Name: 유세포분석을 사용하여 손상된 척수에서 미세아교세포(microglia) 및 말초 침투 대식세포(peripheral infiltrating macrophages in the injured spinal cords) 확인 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-24T13:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 47 s
Description: 학습하세요 유세포분석을 활용한 손상된 척수에서 미세아교세포와 말초 침투 대식세포 식별 방법을. M1형 및 M2형 표현형 분석을 통해 신경염증 반응을 이해하고 중추신경계 질환 치료 전략 개발에 활용하세요.

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<table><tbody><tr><td>1&times; PBS</td><td>&nbsp; 솔라바이오</td><td>P1020</td><td></td></tr><tr><td>10&times; PBS</td><td>&nbsp; 솔라바이오</td><td>P1022</td><td></td></tr><tr><td>18 8주 된 암컷 C57/BL6 마우스&nbsp;</td><td>Cavens Laboratory Animal Ltd, 창저우, 중국</td><td></td><td></td></tr><tr><td>APC-eFluor 780 표지 쥐 항마우스 CCR7(IgG2b 카파)</td><td>인비트로젠</td><td>47-1971-82</td><td>0.25&무; g/테스트</td></tr><tr><td>APC-eFluor 780 표지 쥐 IgG2b kappa&nbsp; 이소형 제어</td><td>인비트로젠</td><td>47-4321-82</td><td>0.25&무; g/테스트</td></tr><tr><td>APC 표지 쥐 항마우스 CD45(IgG2b kappa)</td><td>인비트로젠</td><td>17-0451-82</td><td>0.125&뮤; g/테스트</td></tr><tr><td>APC 표지 쥐 IgG2b kappa&nbsp; 이소형 제어</td><td>인비트로젠</td><td>17-4031-82</td><td>0.125&뮤; g/테스트</td></tr><tr><td>DMEM</td><td>깁코</td><td>11965092</td><td></td></tr><tr><td>태아 소 혈청</td><td>론세라</td><td>S711-001</td><td></td></tr><tr><td>FITC 표지 쥐 항마우스 CD68(IgG2b kappa)</td><td>인비트로젠</td><td>&nbsp; MA5-16676</td><td>0.25&무; g/테스트</td></tr><tr><td>FITC 표지 쥐 IgG2b kappa&nbsp; 이소형 제어</td><td>인비트로젠</td><td>11-4031-82</td><td>0.25&무; g/테스트</td></tr><tr><td>파라포름알데히드</td><td>바이오샤프</td><td>23319084</td><td></td></tr><tr><td>PE 표지 쥐 항마우스 CD11b(IgG2b 카파)</td><td>인비트로젠</td><td>12-0112-81</td><td>0.25&무; g/테스트</td></tr><tr><td>PE 표지 쥐 IgG2b kappa&nbsp; 이소형 제어</td><td>인비트로젠</td><td>12-4031-82</td><td>0.25&무; g/테스트</td></tr><tr><td>퍼콜</td><td>&nbsp; 솔라바이오</td><td>P8370</td><td></td></tr><tr><td>트립신 용액</td><td>바이오샤프</td><td>BL526A</td><td></td></tr></tbody></table>

유세포분석을 사용하여 손상된 척수에서 미세아교세포(microglia) 및 말초 침투 대식세포(peripheral infiltrating macrophages in the injured spinal cords) 확인

Identifying Microglia and Peripheral Infiltrating Macrophages in the Injured Spinal Cords Using Flow Cytometry

척수 조직의 면역 세포는 폴리비닐피롤리돈 밀도 구배 원심분리로 코팅된 콜로이드 실리카를 사용하여 분리됩니다. 원심분리 과정에서 세포는 부력 밀도에 따라 서로 다른 층으로 분포되어 세포 분리가 이루어집니다(그림 1). 위에서 아래로 분포는 다음과 같습니다 : 세포 파편, 단핵 세포가 풍부한 층, 림프구가 풍부한 층, 그리고 하단에는 적혈구 및 과립 구층이 있습니다.
M1 유사 및 M2 유사 세포의 FCM 분석은 CD68, CD45, CD11b 및 CCR7로 구성된 세포 마커 발현 프로파일을 활용합니다29,30. CD11b+ CD68+ CCR7+를 발현하는 세포는 M1 유사 세포로 정의되고, CD11b+ CD68+ CCR7<sup...

In a healthy spinal cord, peripheral infiltrating macrophages are almost undetectable, and microglia (MG) participate in maintaining the stability of the ...

identifying-microglia-peripheral-infiltrating-macrophages-injured

Research

연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

현재 문서는 효율적으로 효과적으로 흐름 cytometric 분석을 위해 활용할 수 뇌 및 척수 조직에서 mononuclear 세포를 분리하기 위해 빠른 프로토콜을 설명합니다.

Percoll 그라디언트를 사용하여 두뇌와 척수 Mononuclear 세포의 분리

유동세포계측법로 부상 / 병적인 CNS에 염증 세포의 부량는 감도 / 정확도를 감소, 유사한 크기 및 과립 세포를 가질 수 지질 / myelin 파편에 의해 복잡합니다. 우리는 myelin 파편을 제거하고 피해를 입은 척수에 유동세포계측법에 의해 세포 검출을 향상시킬 수있는 세포 준비 방법을 고급 있습니다.

유동세포계측법에 의해 피해를 입은 척수 조직에서 면역 세포의 양적 평가 : 세포 정제 방법에 대한 소설을 사용

Microglia은 중추 신경계의 방어 및 면역 감시의 첫번째 라인을 제공 macrophages를 거주하고 있습니다. MicroRNAs는 활성화 및 macrophages의 차별화 등 많은 생리 과정에 중요한 역할을 규제 분자입니다. 이 문서에서는 microglia에서 microRNAs의 측정을위한 방법을 설명합니다.

일반 CNS의 실시간 PCR에 의한과 Neuroinflammation 동안 Microglia에 MicroRNAs의 탐지

다음 스트로크 뇌 골수 세포 특성화 광학 분별 법을 이용하여 수행 Stereology를, 뇌의 유세포 분석에 의해 현탁액 백혈구 수있다. 둘 허혈성 뇌에서 발견되는 주된 서브 세트 골수 세포 표현형의 정확한 구별을 수행하는 유용한 기술이다.

일시적 또는 영구적 인 뇌허혈 모델에서 백혈구 부분 집단의 Stereological 및 유동 세포 계측법 특성

Two-photon intravital imaging은 등쪽 기둥 외상성 척수 파쇄 손상이 있는 골수 키메라 동물의 원래 조직 환경에서 척수의 다양한 세포 유형 간의 상호 작용을 조사하는 데 사용할 수 있습니다.

마우스 지느러미 열 압박 손상에 마이크로 글 리아와 대 식세포와 축삭의 상호 작용의 생체 내에 이미징

이 프로토콜은 유행 세포 계측법에 의한 성체 마우스 중추 신경계에서 대 식세포 모집단의 분석을 제공하며, 이들 세포에 의해 표현되는 다중 마커의 연구에 도움이됩니다.

유동 세포 계측법에 의한 중추 신경계에서 유래 된 대장 세포 및 단구 세포 유래 대 식세포의 분석

정량 분석 murine 좌 골 신경 내에서 셀 내용의 조직의 부족으로 인해 어렵습니다. 이 프로토콜 조직 소화와 개별 쥐의 신경에서 면역 세포 인구의 흐름 cytometry 분석에 대 한 충분 한 세포를 제공 하는 준비 하는 방법을 설명 합니다.

단일 좌 골 신경 및 Cytometry 사용 하 여 단일 마우스에서 지 루트 신경 절에 면역 세포의 분석

여기에서, 우리는 원주형 자기 활성화 세포 분류를 활용하여 탈수초성 질환의 동물 모델에서 원발성 미세아교세포를 분리하고 정제하는 프로토콜을 제시한다.

탈수초화의 동물 모델에서 자기 활성화 세포 분류에 의한 마우스 일차 미세아교세포의 분리

여기에서는 미니 뇌졸중 모델에서 유세포 분석을 사용하여 허혈성 뇌졸중 후 면역 세포 기능을 평가하는 프로토콜을 제시합니다. 이 방법을 사용하면 신경면역 상호 작용을 자세히 검사할 수 있으며 다른 신경퇴행성 질환을 연구하는 데 적용할 수 있어 뇌졸중 병리학의 면역 반응에 대한 이해를 높일 수 있습니다.

Mini-Stroke Murine Model에서 신경면역 상호작용의 분리 및 유세포 분석 평가

이 프로토콜은 유세포 분석과 단일 세포 RNA 시퀀싱을 결합하여 출생 후 초기 마우스 뇌의 소뇌에서 미세아교세포 상태를 분리하고 특성화합니다. 효소 해리, Percoll 원심분리 및 면역염색을 사용하여 미세아교세포의 이질성을 밝히고 소뇌 발달 및 질병에서의 역할에 대한 이해를 향상시킵니다.

출생 후 초기 마우스 뇌 발달에서 미세아교세포 활성화를 특성화하기 위한 유세포 분석 및 단일 세포 분석

학습하세요 유세포분석을 활용한 손상된 척수에서 미세아교세포와 말초 침투 대식세포 식별 방법을. M1형 및 M2형 표현형 분석을 통해 신경염증 반응을 이해하고 중추신경계 질환 치료 전략 개발에 활용하세요.

유세포분석을 사용하여 손상된 척수에서 미세아교세포(microglia) 및 말초 침투 대식세포(peripheral infiltrating macrophages in the injured spinal cords) 확인

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