Name: 혈액 오염이 없는 Murine Nasal Lavage Fluid Collection (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-11T15:10:00.000+00:00
Duration: 5 min 12 s
Description: 배우세요 혈액 오염 없이 생쥐 비강 관개액을 수집하는 방법을. 인두 경로와 기관 경로를 활용하여 면역학적 성분과 호흡기 병원체 검출 정확도를 높입니다. 이 기법은 호흡기 면역학 연구에 필수적입니다.

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<ol><li>Cortegano, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-dependent+nasal+immune+responses+in+non-hospitalized+bronchiolitis+children%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Age-dependent nasal immune responses in non-hospitalized bronchiolitis children.</a> Front Immunol. 13, 1011607(2022).</li>
<li>Yao, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Control+of+pathogenic+effector+T-cell+activities+in+situ+by+PD-L1+expression+on+respiratory+inflammatory+dendritic+cells+during+respiratory+syncytial+virus+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Mucosal+Immunol%22%5BJournal%5D)">Control of pathogenic effector T-cell activities in situ by PD-L1 expression on respiratory inflammatory dendritic cells during respiratory syncytial virus infection.</a> Mucosal Immunol. 8 (4), 746-759 (2015).</li>
<li>Gould, V. M. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nasal+IgA+provides+protection+against+human+influenza+challenge+in+volunteers+with+low+serum+influenza+antibody+titre%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Nasal IgA provides protection against human influenza challenge in volunteers with low serum influenza antibody titre.</a> Front Microbiol. 8, 900(2017).</li>
<li>Casado, B., Pannell, L. K., Viglio, S., Iadarola, P., Baraniuk, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+the+sinusitis+nasal+lavage+fluid+proteome+using+capillary+liquid+chromatography+interfaced+to+electrospray+ionization-quadrupole+time+of+flight-tandem+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Electrophoresis%22%5BJournal%5D)">Analysis of the sinusitis nasal lavage fluid proteome using capillary liquid chromatography interfaced to electrospray ionization-quadrupole time of flight-tandem mass spectrometry.</a> Electrophoresis. 25 (8), 1386-1393 (2004).</li>
<li>Hull, J., Skinner, W., Robertson, C., Phelan, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elemental+content+of+airway+surface+liquid+from+infants+with+cystic+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Elemental content of airway surface liquid from infants with cystic fibrosis.</a> Am J Respir Crit Care Med. 157 (1), 10-14 (1998).</li>
<li>Roponen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammatory+mediators+in+nasal+lavage%2C+induced+sputum+and+serum+of+employees+with+rheumatic+and+respiratory+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Respir+J%22%5BJournal%5D)">Inflammatory mediators in nasal lavage, induced sputum and serum of employees with rheumatic and respiratory disorders.</a> Eur Respir J. 18 (3), 542-548 (2001).</li>
<li>Santos Galvão, C. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammatory+mediators+in+nasal+lavage+among+school-age+children+from+urban+and+rural+areas+in+S%C3%A3o+Paulo%2C+Brazil%5BTitle%5D)+AND+%22S%C3%A3o+Paulo+Med+J%22%5BJournal%5D)">Inflammatory mediators in nasal lavage among school-age children from urban and rural areas in São Paulo, Brazil.</a> São Paulo Med J. 122 (5), 204(2004).</li>
<li>Winkler, E. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SARS-CoV-2+causes+lung+infection+without+severe+disease+in+human+ACE2+knock-in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Virol%22%5BJournal%5D)">SARS-CoV-2 causes lung infection without severe disease in human ACE2 knock-in mice.</a> J Virol. 96 (1), e01511-e01521 (2022).</li>
<li>Kieran, T. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exploring+associations+between+viral+titer+measurements+and+disease+outcomes+in+ferrets+inoculated+with+125+contemporary+influenza+A+viruses%5BTitle%5D)+AND+%22J+Virol%22%5BJournal%5D)">Exploring associations between viral titer measurements and disease outcomes in ferrets inoculated with 125 contemporary influenza A viruses.</a> J Virol. 98 (2), e01661-e01723 (2024).</li>
<li>Peden, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+nasal+lavage+for+objective+measurement+of+irritant-induced+nasal+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Regul+Toxicol+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">The use of nasal lavage for objective measurement of irritant-induced nasal inflammation.</a> Regul Toxicol Pharmacol. 24 (1 II), 68-75 (1996).</li>
<li>Rusznak, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+pollution-induced+allergy+and+asthma%5BTitle%5D)+AND+%22Rev+Fr+Allergol+Immunol+Clin%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of pollution-induced allergy and asthma.</a> Rev Fr Allergol Immunol Clin. 38 (7 Suppl. 1), 397-402 (1998).</li>
<li>Laumbach, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nasal+effects+of+a+mixture+of+volatile+organic+compounds+and+their+ozone+oxidation+products%5BTitle%5D)+AND+%22J+Occup+Environ+Med%22%5BJournal%5D)">Nasal effects of a mixture of volatile organic compounds and their ozone oxidation products.</a> J Occup Environ Med. 47 (11), 1182-1189 (2005).</li>
<li>Kawai, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+potential+of+neuraminidase+as+an+antigen+for+nasal+vaccines+to+increase+cross-protection+against+influenza+viruses%5BTitle%5D)+AND+%22J+Virol%22%5BJournal%5D)">The potential of neuraminidase as an antigen for nasal vaccines to increase cross-protection against influenza viruses.</a> J Virol. 95 (20), 1180-1201 (2021).</li>
<li>Cho, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spontaneous+eosinophilic+nasal+inflammation+in+a+genetically-mutant+mouse%3A+Comparative+study+with+an+allergic+inflammation+model%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Spontaneous eosinophilic nasal inflammation in a genetically-mutant mouse: Comparative study with an allergic inflammation model.</a> PLoS One. 7 (4), e35114(2012).</li>
<li>Puchta, A., Verschoor, C. P., Thurn, T., Bowdish, D. M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+inflammatory+responses+during+intranasal+colonization+with+Streptococcus+pneumoniae%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Characterization of inflammatory responses during intranasal colonization with Streptococcus pneumoniae.</a> J Vis Exp. (83), e50490(2014).</li>
<li>Ghafouri, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+proteomics+of+nasal+fluid+in+seasonal+allergic+rhinitis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Proteome+Res%22%5BJournal%5D)">Comparative proteomics of nasal fluid in seasonal allergic rhinitis.</a> J Proteome Res. 5 (2), 330-338 (2006).</li>
<li>Lindahl, M., Ståhlbom, B., Svartz, J., Tagesson, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protein+patterns+of+human+nasal+and+bronchoalveolar+lavage+fluids+analyzed+with+two-dimensional+gel+electrophoresis%5BTitle%5D)+AND+%22Electrophoresis%22%5BJournal%5D)">Protein patterns of human nasal and bronchoalveolar lavage fluids analyzed with two-dimensional gel electrophoresis.</a> Electrophoresis. 19 (18), 3222-3229 (1998).</li>
<li>Lindahl, M., Ståhlbom, B., Tagesson, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+a+new+potential+airway+irritation+marker%2C+palate+lung+nasal+epithelial+clone+protein%2C+in+human+nasal+lavage+fluid+with+two-dimensional+electrophoresis+and+matrix-assisted+laser+desorption%2Fionization-time+of+flight%5BTitle%5D)+AND+%22Electrophoresis%22%5BJournal%5D)">Identification of a new potential airway irritation marker, palate lung nasal epithelial clone protein, in human nasal lavage fluid with two-dimensional electrophoresis and matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight.</a> Electrophoresis. 22 (9), 1795-1800 (2001).</li>
<li>Schoenebeck, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+preparation+of+nasal+lavage+fluid+%28NLF%29+as+a+noninvasive+sample+for+proteomic+biomarker+discovery%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta+Proteins+Proteomics%22%5BJournal%5D)">Improved preparation of nasal lavage fluid (NLF) as a noninvasive sample for proteomic biomarker discovery.</a> Biochim Biophys Acta Proteins Proteomics. 1854 (7), 741-745 (2015).</li>
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<li>Roustan, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluating+methods+of+mouse+euthanasia+on+the+oocyte+quality%3A+Cervical+dislocation+versus+isoflurane+inhalation%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">Evaluating methods of mouse euthanasia on the oocyte quality: Cervical dislocation versus isoflurane inhalation.</a> Lab Anim. 46 (2), 167-169 (2012).</li>
<li>Park, A. M., Tsunoda, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Forensic+luminol+reaction+for+detecting+fecal+occult+blood+in+experimental+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechniques%22%5BJournal%5D)">Forensic luminol reaction for detecting fecal occult blood in experimental mice.</a> Biotechniques. 65 (4), 227-230 (2018).</li>
<li>Gao, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+nasal+wash+RNA-Seq+reveals+distinct+cell-specific+innate+immune+responses+in+influenza+versus+SARS-CoV-2%5BTitle%5D)+AND+%22JCI+Insight%22%5BJournal%5D)">Human nasal wash RNA-Seq reveals distinct cell-specific innate immune responses in influenza versus SARS-CoV-2.</a> JCI Insight. 6 (22), e152288(2021).</li>
<li>Kirkeby, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunoglobulins+in+nasal+secretions+of+healthy+humans%3A+Structural+integrity+of+secretory+immunoglobulin+A1+%28IgA1%29+and+occurrence+of+neutralizing+antibodies+to+IgA1+proteases+of+nasal+bacteria%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Diagn+Lab+Immunol%22%5BJournal%5D)">Immunoglobulins in nasal secretions of healthy humans: Structural integrity of secretory immunoglobulin A1 (IgA1) and occurrence of neutralizing antibodies to IgA1 proteases of nasal bacteria.</a> Clin Diagn Lab Immunol. 7 (1), 31-39 (2000).</li>
<li>Webb, J. L., Creamer, J. I., Quickenden, T. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+of+the+presumptive+luminol+test+for+blood+with+four+non-chemiluminescent+forensic+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Luminescence%22%5BJournal%5D)">A comparison of the presumptive luminol test for blood with four non-chemiluminescent forensic techniques.</a> Luminescence. 21 (4), 214-220 (2006).</li>
<li>Ahmad, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exploring+the+role+of+platelets+in+virus-induced+inflammatory+demyelinating+disease+and+myocarditis%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Exploring the role of platelets in virus-induced inflammatory demyelinating disease and myocarditis.</a> Int J Mol Sci. 25 (6), 3460(2024).</li>
<li>Olsson, T., Bergström, K., Thore, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+sensitive+method+for+determination+of+serum+hemoglobin+based+on+iso-luminol+chemiluminescence%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Chim+Acta%22%5BJournal%5D)">A sensitive method for determination of serum hemoglobin based on iso-luminol chemiluminescence.</a> Clin Chim Acta. 122 (2), 125-133 (1982).</li>
<li>Van der Meer, W., Dinnissen, J. M. B., de Keijzer, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+the+Sysmex+XT-2000i%2C+a+new+automated+haematology+analyser%5BTitle%5D)+AND+%22Sysmex%22%5BJournal%5D)">Evaluation of the Sysmex XT-2000i, a new automated haematology analyser.</a> Sysmex. (2002), Available at: https://www.sysmex.co.jp/en/products_solutions/library/journal/vol12_no2/summary03.html (2002).</li>
<li>Oshiro, I., Takenaka, T., Maeda, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+method+for+hemoglobin+determination+by+using+sodium+lauryl+sulfate+%28SLS%29%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Biochem%22%5BJournal%5D)">New method for hemoglobin determination by using sodium lauryl sulfate (SLS).</a> Clin Biochem. 15 (2), 83-88 (1982).</li>
<li>Hamaguchi, Y., Oshiro, I., Maeda, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+study+on+reaction+mechanism+of+sodium+lauryl+sulfate-hemoglobin+%28SLS-Hb%29%2C+Part+1%5BTitle%5D)+AND+%22Rinsho+Byori%22%5BJournal%5D)">A study on reaction mechanism of sodium lauryl sulfate-hemoglobin (SLS-Hb), Part 1.</a> Rinsho Byori. 40 (6), 649-654 (1992).</li>
<li>McGee, D. W., McMurray, D. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+protein+malnutrition+on+the+IgA+immune+response+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Immunology%22%5BJournal%5D)">The effect of protein malnutrition on the IgA immune response in mice.</a> Immunology. 63 (1), 25(1988).</li>
<li>Castigli, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+IgA+class+switching+in+APRIL-deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Impaired IgA class switching in APRIL-deficient mice.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 101 (11), 3903-3908 (2004).</li>
<li>Matsuo, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CCL28-deficient+mice+have+reduced+IgA+antibody-secreting+cells+and+an+altered+microbiota+in+the+colon%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">CCL28-deficient mice have reduced IgA antibody-secreting cells and an altered microbiota in the colon.</a> J Immunol. 200 (2), 800-809 (2018).</li>
<li>McDonald, K. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aging+impacts+isolated+lymphoid+follicle+development+and+function%5BTitle%5D)+AND+%22Immun+Ageing%22%5BJournal%5D)">Aging impacts isolated lymphoid follicle development and function.</a> Immun Ageing. 8 (1), 1-12 (2011).</li>
<li>Abolins, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+comparative+immunology+of+wild+and+laboratory+mice%2C+Mus+musculus+domesticus%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">The comparative immunology of wild and laboratory mice, Mus musculus domesticus.</a> Nat Commun. 8 (1), 1-13 (2017).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>동물 고정 바늘</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd., Tokyo, Japan</td><td>KN-358-A</td><td>동물 고정 바늘로 마우스를 고정했습니다. 스테인리스; 총 길이, 23mm; 바늘 끝, 15mm.</td></tr><tr><td>BD OptEIATM&nbsp; TMB 기질 시약 세트</td><td>BD Biosciences, 샌디에이고, 캘리포니아, 미국</td><td>555214</td><td>100 &mu를 추가했습니다. 웰당 TMB 기질 용액의 L.</td></tr><tr><td>벨 항아리</td><td>NA</td><td>NA 마</td><td>취를 위해 벨 항아리를 사용했습니다.</td></tr><tr><td>투명 평평한 바닥 면역 비멸균 96웰 플레이트&nbsp;</td><td>ThermoFisher Scientific, Rochester, NY, USA</td><td>442404</td><td>효소 결합 면역흡착 분석을 위해 MaxiSorp 표면 처리가 적용된 투명 평평한 바닥 면역 비멸균 96웰 플레이트를 사용했습니다.</td></tr><tr><td>면봉</td><td>Sansho Co., Ltd., 도쿄, 일본</td><td>94-1951</td><td>우리는 혈액 오염을 피하기 위해 면봉을 사용했습니다. 면봉의 직경은 7mm였습니다.</td></tr><tr><td>소 태아 혈청</td><td>Sigma-Aldrich Co., St. Louis, MO, USA</td><td>172012-500 ML</td><td>분석 희석제에 소 태아 혈청 10%를 첨가했습니다.</td></tr><tr><td>집게(연구 실험용 마이크로 핀셋, 곡선 팁)</td><td>Sansho Co., Ltd., Tokyo, Japan</td><td>91-1506</td><td>우리는 집게를 사용하여 해부했습니다. 모델, HSC 551-10; 그리고 전체 길이, 105mm.</td></tr><tr><td>집게(정밀 핀셋)</td><td>Sansho Co., Ltd., Tokyo, Japan</td><td>91-2772</td><td>우리는 해부에 집게를 사용했습니다. 모델, HSC 607-12; 전체 길이, 120mm; 팁 직경, 0.3mm.</td></tr><tr><td>염소 항마우스 IgA-UNLB</td><td>SouthernBiotech, 버밍엄, 앨라배마, 미국</td><td>1040-01</td><td>우리는 100 &mu로 투명 평평한 바닥 면역 비멸균 96웰 플레이트를 코팅했습니다. 총 면역글로불린 A의 L/웰(20ng/웰).</td></tr><tr><td>이소플루란&nbsp;</td><td>Viatris Inc., Canonsburg, PA, USA</td><td>NA</td> 마<td>취를 위해 이소플루란을 사용했습니다.</td></tr><tr><td>루미놀 발사 시약 세트</td><td>FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation, 오사카, 일본</td><td>124-06511</td><td>NLF 샘플에서 헤모글로빈을 검출하기 위해 루미놀 반응 시약 세트를 사용했습니다.</td></tr><tr><td>Microtube</td><td>Watson Co., Ltd., 도쿄, 일본</td><td>131-7155C</td><td>NLF 및 BALF 수집을 위해 &nbsp; 마이크로튜브(잠금 캡이 있는 1.5mL 마이크로튜브, 둥근 바닥, 소프트 터치 캡)를 사용했습니다.</td></tr><tr><td>Milli-Q water</td><td>Merck KGaA, Darmstadt, Germany</td><td>Milli-Q Direct 8</td><td>우리는 MilliQ 물을 사용하여 루미놀 정기 용액을 만들었습니다.</td></tr><tr><td>Mini-Shaker PSU-2T</td><td>Biosan Ltd., Riga, Latvia</td><td>PSU-2T</td><td>Mini-Shaler PSU-2T를 사용하여 96웰 플레이트를 쉐이크했습니다.</td></tr><tr><td>마우스 계통</td><td>CLEA Japan, Inc., Tokyo, Japan NA</td><td></td><td>우리는 4개월 된 C57BL/6 수컷 마우스를 사용했습니다.</td></tr><tr><td>Nunc MicroWell 96-Well, Nunclon Delta 처리, 평평한 바닥 마이크로플레이트</td><td>Thermo Fisher Scientific Nunc A/S . Kamstrupvej, Roskilde, 덴마크</td><td>136101</td><td>루미놀 테스트에는 NuncTM MicroWellTM 96웰, Nunclon Delta 처리, 평평한 바닥 마이크로플레이트를 사용했습니다.</td></tr><tr><td>과산화효소 접합 AffiniPure F(ab')2 단편 염소 항마우스 IgG, F(ab')2 단편 특이적(인간, 소 및 말 혈청 단백질에 대한 최소 교차 반응)</td><td>Jackson ImmunoResearch Laboratories, Inc., West Grove, PA, USA</td><td>115-036-072</td><td>100 &mu를 추가했습니다. L의 과산화효소 접합 AffiniPure F(ab')2 단편 염소 항마우스 IgG, F(ab')2 단편 특이적, 각 웰에 대한 검출 항체(10,000배 희석).</td></tr><tr><td>인산염 완충 식염수</td><td>Sigma-Aldrich Co., 세인트루이스, 미주리, 미국</td><td>D8537-500ML</td><td>NLF 및 BALF 수집을 위해 Dulbecco의 인산염 완충 식염수(염화칼슘 및 염화마그네슘 없이 변형, 액체, 멸균 여과, 세포 도형에 적합)를 사용했습니다.</td></tr><tr><td>피펫&nbsp;</td><td>Watson Co., Ltd., 도쿄, 일본</td><td>NA</td><td>우리는 200-&mu를 사용했습니다. 비강 세척용 L 피펫.</td></tr><tr><td>피펫 팁</td><td>Watson Co., Ltd., 도쿄, 일본</td><td>NA</td><td>우리는 200-&mu를 사용했습니다. L 비강 세척을 위한 멀티핏 피펫 팁.</td></tr><tr><td>폴리옥시에틸렌(20) 소르비탄 모노라우레이트(Tween 20)</td><td>FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation, Osaka, Japan</td><td>167-11515</td> 세척 <td>완충액에 Tween 20의 0.05%를, 분석 희석제에 Tween 20의 0.2%를 첨가했습니다.</td></tr><tr><td>정제된 염소 항마우스 IgG(최소 x-반응성) 항체</td><td>BioLegend, San Diego, CA, USA</td><td>405301</td><td>Clear Flat-Bottom Immuno Nonsterile 96-well Plates를 100 & mu로 코팅했습니다. L/웰(10ng/웰)의 총 면역글로불린 G.</td></tr><tr><td>작은 가위, 양뾰족</td><td>Sansho Co., Ltd., 도쿄, 일본</td><td>91-7005</td><td>해부에는 가위를 사용했습니다. 모델, S-4A; 그리고 전체 길이, 115mm.</td></tr><tr><td>황산</td><td>Wako Pure Chemical Industries, Ltd, 도쿄, 일본</td><td>192-04755</td><td>우리는 50 &mu를 추가했습니다. 반응을 멈추기 위해 각 웰에 L of 2 N 황산을</td></tr> 넣습니다.<tr><td>Surflo 정맥 카테터&nbsp;</td><td>Terumo Corporation, 도쿄, 일본&nbsp;</td><td>SR-FS2032</td><td>기관지폐포 세척을 위해 surflo 정맥 카테터를 사용하고 기관에 PBS를 주입했습니다. 카테터, 20G; 카테터 길이, 32mm; 카테터 내경, 0.80mm; 카테터 외경, 1.1mm; 및 내부 바늘, 22G.</td></tr><tr><td>수술용 직선 가위</td><td>Sansho Co., Ltd., Tokyo, Japan</td><td>91-7004</td><td>해부에는 가위를 사용했습니다. 모델, S-3B; 그리고 전체 길이, 120mm.</td></tr><tr><td>Surgilcal 플레이트</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd., Tokyo, Japan</td><td>KN-321-B</td><td>해부에는 코르크 보드를 사용했습니다. 깊이, 20cm; 너비, 15cm; 높이 3cm.</td></tr><tr><td>Synergy H1 하이브리드 다중 모드 마이크로플레이트 리더&nbsp;</td><td>Agilent Technologies, Inc., Santa Clara, CA, USA</td><td>NA</td><td>Synergy H1 Hybrid Multi-Mode Microplate Reader를 사용하여 450nm에서 샘플의 흡광도를 측정했습니다.</td></tr>주<tr><td>사기</td><td>Terumo Corporation, 도쿄, 일본&nbsp;</td><td>SS-01T</td><td>심장에서 채혈하기 위해 1mL 주사기를 사용했습니다.</td></tr><tr><td>스레드</td><td>&nbsp; Niccho Kogyo Co., Ltd. Tokyo Japan</td><td>NA</td><td>시술 중 올바른 위치를 보장하기 위해 카테터를 실로 묶었습니다.</td></tr></tbody></table>

혈액 오염이 없는 murine nasal lavage fluid collection

Murine Nasal Lavage Fluid Collection without Blood Contamination

기존 방법 또는 새로운 방법을 사용하여 C57BL/6 마우스에서 경인두 경로를 통해 NLF 샘플을 수집했습니다. 그림 1에서 볼 수 있듯이, 기존 방법으로 수집된 NLF 샘플은 약간 분홍색을 띠었습니다(그림 1A). 새로운 방법으로 수집된 NLF 샘플은 명확했습니다(그림 1B). 이러한 차이는 기존 방법에 의한 NLF 샘플의 혈액 오염으로 인한 것으로 보였기 때문에 NLF 샘플의 혈액 오염을 루미놀 반응을 사용하여 검사했습니다. 그림 2에서 볼 수 있듯이 기존 방법으로 수집된 NLF 샘플의 화학발광은 양성이었으며 이는 혈액 오염을 나타냅니다(그림 2A). 반면에, 새로운 방법으로 수집된 NLF 샘플의 화학발광은 음성이었습니다(그...

혈액 오염이 없는 Murine Nasal Lavage Fluid Collection

Upper airway samples, including nasal lavage fluid (NLF) and nasal swabs, are useful in detecting pathogens, including viruses and bacteria, which can ...

murine-nasal-lavage-fluid-collection-without-blood-contamination

Research

연구

JoVE Journal

Immunology and Infection

면역학 및 감염학

출처: Venuprasad, K., et al. 기도 염증을 연구하기 위한 마우스 모델에서 헤모필루스 인플루엔자의 기관내 투여. J. Vis. 경험. (2016년)이 비디오는 다운스트림 분석을 위해 유형화할 수 없는 헤모필루스 인플루엔자 에 감염된 안락사된 마우스로부터 기관지폐포 세척액을 수집하고 처리하는 방법을 보여줍니다.

유형이 불가능한 헤모필루스 인플루엔자에 감염된 마우스 모델의 기관지폐포 세척액 수집

이 비디오는 유세포 분석을 사용하여 기관지폐포 세척액에서 다양한 면역 세포를 식별하고 계수하는 방법을 보여줍니다. 초기에는 생존 염료를 사용하여 단일 면역 세포를 식별한 다음 표면 마커 단백질을 차등 염색하여 각 세포 유형을 정확하게 계수할 수 있습니다.

유세포 분석에 의한 Bronchoalveolar Lavage Fluid에서 면역 세포의 식별 및 계수

연쇄상 구균 폐렴을 이용한 뮤린 비소하린의 식민지화및 신봉또는 모집된 세포의 후속 추출이 설명된다. 이 기술은 나아레를 통해 유체의 비소하린과 수집을 플러시하는 것을 포함하며, 시투에서mRNA 발현의 차동 세포 정량화 및 분석을 포함한 다양한 판독에 적응할 수 있다.

연쇄상 구균 폐렴으로 비강 내 식민지 화 중 염증 반응의 특성화

폐의 건강 상태는 폐의 세기관지에있는 면역 세포의 유형과 수에 의해 반영됩니다. 우리는 비 흡착성 세포와 쥐의 하부 호흡기에서 용해되는 요소를 분리하고 연구 할 수있는 기관지 폐포 세척 기술에 대해 설명합니다.

쥐 폐의 기관지 폐포 세척은 염증성 세포의 침윤을 분석하는

이 프로토콜에서는 위 항공에서 그대로 점 막 안 대기의 샘플링에 대 한 비 침 투 적인 기법을 설명합니다. 그것은 모든 연령대의 주제에 vivo에서 단백질 중재자, cytokines, 발산, 등의 레벨의 정량화를 수행 하기 위해 사용할 수 있습니다.

상부 기도 면역 중재자 수준 Vivo에서 의 정량화에 대 한 점 막 안 대기의 비 침범 성 샘플링

이 원고는 위와 더 낮은 기도의 점 막 내벽 액체 (MLF)을 합성 흡수 성 행렬 (SAM)를 사용 하 여 특히 비 강 및 기관지 흡수 기술의 사용을 설명 합니다. 이 메서드는 더 나은 표준화 및 기존 호흡기 샘플링 기법 보다 내성 제공합니다.

비 강 및 기관지 체액의 흡수: 인간의 호흡기 점 막 및 실험실 처리 샘플의 정밀 샘플링

이 프로토콜에는 혈액에서 오염 없이와 뇌 척추 액체 (CSF)의 풍부한 컬렉션에 대 한 향상 된 기술을 설명합니다. 큰 샘플 수집 및 순수성, 더 많은 분석 두뇌 및 척수에 영향을 질병의 우리의 이해를 추가 CSF를 사용 하 여 수행할 수 있습니다.

마 취 쥐에서 척수의 컬렉션에 대 한 개선된 방법

이 통신 격리와 인간에서 치경 대 식 세포의 문화에 대 한 방법론 및 실험적인 목적을 위한 murine 모델에 설명합니다.

고립과 Murine 인간과 치경 대 식 세포의 생체 외에서 문화

식염수 비강 세척액은 개의 비강 면역 미세환경을 샘플링하는 데 사용할 수 있습니다. 이 접근법은 상대적으로 비침습적이고 코 조직을 파괴하지 않기 때문에 연속적으로 수행할 수 있습니다. 비강 세척 기법으로 채취한 세포와 단백질은 다양한 실험실 분석을 위해 처리할 수 있습니다.

개의 비강 면역 미세환경 샘플링을 위한 식염수 세척

여기에서는 란셋을 사용한 안면 정맥 천자를 통해 쥐 피험자의 최적화된 채혈 기술을 위한 프로토콜을 제시합니다. 우리는 유세포 분석 평가와 함께 이 기술을 사용하여 형질전환, 선천성 및 리포터 균주의 세포 표현형을 특성화합니다. 혈청 사이토카인 분석 및 당뇨병 연구에도 적합합니다.

쥐 채혈을 위한 안면 정맥 정맥 천자

배우세요 혈액 오염 없이 생쥐 비강 관개액을 수집하는 방법을. 인두 경로와 기관 경로를 활용하여 면역학적 성분과 호흡기 병원체 검출 정확도를 높입니다. 이 기법은 호흡기 면역학 연구에 필수적입니다.

혈액 오염이 없는 Murine Nasal Lavage Fluid Collection

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