Name: 커프 기법을 통한 마우스 경동맥에 조직 공학 혈관 이식편 이식 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-02T13:55:00.000+00:00
Duration: 7 min 13 s
Description: 학습하세요 커프 기법을 이용한 마우스 경동맥 조직 공학 혈관 이식편 이식 방법을. 이 기술은 혈관 재생 메커니즘 연구에 적합한 동물 모델을 제공하여 심혈관 바이오재료 및 재생의학 연구에 활용됩니다.

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<ol><li>Adhikary, D., Barman, S., Ranjan, R., Stone, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+systematic+review+of+major+cardiovascular+risk+factors%3A+A+growing+global+health+concern%5BTitle%5D)+AND+%22Cureus%22%5BJournal%5D)">A systematic review of major cardiovascular risk factors: A growing global health concern.</a> Cureus. 14 (10), e30119(2022).</li>
<li>Alexander, J. H., Smith, P. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coronary-artery+bypass+grafting%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Coronary-artery bypass grafting.</a> N Engl J Med. 374 (20), 1954-1964 (2016).</li>
<li>Jeong, Y., Yao, Y., Yim, E. K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+understanding+of+intimal+hyperplasia+and+effect+of+compliance+in+synthetic+small+diameter+vascular+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22Biomater+Sci%22%5BJournal%5D)">Current understanding of intimal hyperplasia and effect of compliance in synthetic small diameter vascular grafts.</a> Biomater Sci. 8 (16), 4383-4395 (2020).</li>
<li>Lawson, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioengineered+human+acellular+vessels+for+dialysis+access+in+patients+with+end-stage+renal+disease%3A+Two+phase+2+single-arm+trials%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Bioengineered human acellular vessels for dialysis access in patients with end-stage renal disease: Two phase 2 single-arm trials.</a> Lancet. 387 (10032), 2026-2034 (2016).</li>
<li>Kirkton, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioengineered+human+acellular+vessels+recellularize+and+evolve+into+living+blood+vessels+after+human+implantation%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Bioengineered human acellular vessels recellularize and evolve into living blood vessels after human implantation.</a> Sci Transl Med. 11 (485), eaau6934(2019).</li>
<li>Wang, C., Li, Z., Zhang, L., Sun, W., Zhou, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+results+of+triple-layered+small+diameter+vascular+grafts+in+sheep+carotid+arteries%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Eng+Phys%22%5BJournal%5D)">Long-term results of triple-layered small diameter vascular grafts in sheep carotid arteries.</a> Med Eng Phys. 85, 1-6 (2020).</li>
<li>Tanaka, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+small-diameter+silk+vascular+grafts+implanted+in+dogs%5BTitle%5D)+AND+%22JTCVS+Open%22%5BJournal%5D)">Evaluation of small-diameter silk vascular grafts implanted in dogs.</a> JTCVS Open. 6, 148-156 (2021).</li>
<li>Jin, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+of+small-diameter+tissue-engineered+vascular+grafts+electrospun+from+heparin+end-capped+PCL+and+evaluation+in+a+rabbit+carotid+artery+replacement+model%5BTitle%5D)+AND+%22Macromol+Biosci%22%5BJournal%5D)">Preparation of small-diameter tissue-engineered vascular grafts electrospun from heparin end-capped PCL and evaluation in a rabbit carotid artery replacement model.</a> Macromol Biosci. 19 (8), e1900114(2019).</li>
<li>Xiao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fabrication+of+small-diameter+in+situ+tissue+engineered+vascular+grafts+with+core%2Fshell+fibrous+structure+and+a+one-year+evaluation+via+rat+abdominal+vessel+replacement+model%5BTitle%5D)+AND+%22Biomater+Adv%22%5BJournal%5D)">Fabrication of small-diameter in situ tissue engineered vascular grafts with core/shell fibrous structure and a one-year evaluation via rat abdominal vessel replacement model.</a> Biomater Adv. 165, 214018(2024).</li>
<li>Wei, Y., Wang, F., Guo, Z., Zhao, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue-engineered+vascular+grafts+and+regeneration+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Cell+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Tissue-engineered vascular grafts and regeneration mechanisms.</a> J Mol Cell Cardiol. 165, 40-53 (2022).</li>
<li>Cleary, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+tissue+engineering%3A+The+next+generation%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Vascular tissue engineering: The next generation.</a> Trends Mol Med. 18 (7), 394-404 (2012).</li>
<li>Roh, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue-engineered+vascular+grafts+transform+into+mature+blood+vessels+via+an+inflammation-mediated+process+of+vascular+remodeling%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Tissue-engineered vascular grafts transform into mature blood vessels via an inflammation-mediated process of vascular remodeling.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 107 (10), 4669-4674 (2010).</li>
<li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+thick+fibers+and+large+pores+of+electrospun+poly%28%CE%B5-caprolactone%29+vascular+grafts+on+macrophage+polarization+and+arterial+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">The effect of thick fibers and large pores of electrospun poly(ε-caprolactone) vascular grafts on macrophage polarization and arterial regeneration.</a> Biomaterials. 35 (22), 5700-5710 (2014).</li>
<li>Wu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peptide-tethered+vascular+grafts+enable+blood+vessel+regeneration+via+endogenous+cell+recruitment+and+neovascularization%5BTitle%5D)+AND+%22Compos+B+Eng%22%5BJournal%5D)">Peptide-tethered vascular grafts enable blood vessel regeneration via endogenous cell recruitment and neovascularization.</a> Compos B Eng. 252, 110504(2023).</li>
<li>Hu, Y., Xu, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vessel+graft+atherosclerosis+in+murine+models%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Drug+Targets%22%5BJournal%5D)">Vessel graft atherosclerosis in murine models.</a> Curr Drug Targets. 9 (3), 239-250 (2008).</li>
<li>Qin, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Implantation+of+electrospun+vascular+grafts+with+optimized+structure+in+a+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Implantation of electrospun vascular grafts with optimized structure in a rat model.</a> J Vis Exp. (136), e57340(2018).</li>
<li>Geelhoed, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+method+for+engineering+autologous+non-thrombogenic+in+situ+tissue-engineered+blood+vessels+for+arteriovenous+grafting%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">A novel method for engineering autologous non-thrombogenic in situ tissue-engineered blood vessels for arteriovenous grafting.</a> Biomaterials. 229, 119577(2020).</li>
<li>Wu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Construction+of+vascular+graft+with+circumferentially+oriented+microchannels+for+improving+artery+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Construction of vascular graft with circumferentially oriented microchannels for improving artery regeneration.</a> Biomaterials. 242, 119922(2020).</li>
<li>Vasquez, E. C., Peotta, V. A., Gava, A. L., Pereira, T. M., Meyrelles, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+and+vascular+phenotypes+in+the+apolipoprotein+e-deficient+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Sci%22%5BJournal%5D)">Cardiac and vascular phenotypes in the apolipoprotein e-deficient mouse.</a> J Biomed Sci. 19 (1), 22(2012).</li>
<li>Garcia, V., Sessa, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+nos%3A+Perspective+and+recent+developments%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Endothelial nos: Perspective and recent developments.</a> Br J Pharmacol. 176 (2), 189-196 (2019).</li>
<li>He, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhancing+the+precision+of+genetic+lineage+tracing+using+dual+recombinases%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Enhancing the precision of genetic lineage tracing using dual recombinases.</a> Nat Med. 23 (12), 1488-1498 (2017).</li>
<li>Wang, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nitric+oxide+improves+regeneration+and+prevents+calcification+in+bio-hybrid+vascular+grafts+via+regulation+of+vascular+stem%2Fprogenitor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Nitric oxide improves regeneration and prevents calcification in bio-hybrid vascular grafts via regulation of vascular stem/progenitor cells.</a> Cell Rep. 39 (12), 110981(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1% 페니실린-스트렙토마이신</td><td>Solarbio</td><td>P1400</td><td></td></tr><tr><td>10% 소 태아 혈청</td><td>Gibco</td><td>A5256701</td><td></td></tr><tr><td>4% 파라포름알데히드</td><td>Solarbio</td><td>P1110</td><td></td></tr><tr><td>4',6-디아미디노-2-페닐린돌(DAPI)</td><td>SouthernBiotech</td><td>0100-20</td><td></td></tr><tr><td>알코올</td><td>천진 화학 Reaggent Company</td><td>1083</td><td></td></tr><tr><td>항 마우스 CD31 1 차 항체</td><td>BD Bioscience</td><td>553370</td><td></td></tr><tr><td>동맥 클립</td><td>RWD 생명 과학</td><td>R31005-06</td><td></td></tr><tr><td>C57BL/6 마우스 베이</td><td>징 바이탈 리버 실험실 동물 기술 회사</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco의 수정 독수리 배지 (DMEM)</td> <td>Gibco</td><td>11966025</td><td></td></tr><tr><td>정전기 방적기</td><td>Yunfan Technology</td><td>DP30</td><td></td></tr><tr><td>염소 항쥐 IgG(Alexa Fluor 555)</td><td>Invitrogen</td><td>A-21434</td><td></td></tr><tr><td>헤마트실린 및 에오신(H& E)</td> <td>Solarbio</td><td>G1120</td><td></td></tr><tr><td>헥사플루오로이소프로판올(HFIP)</td> <td>McClean</td><td>H811026</td><td></td></tr><tr><td>Iodophor</td><td>LIRCON</td><td>V273068</td><td></td></tr><tr><td>Microscissors</td><td>World Precision Instruments</td><td>14124</td><td></td></tr><tr><td>Microtweezers</td><td>World Precision Instruments</td><td>500338</td><td></td></tr><tr><td>일반 염소 혈청</td><td>Boster</td><td>AR0009</td><td></td></tr><tr><td>생리 식염수</td><td>Cisen 제약 회사</td><td>H20113369</td><td></td></tr><tr><td>커프용 나일론 튜브</td><td>Portex</td><td></td><td></td></tr><tr><td>최적 절단 온도 화합물(OCT)</td><td>Sakara</td><td>4583</td><td></td></tr><tr><td>펜토바르비탈 나트륨</td><td>시그마</td><td>P3761</td><td></td></tr><tr><td>인산염 완충 식염수(PBS)</td><td>Solarbio</td><td>P1003</td><td></td></tr><tr><td>폴리(&엡실론;- 카프로락톤) (PCL) 펠릿 (Mn = 80,000)</td> <td>시그마</td><td>704067</td><td></td></tr><tr><td>RAW264.7 대식세포</td><td>Biyuntian 생명 공학</td><td></td><td></td></tr><tr><td>주사 전자 현미경 (SEM)</td> <td>Zeiss</td><td>PHENOM-XL-G2</td><td></td></tr><tr><td>수술용 봉합사 6-0</td><td>닝보 Chenghe 마이크로 장치 공장</td><td>220919</td><td></td></tr><tr><td>수술용 봉합사 9-0</td><td>Ningbo Chenghe 마이크로 장치 공장</td><td>221006</td><td></td></tr> 주<tr><td>사기</td><td>Changqiang 의료 기기&nbsp; &nbsp;</td><td>0197</td><td></td></tr><tr><td>인장 시험기</td><td>Instron</td><td>WDW-5D</td><td></td></tr></tbody></table>

커프 기법을 통한 마우스 경동맥에 조직 공학 혈관 이식편 이식

Implantation of Tissue-Engineered Vascular Graft in Mouse Carotid Artery via Cuff Technique

매개변수가 다른 작은 직경의 혈관 이식편은 전기 방사를 통해 성공적으로 준비되었습니다. SEM 이미지는 섬유가 균일하게 분포되어 있고 공극 구조의 존재와 함께 이식벽 내에서 불규칙한 배열을 나타내는 것을 보여주었습니다(그림 4). PCL의 농도가 증가함에 따라 섬유 직경과 기공 크기가 모두 증가했습니다. 각 혈관 이식 그룹에 대한 구체적인 값은 표 2에 제시되어 있습니다. 기계적 테스트 결과는 모든 혈관 이식편이 필요한 기계적 표준을 충족한다는 것을 보여주었습니다. 파단 시 최대 하중 및 변형률은 PCL 농도가 높을수록 증가하고(그림 5A-C), 탄성 계수는 감소합니다(그림 5D). 이러한 결과를 바탕으로 PCL 농도가 15%이고 벽 두께가 150μm인 소구경 혈관...

The development of small-diameter vascular grafts has been a global endeavor, with numerous research groups contributing to this field. Animal ...

implantation-tissue-engineered-vascular-graft-mouse-carotid-artery

Research

연구

JoVE Journal

Bioengineering

생명공학

우리는 마우스의 복부 대동맥의 한 부분이 단지 allogeneic 또는 syngeneic받는 사람의 신장 동맥 아래에 orthotopically 이식되는 기술을 설명합니다. 이 기술은 균일 한 크기의 큰 동맥의 이식이 유리한 것으로 간주되는 연구에 유용 할 수 있습니다.

혈관 질병의 연구에 대한 마우스의 Orthotopic 대동맥 이식

뮤린 자궁 심장 이식 모델은, 면역뿐만 아니라 허혈 재관류 손상 연구에 매우 적합하다. 우리는 비 봉합 커프 기술을 사용하여 절차를 수정이 방법으로 1,000 개 이상의 성공적인 이식을 수행 하였다.  여기서, 우리는 비디오를 보충하기위한이 기술의 추가 정보를 제공합니다.

수정 커프 기술을 사용하여 쥐의 자궁 심장 이식 모델

세포 및 분자 neotissue 형성에 대한 우리의 지식을 개선하기 위해, TEVG의 쥐 모델은 최근에 개발되었다. 이식은 C57BL / 6 마​​우스의 신동맥 대정맥 개재 이식으로 이식되었다. 이 모델은 우리의 임상 연구에서 달성 된 것과 유사한 결과를 얻을 수 있지만, 훨씬 단축 된 시간 과정을 통해.

마우스 모델에서 하대 정맥 끼어 이식의 주입

동물의 희생까지 생체 내에서 엔드 - 투 - 엔드 문합 및 실시간 디지털 평가를 사용하여 양의 경동맥에 조직 설계된 선박 (TEVs)의 상호 위치 배치를위한 단계별 프로토콜입니다.

티슈 엔지니어링 혈관 이식 및 이후의 이식을위한 수술 기법<em&gt; 생체</em&gt; 모니터링

여기, 우리는 두 번 시드를 부분적으로 유도 만능 줄기 세포로 쥐에 이식을위한 기능적인 조직 설계 혈관 이식을 생성하는 프로토콜을 제시 (PiPSC은) - 탈세 포화 선박 발판 생물 반응기에서 유래 내피 세포 - 평활근 세포 및 PiPSC 산출했다.

마우스 모델에서 조직 공학 혈관의 생성 및 손톱 확장

커프 기술은 기술적으로 어려운 작은 혈관의 봉합 문합을 피함으로써 마우스의 이소성 경추 심장 이식 모델을 단축하고 용이하게 합니다. 이 비디오 백서에 표시된 기술적 세부 사항을 통해 연구자는 실험실에서 이 모델을 설정할 수 있습니다.

마우스의 이소성 자궁 심장 이식

여기서, 우리는 자궁 경부 뮤린 모델에서 비 봉합술 커프 기술을 사용하여 마우스에서 이종성 대동맥 이식의 프로토콜을 제시한다. 이 모형은 만성 동종 이식 혈관병증 (CAV)의 근본적인 병리를 공부하기 위하여 이용될 수 있고 그것의 대형을 방지하기 위하여 새로운 치료에이전트를 평가하는 것을 도울 수 있습니다.

수정된 비봉합사 커프 기술을 사용한 뮤린 자궁 경부 대동맥 이식 모델

본 프로토콜에서, 마우스 심장 이식 모델은 심장 동종이식 거부반응의 메카니즘을 조사하기 위해 사용된다. 이 이종 심장 이식 모델에서는 수술 효율이 향상되고 수정된 커프 기술을 사용하여 심장 이식의 자궁경부 종단 간 문합에 의해 심장 이식편의 생존이 보장됩니다.

마우스 자궁경부 이종 심장 이식 모델을 위한 수정된 커프 기술

마우스 심장 이식 모델은 이식 면역학을 연구하기 위한 귀중한 연구 도구입니다. 본 프로토콜은 층류 혈류를 허용하기 위해 수혜자의 총 경동맥 및 기증자의 폐동맥 트렁크에 커프를 배치하는 것을 포함하는 마우스 이종 자궁 경부 심장 이식을 자세히 설명합니다.

혈관 수갑을 이용한 마우스 이종 자궁 경부 심장 이식

이 프로토콜은 마우스 orthotopic 간 이식에서 커프 기술을 사용하여 혈관 재건을 위한 기술 정보를 제공합니다.

Mouse Orthotopic Liver Transplantation에서 Cuff Technique을 사용한 혈관 재건

이 프로토콜은 마우스 자궁경부 심장 이식을 위한 단순화된 끝 투 측면 봉합 문합 기법을 제시하여, 이식 면역학 연구를 위한 견고하고 재현 가능한 모델을 제공합니다.

종단 간 문합 기법을 이용한 경추 이종성 마우스 심장 이식 이식 면역학 연구

학습하세요 커프 기법을 이용한 마우스 경동맥 조직 공학 혈관 이식편 이식 방법을. 이 기술은 혈관 재생 메커니즘 연구에 적합한 동물 모델을 제공하여 심혈관 바이오재료 및 재생의학 연구에 활용됩니다.

커프 기법을 통한 마우스 경동맥에 조직 공학 혈관 이식편 이식

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