Name: 세포 분류에 의한 폐 레티노이드 함유 세포의 분리 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-04-11T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 47 s
Description: 학습하세요 FACS를 이용해 폐 레티노이드 함유 세포를 분리하는 방법을. 비타민 A 대사와 폐 손상 보호 메커니즘 연구에 활용할 수 있습니다.

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<table><tbody><tr><td>10 mL 혈청학적 피펫</td><td>Avantor/VWR</td><td>76452-284</td><td></td></tr><tr><td>100 & micro; M 스트레이너&NBSP;</td><td>Greiner Bio-One</td><td>542000</td><td></td></tr><tr><td>15mL 팔콘 튜브</td><td>Corning</td><td>352099</td><td></td></tr><tr><td>40 & micro; M 스트레이너&NBSP;</td><td>Greiner Bio-One</td><td>542040</td><td></td></tr><tr><td>50mL 팔콘 튜브</td><td>Corning</td><td>352070</td><td></td></tr><tr><td>세포 배양 접시, 35mm 및 급성; 10mm</td><td>Corning</td><td>430165</td><td></td></tr><tr><td>세포 분류 배지</td><td>Gibco</td><td>A59688DJ</td><td></td></tr><tr><td>콜라게나제 유형 IV&nbsp;</td><td>워딩턴 생화학 공사</td><td>LS004188&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Cytek 오로라 세포 분류기 시스템&nbsp;</td><td>Cytek Biosciences</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dispase II</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D4693</td><td></td></tr><tr><td>DNase I</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>DN25</td><td></td></tr><tr><td>Falcon 브랜드 5ml 폴리프로필렌 원형 바닥 튜브, 12mm 및 급성; 75mm</td><td>Corning</td><td>352063</td><td></td></tr><tr><td>Falcon 브랜드 5ml 폴리스티렌 원형 바닥 튜브(셀 스트레이너 캡 포함), 12mm 및 급성, 75mm</td><td>Corning</td><td>352235</td><td></td></tr><tr><td>FlowJo 소프트웨어&nbsp;</td><td>Becton Dickinson</td><td></td><td>유세포 분석 소프트웨어</td></tr><tr><td>HBSS(Ca2+/Mg2+</td><td>Gibco</td><td>14925-092</td><td></td></tr><tr><td>포함) Ca2+/Mg2+</td><td>Gibco</td><td>14175-095</td><td></td></tr><tr><td>Nalgene Rapid-Flow 멸균 일회용 병탑 필터</td><td>ThermoFisher</td><td>595-3320</td><td></td></tr><tr><td>적혈구 용해 버퍼</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>R7757</td><td></td></tr><tr><td>SpectroFlo CS 소프트웨어&nbsp;</td><td>Cytek Biosciences</td><td>버전 1.3.0&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>외과 디자인 Royaltek 스테인레스 스틸 외과 메스 블레이드 Fisher</td><td>Scientific</td><td>22-079-683</td><td></td></tr><tr><td>SYTOX 녹색 죽은 세포 얼룩</td><td>Invitrogen</td><td>S34860</td><td></td></tr><tr><td>Tamoxifen</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T2859</td><td></td></tr></tbody></table>

세포 분류에 의한 폐 레티노이드 함유 세포의 분리

Isolation of Lung Retinoid-Containing Cells by Cell Sorting

폐 레티노이드 함유 세포의 분리 마우스 폐(Lrat+/+ 및 Lrat-/-에서) 마우스를 효소로 소화하고, 단세포 현탁액을 제조하고 위에서 설명한 절차에 따라 FACS를 실시했습니다. 세포 분류 및 데이터 수집은 100μm 노즐과 15psi 압력을 사용하여 SpectroFlo CS 소프트웨어 버전 1.3.0으로 작동하는 Cytek Aurora™ Cell Sorter System에서 수행되었습니다. 먼저, 전방 산란(전방 산란 높이/FSC-H 대 전방 산란 영역/FSC-A)에 대한 플롯을 적용하여 단일 세포(단일체)를 선택하고 게이트한 다음, 측면 산란 및 SYTOX Green 염색을 사용하여 사세포 변별을 수행했습니다(그림 2). 마지막으로, 레티노이드 함유 세포의 표적 집단을 분류하기 위해 ...

Retinoids (vitamin A and its metabolites) are an essential lipid component of the alveolar microenvironment, and cell-type specific retinoid metabolism is ...

isolation-of-lung-retinoid-containing-cells-by-cell-sorting

Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

마우스 폐 돌기 세포의 고도 정화 준비가 설명되어 있습니다. 구체적인 중점이 종래의 돌기 세포 집합의 고립에 제공됩니다.

마우스 폐에 돌기 세포의 분리

이 비디오는 유세포 분석을 사용하여 쥐의 원발성 망막 신경절 세포(RGC)를 분리하는 절차를 보여줍니다. 이 방법은 신경퇴행성 질환에서 기능적 망막 신경절 세포의 상실로 인한 시력의 주요 저하를 더 잘 이해하는 것을 목표로 망막 신경절 세포에 대한 향후 연구를 가능하게 합니다.

형광 활성화 세포 분류를 사용한 쥐 망막 신경절 세포 분리

여기에서는 말초 Vδ1+CD4+ T 세포의 희소한 T 세포 개체, 즉 최근에 보여준 바와 같이 흉선 외 αβ T 세포 전구 세포의 분리 및 복제를 위한 최적화된 프로토콜을 제공합니다. 이 기술을 사용하면 체외 배양에서 이러한 세포를 정량적으로 분리, 복제 및 효율적으로 확장할 수 있습니다.

분리 및<em&gt; 전의 VIVO</emVδ1의&gt; 문화<sup&gt; +</sup&gt; CD4<sup&gt; +</sup&gt; γδ T 세포, Extrathymic αβT 세포 선조

이 프로토콜은 소화 효소, 밀도 구배 분리, 수지 밀착성 및 CD146 + 자성 비드의 선택을 이용하여, 래트에서 일차 폐 상주 간엽 기질 세포를 얻기위한 분리 기술을 설명한다.

CD146의 분리<sup&gt; +</sup쥐 폐에서&gt; 주민 폐 중간 엽 기질 세포

간 손상은 이종 세포 인구를 나타내는 전구 세포의 확장을 동반한다. 이 세포 구획의 소설 분류는 여러 부분 집합의 구별이 가능합니다. 여기에 설명 된 방법은 추가 분석 및 분석에 사용될 수있는 다양한 서브 세트의 고순도 분리 계측법 흐름을 도시한다.

분리 및 소설 표면 마커 조합에 의해 확인 된 간 전구 부분 집합의 농축

수백만 명의 사람들이 망막 퇴행성 질환으로 고통 받아 돌이킬 수없는 실명을 경험합니다. 이 질병의 많은 공통점은 망막 신경절 세포 (RGCs)의 소실이다. 이 상세한 프로토콜은 유동 세포 계측법을 이용한 양성 및 음성 선택에 의한 1 차 쥐 RGC의 분리를 기술합니다.

유동 세포 계측법에 의한 일차 망막 신경절 세포 (RGCs)의 분리

이 기사는 인간 폐의 근위 및 원위 영역으로부터 생존 가능한 상피 세포의 농축을 허용하는 조직 해리 및 세포 분획화 접근법에 대한 상세한 방법론을 제공한다. 본원에서 이러한 접근법은 3D 오가노이드 배양 모델의 사용을 통한 폐 상피 전구 세포의 기능적 분석에 적용된다.

오가노이드 배양을 위한 인간 폐 상피 전구 세포의 분리 및 농축

이 프로토콜은 세포 수율, 순도 및 생존성에 최적화된 뮤린 출생후 망막 내피 세포의 단리를 위한 방법을 설명한다. 이 세포는 차세대 시퀀싱 접근법에 적합합니다.

차세대 염기서열분석을 위한 뮤린 망막 내피 세포의 분리

어렵지만 폐 내피 세포의 분리는 폐 염증 연구에 필수적입니다. 본 프로토콜은 대혈관 및 미세혈관 내피 세포의 고수율, 고순도 단리를 위한 절차를 설명한다.

Microvascular and Macrovascular Endothelial Cell Isolation and Purification from Lung-Derived Samples(폐 유래 샘플에서 미세혈관 및 대혈관 내피 세포 분리 및 정제)

여기에 제시된 것은 장기 바이오뱅킹을 위한 원발성 기관지 상피 세포의 분리 및 확장과 공기-액체 계면에서 배양에 의한 분화된 상피 세포의 생성을 위한 재현 가능하고 저렴하며 강력한 방법입니다.

바이오뱅킹을 위해 절제된 폐 조직에서 기관지 상피 세포를 분리하고 잘 분화된 공기-액체 계면 배양을 확립합니다.

이 프로토콜은 인플루엔자 감염 후 안정적인 상태에서 마우스 폐에서 살아있는 면역 및 비면역 집단을 격리하는 방법을 자세히 설명합니다. 또한 상피 및 골수성 세포 부분 집합을 식별하기 위한 게이팅 전략을 제공합니다.

Isolation of Live Myeloid and Epithelial Cell Populations from the Mouse Lung(쥐 폐에서 살아있는 골수성 및 상피 세포 집단의 분리)

학습하세요 FACS를 이용해 폐 레티노이드 함유 세포를 분리하는 방법을. 비타민 A 대사와 폐 손상 보호 메커니즘 연구에 활용할 수 있습니다.

세포 분류에 의한 폐 레티노이드 함유 세포의 분리

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