Name: 생체 내 Drosophila melanogaster에 TurboID 기반 근접 라벨링 적용 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-13T13:15:00.000+00:00
Duration: 9 min 59 s
Description: 배우세요 TurboID 근접 라벨링을 이용해 Drosophila melanogaster 생식선 세포에서 zucchini 단백질 상호작용을 분석하는 방법을. 새로운 상호작용 단백질을 식별하여 분자 메커니즘을 규명할 수 있습니다.

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<ol><li>Kim, D. I., Roux, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Filling+the+void%3A+Proximity-based+labeling+of+proteins+in+living+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Trend+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Filling the void: Proximity-based labeling of proteins in living cells.</a> Trend Cell Biol. 26 (11), 804-817 (2016).</li>
<li>Mair, A., Xu, S. L., Branon, T. C., Ting, A. Y., Bergmann, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proximity+labeling+of+protein+complexes+and+cell-type-specific+organellar+proteomes+in+Arabidopsis+enabled+by+turboid%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Proximity labeling of protein complexes and cell-type-specific organellar proteomes in Arabidopsis enabled by turboid.</a> eLife. 8, e47864(2019).</li>
<li>Qi, Y., Katagiri, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Purification+of+low-abundance+Arabidopsis+plasma-membrane+protein+complexes+and+identification+of+candidate+components%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+J%22%5BJournal%5D)">Purification of low-abundance Arabidopsis plasma-membrane protein complexes and identification of candidate components.</a> Plant J. 57 (5), 932-944 (2009).</li>
<li>Branon, T. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+proximity+labeling+in+living+cells+and+organisms+with+turboid%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Efficient proximity labeling in living cells and organisms with turboid.</a> Nat Biotechnol. 36 (9), 880-887 (2018).</li>
<li>Rhee, H. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proteomic+mapping+of+mitochondria+in+living+cells+via+spatially+restricted+enzymatic+tagging%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Proteomic mapping of mitochondria in living cells via spatially restricted enzymatic tagging.</a> Science. 339 (6125), 1328-1331 (2013).</li>
<li>Roux, K. J., Kim, D. I., Raida, M., Burke, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+promiscuous+biotin+ligase+fusion+protein+identifies+proximal+and+interacting+proteins+in+mammalian+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">A promiscuous biotin ligase fusion protein identifies proximal and interacting proteins in mammalian cells.</a> J Cell Biol. 196 (6), 801-810 (2012).</li>
<li>Quantitative Proteomics. , 
 <a target="_blank" href="https://case.edu/medicine/nutrition/centers-and-collaborations/case-center-proteomics-and-bioinformatics/proteomics-and-small-molecule-mass-spectrometry-core/quantitative-proteomics">https://case.edu/medicine/nutrition/centers-and-collaborations/case-center-proteomics-and-bioinformatics/proteomics-and-small-molecule-mass-spectrometry-core/quantitative-proteomics</a> (2025).</li>
<li>Udeshi, N. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibodies+to+biotin+enable+large-scale+detection+of+biotinylation+sites+on+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Meth%22%5BJournal%5D)">Antibodies to biotin enable large-scale detection of biotinylation sites on proteins.</a> Nat Meth. 14 (12), 1167-1170 (2017).</li>
<li>Ummethum, H., Hamperl, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proximity+labeling+techniques+to+study+chromatin%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Genet%22%5BJournal%5D)">Proximity labeling techniques to study chromatin.</a> Front Genet. 11, 450(2020).</li>
<li>Han, S., Li, J., Ting, A. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proximity+labeling%3A+Spatially+resolved+proteomic+mapping+for+neurobiology%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Proximity labeling: Spatially resolved proteomic mapping for neurobiology.</a> Curr Opin Neurobiol. 50, 17-23 (2018).</li>
<li>Nishimasu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+and+function+of+zucchini+endoribonuclease+in+pirna+biogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Structure and function of zucchini endoribonuclease in pirna biogenesis.</a> Nature. 491 (7423), 284-287 (2012).</li>
<li>Zamudio, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DNA+methylation+restrains+transposons+from+adopting+a+chromatin+signature+permissive+for+meiotic+recombination%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Dev%22%5BJournal%5D)">DNA methylation restrains transposons from adopting a chromatin signature permissive for meiotic recombination.</a> Genes Dev. 29 (12), 1256-1270 (2015).</li>
<li>Cha, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapeutic+modulation+of+gsto+activity+rescues+fus-associated+neurotoxicity+via+deglutathionylation+in+als+disease+models%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Cell%22%5BJournal%5D)">Therapeutic modulation of gsto activity rescues fus-associated neurotoxicity via deglutathionylation in als disease models.</a> Dev Cell. 57 (6), 783-798.e8 (2022).</li>
<li>Pulver, S. R., Berni, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+fundamentals+of+flying%3A+Simple+and+inexpensive+strategies+for+employing+Drosophila+genetics+in+neuroscience+teaching+laboratories%5BTitle%5D)+AND+%22J+Undergrad+Neurosci+Educ%22%5BJournal%5D)">The fundamentals of flying: Simple and inexpensive strategies for employing Drosophila genetics in neuroscience teaching laboratories.</a> J Undergrad Neurosci Educ. 11 (1), A139-A148 (2012).</li>
<li>Feizy, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+identification+of+Drosophila+rhodopsin+interaction+partners+by+biotin+proximity+labeling%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">In vivo identification of Drosophila rhodopsin interaction partners by biotin proximity labeling.</a> Sci Rep. 14 (1), 1986(1986).</li>
<li>Zhang, B., Zhang, Y., Liu, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Highly+effective+proximate+labeling+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22G3%22%5BJournal%5D)">Highly effective proximate labeling in Drosophila.</a> G3. 11 (5), jkab077(2021).</li>
<li>Hudson, A. M., Cooley, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+for+studying+oogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Methods%22%5BJournal%5D)">Methods for studying oogenesis.</a> Methods. 68 (1), 207-217 (2014).</li>
<li>Waring, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphogenesis+of+the+eggshells+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Rev+Cytol%22%5BJournal%5D)">Morphogenesis of the eggshells in Drosophila.</a> Int Rev Cytol. 198, 67-108 (2000).</li>
<li>Weil, T. T., Parton, R. M., Davis, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparing+individual+drosophila+egg+chambers+for+live+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Preparing individual drosophila egg chambers for live imaging.</a> J Vis Exp. (60), e3679(2012).</li>
<li>Nguyen, T. T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+profiling+of+the+zucchini+proximal+proteome+in+the+Drosophila+ovary%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">In vivo profiling of the zucchini proximal proteome in the Drosophila ovary.</a> Development. 150 (4), dev201220(2023).</li>
<li>Ahmadi, S., Winter, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+poly%28ethylene+glycol%29+and+poly%28ethylene+glycol%29-based+detergents+using+peptide+search+engines%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Identification of poly(ethylene glycol) and poly(ethylene glycol)-based detergents using peptide search engines.</a> Anal Chem. 90 (11), 6594-6600 (2018).</li>
<li>Zada, A., Khan, I., Zhang, M., Cheng, Y., Hu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Airid-based+proximity+labeling+for+protein-protein+interaction+in+plants%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Airid-based proximity labeling for protein-protein interaction in plants.</a> J Vis Exp. (187), e64428(2022).</li>
<li>Fang, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lowering+sample+requirements+to+study+tyrosine+kinase+signaling+using+phosphoproteomics+with+the+tmt+calibrator+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Proteomics%22%5BJournal%5D)">Lowering sample requirements to study tyrosine kinase signaling using phosphoproteomics with the tmt calibrator approach.</a> Proteomics. 20 (24), 2000116(2020).</li>
<li>Park, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((One-stage+tip+method+for+tmt-based+proteomic+analysis+of+a+minimal+amount+of+cells%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Omega%22%5BJournal%5D)">One-stage tip method for tmt-based proteomic analysis of a minimal amount of cells.</a> ACS Omega. 8 (22), 19741-19751 (2023).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Turboid-based+proximity+labeling+for+in+planta+identification+of+protein-protein+interaction+networks%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Turboid-based proximity labeling for in planta identification of protein-protein interaction networks.</a> J Vis Exp. (159), e60728(2020).</li>
<li>Trinkle-Mulcahy, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+proximity-based+labeling+methods+for+interactome+mapping%5BTitle%5D)+AND+%22F1000Res%22%5BJournal%5D)">Recent advances in proximity-based labeling methods for interactome mapping.</a> F1000Res. 8, Faculty Rev-135 F1000(2019).</li>
<li>Wei, X. F., Li, S., Hu, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+turboid-based+proximity+labelling+approach+for+identifying+the+DNA-binding+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">A turboid-based proximity labelling approach for identifying the DNA-binding proteins.</a> STAR Protoc. 4 (1), 102139(2023).</li>
<li>Bosch, J. A., Chen, C. L., Perrimon, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proximity-dependent+labeling+methods+for+proteomic+profiling+in+living+cells%3A+An+update%5BTitle%5D)+AND+%22WIREs+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Proximity-dependent labeling methods for proteomic profiling in living cells: An update.</a> WIREs Dev Biol. 10 (1), e392(2021).</li>
<li>Rayaprolu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+type-specific+biotin+labeling+in+vivo+resolves+regional+neuronal+and+astrocyte+proteomic+differences+in+mouse+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Cell type-specific biotin labeling in vivo resolves regional neuronal and astrocyte proteomic differences in mouse brain.</a> Nat Commun. 13, 2927(2022).</li>
<li>Uckun, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+profiling+of+the+alk+proximitome+in+the+developing+Drosophila+brain%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">In vivo profiling of the alk proximitome in the developing Drosophila brain.</a> J Mol Biol. 433 (23), 167282(2021).</li>
<li>Xiong, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+proteomic+mapping+through+gfp-directed+proximity-dependent+biotin+labelling+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">In vivo proteomic mapping through gfp-directed proximity-dependent biotin labelling in zebrafish.</a> Elife. 10, e64631(2021).</li>
<li>Holzer, E., Rumpf-Kienzl, C., Falk, S., Dammermann, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modified+turboid+approach+identifies+tissue-specific+centriolar+components+in+C.+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Genet%22%5BJournal%5D)">A modified turboid approach identifies tissue-specific centriolar components in C. elegans.</a> PLoS Genet. 18 (4), e1010150(2022).</li>
<li>Artan, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interactome+analysis+of+Caenorhabditis+elegans+synapses+by+turboid-based+proximity+labeling%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Interactome analysis of Caenorhabditis elegans synapses by turboid-based proximity labeling.</a> J Biol Chem. 297 (3), 101094(2021).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Turboid-based+proximity+labeling+reveals+that+ubr7+is+a+regulator+of+n+nlr+immune+receptor-mediated+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Comm%22%5BJournal%5D)">Turboid-based proximity labeling reveals that ubr7 is a regulator of n nlr immune receptor-mediated immunity.</a> Nat Comm. 10 (1), 3252(2019).</li>
<li>Baumgartner, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Drosophila+zad+zinc+finger+protein+kipferl+guides+rhino+to+pirna+clusters%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">The Drosophila zad zinc finger protein kipferl guides rhino to pirna clusters.</a> eLife. 11, e80067(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>항체</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Goat 항마우스 IgG(H+L) 2차 항체, HRP</td><td>Invitrogen</td><td>31430</td><td>분석 등급, 감광성</td></tr><tr><td>염소 항토끼 IgG(H+L) 고교차 흡착 2차 항체, alexa fluor plus 488</td><td>Invitrogen</td><td>A32731</td><td>분석 등급, 감광성</td></tr><tr><td>염소 항토끼 IgG(H+L) 2차 항체, HRP</td><td>Invitrogen</td><td>31460</td><td>분석 등급, 감광</td></tr>성 <tr><td>HSP90 항체 (토끼)</td> <td>세포 신호 전달 기술</td><td>4874</td><td>다클론 항체</td></tr><tr><td>Pierce Streptavidin 단백질, HRP</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>21126</td><td>분석 등급</td></tr><tr><td>Streptavidin, Alexa Fluor 594 접합체</td><td>Invitrogen</td><td>S11227</td><td>감광성, 분석 등급</td></tr><tr><td>V5 태그 항체(마우스)</td><td>Invitrogen</td><td>R960-25</td><td>단클론 항체</td></tr><tr><td>V5 태그 항체(토끼)(D3H8Q)</td><td>세포 신호 전달 기술</td><td>13202</td><td>단클론 항체</td></tr><tr><td>플라이 라인</td><td>회사<</td><td>strong>카탈로그 번호</td><td>Comments/Description</td></tr><tr><td>pUASp Tom20 V5-TurboID/ TM3</td><td>한국 초파리 스톡 센터</td><td>2373-2</td><td>플라이 스톡</td></tr><tr><td>pUASp 호박 V5-TurboID/Cyo</td><td>한국 초파리 스톡 센터</td><td>2188</td><td>플라이 스톡</td></tr><tr><td>pUASP_attB_V5-TurboID-NES/Cyo</td><td>한국 초파리 스톡 센터</td><td>2635-4</td><td>플라이 스톡</td></tr><tr><td>w[*]; P{w[+mC]=matalpha4-GAL-VP16}V2H</td><td>Bloomington Drosophila Stock Center</td><td>7062</td><td>플라이 스톡</td></tr><tr><td>장비 및 소모품</td><td>회사</td><td>카탈로그 번호</td><td>Comments/Description</td></tr><tr><td>분석 저울</td><td>Mettler Toledo</td><td>ME204</td><td>0.1 mg 가독성</td></tr><tr><td>Amersham Protran 0.45 NC 니트로셀룰로오스 웨스턴 블로팅 멤브레인(300 mm &x; 4 m)</td><td>Cytiva</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>10600002-Axygen 1.7 mL MaxyClear Snaplock 미세 원심분리기 튜브</td><td>Corning</td><td>MCT-175-C</td><td>공중합체</td></tr><tr><td>BRAND&nbsp; 커버 유리(22mm x 22mm)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>BR470055</td><td>붕규산 유리</td></tr><tr><td>벌크 피펫 팁(10 & micro; L)</td> <td>Vertex</td><td>4110N00</td><td>프로필렌</td></tr><tr><td>벌크 피펫 팁(1000 & micro; L)</td> <td>Vertex</td><td>4330N00</td><td>프로필렌</td></tr><tr><td>벌크 피펫 팁(200 & micro; L)</td><td>Vertex</td><td>4230N00</td><td>프로필렌</td></tr><tr><td>세포 배양 플레이트(96웰)</td><td>SPL</td><td>300096</td><td>폴리스티렌, 평바닥형</td></tr><tr><td>원심분리기(1.5-2mL 튜브 크기 로터 포함)</td><td>Eppendorf</td><td>5424 R</td><td>고정각, 냉장</td></tr><tr><td>원심분리기(5mL 튜브 크기 로터 포함)</td><td>Eppendorf</td><td>5425 R</td><td>고정각, 냉장</td></tr><tr><td>화학 숟가락</td><td>-</td><td>- </td><td>스테인레스 스틸</td></tr><tr><td>ChemiDoc 이미징 시스템</td><td>Biorad</td><td>12003153</td><td>웨스턴 블롯 이미징 시스템</td></tr><tr><td>CO2 플라이 패드</td><td></td>-<td>-</td><td>마취 보드</td></tr><tr><td>CO2 탱크 및 조절기</td><td>-</td><td>-</td><td>고압 가스 및 현기증 주의</td></tr> 소형 <tr><td>인큐베이터</td><td>JSR JSGI-10T</td><td></td><td>높은 주의 온도</td></tr><tr><td>공초점 레이저 주사 현미경</td><td>Zeiss</td><td>LSM 710</td><td>강렬한 레이저 빔에 대한 주의</td></tr><tr><td>원뿔형 튜브(15mL)</td><td>SPL</td><td>50015</td><td>폴리프로필렌/고밀도 폴리에틸렌&nbsp;</td></tr><tr><td>원추형 튜브(50mL)</td> <td>SPL</td><td>50050</td><td>폴리프로필렌/고밀도 폴리에틸렌&nbsp;</td></tr><tr><td>디지털 저울</td><td>-</td><td></td><td>-</td></tr><tr><td>디지털 타이머</td><td>-</td><td>-</td><td>해</td></tr><tr><td>부 접시</td><td>-</td><td>-</td><td>실리콘</td></tr><tr><td>듀몽 #5SF 겸자&nbsp;</td><td>Fine Science Tools</td><td>11252-00</td><td>초미세 팁, 날카로운 물체에 대한 주의</td></tr><tr><td>DynaMag-2 자석</td><td>Invitrogen</td><td>12321D</td><td>1.5-2 mL 크기의 미세 원심분리기 튜브용</td></tr><tr><td>Fisherbrand&nbsp; Superfrost Plus 현미경 슬라이드 (25mm x 75mm)</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-550-15</td><td>날카로운 물체에 대한 주의</td></tr> 날<tr><td>리는 음식 병 (종이 플러그 포함)</td><td>Hansol Tech</td><td>FFB-21010-Fly</td><td></td></tr> <tr><td>식품 유리병 (면 캡 포함)</td><td>Hansol Tech</td><td>FFV-11010</td><td>-</td></tr><tr><td>집중 초음파 발생기</td><td>Covaris</td><td>M220</td> 초음파 젤 <td></td></tr><tr><td>나이프</td><td>Invitrogen</td> 주의<td>EI9010</td><td>플라스틱 손잡이가 있는 스테인리스 스틸</td></tr><tr><td>3MM Chr 압지(46cm & 57cm)</td><td>Cytiva</td><td>3030-917</td><td>Whatmann 종이</td></tr><tr><td>휴대용 균질화기 및 플라스틱 유봉</td><td>Kimble</td><td>749540-0000</td><td>무선 모터</td></tr><tr><td>히트 블록</td><td>미세 PCR</td><td>ALB6400</td><td>고온</td></tr><tr><td>보푸라기 없는 티슈</td> 주의 <td>Yuhan-Kimberly</td><td>41112</td><td>- </td></tr><tr><td>액체 질소</td><td>-</td><td>-</td>동<td>상 및 화상 주의</td></tr> 마이크로<tr><td>플레이트 분광 광도계</td><td>Agilent Technologies</td><td>Epoch</td><td>Monochromator 기반 광학 마이크로</td></tr><tr><td>파</td><td>-</td><td>-</td><td>고온</td></tr><tr><td>주의 milliTUBE 1 mL AFA 섬유</td><td>Covaris PN</td><td>520135</td><td>유리</td></tr><tr><td>미니 젤 탱크</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>A25977</td><td>고온</td></tr><tr><td>NuPAGE Bis-tris 미니 단백질 젤, 4&ndash; 12%, 1.0&ndash; 1.5mm, 10웰</td><td>Invitrogen</td><td>NP0323BOX</td><td>폴리아크릴아미드 함유, 독성 주의</td></tr><tr><td>NuPAGE Bis-tris 미니 단백질 젤, 4&ndash; 12%, 1.0&ndash; 1.5 mm, 15-well</td><td>Invitrogen</td><td>NP0321BOX</td><td>폴리아크릴아미드 함유, 독성 주의</td></tr><tr><td>페인트 브러시(&Oslash; 1.8 mm)</td><td>Hwa hong</td><td>791240-Pipetman</td><td></td></tr> <tr><td>L (P1000L)</td><td>Gilson</td><td>FA10006M</td><td>금속 이젝터가 있는 단일 채널 마이크로피펫</td></tr><tr><td>Pipetman L (P200L)</td><td>Gilson</td><td>FA10005M</td><td>금속 이젝터가 있는 단일 채널 마이크로피펫</td></tr><tr><td>Pipetman L ( P20L)</td><td>Gilson</td><td>FA10003M</td><td>금속 이젝터가 있는 단일 채널 마이크로피펫</td></tr><tr><td>Pipetman L (P2L)</td><td>Gilson</td><td>FA10001M</td><td>금속 이젝터가 있는 단일 채널 마이크로피펫</td></tr><tr><td>전원 공급 장치</td><td>주요 과학</td><td>MP-310</td><td>고전압 전기 주의</td></tr><tr><td>프로그래밍 가능한 회전자</td><td>Biosan</td><td>RS-24-Protein</td><td></td></tr> <tr><td>LoBind&nbsp; 튜브</td><td>Eppendorf</td><td>30108302</td><td>-</td></tr><tr><td>면도날</td><td>Dorco</td><td>304020</td><td>스테인레스 스틸, 날카로운 물체에 대한 주의</td></tr><tr><td>롤러</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td></tr><tr><td>혈청학적 피펫(10mL)</td><td>SPL</td><td>91010</td><td>폴리스티렌</td></tr><tr><td>혈청학적 피펫(25mL)</td><td>SPL</td><td>91025</td><td>폴리스티렌</td></tr><tr><td>혈청학적 피펫(5mL)</td><td>SPL</td><td>91005</td><td>폴리스티렌</td></tr><tr><td>혈청학적 피펫(50mL)</td><td>SPL</td><td>91050</td><td>폴리스티렌</td></tr><tr><td>스냅 캡 저보유 미세 원심분리기 튜브(1.5mL)</td><td>Thermo Scientific</td><td>3451PK</td><td>폴리프로필렌</td></tr><tr><td>스폰지 패드</td><td>Invitrogen</td><td>EI9052</td><td>-</td></tr><tr><td>실체 현미경</td><td>Zeiss</td><td>Stemi 508</td><td>-</td></tr><tr><td>실체 현미경&nbsp;</td><td>라이카</td><td></td><td></td></tr><tr><td>써모믹서&nbsp; C</td><td>Eppendorf</td><td>5382000015</td><td>1.5 및 5 mL 크기 블록 포함</td></tr><tr><td>핀셋</td><td>Aven Tools</td><td>18526</td><td>플라스틱, 플랫 팁</td></tr><tr><td>와류 믹서</td><td>Scientific Industries</td><td>SI-0236-XCell</td><td></td></tr> <tr><td>II 블롯 모듈</td><td>Invitrogen</td><td>EI9051</td><td>고온 주의</td></tr><tr><td>XCell&nbsp; SureLock 미니 셀</td><td>Invitrogen</td><td>EI0001</td><td>고온 주의</td></tr><tr><td>화학물질</strong</td><td>>Company</td><td>카탈로그 번호</td><td>Comments/Description</td></tr><tr><td>Acetone</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>650501</td><td>분석 등급</td></tr><tr><td>Acetonitrile</td><td>Supelco</td><td>1.00029.1000</td><td>LC-MS 등급, 흡입 독성 및 가연성</td></tr><tr><td>알부민 표준 앰플(0.9% 식염수 및 0.05% 아지드화나트륨에 2mg/mL의 소 혈청 알부민(BSA) 함유)Thermo</td> <td>Scientific</td><td>23209</td><td>Pierce BCA 단백질 분석 키트의 일부(Thermo Scientific, 23225)</td></tr><tr><td>알부민, 소 혈청</td><td>Bioshop</td><td>ALB001</td><td>분석 등급</td></tr><tr><td>중탄산암모늄</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>09830</td><td>분석 등급</td></tr><tr><td>비오틴&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>B4639</td><td>세포 및 조직 배양 등급</td></tr><tr><td>염화칼슘(CaCl2)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C5670</td><td>세포 배양 등급</td></tr><tr><td>선명도 웨스턴 ECL 기질</td><td>Biorad</td><td>1705060</td><td>분석 등급</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>MBD0015</td><td>감광성 분석 등급</td></tr><tr><td>Dithiothreitol(DTT)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>R0861</td><td>분석 등급</td></tr> 태<tr><td>아 소 혈청</td><td>Corning</td><td>35-015-CV</td><td>세포 배양 등급</td></tr><tr><td>포름산</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F0507</td><td>시약 등급, 흡입 독성 주의</td></tr><tr><td>Grace's 곤충 배지</td><td>Gibco</td><td>11595030</td><td>세포 배양 등급</td></tr><tr><td>인스턴트 건조 효모</td><td>브랜드 없음</td><td>N1019</td><td>-</td></tr><tr><td>Iodoacetamide</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>I1149</td><td>감광성, 분석 등급</td></tr><tr><td>메탄올</td><td>Carlo Erba</td><td>41484</td><td>분석 등급</td></tr><tr><td>매니큐어</td><td>-</td><td>-</td><td>투명형</td></tr><tr><td>Novex Tris-글리신 SDS 샘플 완충액(2X)</td><td>Invitrogen</td><td>LC2676</td><td>분석 등급</td></tr><tr><td>NuPAGE MOPS SDS 러닝 버퍼(20X)</td><td>Invitrogen</td><td>NP0001</td><td>분석 등급</td></tr><tr><td>PageRuler 사전 염색 단백질 사다리</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>26616</td><td>분석 등급</td></tr><tr><td>페닐메탄설포닐 플루오라이드&nbsp;</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>36978</td><td>분석 등급</td></tr><tr><td>인산염 완충 식염수</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P4417</td><td>분석 등급</td></tr><tr><td>Pierce 16% 포름알데히드(w/v)Thermo</td> <td>Fisher Scientific</td><td>28908</td><td>분석 등급, 감광성</td></tr><tr><td>Pierce BCA 단백질 분석 키트</td><td>Thermo Scientific</td><td>23225</td><td>분석 등급</td></tr><tr><td>Pierce BCA 시약 A(탄산나트륨, 중탄산나트륨, 비신코닌산 및 주석산나트륨을 0.1M 수산화나트륨에 함유)</td><td>Thermo Scientific</td><td>23228</td><td>Pierce BCA 단백질 분석 키트의 일부(Thermo Scientific, 23225)</td></tr><tr><td>Pierce BCA 시약 B(4% 황산구리 함유)</td><td>Thermo Scientific</td><td>1859078</td><td>Pierce BCA 단백질 분석 키트의 일부(Thermo Scientific, 23225)</td></tr><tr><td>프로피온산</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>402907</td><td>ACS 등급</td></tr><tr><td>프로테아제 억제제 칵테일 세트 III</td><td>Calbiochem</td><td>539134</td><td>세포 및 조직 배양 등급</td></tr><tr><td>SlowFade Gold 퇴색 방지 마운트 제</td><td>인 Invitrogen</td><td>S36936</td><td>감광</td></tr><tr><td>성 염화나트륨(NaCl)</td><td>Bioneer</td><td>C-9025</td><td>분석 등급</td></tr> 나<tr><td>트륨 데옥시콜레이트</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D6750</td><td>분석 등급</td></tr>도<tr><td>데실 황산나트륨</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>71736</td><td>분자 등급</td></tr><tr><td>수산화나트륨(NaOH)</td><td>Biosesang</td><td>SR2018-100-00</td><td>분석 등급</td></tr><tr><td>삼중 증류수</td><td>-</td><td>-</td><td>초순수(유형 1)</td></tr><tr><td>트리스 완충 식염수</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>94158</td><td>분석 등급</td></tr><tr><td>트리스-글리신 전달 완충액</td><td>Koma Biotech</td><td>K0341001</td><td>분석 등급</td></tr><tr><td>Tris-HCl, pH 8</td><td>Bioneer</td><td>C-9006</td><td>분석 등급</td></tr><tr><td>Triton x-100</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>93443</td><td>분자 등급</td></tr><tr><td>트립신</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>20233</td><td>세포 배양 등급</td></tr><tr><td>Tween 20</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P9416</td><td>분자 등급</td></tr><tr><td>요소</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>U5378</td><td>분자 & 세포 배양 등급</td></tr></tbody></table>

생체 내 drosophila melanogaster에 turboid 기반 근접 라벨링 적용

In Vivo Application of TurboID-based Proximity Labeling in Drosophila melanogaster

예시 출력은 그림 1, 그림 2, 그림 3, 그림 4에 나와 있으며, 이는 이전에 Nguyen et al.20에 의해 발표되었습니다. 그림 1은 초파리 난소에서 TurboID 기반 PL의 실험 절차를 보여줍니다. 먼저 Zuc와 TurboID를 결합한 구문(Zuc-V5-TurboID)이 생성되었습니다. 잘 알려져 있고 뚜렷한 하위 소기관 거주자, 즉 핵 수출 신호(NES) 및 트랜스로케이스 외부 미토콘드리아 막(Tom20)도 TurboID(NES-V5-TurboID 및 Tom20-V5-TurboID)와 융합되었습니다. NES-V5-TurboID는 세포...

생체 내 Drosophila melanogaster에 TurboID 기반 근접 라벨링 적용

Proximity labeling (PL) is a powerful method for mapping protein-protein interaction networks. Advances in labeling enzymes, especially TurboID, have ...

in-vivo-application-turboid-based-proximity-labeling-drosophila

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연구

JoVE Journal

Biology

생물학

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Mesoscopic 형광 tomography는 조직 sectioning 형광 현미경의 침투 제한없는 운영하고 있습니다. 이 기술은 다중 투영 조명 및 광자 수송 설명을 기반으로합니다. 우리의 morphogenesis의 인 - 생체내 전체 - 몸 3D 시각화 GFP - 표현에 날개 imaginal 디스크를...

에 대한 Mesoscopic 형광 Tomography 인 - 생체내</em개발> 이미징 Drosophila</em

Drosophila의 hemocytes은 개발 배아의 전체를 통해 분산. 이 프로토콜은 찬란 표시된 hemocytes와 배아를 사용하여 이러한 마이 그 레이션을 마운트 및 이미지하는 방법을 보여줍니다.

라이브 영상 Drosophila melanogaster 배아 Hemocyte 마이 그 레이션

이 프로토콜은 그대로의 anesthetization 및 이미징을위한 신뢰할 수있는 방법을...

서브 세포 해상도 손상 Drosophila의 애벌레의 생체내 이미징에서

우리는 중추 신경 시스템에 하나의 뉴런을 라벨에 대한 기술 (CNS)의...

의 중추 신경계에 단일 세포의 라벨<em&gt; Drosophila melanogaster</em

이 논문은 직접 번데기를 통해 이미지 세포 행동에 빠른 스캐닝 공 초점 현미경을 사용하는 방법을 보여줍니다. 그대로 번데기 경우를 떠남으로서,이 방법은 직접 공부하기 어려운 초파리 개발의 단계에서 관찰하고 역동적 인 세포 프로세스의 측정을 할 수 있습니다.

의 번데기 케이스를 통해서 영상<em&gt; 초파리</em

이 프로토콜은 살아있는 초파리 번데기 눈 신경 상피를 이미징하는 효율적인 방법을 제시합니다. 이 방법은 조직의 움직임과 불균일한 토폴로지를 보상하고, 여러 GFP 태그가 지정된 접합 단백질을 사용하여 세포 경계의 시각화를 향상시키며, 쉽게 조립할 수 있는 이미징 장비를 사용합니다.

의 라이브 영상 초파리 번데기 눈

교 잡 프로토콜 설명된 RNA 제자리에 전체 초파리 배아 또는 해 부 조직에서 RNA의 검출을 허용 한다. 96-잘 결정 접시와 tyramide 신호 증폭에 사용 하 여, 성적 감지할 수 있습니다 높은 해상도, 감도, 및 처리량, 그리고 상대적으로 저렴 한 비용.

높은 해상도 교 잡 형광 제자리에 초파리 태아와 Tyramide 신호 증폭을 사용 하 여 조직에서

여기에 우리가 설명 단일 분자 사진 활성화 지역화 현미경 라이브 초파리 melanogaster 의 모터 신경 맨끝에 실시 될 수 있습니다 하는 방법 3 유 충 탈피.

Vivo에서 단일 분자 초파리 연 접 모터 신경 맨끝에 추적

여기에서, 우리는 분자 비콘, 회전 디스크 공초점 현미경 및 오픈 소스 분석을 사용하여 살아있는 Drosophila melanogaster 계란 챔버에서 내인성 mRNA 인신 매매의 시각화, 탐지, 분석 및 추적을위한 프로토콜을 제시합니다. 소프트웨어.

라이브 드로소필라 멜라노가스터 에그 챔버에서 내인성 mRNA 를 시각화하고 추적

초기 초파리 배아에서는 많은 소기관이 운동성입니다. 원칙적으로, 그들은 특정 형광 프로브를 통해 실시간으로 이미징 될 수 있지만, 달걀 껍질은 배아에 직접 적용하는 것을 방지합니다. 이 프로토콜은 미세주입을 통해 이러한 프로브  를 도입한 다음 입자 이미지 속도측정법을 통해 벌크 소기관 움직임을 분석하는 방법을 설명합니다.

초파리 배아에서 지질 함유 소기관의 세포 골격 의존성 밀매 시각화

배우세요 TurboID 근접 라벨링을 이용해 Drosophila melanogaster 생식선 세포에서 zucchini 단백질 상호작용을 분석하는 방법을. 새로운 상호작용 단백질을 식별하여 분자 메커니즘을 규명할 수 있습니다.

생체 내 Drosophila melanogaster에 TurboID 기반 근접 라벨링 적용

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