2025년 7월 3일
In vivo 컨포칼 현미경은 고해상도의 유망한 이미징 기술입니다. 임상의가 생체 내에서 눈꺼풀 가장자리에서 Demodex를 감지하기 위해 다음 절차를 제시합니다.
우리는 임상 채택을 확대하기 위해 모낭충 진드기의 눈꺼풀을 검출하기 위한 표준화된 생체 내 공초점 현미경 프로토콜을 개발하고 있습니다. 우리는 임상 실습에서 생체 내 모낭충 진드기의 검출을 제한하는 표준화된 IVCM 프로토콜의 후자를 조정하고 있습니다. 비침습적이고 통증이 없으며 신속한 생체 내 검출을 제공하고 추적 관찰이 용이하여 명칭 통증과 잔류 경미한 문제를 제거합니다.
[해설자] 시작하려면 렌즈 청소용 물티슈를 사용하여 장치의 렌즈를 청소하십시오. 알코올에 적신 면봉을 사용하여 머리 받침과 턱받이를 철저히 소독하십시오. 두 개의 검은색 레버를 함께 누르고 턱받침대가 올바른 수평 위치에 있는지 확인하기 위해 턱받침대가 걸릴 때까지 앞으로 당깁니다. 이제 조정 나사를 돌려 검사 전에 카메라를 환자에게서 멀리 옮깁니다. 장치의 현미경 렌즈 전면에 약 0.02밀리리터의 카보머 기반 안과용 젤을 바릅니다. 그런 다음 보호 커버에서 멸균 일회용 폴리메틸메타크릴레이트 캡을 제거합니다. 캡의 측면을 전면에 닿지 않고 현미경 렌즈에 단단히 누릅니다. 그런 다음 캡 앞면에 젤 눈물 대용품 한 방울을 바릅니다. 소프트웨어에서 새 환자 파일을 만듭니다. 이제 검사할 눈꺼풀 가장자리에 프로파라카인 염산염 한 방울을 바르십시오. 작업자의 관점에서 스캐닝 카메라를 왼쪽으로 이동합니다. 그런 다음 CCD 카메라 대물 렌즈를 돌려 제어 이미지를 스캐너 레이저 카메라의 광축에 수직으로 조정합니다. 소프트웨어를 사용하여 새로운 검사를 시작합니다. 검사 데이터 탭의 장치 드롭다운 목록에서 Heidelberg Retina Tomograph Cornea를 선택하고 각막 모듈 설정 대화 상자를 관찰합니다. 필드 렌즈 드롭다운 목록에서 FOV 400을 선택하고 확인을 클릭하여 확인합니다. 그런 다음 획득 창이 열릴 때까지 기다렸다가 스캐닝 레이저 카메라 라이브 이미지 및 제어 이미지의 표시를 확인합니다. 다음으로 획득 기간에서 요소를 설정합니다. CCD 줌 팩터(CCD Zoom Factor) 드롭다운에서 1x를 선택하여 제어 이미지 크기를 설정합니다. 자동 밝기 및 자동 상자를 선택하여 자동 밝기 제어를 활성화합니다. 단면 스캔 유형이 선택되어 있는지 확인합니다. 참조 이미지를 획득하려면 자동 밝기 제어를 끕니다. 그런 다음 라이브 이미지가 어두워질 때까지 조정 핀으로 초점면을 조정한 후 밝은 반사가 나타나 폴리메틸메타크릴레이트 캡의 전면을 나타냅니다. 초점 위치 마이크로미터 섹션에서 재설정을 클릭하고 값이 0이 될 때까지 기다립니다. 그런 다음 자동 밝기 상자를 선택하고 자동 재설정을 끕니다. 이제 검사대의 높이를 조정하십시오. 환자의 턱을 턱받침대에 놓고 이마를 이마 받침대에 대십시오. 환자의 윗 눈꺼풀이 머리 받침 기둥의 빨간색 표시와 정렬되도록 검은색 나사를 사용하여 턱받이 높이를 조정합니다. 환자에게 고정된 광원을 향해 아래를 바라보고 일정한 시선을 유지하도록 지시합니다. 면봉으로 윗 눈꺼풀을 뒤집어 속눈썹 뿌리와 눈꺼풀 가장자리를 완전히 노출시킵니다. 조정 나사를 돌려 레이저 빔 반사를 위 눈꺼풀 높이에 맞춥니다. 그런 다음 위 눈꺼풀 가장자리가 폴리메틸메타크릴레이트 캡의 중앙에 부드럽게 닿을 때까지 스캐닝 레이저 카메라를 움직입니다. 눈꺼풀 가장자리의 미세한 수평 움직임을 사용하여 측두쪽에서 비강까지 속눈썹 뿌리를 주의 깊게 스캔합니다. 현미경 렌즈를 시계 방향 또는 시계 반대 방향으로 돌려 초점을 수정하고 전체 모낭과 뿌리를 관찰합니다. 풋 페달을 사용하여 의심되는 모든 모낭충 이미지를 기록합니다. 검사를 종료한 후 옵션 대화 상자에서 획득 시간으로 빠르게 정렬을 선택하여 측두에서 비강으로 이미지를 표시합니다. 2024년에는 모낭충 검출을 위해 생체 내 공초점 현미경 검사를 받는 피험자의 수가 2023년에 비해 모든 연령대에서 크게 증가했으며, 21세에서 30세 사이의 연령대에서 가장 많은 수가 관찰되었습니다. 2024년에 도입된 표준 운영 절차에서는 4세부터 90세 이상까지 피험자를 포함할 수 있었습니다.
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본 논문은 눈꺼풀 가장자리에서 모낭충(Demodex mites)을 검출하기 위한 표준화된 생체 내 공초점 현미경(in vivo confocal microscopy) 프로토콜을 제시합니다. 이 방법은 비침습적이며 임상 도입을 확대하는 것을 목표로 합니다.
눈꺼풀 가장자리에서 모낭충(Demodex mite) 검출을 위해 표준화된 생체 내 공초점 현미경(in vivo confocal microscopy, IVCM) 검사는 안구 표면 연구에서 비침습적이고 재현 가능하며 정량적인 이미징에 대한 중요한 요구를 충족합니다. 본 프로토콜은 광범위한 연령층에 걸쳐 신속하고 통증 없는 평가를 가능하게 하여, 초기 발견 및 임상 검증 워크플로우에서 중개 연구의 연속성을 지원하고 절차적 변동성을 줄여줍니다. IVCM의 도입은 안과 질환 모델의 예측 신뢰도를 높이며, 연구 간 비교 가능성을 위한 기업 전반의 표준화를 촉진합니다.
IVCM은 안구 표면 연구 및 항기생충 스크리닝을 위한 표준화된 정량적 영상 모달리티를 제공함으로써, 발견부터 전임상 단계에 이르는 연속 과정에 통합됩니다.