Name: 복잡한 분변 군집의 지속적인 배양을 위한 Bioreactor Assembly (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-04-25T14:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 37 s
Description: 배우세요 미니 바이오리액터 조립법으로 복잡한 분변 미생물 군집을 무산소 조건에서 지속적으로 배양하는 방법을 익히세요. 이 기술은 병행 실험을 통해 암 치료에서 미생물 메타볼라이트의 효과를 신속하게 연구하는 데 활용됩니다.

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<ol><li>Sender, R., Fuchs, S., Milo, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Revised+estimates+for+the+number+of+human+and+bacteria+cells+in+the+body%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biol%22%5BJournal%5D)">Revised estimates for the number of human and bacteria cells in the body.</a> PLoS Biol. 14 (8), e1002533(2016).</li>
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</ol>

장내 미생물총(microbiota)은 박테리아, 곰팡이, 고세균 및 바이러스를 포함한 미생물의 광대한 네트워크로, 인간 숙주보다 훨씬 더 많은 거대한 유전 및 대사 레퍼토리를 포함하고 있습니다1. 마이크로바이옴의 풍부한 대사 능력에는 식이 영양소의 박테리아 처리로 생성된 대사 산물, 박테리아에 의해 화학적으로 변형된 숙주 대사 산물, 미생물총(microbiota2)에 의해 고유하게 합성된 대사 산물이 포함됩니다. 미생물총(Microbiota)은 거의 모든 숙주 생물과정뿐만 아니라 염증성 장 질환, 암, 대사 장애, 심지어 신경 장애와 같은 질병 상태에도 관여합니다 2,3. 미생물총(microbiota)과 숙주(host)의 기여도를 해부하는 것은 건강과 질병에서 특정 미생물 또는 복잡한 군집의 역할을 이해하는 데 필수적입니다. 이러한 해부를 가능하게 하는 한 가지 접근 방식은 역동적인 조건에서 다양한 미생물 군집을 배양하는 미생물 생물 반응기를 사용하는 것입니다. 대규모 바이오 제품 배양 또는 대사 과정 연구를 위한 특정 영양 인자의 정확한 제어를 포함하여 거의 모든 목적으로 분변 박테리아 군집의 성장을 허용하는 상업적으로 이용 가능한 많은 생물 반응기가 있습니다. 그러나 이러한 시스템은 비용이 많이 들고 광범위한 준비가 필요하며 다양한 실험 조건을 병렬로 검사할 수 없습니다. 비용이 적게 들고 적응력이 뛰어나며 많은 병렬 조건을 허용하는 단순화된 접근 방식을 위해 Auchtung et al.4에서 채택한 연속 흐름 하에서 미니 생물 반응기 어레이의 설정 및 사용에 대한 프로토콜을 제시합니다.
미니 바이오리액터 시스템의 전체 설정은 그림 1A에 나와 있습니다. 이 미니 바이오리액터 시스템은 서로 완전히 독립적이며 연동 흐름의 혐기성 챔버에 설정된 6개의 반응기 웰 어레이를 사용하여 지속적인 매체 전달 및 제거가 가능합니다(그림 1A). 각 반응기 어레이는 60개 위치의 자기 교반 플레이트에 있으며, 소스 매체 및 폐기물 흐름을 위한 2스톱 튜빙을 유지하는 2개의 48개 카세트 연동 펌프가 있습니다(그림 1A). 혐기성 챔버에는 산소 함량을 측정하는 CAM-12 혐기성 모니터, 가열 용량으로 산소를 제거하는 촉매 상자, 박테리아 대사에서 과도한 가스를 흡수하는 황화수소 제거 컬럼이 장착되어 있습니다. 각 반응기 우물에는 소스 매체 유입구, 폐기물 배출구 및 샘플 포트가 장착되어 있어 각 개별 반응기 우물을 접종하거나 샘플링할 수 있습니다(그림 1B).
앞서 설명한 바와 같이, 바이오리액터 시스템은 온도, 매체 소비량 및 영양분 가용성을 동적으로 제어하여 분변 군집의 배양 및 유지를 지원합니다. 온도는 가열 용량이 있는 촉매 상자에 의해 조절되어 전체 혐기성 챔버의 온도 변화를 신속하게 구현할 수 있습니다. 매체 소비는 연동 펌프 유량에 의해 조절되며, 이는 반응기의 매체 회전율을 변경하기 위해 수정할 수 있습니다. 미디어 회전율은 반응기에서 배양되는 커뮤니티 유형에 맞게 사용자 정의할 수 있으며, 예를 들어 느리게 성장하거나 매우 빠르게 성장하는 표적 균주에 맞게 조정됩니다. 마지막으로, 영양분 가용성은 각 반응기 웰의 개별 샘플 포트를 통해 구성 요소를 추가하여 동적으로 수정할 수 있습니다. 실험 시작 시 수정할 수 있지만 시스템에서 동적 제어가 없는 정적 조건은 매체 유형, 산소 함량 및 동시 반응기 수입니다. 조사자는 원하는 소스 미디어를 구현하도록 선택할 수 있으며, 여기에 하나의 미디어가 설명되어 있지만 끝없는 다른 소스 미디어 유형이 성공적으로 구현되었습니다. 호기성 또는 미세호기성 조건에서 반응기를 작동할 수 있습니다(미호기성 챔버의 가용성에 따라 다름). 마지막으로, 연구자의 실험 요구에 따라 필요한 만큼 많은 반응기를 설정할 수 있습니다. 반응기는 어레이 내에서 6개의 세트로 되어 있지만 각 반응기는 다른 반응기와 독립적으로 작동하며 원하는 경우 각각 다른 소스에 연결할 수 있습니다.
이 모듈식 바이오리액터 시스템은 약 $25,000(혐기성 챔버 또는 챔버별 구성 요소 제외)로 완전히 설정할 수 있으며, 재사용할 수 없는 유일한 부품은 시스템 실행당 $100 미만으로 교체할 수 있는 튜빙입니다. 이 시스템은 대부분 자동화되어 있지만 배지 소스 병이 비어 있을 때 교체해야 하므로 미디어 레벨을 매일 확인해야 합니다. 또한 모든 샘플링은 수동으로 완료해야 하며 시스템에 대한 동적 조건부 변경은 수동으로 시작해야 합니다(예: 온도 변경). Auchtung et al.이 발표한 원래 시스템 프로토콜에서 전반적인 성능과 유용성4을 개선하기 위해 몇 가지 수정 사항이 구현되었습니다. 첫째, 생물 반응기 어레이의 3D 프린팅 재료는 ABS와 같은 반투명 투명 플라스틱으로 수정되어 반복되는 고압증기멸균을 통해 시스템의 구조적 무결성을 향상시킵니다. 또한 1/8인치(3.2mm) OD PTFE 튜빙 대신 E-LFL, 2.06mm ID, 100피트 튜빙이 대신 사용되는데, 이는 붕괴에 더 강하여 시스템의 흐름을 막을 수 있는 더 견고한 소재로 인해 사용됩니다. 마지막으로, 1/4 -28mm 나사산을 사용하여 미늘 수 어댑터에 추가 피팅을 사용하여 매체 소스 병에서 튜브 미끄러짐의 변화를 줄입니다. Han et al.에 따르면, 적응된 MEGA 배지 레시피는 까다로운 혐기성 미생물의 배양을 가능하게 하는 정의되지 않고 복잡하며 매우 풍부한 배지를 제공합니다5. 배지는 원본이 더 이상 상업적으로 이용 가능하지 않기 때문에 히스티딘-헤마틴 성분의 대체 제제를 활용하도록 수정됩니다. 수산화나트륨은 매체를 7.0 또는 원하는 pH로 pH하는 데에도 사용됩니다. 전반적으로 이 시스템은 예산이 저렴하고 사용자 친화적이며 최적화되어 있으며 연속 유동 배양 시스템의 훌륭한 진입점입니다.
이 프로토콜에서는 재료, 시스템 멸균 및 장내 인간화 쥐 배설물 샘플의 배양을 위한 후속 사용을 포함하여 이 미니 생물 반응기 어레이 시스템의 설정에 대해 자세히 설명합니다. 이 방법의 전반적인 목표는 통제된 조건에서 미생물 군집을 배양하는 데 사용할 수 있는 적응 가능하고 비용 효율적인 생물 반응기 시스템을 구축하는 것입니다. mini-bioreactor 시스템 조립을 위한 워크플로우의 자세한 개략도는 그림 2 에 나와 있으며 프로토콜 내의 적절한 단계에서 참조됩니다. 이 예에서는 인간화된 장내 마우스의 동일한 배설물 샘플로 두 개의 반응기에 접종하고 MEGA 배지의 연속적인 흐름 하에서 미생물 군집 구조를 설명합니다.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68035/68035fig1v2.jpg"> 
그림 1: 혐기성 챔버에서 mini-bioreactor 어레이 설정의 개략도. (A) 혐기성 챔버에서 완료된 mini-bioreactor 어레이 설정의 전체 보기. 6웰 바이오리액터 어레이는 60개 위치 마그네틱 교반 플레이트에 위치합니다. 소스 루어 티 네트워크는 두 개의 구멍이 있는 병 뚜껑을 통해 왼쪽의 소스 미디어에 연결됩니다. 두 개의 연동 펌프가 각각 왼쪽과 오른쪽의 소스 및 폐기물 네트워크에서 2스톱 튜빙을 고정합니다. waste luer 티 네트워크는 오른쪽에 있는 쓰레기통으로 비워집니다. CAM-12 모니터, 가열 용량이 있는 촉매 상자 및 황화수소 제거 컬럼을 포함한 혐기성 챔버 작동을 위한 필수 장비는 어레이 시스템 주변의 챔버 내에 배치됩니다. (B) 상단 view 반응기의 적절한 높이에 매체가 있는 하나의 반응기 웰에 부착된 소스, 샘플 및 폐기물 포트. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68035/68035fig1v2large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68035/68035fig2v2.jpg"> 
그림 2: mini-bioreactor array assembly workflow의 개략도. (A) 미니 생물반응기 어레이의 하향식 보기, 공급원, 폐기물 및 샘플 포트의 방향을 보여줍니다. (B) 프로토콜의 단계 2.3-2.4를 보여주는 보기가 있는 미니 생물반응기 어레이의 측면 모습. 1/8인치 PTFE 튜브와 피팅(1)이 부착되어 폐기물 및 샘플 포트에 삽입됩니다. PTFE가 없는 피팅(1)이 소스 포트에 삽입됩니다. (C) 프로토콜의 2.5-2.6단계를 보여주는 미니 생물반응기 어레이의 측면도. 피팅(2)은 소스 및 폐기물 포트에 부착됩니다. 샘플 포트에 피팅(3)이 부착되고 그 위에 피팅(4)이 삽입됩니다. (D) 2.9-2.11단계를 보여주는 미니 생물반응기 어레이의 측면 모습. E-LFL 2.06mm 튜빙은 소스 및 폐기물 포트에 연결되고 다른 쪽 끝은 피팅 (5)에 연결된 다음 (6)에 연결됩니다. 그런 다음 적절한 직경의 2스톱 튜빙을 피팅(6)에 연결합니다. 그런 다음 2스톱 튜빙의 끝에서 역 연결을 반복하여 피팅(6)을 2스톱 튜빙에 연결하고 피팅(5)을 2스톱 튜빙에 연결합니다. 마지막으로, E-LFL 2.06mm 튜빙은 루어 티 네트워크에 연결하기 위해 피팅 (5)에 연결됩니다. (E) 2.12-2.15 단계에 설명된 소스 및 폐기물 루어 티 네트워크 설정을 표시하는 미니 생물 반응기 어레이의 하향식 보기. 피팅 (5)로 끝나는 E-LFL 2.06mm 튜브는 각 반응기를 여러 피팅 (7)에 연결하는 데 사용되며, 마지막 개구부는 소스 또는 폐기물 병의 캡에 연결됩니다. (F) 측면 view 2.16-2.17단계에 설명된 두 개의 구멍 병뚜껑 어셈블리. 캡의 한 구멍은 병 내부에 있는 PTFE 튜브에 연결됩니다. 이 개구부에는 피팅(1)이 삽입된 후 피팅(2)과 피팅(5)에 연결된 E-LFL 2.06mm 튜빙이 삽입됩니다. 이 피팅은 소스 또는 폐기물 루어 네트워크에 연결됩니다. PTFE 튜빙에 연결되지 않은 개구부에 피팅(1)을 삽입한 다음 피팅(2)을 삽입하고 E-LFL 2.06mm 튜빙을 다른 피팅(5)에 연결합니다. 이 끝단은 멸균 0.22μM 주사기 필터에 나중에 부착할 수 있도록 오토클레이브 멸균 중에 호일로 덮여 있습니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68035/68035fig2v2large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>

<table><tbody><tr><td>1 mL BD 슬립 팁 주사기 멸균, 일회용</td><td>Fisher Scientific</td><td>309659</td><td></td></tr><tr><td>1/4-28 mm 나사산-가시 수 어댑터(3.2 mm), 5/팩</td><td>Cole-Parmer</td><td>008NB32-KD5L</td> 1개의 <td>6-웰 어레이를 구축하려면 2팩이 필요합니다</td></tr><tr><td>10M NaOH(수산화나트륨)</td> <td>Sigma</td><td>72068-100ML</td><td></td></tr><tr><td>2.0ml 스크류 캡 튜브, 논널, 스커트, 천연, E-빔 멸균 튜브(캡 부착 포함</td>) <td>Fisher Scientific</td><td>14-755-228</td><td></td></tr><tr><td>2mag MIXdrive 60 교반 드라이브</td><td>2mag</td><td>40060</td><td>60위치 마그네틱 교반판(가열 용량 추가 옵션 - cat# 40260)</td></tr><tr><td>6웰 반응기 arrray, ABS와 유사한 반투명 투명 플라스틱</td><td>Protolabs</td><td>사용자 정의</td><td>3D 프린팅용 .stl 파일에 대한 보충 파일 참조</td></tr><tr><td>앱솔루트 에탄올(200 프루프)</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP2818</td><td></td></tr><tr><td>아세트산, 빙하</td><td>시그마</td><td>A6283</td><td></td></tr><tr><td>어댑터, 나일론, 1/4-28 스레드에 대한 수 루어, 25/팩</td><td>Cole-Parmer</td><td>EW-45505-82</td><td>1개의 6웰 어레이를 구축하려면 6개(1팩)가 필요합니다.</td></tr> 알루미늄 <tr><td>호일</td><td>Fisher Scientific</td><td>01-213-100</td><td></td></tr><tr><td>혐기성 챔버</td><td>Coy Lab Products</td><td>유형 B</td><td></td></tr><tr><td>Bel-Art&nbsp; SP Scienceware 벼룩 마이크로 스핀바 마그네틱 교반 바 (1/pk)</td><td>Fisher Scientific</td><td>22-261679</td><td>1개의 6웰 어레이를 구축하려면 6&nbsp가 필요합니다.</td></tr><tr><td>생물안전 캐비닛 클래스 2</td><td>Nuaire</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Butyric acid</td><td>Sigma</td><td>B103500&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>CaCl2 & 2H2O(염화칼슘 이수화물)</td> <td>Sigma</td><td>C7902</td><td></td></tr><tr><td>Clorox 헬스케어 살균 물티슈, 표백제 함유, 무향, 6" x 5", 물티슈 150개 팩</td><td>사무실 창고</td><td>129202</td><td></td></tr><tr><td>D-(-)-과당</td><td>시그마</td><td>F0127-100G</td><td></td></tr><tr><td>D-(+)-셀로비오스</td><td>시그마</td><td>C7252-100G</td><td></td></tr><tr><td>D-(+)-포도당</td><td>시그마</td><td>G8270-100G</td><td></td></tr><tr><td>D-(+)-맥아당 일수화물</td><td>시그마</td><td>M5885-100G</td><td></td></tr><tr><td>드릴 아메리카 플러그 핸드 탭 DWTP1/4-28</td><td>홈 디포</td><td>305699489</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco의 인산염 완충 식염수, Ca 및 Mg 없음 1X, 멸균</td><td>Genesee</td><td>25-508</td><td></td></tr><tr><td>암 루어 & 1/16&프라임; 호스 미늘 어댑터, 나일론, 25/팩</td><td>Cole-Parmer</td><td>EW-45502-00</td><td>6웰 어레이 1개를 구축하려면 24(1팩)</td></tr><tr><td>암 루어 &times; 1/8&times; 호스 미늘 어댑터, 나일론 25/팩</td><td>Cole-Parmer</td><td>EW-45502-04</td> 6<td>웰 어레이 1개를 구축하려면 6(1팩)</td></tr><tr><td>암 루어 &times; 3/32&Prime; 호스 미늘 어댑터, 나일론, 25/팩</td><td>Cole-Parmer</td><td>EW-45502-02</td><td>6웰 어레이 1개를 구축하려면 6 (1 팩) 필요 암</td></tr> <tr><td>루어 티, 나일론, 25 / 팩</td><td>Cole-Parmer</td><td>EW-45502-56</td><td>1 6 웰 어레이 1 개를 구축하려면 10 (1 팩)</td></tr> <tr><td>FeSO4 & middot 필요; 7H2O (철 [II] 황산염 칠수화물)</td> <td>시그마</td><td>F8633</td><td></td></tr><tr><td>헤마틴</td><td>시그마</td><td>H3281</td><td></td></tr><tr><td>히스티딘</td><td>시그마</td><td>H7750</td><td></td></tr><tr><td>이소발레르산</td><td>시그마</td><td>129542</td><td></td></tr><tr><td>K2HPO4 이염기성 (인산수소 이칼륨)</td> <td>시그마</td><td>P2222-1KG</td><td></td></tr><tr><td>KH2PO4 일염기성 (인산이수소 칼륨)</td> <td>시그마</td><td>P0662-500G</td><td></td></tr><tr><td>대형 오리피스 피펫 팁</td><td>피셔 사이언티픽</td><td>02-707-134</td><td></td></tr><tr><td>L-시스테인 염산염</td><td>시그마</td><td>C1276-10G</td><td></td></tr><tr><td>잠금 링이 있는 남성 루어 & 1/8&times; 호스 미늘 어댑터, 나일론, 25/팩</td><td>Cole-Parmer</td><td>EW-45505-04</td><td>1개의 6웰 어레이를 구축하려면 42개(2팩)가 필요합니다.</td></tr> 육<tr><td>류 추출물</td><td>Sigma</td><td>70164-500G</td><td></td></tr><tr><td>Med Vet International&nbsp; 엑셀 바늘, 20G x 1", 피하 주사, 100/상자, 26417</td><td>피셔 사이언티픽</td><td>50-209-2532</td><td></td></tr><tr><td>메나디온(비타민 K3)</td><td>시그마</td><td>M5625</td><td></td></tr><tr><td>MgSO4&nbsp; &middot; 7H2O(황산마그네슘 칠수화물)</td> <td>시그마</td><td>M1880-500G&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Milli-Q 물</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>NaCl(염화나트륨)</td> <td>시그마</td><td>S9888-500G&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>NaHCO3 (중탄산나트륨)</td> <td>시그마</td><td>S5761-500G</td><td></td></tr><tr><td>Omnifi t Q 시리즈 2홀 병뚜껑</td><td>Cole-Parmer</td><td>00945Q-2</td><td>6웰 어레이 1개를 구축하려면</td></tr><tr><td>PMP IPC-N L 24CHNL 8RLR 115V MasterFlex</td><td></td><td>ISM939C-115V</td><td>24채널 연동 펌프 1개가 필요하며, 소스용 1개, 폐기물용 1개 필요</td></tr><tr><td>정밀 씰 및 고무 격막, 흰색, 7mm OD 유리관(100/pk)</td><td>밀리포어 시그마</td><td>Z553905-100EA</td><td>1개의 6웰 어레이를 구축하려면 6개의 격막이 필요합니다</td></tr>. 프로<tr><td>피온산</td><td>시그마</td><td>P5561&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>펌프 튜빙, 2-스톱, Tygon S3 E-Lab, 1.02 mm ID; 12/PK</td><td>VWR</td><td>MFLX96460-28</td><td>1개의 6-웰 어레이를 구축하려면 6&nbsp가 필요합니다. (1팩)</td></tr><tr><td>펌프 튜브, 2-스톱, Tygon S3 E-Lab, 1.14 mm ID; 12/PK</td><td>VWR</td><td>MFLX96460-30</td> 6-웰 <td>어레이 1개를 구축하려면 6개(1팩)가 필요합니다.</td></tr> <tr><td>Puritan Cary-Blair 배지, 5ml</td><td>Fisher Scientific</td><td>22-029-646</td><td></td></tr><tr><td>PYREX 2L 원형 배지 보관 병, GL45 스크류 캡 포함</td><td>Fisher Scientific</td><td>06-414-1E</td><td></td></tr><tr><td>면도날</td><td>Genesee</td><td>12-640</td><td></td></tr><tr><td>Resazurin, 나트륨염</td><td>ThermoFisher의 ACROS Organics</td><td>AC41890-0010</td><td></td></tr><tr><td>수용성 전분</td><td>Sigma</td><td>S9765-100G</td><td></td></tr><tr><td>스테인리스 스틸 마이크로 주걱, 블레이드와 같은 숟가락</td><td>Fisher Scientific</td><td>S50823</td><td></td></tr><tr><td>TBNG TYGON ELFL 2.06MMID 100'VWR</td><td></td> <td>MFLX06449-42</td> 1개의 <td>6웰 어레이를 구축하려면 205.5cm 미</td></tr><tr><td>량 미네랄 보충제</td><td>ATCC</td><td>MD-TMS</td> <td>필요</td></tr><tr><td>트립티카제 펩톤(BBL)</td> <td>Fisher Scientific</td><td>B11921</td><td></td></tr><tr><td>튜빙, PTFE, 1/8&프라임; (3.2mm) OD & 시간; 1.5 mm ID, 10 m</td><td>Cole-Parmer</td><td>008 T32-150-10</td><td>1개의 6웰 어레이를 구축하려면 300 mm</td></tr><tr><td>Tween 80</td><td>Sigma</td><td>P1754&nbsp가 필요합니다.</td><td></td></tr><tr><td>비타민 보충제</td><td>ATCC</td><td>MD-VS</td><td></td></tr><tr><td>효모 추출물(박토)</td><td>Fisher Scientific</td><td>DF0127-17-9</td><td></td></tr></tbody></table>

복잡한 분변 군집의 지속적인 배양을 위한 bioreactor assembly

Bioreactor Assembly for Continuous Culture of Complex Fecal Communities

접종 2주 후 인간 배설물 슬러리가 서식한 마우스에서 배설물 샘플을 수집하여 -80°C에서 보관했습니다. 바이오리액터 시스템은 두 개의 복제 반응기 유정에 대해 연속적인 MEGA 매체 흐름으로 설정되었습니다(그림 3A). 분변 슬러리는 단계 6에 기재된 프로토콜에 따라 마우스 분변 펠릿으로부터 제조되었으며, 두 반응기는 반응기 마우스 분변 슬러리를 샘플 포트로 접종하였다. 정적 조건에서 37°C의 반응기 우물에서 분변 군락을 하룻밤 동안 배양한 후, 흐름은 반응기로 다시 시작되어 6일 동안 유지되었습니다. 두 반응기 웰은 반응기로의 흐름을 다시 시작한 후 1, 2, 3, 4 및 6일 후에 샘플링하고 추가 처리를 위해 -80°C에서 보관했습니다.
시간 경과에 따른 미생물 군집 구성의 차이를 평가하기 위해, 앞서...

복잡한 분변 군집의 지속적인 배양을 위한 Bioreactor Assembly

The microbiota, especially bacteria, respond to various environmental exposures such as micro and macronutrients, pharmacological compounds, and ...

bioreactor-assembly-for-continuous-culture-complex-fecal

Research

연구

JoVE Journal

Immunology and Infection

면역학 및 감염학

실험실 규모의 혐기성 digesters 과학자 혐기성 생물 공학의 기존 애플 리케이션을 최적화하는 새로운 방법을 연구하고 다양한 유기 폐기물의 메탄 생산 잠재력을 평가할 수 있습니다. 이 문서는 지속적으로 혐기성 소화조를 흔들 실험실 규모의 건설, 접종, 운영 및 모니터링을위한 일반 모델을 소개합니다.

시스템 설치 및 기본 작업 : Biogas로 유기 폐기물을 변환하는 혐기성 소화조를 지속 - 흔들

출처: 아흐마디, S. 외. 인체 대변 미생물군에 대한 중재적 요법의 효과를 추정하기 위한 시험관 내 배치 배양 모델. J. Vis. 경험 (2019).이 영상은 식이 발효성 섬유를 배양하여 장내 미생물 미생물의 대사물 생성을 연구하기 위해 장내 미생물 발효를 모델링하는 방법을 시연합니다.

시험관 내 인간 장내 미생물군에 의한 대장 발효를 모방하는 배치 배양 모델

지속적인 성장 조절 공급을 사용한 영양소 조절은 교반 현탁 생물 반응기에서 배양에 대한 간헐적 배치 공급에 비해 포유류 세포 스페로이드의 성장 속도를 향상시킵니다.  이 연구는 간단한 조정된 비율 공급 배양을 설정하는 데 필요한 방법을 보여줍니다.

회전 타원체의 포유 동물 세포의 대규모 확장을위한 지속적인 공급함으로써 영양 규정

배양 세포의 기능적 문제는 3 차원 배양 환경 16-21 -like 생체 내에서 배양함으로써 더욱 향상시킬 수있다. 이 논문은 생체 -like 포유 동물 조직 배양 용 중공 바이오 리액터 시스템의 셋업 및 동작을 설명한다.

에 대한 중공의 생물 반응<em&gt; 생체</em&gt; -처럼 포유류 조직 문화

고밀도 생물 반응기(HDBR)라는 새로운 반응기 설계가 고밀도 미생물 군집의 배양 및 연구를 위해 제시됩니다. 여기에서 HDBR은 혼합 고밀도 조류 군집에 의한 질소 대사 연구를 위한 광생물반응기(PBR) 구성에 성공적으로 적용됩니다.

다양한 미생물 커뮤니티의 고밀도 배양위한 새로운 생물 반응기

창 자 미생물 호스트 상호 작용은 합성 구두 커뮤니티, 생체 외에서 위장 소화, 그리고 소장 상피의 모델을 결합 하 여 새로운 접근 방식을 사용 하 여 평가 됐다. 우리 세포 침입 병원 체와 다중 종 biofilms의 평가 또는 테스트 probiotic 정립 생존 적응 될 수 있는 방법 제시.

생체 외에서 직감 호스트 미생물 인터페이스에 합성 세균 컨소시엄의 생존 능력을 평가

여기, 선물이 위장 장 관의 생리 조건을 시뮬레이션 bioreactors의 시리즈를 사용 하 여 콜론 생체 외에서, 의 본질적인 microbiota 경작을 위한 프로토콜.

인간의 본질적인 Microbiota 공부 기술을 경작 하는 체 외에서 고급 적용

여기에서는 GMP 등급의 용해성 마이크로캐리어를 기반으로 하는 완전 폐쇄형 시스템을 통해 부착 세포의 대규모 제조를 달성하기 위한 프로토콜을 제시합니다. 인간 중간엽 줄기 세포, HEK293T 세포 및 Vero 세포의 배양은 검증되었으며 세포 및 유전자 치료 산업의 수량 요구와 품질 기준을 모두 충족했습니다.

GMP 등급의 용해성 다공성 마이크로캐리어를 기반으로 한 대규모 셀 생산

이 논문의 초점은 환경에서 획득한 까다로운 혐기성 미생물을 위한 배지를 만들기 위한 모범 사례를 자세히 설명하는 것입니다. 이러한 방법은 혐기성 배양을 관리하는 데 도움이 되며 찾기 어려운 배양되지 않은 미생물인 "미생물 암흑 물질"의 성장을 지원하는 데 적용할 수 있습니다.

환경적으로 획득한 혐기성 미생물을 배양하기 위한 In Situ Informed Simulated Medium 형식 세트

MBRA(Minibioreactor Array)는 복잡한 미생물 군집의 배양을 가능하게 하는 고처리량, 맞춤형 연속 흐름 배양 시스템으로, 마이크로바이옴 역학, 치료 상호 작용 및 환경 요인에 대한 미생물 반응을 연구하기 위한 병렬 실험을 지원합니다.

Minibioreactor Array(MBRA)의 조립 및 사용을 위한 업데이트된 프로토콜

배우세요 미니 바이오리액터 조립법으로 복잡한 분변 미생물 군집을 무산소 조건에서 지속적으로 배양하는 방법을 익히세요. 이 기술은 병행 실험을 통해 암 치료에서 미생물 메타볼라이트의 효과를 신속하게 연구하는 데 활용됩니다.

복잡한 분변 군집의 지속적인 배양을 위한 Bioreactor Assembly

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