경구용 β-아미노프로피오니트릴 및 피하 안지오텐신 II 주입에 의해 유도된 흉부 대동맥 박리의 쥐 모델

본 연구는 BAPN과 안지오텐신 II 유도를 통해 흉부 대동맥 박리술(TAD)의 마우스 모델을 확립하여 TAD 병인 또는 치료 접근법을 탐색하기 위한 귀중한 도구를 제공하는 상세한 절차를 제공합니다. BAPN-안지오텐신 II 조합은 높은 TAD 발생률을 달성하고 인간 TAD에서 관찰되는 것과 유사한 병태생리학적 특성을 복제하는 쥐 TAD 모델을 확립하는 방법을 제공합니다. 앞으로 우리 연구팀은 심혈관 병인을 설명하기 위해 임상 연구와 기초 연구를 통합하고 기계론적 통찰력과 중개 혁신을 통해 새로운 치료 전략의 발견을 우선시할 것입니다.

[발표자] 각 마우스의 무게를 측정하고 최대 체중을 기록하여 실험에 필요한 안지오텐신 II 질량을 계산합니다. 계산 템플릿을 사용하여 최대 체중을 기준으로 각 마우스의 안지오텐신 II 질량을 결정합니다. 그런 다음 마우스당 130마이크로리터의 안지오텐신 II 용액을 준비하는 데 필요한 안지오텐신 II의 총 질량을 계산합니다. 제공된 템플릿을 사용하여 실험에 필요한 안지오텐신 II 용액과 식염수의 충전량을 결정합니다. 분석 저울을 사용하여 멸균 마이크로튜브에서 계산된 양의 안지오텐신 II의 무게를 측정합니다. 계산된 부피의 생리 식염수를 마이크로튜브에 추가합니다. 와류 혼합기를 사용하여 눈에 보이는 입자가 남지 않을 때까지 분말을 완전히 녹입니다. 분석 저울을 사용하여 펌프 본체와 유량 조절기를 포함한 각 삼투압 펌프의 무게를 측정합니다. 새로 개봉한 1밀리리터 멸균 주사기에 충전 튜브를 부착하고 준비된 안지오텐신 II 용액을 조심스럽게 흡인합니다. 충전 튜브를 위쪽 위치에 놓고 주사기에서 기포를 제거합니다. 튜브가 더 이상 삽입되지 않을 때까지 충전 튜브의 끝을 삼투압 펌프의 상단 구멍에 부드럽게 삽입합니다. 펌프를 똑바로 세우고 출구에 안지오텐신 II 용액이 나타날 때까지 주사기 플런저를 천천히 누릅니다. 그런 다음 충전 튜브를 조심스럽게 멈추고 제거합니다. 그런 다음 유량 감속기와 펌프 상단 사이에 틈이 남지 않을 때까지 조심스럽고 천천히 유량 감속기를 펌프 개구부에 삽입합니다. 분석 저울을 사용하여 부하된 펌프의 무게를 측정하고 값을 기록합니다. 채워진 펌프를 섭씨 37도의 멸균 식염수에 넣고 중재자 머리가 위를 향하도록 하여 이식 전 최소 6시간 동안 놓습니다. 마우스를 수술 표면에 엎드린 자세로 놓습니다. 메스를 사용하여 피부에 1cm 가로 절개를 조심스럽게 합니다. 한 쌍의 곡선 겸자를 사용하여 절단 가장자리를 잡고 다른 한 쌍의 겸자를 사용하여 피하 조직을 무딘 듯이 해부하여 삼투압 펌프를 위한 주머니를 만듭니다. 유량 조절기 헤드가 마우스의 꼬리 끝을 향하도록 채워진 펌프를 포켓에 삽입합니다. 6-0 비흡수성 봉합사를 사용하여 절치 가장자리를 깔끔하게 정렬하고 피부를 닫습니다. 이 그림은 모든 실험군에서 대동맥 박리 및 파열의 발생률을 보여줍니다. 대동맥 박리는 BAPN과 안지오텐신 II 그룹의 마우스 100%에서 발생했으며, 35%는 파열을 경험하여 BAPN 또는 BAPN과 식염수 그룹에서 관찰된 55% 또는 60% 발생률을 능가하는 반면, 대조군에서는 박리 또는 파열이 발생하지 않았습니다. 총 대동맥 형태는 대조군의 대동맥과 비교하여 BAPN, BAPN과 식염수 및 BAPN과 안지오텐신 II 그룹에서 점진적인 변형을 보였습니다. 최대 흉부 대동맥 직경은 대조군에 비해 모든 BAPN 치료 그룹에서 유의하게 더 컸으며 치료군 간에 유의미한 차이는 없었습니다. 헤마톡실린 및 에오신 염색은 대조군에서 얇고 균일한 대동맥벽을 나타낸 반면, 모든 BAPN 치료 그룹은 비후와 염증성 침윤을 보였습니다. Elastin Van Gieson 염색은 대조군에서 온전한 탄성 섬유를 입증하고 모든 BAPN 치료 그룹에서 거짓 내강 형성을 동반한 점진적인 섬유 단편화를 보여주었습니다.