Name: Synthesis of Compound Giant Unilamellar Vesicles: A Biomimetic Model of Nucleate Cells(복합 거대 단층소포의 합성: 핵세포의 생체 모방 모델) (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-03T13:10:00.000+00:00
Duration: 10 min 10 s
Description: 배우세요 복합 거대 단층소포(cGUV) 합성법을 통해 핵세포 생체 모방 모델을 구축하는 방법을. 전기형성과 삼투압 충격 기술을 활용하여 이중막 소포 구조를 만들고 세포 생물물리학 연구에 활용합니다.

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<ol><li>Dimova, R. Chapter one - Giant vesicles: A biomimetic tool for membrane characterization. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDimova%2C+R+%22Advances+in+planar+lipid+bilayers+and+liposomes%22">Advances in planar lipid bilayers and liposomes</a>. Iglic, A. 16, 1-50 (2012).</li>
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<li>Kurihara, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Self-reproduction+of+supramolecular+giant+vesicles+combined+with+the+amplification+of+encapsulated+DNA%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Chem%22%5BJournal%5D)">Self-reproduction of supramolecular giant vesicles combined with the amplification of encapsulated DNA.</a> Nat Chem. 3 (10), 775-781 (2011).</li>
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<li>Riske, K. A., Dimova, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electro-deformation+and+poration+of+giant+vesicles+viewed+with+high+temporal+resolution%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+J%22%5BJournal%5D)">Electro-deformation and poration of giant vesicles viewed with high temporal resolution.</a> Biophys J. 88 (2), 1143-1155 (2005).</li>
<li>Maoyafikuddin, M., Kulkarni, S. V., Thaokar, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthesis+method+and+high+salt+concentration+can+affect+electrodeformation+of+GUVs+under+strong+pulsed+DC+fields%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Omega%22%5BJournal%5D)">Synthesis method and high salt concentration can affect electrodeformation of GUVs under strong pulsed DC fields.</a> ACS Omega. 10 (7), 6427-6436 (2025).</li>
<li>Behera, N., Thaokar, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Numerical+modeling+of+giant+pore+formation+in+vesicles+under+msPEF-induced+electroporation%3A+Role+of+charging+time+and+waveform%5BTitle%5D)+AND+%22Bioelectrochemistry%22%5BJournal%5D)">Numerical modeling of giant pore formation in vesicles under msPEF-induced electroporation: Role of charging time and waveform.</a> Bioelectrochemistry. 164, 108926(2025).</li>
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<li>Corvera, E., Mouritsen, O. G., Singer, M. A., Zuckermann, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+permeability+and+the+effect+of+acyl-chain+length+for+phospholipid+bilayers+containing+cholesterol%3A+theory+and+experiment%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta%22%5BJournal%5D)">The permeability and the effect of acyl-chain length for phospholipid bilayers containing cholesterol: theory and experiment.</a> Biochim Biophys Acta. 1107 (2), 261-270 (1992).</li>
<li>Kamiya, K., Osaki, T., Takeuchi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Formation+of+vesicles-in-a-vesicle+with+asymmetric+lipid+components+using+a+pulsed-jet+flow+method%5BTitle%5D)+AND+%22RSC+Advances%22%5BJournal%5D)">Formation of vesicles-in-a-vesicle with asymmetric lipid components using a pulsed-jet flow method.</a> RSC Advances. 9 (52), 30071-30075 (2019).</li>
<li>Doğan Güzel, F., Kaur, J., Zendeh, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cheap+portable+electroformed+giant+unilamellar+vesicles+preparation+kit%5BTitle%5D)+AND+%22J+Liposome+Res%22%5BJournal%5D)">Cheap portable electroformed giant unilamellar vesicles preparation kit.</a> J Liposome Res. 33 (2), 183-188 (2023).</li>
<li>Kaur, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On-chip+label-free+impedance-based+detection+of+antibiotic+permeation%5BTitle%5D)+AND+%22IET+Nanobiotechnol%22%5BJournal%5D)">On-chip label-free impedance-based detection of antibiotic permeation.</a> IET Nanobiotechnol. 15 (1), 100-106 (2021).</li>
</ol>

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<table><tbody><tr><td>콜레스테롤 (시그마 등급, 99%)</td><td>Avanti Polar Lipids, Inc.</td><td>C8667</td><td>sGUV 합성용</td></tr><tr><td>클로로포름</td><td>Merck Life Science Pvt. Ltd.</td><td>DA2P711602</td><td>지질 스톡 용액 준비용 용매</td></tr><tr><td>DMPC</td><td>Avanti Polar Lipids, Inc.</td><td>850345C</td><td>sGUV 합성용</td></tr><tr><td>에탄올</td><td>Hayman</td><td>F204325</td><td>ITO 슬라이드 세척용</td></tr><tr><td>FITC-DEXTRAN (4 Kda-MW)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>466994</td><td>cGUV 내부 소낭의 봉입용</td></tr><tr><td>글루코스</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G-7021</td><td>글루코스 용액 준비용, 자당 용액에 현탁된 sGUV에 삼투압 충격 주기 위해 사용</td></tr><tr><td>Liss Rhod PE</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>810150C-1MG</td><td>지질 분자 염색용</td></tr><tr><td>나일 레드</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>72485</td><td>cGUV 및 sGUV 막 염색용</td></tr><tr><td>소듐 클로라이드 (NaCl)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>1936060521</td><td>소금 스톡 용액 준비용, cGUV 칸막이의 전도도 변화</td></tr><tr><td>자당</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S9378</td><td>전기형성 챔버의 수화 매체로서의 자당 용액</td></tr><tr><td>장비</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>카비틀리 슬라이드</td><td>Blue star</td><td></td><td>현미경 관찰용 cGUV 현탁액 배치</td></tr><tr><td>cMOS pco.edge 4.2 카메라</td><td>Excelitas</td><td>61009524</td><td>형광 단색 이미지 및 DIC 이미징용</td></tr><tr><td>커버 슬립 (22 x 60 mm)</td><td>Blue star</td><td></td><td>캐비티 슬라이드 덮기용</td></tr><tr><td>Eppendrof 전기융합 챔버</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td>sGUV 현탁액을 챔버에 넣고 삼투압 및 현미경 관찰, 다른 간단한 챔버도 사용할 수 있음</td></tr><tr><td>함수 발생기 (이중 채널)</td><td>Tektronix</td><td>AFG3022C</td><td>전기형성 챔버에 AC 전기장을 전달하는 데 사용되는 함수 발생기</td></tr><tr><td>인큐베이터</td><td>로컬 사용자 정의</td><td></td><td>전기형성 챔버를 40°에 배치</td></tr><tr><td>ITO 슬라이드</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>576352-10PAK</td><td>전기형성 방법에 사용되는 ITO 슬라이드</td></tr><tr><td>Nikon Eclipse 거꾸로 현미경</td><td>Nikon</td><td>TE2000-U</td><td>sGUV 및 cGUV 시각화용</td></tr><tr><td>실리콘 시트 (두께 3mm)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>GF49463141</td><td>전기형성 챔버의 간격용</td></tr><tr><td>주사기 (2mL)</td><td>Becton Dickinson India Pvt Ltd.</td><td>300844</td><td>수화 매체 주입 및 전기형성 챔버에서 sGUV 수확용</td></tr><tr><td>Zeiss 공초점 현미경 설치</td><td>IIT 봄베이 중앙 시설</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>
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synthesis of compound giant unilamellar vesicles: a biomimetic model of nucleate cells(복합 거대 단층소포의 합성: 핵세포의 생체 모방 모델)

Synthesis of Compound Giant Unilamellar Vesicles: A Biomimetic Model of Nucleate Cells

Synthesis of Compound Giant Unilamellar Vesicles: A Biomimetic Model of Nucleate Cells(복합 거대 단층소포의 합성: 핵세포의 생체 모방 모델)

A simple Giant unilamellar vesicle (sGUV) is a micron-sized spherical vesicle, which is composed of a lipid bilayer that encloses an aqueous solution ...

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연구

JoVE Journal

Bioengineering

생명공학

물방울 인터페이스 지질 이중층에 대한 미세 유체 분사는 막 비대칭, 횡단 단백질의 결합, 재료의 캡슐화 제어와 소포를 생성 할 수있는 신뢰할 수있는 방법을 제공합니다. 이 기술은 구획화 된 생체 분자가 소망되는 생물학적 시스템의 다양한 연구에 적용 할 수있다.

미세 유체 제트를 사용하여 지질 이중층 소포 세대

전기 주조, 젤 이용한 붓기 - 거대한 단일 층 소포 (GUVs)에 횡단 단백질, KvAP의 재구성은 두 탈수 수분 보충 방법에 대한 설명된다. 두 방법 모두에서, 상기 단백질을 포함하는 작은 소포 단층이어서 형광 현미경 및 패치 클램프 전기 생리학에 의해 연구 할 수 GUVs을 형성하기 위하여 함께 융합된다.

횡단 단백질의 재구성, 현미경 및 패치 클램프 연구 거대한 단일 층 소포에 전압 게이트 이온 채널, KvAP,

고도로 채워진 마이크로미터 크기의 구성 요소를 포함하는 거대한 소포는 유용한 세포 모델입니다. 유중수(water-in-oil) 에멀젼 원심분리 방법은 캡슐화된 물질로 거대한 소포를 준비하기 위한 간단하고 강력한 도구입니다.

유 중수 에멀젼의 원심 분리에 의해 거 소포 캡슐화 미소 구의 제조

우리는 지역화 된 칼슘 이온 기울기를 사용 하 여 소포의 비접촉 식 micromanipulation 위한 기술 제시. 주변에 거 대 한 지질 기 칼슘 이온 솔루션의 microinjection는 막 관 돌출의 생산의 결과로 지질 막 개장 하기 위하여 이용 된다.

막 거 대 한 소포 지역화 된 칼슘 이온 기울기에 대 한 응답에서의 개장

우리는 거대한 소포 (GV) 안쪽에 박테리아의 단세포 배양을 보여줍니다. 세균 세포를 함유하는 GV는 액적 전달 방법에 의해 제조되었고, 세균 성장의 직접적인 관찰을 위해 유리 기판 위에 지지막 에 고정시켰다. 이 접근은 또한 그밖 세포에 적응할 수 있습니다.

거대한 소포 내부의 단세포 수준에서 세균 세포 배양

이 프로토콜의 목표는 마이크로파이펫 흡인에 의해 거대 소포의 막 기계적 특성을 안정적으로 측정하는 것입니다.

마이크로 파이펫 포부로 전기 형성 및 기계적 특성 측정에 의한 거대한 Unilamellar 하이브리드 소포의 Obtention

이 기사에서는 캡슐화 된 세포 골격 단백질로 거대한 unilamellar 소포를 신속하게 생산하기위한 간단한 방법을 소개합니다. 이 방법은 감금 및 세포골격-막 상호작용에서 세포골격 구조의 상향식 재구성에 유용한 것으로 입증된다.

거대한 Unilamellar 소포 안에 재구성 된 세포 골격의 신속한 캡슐화

이 원고에서는 F-actin 세포 골격을 거대한 unilamellar 지질 소포 (리포솜이라고도 함)로 캡슐화하는 실험 기술과 리포솜 막의 내부 전단지에 피질 생모방 F- 액틴 층을 형성하는 방법을 보여줍니다.

체외 거대한 Unilamellar 소포 내부의 Actin Cytoskeleton 재구성

이 초보자 가이드는 액적 전달 방법을 통해 GIV(Giant Unilamellar Vesicles)를 준비하기 위한 일반적인 프로토콜을 제시하고, 중요한 단계를 논의하고, 합성 생물학 및 마이크로로보틱스를 포함한 다양한 응용 분야에 필요한 가능한 조정에 도움이 되는 통찰력을 제공합니다.

액적 전달 방법을 사용하여 거대한 단층 소포를 안정적으로 준비

이 기사에서는 상으로 분리된 거대 소포 내부의 세포골격 네트워크의 간단한 원팟 재구성을 소개합니다. 이 방법은 일반화되어 광범위한 생체 분자의 캡슐화 또는 제한에 적용될 수 있습니다.

시험관 내 상분리된 거대 단일층 소포(GUV) 내부 세포골격 네트워크의 재구성

배우세요 복합 거대 단층소포(cGUV) 합성법을 통해 핵세포 생체 모방 모델을 구축하는 방법을. 전기형성과 삼투압 충격 기술을 활용하여 이중막 소포 구조를 만들고 세포 생물물리학 연구에 활용합니다.

Synthesis of Compound Giant Unilamellar Vesicles: A Biomimetic Model of Nucleate Cells(복합 거대 단층소포의 합성: 핵세포의 생체 모방 모델)

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