Name: Fragile X Messenger Ribonucleoprotein이 결핍된 인간 유도 만능 줄기세포 유래 성상세포의 생성 및 특성화 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-06T14:35:00.000+00:00
Duration: 10 min 59 s
Description: 배우세요 인간 유도 만능 줄기세포에서 전뇌 특이 성상세포를 분화시키는 방법을. 이 프로토콜은 Fragile X 증후군의 대사 이상을 연구하고 신경발달 장애에서 신경교세포의 역할을 탐구하는 데 활용됩니다.

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<ol><li>Santoro, M. R., Bray, S. M., Warren, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+of+fragile+X+syndrome%3A+A+twenty-year+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Pathol%22%5BJournal%5D)">Molecular of fragile X syndrome: A twenty-year perspective.</a> Annu Rev Pathol. 7, 219-245 (2012).</li>
<li>Wang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmentally-programmed+FMRP+expression+in+oligodendrocytes%3A+A+potential+role+of+FMRP+in+regulating+translation+in+oligodendroglia+progenitors%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Mol+Genet%22%5BJournal%5D)">Developmentally-programmed FMRP expression in oligodendrocytes: A potential role of FMRP in regulating translation in oligodendroglia progenitors.</a> Hum Mol Genet. 13 (1), 79-89 (2004).</li>
<li>Pacey, L. K. K., Doering, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+expression+of+FMRP+in+the+astrocyte+lineage%3A+Implications+for+fragile+X+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Glia%22%5BJournal%5D)">Developmental expression of FMRP in the astrocyte lineage: Implications for fragile X syndrome.</a> Glia. 55 (15), 1601-1609 (2007).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Purification+and+characterization+of+progenitor+and+mature+human+astrocytes+reveals+transcriptional+and+functional+differences+with+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Purification and characterization of progenitor and mature human astrocytes reveals transcriptional and functional differences with mouse.</a> Neuron. 89 (1), 37-53 (2016).</li>
<li>Allen, N. J., Barres, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroscience%3A+Glia+-+more+than+just+brain+glue%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Neuroscience: Glia - more than just brain glue.</a> Nature. 457 (7230), 675-677 (2009).</li>
<li>Khakh, B. S., McCarthy, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Astrocyte+calcium+signaling%3A+From+observations+to+functions+and+the+challenges+therein%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harb+Perspect+Biol%22%5BJournal%5D)">Astrocyte calcium signaling: From observations to functions and the challenges therein.</a> Cold Spring Harb Perspect Biol. 7 (4), a020404(2015).</li>
<li>Allen, N. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Astrocyte+glypicans+4+and+6+promote+formation+of+excitatory+synapses+via+GluA1+AMPA+receptors%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Astrocyte glypicans 4 and 6 promote formation of excitatory synapses via GluA1 AMPA receptors.</a> Nature. 486 (7403), 410-414 (2012).</li>
<li>Chung, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+and+molecular+interrogation+of+intact+biological+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Structural and molecular interrogation of intact biological systems.</a> Nature. 497 (7449), 332-337 (2013).</li>
<li>Rothstein, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Knockout+of+glutamate+transporters+reveals+a+major+role+for+astroglial+transport+in+excitotoxicity+and+clearance+of+glutamate%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Knockout of glutamate transporters reveals a major role for astroglial transport in excitotoxicity and clearance of glutamate.</a> Neuron. 16 (3), 675-686 (1996).</li>
<li>Almad, A., Maragakis, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+stocked+toolbox+for+understanding+the+role+of+astrocytes+in+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurol%22%5BJournal%5D)">A stocked toolbox for understanding the role of astrocytes in disease.</a> Nat Rev Neurol. 14 (6), 351-362 (2018).</li>
<li>Zhang, Y., Barres, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Astrocyte+heterogeneity%3A+An+underappreciated+topic+in+neurobiology%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Astrocyte heterogeneity: An underappreciated topic in neurobiology.</a> Curr Opin Neurobiol. 20 (5), 588-594 (2010).</li>
<li>Clarke, L. E., Barres, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emerging+roles+of+astrocytes+in+neural+circuit+development%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Emerging roles of astrocytes in neural circuit development.</a> Nat Rev Neurosci. 14 (5), 311-321 (2013).</li>
<li>Bradley, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regionally+specified+human+pluripotent+stem+cell-derived+astrocytes+exhibit+different+molecular+signatures+and+functional+properties%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Regionally specified human pluripotent stem cell-derived astrocytes exhibit different molecular signatures and functional properties.</a> Development. 146 (13), dev170910(2019).</li>
<li>Das Sharma, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Astrocytes+mediate+cell+non-autonomous+correction+of+aberrant+firing+in+human+FXS+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Astrocytes mediate cell non-autonomous correction of aberrant firing in human FXS neurons.</a> Cell Rep. 42 (4), 112344(2023).</li>
<li>Chambers, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Highly+efficient+neural+conversion+of+human+ES+and+iPS+cells+by+dual+inhibition+of+SMAD+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Highly efficient neural conversion of human ES and iPS cells by dual inhibition of SMAD signaling.</a> Nat Biotechnol. 27 (3), 275-280 (2009).</li>
<li>Hu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+JAK%2FSTAT+signaling+pathway%3A+from+bench+to+clinic%5BTitle%5D)+AND+%22Sig+Transduct+Target+Ther%22%5BJournal%5D)">The JAK/STAT signaling pathway: from bench to clinic.</a> Sig Transduct Target Ther. 6, 402(2021).</li>
<li>Baser, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Onset+of+differentiation+is+post-transcriptionally+controlled+in+adult+neural+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Onset of differentiation is post-transcriptionally controlled in adult neural stem cells.</a> Nature. 566 (7742), 100-104 (2019).</li>
<li>Pal, R., Bhattacharya, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modelling+protein+synthesis+as+a+biomarker+in+fragile+x+syndrome+patient-derived+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Sci%22%5BJournal%5D)">Modelling protein synthesis as a biomarker in fragile x syndrome patient-derived cells.</a> Brain Sci. 9 (3), 1-12 (2019).</li>
<li>Gross, C., Bassell, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Excess+protein+synthesis+in+FXS+patient+lymphoblastoid+cells+can+be+rescued+with+a+p110%CE%B2-selective+inhibitor%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Excess protein synthesis in FXS patient lymphoblastoid cells can be rescued with a p110β-selective inhibitor.</a> J Mol Med. 18 (3), 336-345 (2012).</li>
<li>Kumari, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+fragile+X+syndrome+specific+molecular+markers+in+human+fibroblasts%3A+A+useful+model+to+test+the+efficacy+of+therapeutic+drugs%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Mutat%22%5BJournal%5D)">Identification of fragile X syndrome specific molecular markers in human fibroblasts: A useful model to test the efficacy of therapeutic drugs.</a> Hum Mutat. 35 (12), 1485-1494 (2014).</li>
<li>Jacquemont, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protein+synthesis+levels+are+increased+in+a+subset+of+individuals+with+fragile+X+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Mol+Genet%22%5BJournal%5D)">Protein synthesis levels are increased in a subset of individuals with fragile X syndrome.</a> Hum Mol Genet. 27 (12), 2039-2051 (2018).</li>
<li>Bowser, D. N., Khakh, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ATP+excites+interneurons+and+astrocytes+to+increase+synaptic+inhibition+in+neuronal+networks%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">ATP excites interneurons and astrocytes to increase synaptic inhibition in neuronal networks.</a> J Neurosci. 24 (39), 8606-8620 (2004).</li>
<li>Schmunk, G., Boubion, B. J., Smith, I. F., Parker, I., Gargus, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shared+functional+defect+in+IP3R-mediated+calcium+signaling+in+diverse+monogenic+autism+syndromes%5BTitle%5D)+AND+%22Transl+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Shared functional defect in IP3R-mediated calcium signaling in diverse monogenic autism syndromes.</a> Transl Psychiatry. 5 (9), e643-e710 (2015).</li>
<li>Peteri, U. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+the+human+pluripotent+stem-cell-derived+astrocyte+model+with+forebrain+identity%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Sci%22%5BJournal%5D)">Generation of the human pluripotent stem-cell-derived astrocyte model with forebrain identity.</a> Brain Sci. 11 (2), 209(2021).</li>
<li>Alvarez-Mora, M. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+mitochondrial+function+and+dynamics+in+the+pathogenesis+of+FXTAS%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Impaired mitochondrial function and dynamics in the pathogenesis of FXTAS.</a> Mol Neurobiol. 54 (9), 6896-6902 (2017).</li>
<li>Giulivi, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+dysfunction+in+autism%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial dysfunction in autism.</a> JAMA. 304 (21), 2389-2396 (2010).</li>
<li>Anitha, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+region-specific+altered+expression+and+association+of+mitochondria-related+genes+in+autism%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Autism%22%5BJournal%5D)">Brain region-specific altered expression and association of mitochondria-related genes in autism.</a> Mol Autism. 3 (1), 12(2012).</li>
<li>Teves, J. M. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parkinson%27s+disease+skin+fibroblasts+display+signature+alterations+in+growth%2C+redox+homeostasis%2C+mitochondrial+function%2C+and+autophagy%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Parkinson's disease skin fibroblasts display signature alterations in growth, redox homeostasis, mitochondrial function, and autophagy.</a> Front Neurosci. 11, 737(2018).</li>
<li>Yao, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+bioenergetic+deficit+precedes+Alzheimer%27s+pathology+in+female+mouse+model+of+Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial bioenergetic deficit precedes Alzheimer's pathology in female mouse model of Alzheimer's disease.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 106 (34), 14670-14675 (2009).</li>
<li>Sonntag, K. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Late-onset+Alzheimer%27s+disease+is+associated+with+inherent+changes+in+bioenergetics+profiles%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Late-onset Alzheimer's disease is associated with inherent changes in bioenergetics profiles.</a> Sci Rep. 7 (1), 14038(2017).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1-티오글리세롤</td><td>시그마-알드리치</td><td>M6145</td><td></td></tr><tr><td>아큐타제&nbsp; 솔루션</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A6964</td><td>효소 세포 박리 배지&nbsp;</td></tr><tr><td>아데노신 5&-삼인산마그네슘염</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A9187</td><td></td></tr><tr><td>Advanced DMEM/F-12</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>12634010</td><td></td></tr><tr><td>항생제-항진균제(100x)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>15240062</td><td></td></tr><tr><td>B-27 보충제(50x), 무혈청</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>17504044</td><td></td></tr><tr><td>소 혈청 알부민</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A9418</td><td></td></tr><tr><td>화학적으로 정의된 지질 농축액</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>11905031</td><td></td></tr><tr><td>콜라게나제, 유형 IV, 분말</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>17104019</td><td></td></tr><tr><td>Deoxyribonuclease I</td><td>Worthington Biochemical Corporation</td><td>LK003170</td><td></td></tr><tr><td>Dimethyl sulfoxide</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D2650</td><td></td></tr><tr><td>Dispase II, 분말</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>17105041</td><td></td></tr><tr><td>DPBS, 칼슘 없음, 마그네슘 없음</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>14190144</td><td></td></tr><tr><td>Essential 8</td><td>Medium ThermoFisher Scientific</td><td>A1517001</td><td></td></tr><tr><td>FXS1, FXS2&nbsp;</td><td>코리엘 의학 연구소&nbsp;</td><td>GM07072, GM05848</td><td>FXS 환자 세포</td></tr><tr><td>글루타맥스 보충제</td><td>써모피셔 사이언티픽</td><td>35050061</td><td>글루타민 대체물</td></tr><tr><td>햄의 F-12 영양 믹스</td><td>써모피셔 사이언티픽</td><td>11765054</td><td></td></tr><tr><td>건강한 대조군 세포&nbsp;</td>시<td>더스-시나이 메디컬 센터&nbsp;</td><td>ND30625</td><td>건강한 대조군 세포&nbsp;</td></tr><tr><td>돼지 장 점막에서 추출한 헤파린 나트륨염</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H3149</td><td></td></tr><tr><td>IMDM</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>12440053</td><td></td></tr><tr><td>인슐린, 인간</td><td>Roche</td><td>11376497001</td><td></td></tr><tr><td>LDN 193189&nbsp;</td><td>Stratech Scientific</td><td>S2618-SEL</td><td></td></tr><tr><td>백혈병 억제 인자 인간</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>L5283</td><td></td></tr><tr><td>Matrigel&nbsp; 성장 인자 감소(GFR) 기저막 매트릭스</td><td>Corning</td><td>354230</td><td></td></tr><tr><td>MEM 비필수 아미노산 용액(100x)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>11140050</td><td></td></tr><tr><td>마우스 FGF-염기성(FGF-2/bFGF) 재조합 단백질</td><td>Peprotech</td><td>450-33</td><td></td></tr><tr><td>Mr. Frosty 냉동 용기</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>5100-0001</td><td>cryobox</td></tr><tr><td>N-2 보충제(100x)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>17502048</td><td></td></tr><tr><td>N-아세틸-L-시스테인</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A9165</td><td></td></tr><tr><td>신경기저 배지</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>21103049</td><td></td></tr><tr><td>Nunc 바이오뱅킹 및 세포 배양 극저온 튜브</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>377267</td><td></td></tr><tr><td>Nunc 세포 배양 처리 6웰 접시</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>140675</td><td></td></tr><tr><td>파파인 해리 시스템</td><td>Worthington Biochemical Corporation</td><td>LK003150</td><td></td></tr><tr><td>페니실린-스트렙토마이신</td><td>ThermoFisher Scientific 15140122</td><td></td><td></td></tr><tr><td>재조합 인간 CNTF 단백질, CF&nbsp;</td><td>R& D Systems</td><td>257-NT-010</td><td></td></tr><tr><td>재조합 인간 EGF 단백질, CF</td><td>R& D Systems</td><td>236-EG-01M</td><td></td></tr><tr><td>RevitaCell 보충제(100x)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>A2644501</td><td></td></tr><tr><td>SB431542</td><td>Tocris</td><td>1614</td><td></td></tr><tr><td>Seahorse XFe24 분석기&nbsp;</td><td>애질런트 테크놀로지</td><td></td><td></td></tr>스 <tr><td>Seahorse XF 세포 미토 스트레스 테스트 키트</td><td>애질런트 테크놀로지</td>스 <td>103015-100</td><td></td></tr><tr><td>Seahorse XF 해당작용 스트레스 테스트 키트</td><td>애질런트 테크놀로지</td>스 <td>103020-100</td><td></td></tr><tr><td>조직 배양 접시-100cm</td><td>바이오스타 라이프텍</td><td>TCD000100</td><td></td></tr><tr><td>트랜스페린</td><td>로슈</td><td>10652202001</td><td></td></tr><tr><td>VWR 면도기 Blades</td><td>VWR International</td><td>55411-050</td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>항체와 관련상품&nbsp; <</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>strong>1차 항체</td><td>Company</td><td>카탈로그 번호</td><td>희석</td></tr><tr><td>Oct4 (C-10)</td><td>Santa Cruz Biotechnology</td><td>sc-5279</td><td>희석: 1:250 2차 항체: 염소 항-마우스 IgG, Alexa Fluor 568</td></tr><tr><td>Nanog</td><td>R & D Systems</td><td>AF1997</td><td>희석: 1:100 2차 항체: 당나귀 항-염소 IgG, Alexa Fluor 488</td></tr><tr><td>Vimentin</td><td>Abcam</td><td>Ab5733</td><td>희석: 1:500 2차 항체: 염소 항-닭 IgY, Alexa Fluor 488</td></tr><tr><td>NFIA</td><td>Abcam</td><td>Ab41851</td><td>희석: 1:500 2차 항체: 염소 항-토끼 IgG, Alexa Fluor 568</td></tr><tr><td>GFAP-cy3</td><td>Sigma</td><td>C9205</td><td>희석: 1:500 2차 항체: NA</td></tr><tr><td>GFAP</td><td>DAKO</td><td>Z0334</td><td>희석: 1:500 2차 항체: 염소 항토끼 IgG, Alexa Fluor 568</td></tr><tr><td>S100&beta;</td><td>DAKO</td><td>IR504</td><td>희석액: 1:500 2차 항체: 염소 항토끼 IgG, Alexa Fluor 488</td></tr><tr><td>항핵 항체, 클론 235-1</td><td>Merck Millipore</td><td>MAB1281</td><td>희석액: 1:1000 2차 항체: 염소 항-마우스 IgG1, Alexa Fluor 555</td></tr><tr><td>2차 항체&nbsp; <</td><td></td><td></td><td>strong>희석</td></tr><tr><td>염소 항마우스 IgG, Alexa Fluor 568</td><td>Thermo Fisher Scientific&nbsp;</td><td>A11004</td><td>1:1000</td></tr><tr><td>당나귀 항염소 IgG, Alexa Fluor 488</td><td>Thermo Fisher Scientific&nbsp;</td><td>A11055</td><td>1:1000</td></tr><tr><td>염소 안티 치킨 IgY, Alexa Fluor 488</td><td>Thermo Fisher Scientific&nbsp;</td><td>A11039</td><td>1:1000</td></tr><tr><td>염소 항토끼 IgG, Alexa Fluor 568</td><td>Thermo Fisher Scientific&nbsp;</td><td>A11011</td><td>1:1000</td></tr><tr><td>염소 항토끼 IgG, Alexa Fluor 488</td><td>Thermo Fisher Scientific&nbsp;</td><td>A11034</td><td>1:1000</td></tr><tr><td>염소 항마우스 IgG1, Alexa Fluor 555</td><td>Thermo Fisher Scientific&nbsp;</td><td>A21127</td><td>1:1000</td></tr></tbody></table>

fragile x messenger ribonucleoprotein이 결핍된 인간 유도 만능 줄기세포 유래 성상세포의 생성 및 특성화

Generation and Characterization of Human Induced Pluripotent Stem Cell-derived Astrocytes Lacking Fragile X Messenger Ribonucleoprotein

인간 유도 만능 줄기세포(hiPSC) 콜로니는 상업적으로 정의된 배지를 사용하여 유지하고 다능성 마커인 Oct4 및 Nanog에 대해 면역 염색했습니다(그림 1B). FXS 및 CTRL APC는 비멘틴 및 NFIA에 대해 면역 양성 세포의 유사한 고도로 농축된 비율을 보여주었습니다(그림 1C, D). 건강한 hiPSC와 FXS hiPSC에서 유래한 APC는 HOXB4(그림 1F)에 비해 FOXG1의 상당한 상향 조절을 보였으며, 이는 우세한 전뇌 정체성과 일치합니다. FXS 그룹에서 CTRL 성상세포에 비해 GFAP 발현 성상세포의 수가 크게 감소한 것을 관찰했는데, 이는 S100β 발현 성상세포의 수에 영향을 미치지 않았습니다(<strong clas...

Fragile X Messenger Ribonucleoprotein이 결핍된 인간 유도 만능 줄기세포 유래 성상세포의 생성 및 특성화

Fragile X syndrome (FXS), a leading inherited cause of autism spectrum disorder and intellectual disability, has been studied extensively using rodent ...

generation-characterization-human-induced-pluripotent-stem-cell

Research

연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

이 비디오는 인간 만능 줄기 세포의 전구 세포에서 천체권을 생성하는 방법을 보여줍니다. 그것은 성장 인자와 키나아제 억제제를 포함하는 영양 배지를 가진 줄기 세포의 성장과 증식을 포함합니다. 그런 다음 이 세포는 응집되어 성상세포로 분화하여 천체권을 형성합니다.

인간 만능 줄기 세포를 이용한 천체권 생성 및 유지

Astrocytes 정상 뇌 개발 및 기능, 및 중앙 신경계 수리를 위해 필수적인 기초 생물학적 과정에 참여하는 다양한 세포로 인정되었습니다. 여기 중추 신경계 세포의 주요 클래스의 생물학을 연구하는 순수 마우스 astrocyte 문화를 얻기 위해 빠른 절차를 제시한다.

마우스 두피 Astrocytes의 분리와 문화

성상 세포는 중추 신경계 (CNS)에서 가장 중요한 핵심 선수 중 하나이다. 여기서는 후 시험관 허혈 암수 신생아 새끼의 성상 세포 기능의 기초가되는 메카니즘을 연구하기 위해 거세 해마 성상 세포 배양 프로토콜의 구체적인 방법을보고하고있다.

마우스 해마 성상에서 섹스 차이점 후<em&gt; 인 체외</em&gt; 허혈

우리는 수정하고 흥분 대뇌 피질의 뉴런 (12)에 인간 유도 만능 줄기 세포 (hiPSCs)의 빠른 재현, 효율적인 분화를 설명하는 이전에 게시 된 프로토콜을 구현합니다. 특히, 우리의 수정은 네트워크 레벨에서의 전기 생리 학적 특성을 측정하기위한 마이크로 - 전극 어레이의 신경 세포 밀도 및 사용의 제어를 허용한다.

마이크로 전극 배열에 네트워크 활동을 측정하기위한 유도 다 능성 줄기 세포의 빠른 신경 세포의 분화

우리는 유도 된 신경 전구 세포 (iNPC)로 인간의 피부 유래 섬유 아세포와 유도 된 천체 세포 (iA)로 후속 분화를 재프로그래밍하는 프로토콜을 설명합니다. 이 방법은 대량으로 iNPC 및 iA의 빠르고 재현 가능한 생성으로 이어집니다.

섬유아세포에서 신경 전구세포로의 직접 변환을 이용한 신경질환 시험관 모델링 및 성상세포로의 분화

우리는 하류 분자 분석에 사용하기 위해 인간 성상 세포 집단을 신선하게 냉동 된 조직으로부터 풍부하게하고 분리하는 방법을 개발했습니다.

형광 활성화 핵 분류를 사용하여 신선 냉동 피질로부터 성인 인간 성상세포 집단의 분리

우리는 척수 인간 유도 만능 유래 성상 세포와 뉴런을 구별하는 방법과 전기 생리 학적 기록을위한 이들의 공동 배양을 설명합니다.

지역별 인간 만능줄기세포 유래 성상세포 및 뉴런을 이용한 ALS 모델링을 위한 전기생리학적 플랫폼 구축

시냅스 전달에 필요한 세포하 이벤트를 시각화하기 위해 두 가지 관련 방법이 설명된다. 이들 프로토콜은 시험관내 배양된 뉴런의 라이브 세포 이미징을 사용하여 시냅스 전 칼슘 유입 및 시냅스 소포막 융합의 역학의 실시간 모니터링을 가능하게 한다.

근위축성 측삭 경화증 모델에서 시냅스 기능의 실시간 형광 측정

여기서 우리는 출생 후 마우스의 중추 신경계의 다른 영역에서 유래 된 성상 세포의 고도로 농축 된 배양물을 생성하고 전사 인자의 강제 발현에 의해 기능적 뉴런으로 직접 전환시키는 상세한 프로토콜을 설명합니다.

마우스 성상세포의 분리 및 직접 뉴런 리프로그래밍

우리는 발달 생물학의 지식과 발표된 연구를 바탕으로 인간 배아 줄기 세포와 인간 유도 만능 줄기 세포 모두에서 A9 중뇌 도파민 뉴런을 효율적으로 생성할 수 있는 최적화된 프로토콜을 개발했으며, 이는 파킨슨병에 대한 질병 모델링 및 세포 대체 요법에 유용할 것입니다.

인간의 다 능성 줄기 세포에서 도파민 신경 세포의 분화를 감독

배우세요 인간 유도 만능 줄기세포에서 전뇌 특이 성상세포를 분화시키는 방법을. 이 프로토콜은 Fragile X 증후군의 대사 이상을 연구하고 신경발달 장애에서 신경교세포의 역할을 탐구하는 데 활용됩니다.

Fragile X Messenger Ribonucleoprotein이 결핍된 인간 유도 만능 줄기세포 유래 성상세포의 생성 및 특성화

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