk: Trafficking and functional impact of maternal exosomes at the feto-maternal interface under normal and pathologic statesdagger.</a> Biol Reprod. 105 (6), 15621576(2021).</li>
<li>Caruso Bavisotto, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exosomal+hsp60%3A+A+potentially+useful+biomarker+for+diagnosis%2C+assessing+prognosis%2C+and+monitoring+response+to+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Rev+Mol+Diagn%22%5BJournal%5D)">Exosomal hsp60: A potentially useful biomarker for diagnosis, assessing prognosis, and monitoring response to treatment.</a> Expert Rev Mol Diagn. 17 (9), 815-822 (2017).</li>
<li>Feng, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Latest+trend+of+milk-derived+exosomes%3A+Cargos%2C+functions%2C+and+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Nutr%22%5BJournal%5D)">Latest trend of milk-derived exosomes: Cargos, functions, and applications.</a> Front Nutr. 8, 747294(2021).</li>
<li>Li, P., Kaslan, M., Lee, S. H., Yao, J., Gao, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progress+in+exosome+isolation+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Theranostics%22%5BJournal%5D)">Progress in exosome isolation techniques.</a> Theranostics. 7 (3), 789-804 (2017).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>(H+L) HRP 켤레 안티마우스</td><td>바이오-래드</td><td>1721011</td><td></td></tr><tr><td>(H+L) HRP 켤레 안티래빗</td><td>바이오-래드</td><td>1706515</td><td></td></tr><tr><td>0.20 주사기 필터</td><td>피셔브랜드</td><td>09-719C</td><td></td></tr><tr><td>0.70 um 셀 스트레이너</td><td>코닝</td><td>431751</td><td></td></tr><tr><td>150만 트리스 HCL</td><td>자체 제작</td><td></td><td></td></tr><tr><td>15 mL 튜브</td><td>팔콘</td><td>352096</td><td></td></tr><tr><td>16인치 필터 확장 세트</td><td>B-브라운</td><td>FE2012F</td><td></td></tr><tr><td>1M 트리스 HCL</td><td>테크노바</td><td>T1068</td><td></td></tr><tr><td>1배 PBS</td><td>깁코</td><td>10010-031</td><td></td></tr><tr><td>50 mL 튜브</td><td>팔콘</td><td>353070</td><td></td></tr><tr><td>5배 환원 샘플 버퍼</td><td>써모 사이언티픽</td><td>39000</td><td></td></tr><tr><td>아실아마이드</td><td>피셔 사이언티프&nbsp;</td><td>BP1410-1</td><td></td></tr><tr><td>암포테리신 B</td><td>깁코</td><td>15290-018</td><td></td></tr><tr><td>AMT 나노스프린트43 마크-II 카메라</td><td>AMT</td><td></td><td></td></tr><tr><td>안티-앤티</td><td>깁코</td><td>15240-062</td><td></td></tr><tr><td>안티-CD63</td><td>노부스비오</td><td>NBP2-32830</td><td></td></tr><tr><td>안티-CD9</td><td>인비트로젠</td><td>10626D</td><td></td></tr><tr><td>APS</td><td>써모 사이언티픽</td><td>17874</td><td></td></tr><tr><td>BCA 단백질 분석 키트</td><td>피어스</td><td>23227</td><td></td></tr><tr><td>벡맨 진공관</td><td>벡맨은 coulter&nbsp;</td><td>344059</td><td></td></tr><tr><td>브라이트스타 ECL 케미루미네센트</td><td>알칼리 사이언티픽</td><td>XR92</td><td></td></tr><tr><td>엑소좀 고갈된 FBS</td><td>피셔 사이언티브</td><td>NC0464480</td><td></td></tr><tr><td>고속 차단 버퍼</td><td>피어스</td><td>37575</td><td></td></tr><tr><td>태아 소 혈청</td><td>라이프 테크놀로지</td><td>10082147</td><td></td></tr><tr><td>HSP70</td><td>인비트로젠</td><td>MA3-006</td><td></td></tr><tr><td>인간 인슐린</td><td>시그마-올드리치</td><td>I9278-5ML</td><td></td></tr><tr><td>과산화수소</td><td>피셔 사이언티브</td><td>H325-500</td><td></td></tr><tr><td>IEC-6&nbsp;</td><td>ATCC</td><td>CRL-1592</td><td></td></tr><tr><td>JEOL 1400 플래시 템</td><td>JEOL USA 주식회사</td><td></td><td></td></tr><tr><td>레인 마커 감소 시료 버퍼</td><td>써모 사이언티픽</td><td>39000</td><td></td></tr><tr><td>분유</td><td>바이오월드</td><td>30620074-1</td><td></td></tr><tr><td>나노사이트 NS 300</td><td>말번 인스트루먼트 주식회사</td><td></td><td></td></tr><tr><td>니트로셀룰로오스 막</td><td>생명체 기술</td><td>88018</td><td></td></tr><tr><td>PELCO 이지글로우 방전 장치</td><td>테드 펠라</td><td></td><td></td></tr><tr><td>프로테아제 억제제 미니 정제</td><td>피어스</td><td>A32955</td><td></td></tr><tr><td>RIPA 버퍼</td><td>피어스</td><td>89901</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640</td><td>피셔 사이언티프&nbsp;</td><td>11875119</td><td></td></tr><tr><td>SDS</td><td>피셔 사이언티프&nbsp;</td><td>BP2436-200</td><td></td></tr><tr><td>T-25 플라스크</td><td>써모 사이언티픽</td><td>156367</td><td></td></tr><tr><td>TBS</td><td>자체 제작</td><td></td><td></td></tr><tr><td>테메드</td><td>바이오-래드</td><td>161-0801</td><td></td></tr><tr><td>트립신 EDTA</td><td>깁소</td><td>25200-056</td><td></td></tr><tr><td>트윈 20세</td><td>써모 사이언티픽</td><td>J20605-AP</td><td></td></tr></tbody></table>

인간 모유 유래 세포외 소포의 신속한 분리

Rapid Isolation of Human Breast Milk-Derived Extracellular Vesicles

Extracellular vesicles (EVs), nanosized particles approximately 20-1000 nm in size, are rapidly garnering attention for their therapeutic potential. ...

rapid-isolation-of-human-breast-milk-derived-extracellular-vesicles

Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

출처: 왓슨, DC, et.al. 대장균 및 기타 박테리아로부터 세포외 소포의 확장 가능한 분리 및 정제. J. Vis. 경험. (2021년)이 비디오는 유전자 조작 박테리아의 외막에서 파생된 세포외 소포(EV)의 분리 및 농축을 보여줍니다. 이 과정에는 박테리아를 배양하여 EV를 방출한 다음 세포와 잔해물을 제거하기 위한 순차적 원심분리 및 여과 단계가 포함됩니다. 마지막으로, 한외여과는 다운스트림 분석을 위해 EV를 농축하는 데 사용됩니다.

박테리아로부터 외막 유래 세포외 소포의 분리 및 농축

Source: DeMarino, C., et al. Purification of High Yield Extracellular Vesicle Preparations Away from Virus. J. Vis. Exp. (2019)The video demonstrates the separation of EVs from virions and other contaminants by density gradient centrifugation, followed by capture and concentration with hydrogel nanoparticles. Washed fractions are then ready for downstream identification of those enriched in EVs.

Separation and Enrichment of Extracellular Vesicles in the Presence of Virions

이 프로토콜은 적게 10 μL의 혈청 샘플에서 세포 외 소체 (전기 자동차), 셀로부터 방출 멤브레인 작은 입자를 분리하는 방법을 자세히 설명. 이 접근법은, 초 원심 분리의 필요성을 회피 분석 시간의 몇 분을 필요로하고, 제한된 양의 시료로부터 전기차의 분리를 가능하게한다.

세포 외 소포의 분리 및 특성에 대한 종이 기반의 장치

이 프로토콜은 non-adherent / mesenchymal 유방 상피 세포에서 세포 외 소포 (EVs) / 엑소 좀을 정화, 정량화 및 특성화하고 유선 형성능을 내유성 상피 세포로 전달하는 방법을 설명합니다. 줄기 모양의 유방 상피 세포로부터 유래 된 EVs / 엑소 좀은이 세포 특성을 EVs / 엑소 좀을 섭취하는 세포로 전달할 수있다.

extracellular vesicles / exosomes를 통한 유방 기초 상피 세포와 유방 Luminal 세포 사이 유선 형성 능력의 이전

여기, 두 세포 외 기 격리 프로토콜, 한 원심 분리 및 밀도 그라데이션 원심 분리, extracellular 소포 murine bronchoalveolar 게 액체 샘플에서 분리 된 ultracentrifugation 설명 합니다. 두 방법으로 murine bronchoalveolar 게 액체에서 파생 된 세포 외 소포는 계량 하 고 특징.

Extracellular 소포 Murine Bronchoalveolar 게 유체는 한 원심 분리 기법을 사용 하 여에서 격리

단계별 절차는 액체 견본에서 엑소좀 및 세포외 소포의 표지 자유로운 고정을 위해 기술되고 원자력 현미경 검사법 (AFM)에 의하여 그들의 화상 진찰. AFM 이미지는 용액에서 소포의 크기를 추정하고 다른 생물 물리학적 특성을 특성화하는 데 사용됩니다.

원자력 현미경 검사법에 의한 세포 외 소포의 화상 진찰

이 프로토콜은 EV 강수량, 밀도 그라데이션 초원심분리 및 입자 포획을 통합하여 고효율 및 수율을 가진 비리온으로부터 세포외 소포(EV)를 분리하여 간소화된 워크플로우와 시동 감소를 허용합니다. 모든 EV 연구에서 사용할 수 있는 재현 가능한 준비를 할 수 있습니다.

바이러스로부터 멀리 떨어진 고수율 세포 외 소포 제제의 정제

여기서 프로토콜은 크기 배제 크로마토그래피를 사용하여 세포외 소포가 컨디셔닝 세포 배양 배지로부터 적절하게 분리될 수 있음을 보여줍니다.

조절된 세포 배양 배지에서 세포외 소포를 분리하기 위한 크기 배제 크로마토그래피

이 프로토콜은 간단한 실험실 규모의 벤치탑 설정으로 인간 탯줄 유래 중간엽 줄기 세포의 작은 세포외 소포(hUC-MSC-sEV)를 분리하는 방법을 보여줍니다. 분리된 hUC-MSC-sEV의 크기 분포, 단백질 농도, sEV 마커 및 형태는 각각 나노입자 추적 분석, BCA 단백질 분석, 웨스턴 블롯 및 투과 전자 현미경으로 특성화됩니다.

인간 중간엽 줄기세포에서 작은 세포외 소포를 분리하는 간단한 탁상형 여과 방법

이 연구는 밀도 구배 원심분리(DGC)를 통해 인간의 대변에서 농축된 박테리아 세포외 소포체(BEV)를 분리 및 정제하는 방법을 설명하고, 형태, 입자 크기 및 농도에서 BEV의 물리적 특성을 식별하고, 임상 및 과학 연구에서 DGC 접근 방식의 잠재적 응용 분야에 대해 논의합니다.

Density Gradient Centrifugation을 사용한 인간 대변에서 박테리아 세포외 소포의 분리 및 정제

배우세요 인간 모유에서 세포외 소포를 신속하게 분리하는 방법을. 초고속 여과법은 초원심분리보다 시간을 단축하면서도 높은 입자 농도와 유사한 크기의 소포를 얻어 임상 적용 가능성을 제공합니다.

인간 모유 유래 세포외 소포의 신속한 분리

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