Name: 라이트 시트 형광 현미경을 이용한 재관류 급성 심근경색증의 심장 손상 및 면역 반응의 동시 3D 분석 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-09-26T12:30:00.000+00:00
Duration: 6 min 38 s
Description: 배우세요 라이트 시트 형광 현미경을 이용해 심근경색 후 심장 손상과 면역 반응을 동시에 3D 분석하는 방법을. 마우스 모델로 손상 부위와 면역세포 상호작용을 정량화하여 심장 기능 회복 연구에 활용합니다.

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<ol><li>Whelan, R. S., Kaplinskiy, V., Kitsis, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+death+in+the+pathogenesis+of+heart+disease%3A+mechanisms+and+significance%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Physiol%22%5BJournal%5D)">Cell death in the pathogenesis of heart disease: mechanisms and significance.</a> Annu Rev Physiol. 72, 19-44 (2010).</li>
<li>Frangogiannis, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammation+in+cardiac+injury%2C+repair+and+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Inflammation in cardiac injury, repair and regeneration.</a> Curr Opin Cardiol. 30 (3), 240-245 (2015).</li>
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<li>Koch, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Capillary+endothelia+and+cardiomyocytes+differ+in+vulnerability+to+ischemia%2Freperfusion+during+clinical+heart+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Cardiothorac+Surg%22%5BJournal%5D)">Capillary endothelia and cardiomyocytes differ in vulnerability to ischemia/reperfusion during clinical heart transplantation.</a> Eur J Cardiothorac Surg. 20 (5), 996-1001 (2001).</li>
<li>Singhal, A. K., Symons, J. D., Boudina, S., Jaishy, B., Shiu, Y. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+endothelial+cells+in+myocardial+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Vasc+Dis+Prev%22%5BJournal%5D)">Role of endothelial cells in myocardial ischemia-reperfusion injury.</a> Vasc Dis Prev. 7, 1-14 (2010).</li>
<li>Robbers, L. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnetic+resonance+imaging-defined+areas+of+microvascular+obstruction+after+acute+myocardial+infarction+represent+microvascular+destruction+and+haemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Heart+J%22%5BJournal%5D)">Magnetic resonance imaging-defined areas of microvascular obstruction after acute myocardial infarction represent microvascular destruction and haemorrhage.</a> Eur Heart J. 34 (30), 2346-2353 (2013).</li>
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<li>Merz, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contemporaneous+3D+characterization+of+acute+and+chronic+myocardial+I%2FR+injury+and+response%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Contemporaneous 3D characterization of acute and chronic myocardial I/R injury and response.</a> Nat Commun. 10 (1), 2312(2019).</li>
<li>Buscemi, L., Price, M., Bezzi, P., Hirt, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatio-temporal+overview+of+neuroinflammation+in+an+experimental+mouse+stroke+model%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Spatio-temporal overview of neuroinflammation in an experimental mouse stroke model.</a> Sci Rep. 9 (1), 507(2019).</li>
<li>Zhong, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tubular+epithelial+cells-derived+small+extracellular+vesicle-VEGF-A+promotes+peritubular+capillary+repair+in+ischemic+kidney+injury%5BTitle%5D)+AND+%22NPJ+Regen+Med%22%5BJournal%5D)">Tubular epithelial cells-derived small extracellular vesicle-VEGF-A promotes peritubular capillary repair in ischemic kidney injury.</a> NPJ Regen Med. 7 (1), 73(2022).</li>
<li>Redfors, B., Shao, Y., Omerovic, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+infarct+size+and+area+at+risk+assessment+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Clin+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Myocardial infarct size and area at risk assessment in mice.</a> Exp Clin Cardiol. 17 (4), 268-272 (2012).</li>
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<li>Botker, H. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Practical+guidelines+for+rigor+and+reproducibility+in+preclinical+and+clinical+studies+on+cardioprotection%5BTitle%5D)+AND+%22Basic+Res+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Practical guidelines for rigor and reproducibility in preclinical and clinical studies on cardioprotection.</a> Basic Res Cardiol. 113 (5), 39(2018).</li>
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<li>Haj-Yehia, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD47+blockade+enhances+phagocytosis+of+cardiac+cell+debris+by+neutrophils%5BTitle%5D)+AND+%22IJC+Heart+Vasculature%22%5BJournal%5D)">CD47 blockade enhances phagocytosis of cardiac cell debris by neutrophils.</a> IJC Heart Vasculature. 48, 101269(2023).</li>
<li>Totzeck, M., Hendgen-Cotta, U. B., French, B. A., Rassaf, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+practical+approach+to+remote+ischemic+preconditioning+and+ischemic+preconditioning+against+myocardial+ischemia%2Freperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Methods%22%5BJournal%5D)">A practical approach to remote ischemic preconditioning and ischemic preconditioning against myocardial ischemia/reperfusion injury.</a> J Biol Methods. 3 (4), e57(2016).</li>
<li>Michel, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+pressure-volume+analysis+of+acute+myocardial+infarction+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Real-time pressure-volume analysis of acute myocardial infarction in mice.</a> J Vis Exp. (137), e57621(2018).</li>
<li>Ojha, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+the+structural+and+functional+changes+in+the+myocardium+following+focal+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Characterization of the structural and functional changes in the myocardium following focal ischemia-reperfusion injury.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 294 (6), H2435-H2443 (2008).</li>
<li>Clasen, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+ischemia+and+reperfusion+in+mice%3A+a+comprehensive+hemodynamic%2C+electrocardiographic+and+electrophysiological+characterization%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Cardiac ischemia and reperfusion in mice: a comprehensive hemodynamic, electrocardiographic and electrophysiological characterization.</a> Sci Rep. 13 (1), 5693(2023).</li>
<li>Lang, C. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expedient+assessment+of+post-infarct+remodeling+by+native+cardiac+magnetic+resonance+imaging+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Expedient assessment of post-infarct remodeling by native cardiac magnetic resonance imaging in mice.</a> Sci Rep. 11 (1), 11625(2021).</li>
<li>Coolen, B. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+T1+mapping+of+the+mouse+heart+using+variable+flip+angle+steady-state+MR+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22NMR+Biomed%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional T1 mapping of the mouse heart using variable flip angle steady-state MR imaging.</a> NMR Biomed. 24 (2), 154-162 (2011).</li>
<li>Zhong, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comprehensive+cardiovascular+magnetic+resonance+of+myocardial+mechanics+in+mice+using+three-dimensional+cine+DENSE%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cardiovasc+Magn+Reson%22%5BJournal%5D)">Comprehensive cardiovascular magnetic resonance of myocardial mechanics in mice using three-dimensional cine DENSE.</a> J Cardiovasc Magn Reson. 13 (1), 83(2011).</li>
<li>Becker, K., Jahrling, N., Kramer, E. R., Schnorrer, F., Dodt, H. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultramicroscopy%3A+3D+reconstruction+of+large+microscopical+specimens%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biophotonics%22%5BJournal%5D)">Ultramicroscopy: 3D reconstruction of large microscopical specimens.</a> J Biophotonics. 1 (1), 36-42 (2008).</li>
<li>Ke, M. T., Fujimoto, S., Imai, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SeeDB%3A+a+simple+and+morphology-preserving+optical+clearing+agent+for+neuronal+circuit+reconstruction%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">SeeDB: a simple and morphology-preserving optical clearing agent for neuronal circuit reconstruction.</a> Nat Neurosci. 16 (8), 1154-1161 (2013).</li>
<li>Rajendran, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+peripheral+neural+circuits+that+regulate+heart+rate+using+optogenetic+and+viral+vector+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Identification of peripheral neural circuits that regulate heart rate using optogenetic and viral vector strategies.</a> Nat Commun. 10 (1), 1944(2019).</li>
<li>Mann, L., Klingberg, A., Gunzer, M., Hasenberg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+visualization+of+leukocyte+infiltrate+in+a+murine+model+of+fulminant+myocarditis+by+light+sheet+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Quantitative visualization of leukocyte infiltrate in a murine model of fulminant myocarditis by light sheet microscopy.</a> J Vis Exp. (123), e55450(2017).</li>
<li>Taki, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((14C-Methionine+uptake+as+a+potential+marker+of+inflammatory+processes+after+myocardial+ischemia+and+reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nucl+Med%22%5BJournal%5D)">14C-Methionine uptake as a potential marker of inflammatory processes after myocardial ischemia and reperfusion.</a> J Nucl Med. 54 (3), 431-436 (2013).</li>
<li>Michel, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PD1+deficiency+modifies+cardiac+immunity+during+baseline+conditions+and+in+reperfused+acute+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">PD1 deficiency modifies cardiac immunity during baseline conditions and in reperfused acute myocardial infarction.</a> Int J Mol Sci. 23 (14), 7533(2022).</li>
<li>Park, K. C., Gaze, D. C., Collinson, P. O., Marber, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+troponins%3A+from+myocardial+infarction+to+chronic+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc+Res%22%5BJournal%5D)">Cardiac troponins: from myocardial infarction to chronic disease.</a> Cardiovasc Res. 113 (14), 1708-1718 (2017).</li>
<li>Whittington, N. C., Wray, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Suppression+of+red+blood+cell+autofluorescence+for+immunocytochemistry+on+fixed+embryonic+mouse+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Suppression of red blood cell autofluorescence for immunocytochemistry on fixed embryonic mouse tissue.</a> Curr Protoc Neurosci. 81 (2), 28.21-28.28 (2017).</li>
<li>Klingberg, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fully+automated+evaluation+of+total+glomerular+number+and+capillary+tuft+size+in+nephritic+kidneys+using+light+sheet+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Soc+Nephrol%22%5BJournal%5D)">Fully automated evaluation of total glomerular number and capillary tuft size in nephritic kidneys using light sheet microscopy.</a> J Am Soc Nephrol. 28 (2), 452-459 (2017).</li>
<li>Weiss, K. R., Voigt, F. F., Shepherd, D. P., Huisken, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tutorial%3A+practical+considerations+for+tissue+clearing+and+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Tutorial: practical considerations for tissue clearing and imaging.</a> Nat Protoc. 16 (6), 2732-2748 (2021).</li>
<li>Susaki, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole-brain+imaging+with+single-cell+resolution+using+chemical+cocktails+and+computational+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Whole-brain imaging with single-cell resolution using chemical cocktails and computational analysis.</a> Cell. 157 (3), 726-739 (2014).</li>
<li>Erturk, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+imaging+of+solvent-cleared+organs+using+3DISCO%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional imaging of solvent-cleared organs using 3DISCO.</a> Nat Protoc. 7 (11), 1983-1995 (2012).</li>
<li>Merz, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-resolution+three-dimensional+imaging+for+precise+staging+in+melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Cancer%22%5BJournal%5D)">High-resolution three-dimensional imaging for precise staging in melanoma.</a> Eur J Cancer. 159, 182-193 (2021).</li>
<li>Hofmann, J., Gadjalova, I., Mishra, R., Ruland, J., Keppler, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+tissue+clearing+and+multi-organ+volumetric+imaging+enable+quantitative+visualization+of+sparse+immune+cell+populations+during+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Efficient tissue clearing and multi-organ volumetric imaging enable quantitative visualization of sparse immune cell populations during inflammation.</a> Front Immunol. 11, 599495(2020).</li>
<li>Pichardo, A. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optical+tissue+clearing+to+study+the+intra-pulmonary+biodistribution+of+intravenously+delivered+mesenchymal+stromal+cells+and+their+interactions+with+host+lung+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Optical tissue clearing to study the intra-pulmonary biodistribution of intravenously delivered mesenchymal stromal cells and their interactions with host lung cells.</a> Int J Mol Sci. 23 (22), 14171(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>27G 바늘</td><td>벡턴 디킨슨</td><td>305889</td><td>BD 이클립스</td></tr><tr><td>3D 이미지 처리 및 분석 소프트웨어</td><td>비트플레인</td><td>버전 10.1.0</td><td>이마리스</td></tr><tr><td>5-0 봉합사</td><td>세라그-비스너</td><td>IC108000</td><td>비단</td></tr><tr><td>6-0 봉합사</td><td>에티콘</td><td>EH7814</td><td>프롤렌</td></tr><tr><td>AlexaFluor 546 항체 라벨링 키트</td><td>인비트로젠</td><td>A20183</td><td></td></tr><tr><td>AlexaFluor 790 항체 라벨링 키트</td><td>인비트로젠</td><td>A20189</td><td></td></tr><tr><td>항마우스 Ly6G 항체 (AlexaFluor 647)</td><td>바이오레전드</td><td>127610</td><td>복제: 1A8</td></tr><tr><td>셀 스트레이너(100 & micro; m)</td><td>코 닝</td><td>431752</td><td></td></tr><tr><td>디메틸 설폭사이드(DMSO)</td><td>칼 로스</td><td>7029.1</td><td></td></tr><tr><td>에탄올</td><td>칼 로스</td><td>0911.4</td><td></td></tr><tr><td>에틸 신네메이트(ECi)</td><td>시그마-알드리치</td><td>112372</td><td></td></tr><tr><td>파일 변환기 소프트웨어</td><td>비트플레인</td><td>버전 10.1.0</td><td>이마리스</td></tr><tr><td>사</td><td>푸르만</td><td>10021</td><td></td></tr><tr><td>젤란 껌 분말</td><td>시그마-알드리치</td><td>피8169</td><td>피타젤</td></tr><tr><td>헤파린(25.000 IE/5 mL)</td><td>레오 파마</td><td>15261203</td><td></td></tr><tr><td>과산화수소(H2O2, 30%)</td><td>칼 로스</td><td>8070.2</td><td></td></tr><tr><td>주사 주사기</td><td>B 브라운</td><td>9161502S</td><td>옴니칸 F</td></tr><tr><td>케타민(100mg/mL)</td><td>벨라파마</td><td>402581.00.00</td><td></td></tr><tr><td>라이트 시트 현미경 시스템</td><td>밀테니 바이오텍</td><td>-</td><td>UltraMicroscope 블레이즈</td></tr><tr><td>루어 잠금 주사기</td><td>벡턴 디킨슨</td><td>303172</td><td>BD Plastipak</td></tr><tr><td>마그네틱 교반기</td><td>VWR</td><td>444-0572</td><td></td></tr><tr><td>Neo sCMOS 카메라(4.2MP)</td><td>안도르 테크놀로지</td><td>ZL41 셀 4.2</td><td></td></tr><tr><td>목표</td><td>밀테니 바이오텍</td><td>130-133-625</td><td>MI 플랜 1.1x NA 0.1, WD 17.6mm</td></tr><tr><td>파라포름알데히드(PFA, 4%)</td><td>시그마-알드리치</td><td>1.00496</td><td>10% 포르말린, 중성 완충</td></tr><tr><td>페트리 접시</td><td>그라이너 바이오-원</td><td>632181</td><td></td></tr><tr><td>인산염 완충 식염수(PBS)</td><td>깁코</td><td>14190-094</td><td>MgCl2/CaCl2</td></tr><tr><td>폴리프로필렌 튜브(15mL)</td><td>그라이너 바이오-원</td><td>188261</td><td></td></tr><tr><td>폴리프로필렌 튜브(5mL)</td><td>칼 로스</td><td>에키9.1</td><td>검정</td></tr><tr><td>폴리프로필렌 튜브(50mL)</td><td>그라이너 바이오-원</td><td>227261</td><td></td></tr><tr><td>마우스 심장 캐뉼라 삽입을 위한 준비 접시</td><td>휴고 삭스 엘렉트로닉</td><td>73-4327</td><td>캐뉼라 포함</td></tr><tr><td>정제된 항마우스 CD31 항체</td><td>벡턴 디킨슨</td><td>53369</td><td>복제: MEC13.3</td></tr><tr><td>롤러 펌프</td><td>이스마텍</td><td>ISM597-230</td><td></td></tr><tr><td>밀봉 필름</td><td>베미스</td><td>PM-996</td><td>파라필름</td></tr><tr><td>실체 현미경</td><td>라이카</td><td>S6D</td><td></td></tr><tr><td>튜브 회전 장치</td><td>하이돌프</td><td>폴리맥스 1040</td><td></td></tr><tr><td>백색광 레이저</td><td>NKT 포토닉스</td><td>SuperK 익스트림</td><td>200mW, 480&ndash; 2400 나노미터</td></tr><tr><td>WT 마우스 변형</td><td>얀비에 연구소</td><td>-</td><td>C57BL/6JRj</td></tr><tr><td>자일라진 (2%)</td><td>세바 티어게순하이트</td><td>6324464.00.00</td><td></td></tr></tbody></table>

라이트 시트 형광 현미경을 이용한 재관류 급성 심근경색증의 심장 손상 및 면역 반응의 동시 3d 분석

Simultaneous 3D Analysis of Cardiac Damage and Immune Response in Reperfused Acute Myocardial Infarction Using Light Sheet Fluorescence Microscopy

라이트 시트 형광 현미경(LSFM)을 사용하여 제시된 접근법은 repAMI 후 AAR, 내피 손상 및 호중구 침윤을 동시에 분석할 수 있습니다. 도 1A 는 repAMI 유도 24시간 후 C57BL/6J 마우스의 생체 내 및 생체 외 항체 염색을 나타낸 것이다. 심장 내피 손상 염색에 대한 항체(AlexaFluor 790으로 표지된 항-CD31) 및 호중구 침윤(AlexaFluor 647로 표지된 항-Ly6G)을 희생 10분 전에 정맥 주사했습니다. 충분한 혈액 제거 후, AlexaFluor 546과 접합된 항-CD31 항체의 역행성 대동맥 관류를 통해 AAR을 염색하고, 하룻밤 동안 4°C에서 4% PFA로 심장을 고정하였다. 그림 1B 는 LSFM 이미징을 위한 추가 조직 처리를 설명합니다. 고정 후, 조직 자가형광을 감소시키기 위해 과산화수소와 디메틸설폭사이드로 표백한 후 상승하는 에탄올 열에 의해 심...

라이트 시트 형광 현미경을 이용한 재관류 급성 심근경색증의 심장 손상 및 면역 반응의 동시 3D 분석

Complex cellular interactions determine functional and structural tissue remodeling during reperfused acute myocardial infarction (repAMI). These ...

simultaneous-3d-analysis-cardiac-damage-immune-response-reperfused

Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

뇌 염증 반응의 복잡성에 새로운 통찰력을 얻을 수있는 방법이 제공됩니다. 우리는 국소 허혈의 마우스 모델에서 미세 아교 세포 / 대식 세포 표현형 마커의 공동 발현 패턴을 조사하기 위해 삼차원 촛점 분석 하였다 면역 형광 기반 프로토콜을 설명한다.

실험 뇌 손상 양극화의 소교 / 대식 세포 마커의 3 차원 공 촛점 분석

이 프로토콜은 MRI와 전체 심장 심근 조직의 3 차원 비교를위한 새로운 방법을 설명합니다. 이는 심근 경색의 만성 돼지 모델의 경색 경계 영역에서 심근 내 주입의 정확한 평가를 위해 설계되었습니다.

3D 전체 심장 심근 조직 분석

중심부에 위치한 분자 이벤트는 기관의 전기 및 수축 기능을 조정. 여기에 제시된 지역 필드 형광 현미경 기술의 집합은 그대로 마음에 휴대 변수의 기록을 할 수 있습니다. 심장 기능을 정의하는 메커니즘을 확인하면 마음이 병적 인 상황에서 어떻게 작동하는지 이해에 중요하다.

지역 필드 형광 현미경 : 본래 마음의 세포 신호 이미징

여기, 우리는 CD11c.DTR 마우스의 기관 내 디프테리아 독소 치료에 의해 유도되는 무균 성 심근염의 쥐 모델에서 심장 CD45 + 백혈구 침윤을 시각화하기위한 가벼운 시트 현미경 접근법을 설명한다.

Light Sheet Microscopy에 의한 심근 성 심근염의 Murine 모델에서의 백혈구 침윤의 정량적 시각화

이 연구 murine 마음 공부 광 청소와 함께 양면 조명 빛 시트 형광 현미경 검사 법 (LSFM) 기법을 사용 합니다.

Murine 심장 연구에 대 한 빛-시트 형광 현미경 검사 법

상해 다음 심근 세포 증식은 비 근세포 세포 집단에서 세포 외 단서의 교향곡을 요구하는 동적 프로세스입니다. 계보 추적, 수동 선명도 및 3차원 전체 마운트 공초점 현미경 기술을 활용하여 다양한 세포 유형이 심장 수리 및 재생에 미치는 영향을 분석할 수 있습니다.

클리어 심장 3 차원 이미징을 통해 표적 세포 집단의 심장 손상 반응을 캡처

조직 제거의 세련된 방법이 개발되어 성인 마우스 심장에 적용되었습니다. 이 방법은 유전 기자 전략에 기인하는 표시된 섬유아세포 형광을 유지하면서 조밀한, 자동 형광 심장 조직을 취소하도록 설계되었습니다.

건강하고 부상당한 마우스 심혼에 있는 3차원 섬유아세포 조직을 위한 정제된 CLARITY 기지를 둔 조직 정리

우리는 조직 변형 및 염색의 새로운 발전과 축 방향 스캔 라이트 시트 현미경의 개발을 결합하여 전체 마우스 심장의 메조스코픽 재구성 방법을 보고합니다.

전체 마우스 심장의 메조스코픽 광학 이미징

이 프로토콜은 적극적으로 수축심장 trabecula ex vivo에서sarcomere, 칼슘 및 거시적 기하학적 기하학적 데이터의 컬렉션을 제공합니다. 이러한 동시 측정은 세 가지 이미징 양식의 통합에 의해 가능하게됩니다.

동시 브라이트필드, 형광, 및 수축 심장 Trabeculae Ex Vivo의 광학 일관성 지형 이미징

이 프로토콜은 설치류 심장의 복잡한 심장 구조를 조사하기 위해 적응된 조직 투명화 방법과 함께 고급 광시트 현미경을 활용하여 심장 형태 형성 및 리모델링을 이해하는 데 큰 잠재력을 가지고 있습니다.

설치류 심장의 심장 구조를 밝히기 위한 Light-Sheet Imaging

현재의 2,3,5-트리페닐테트라졸륨 클로라이드(TTC) 분석법은 미세한 해상도로 심근 손상을 분석할 수 있는 정교한 TTC 염색 프로토콜을 도입하여, 세포 수준에서 경색 크기와 심근세포 생존성을 정확하고 신뢰할 수 있게 하는 고품질 이미지를 생성합니다.

심근손상의 정확하고 신뢰할 수 있는 분석을 위한 현미경 2,3,5-트리페닐테트라졸륨 염화염법 분석법

배우세요 라이트 시트 형광 현미경을 이용해 심근경색 후 심장 손상과 면역 반응을 동시에 3D 분석하는 방법을. 마우스 모델로 손상 부위와 면역세포 상호작용을 정량화하여 심장 기능 회복 연구에 활용합니다.

라이트 시트 형광 현미경을 이용한 재관류 급성 심근경색증의 심장 손상 및 면역 반응의 동시 3D 분석

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