Name: N-메틸-D-아스파르트산(NMDA) 유발 흥분독성 하에서 망막신경절세포의 해부학적 특징 검사 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-09-19T12:40:00.000+00:00
Duration: 7 min 11 s
Description: 학습하세요 NMDA 유발 흥분독성 하에서 망막신경절세포의 해부학적 특징을 유전자 지향적 알칼리성 인산효소 표지법으로 검사하는 방법입니다. 마우스 망막을 이용하여 퇴행 과정에서 새로운 표현형을 식별하고 망막 생물학 및 잠재적 치료 표적에 대한 이해를 높입니다.

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<li>Kiyama, T., Chen, C. K., Zhang, A., Mao, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+Susceptibility+of+Retinal+Neurons+to+the+Loss+of+Mitochondrial+Biogenesis+Factor+Nrf1%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Differential Susceptibility of Retinal Neurons to the Loss of Mitochondrial Biogenesis Factor Nrf1.</a> Cells. 11 (14), 2203(2022).</li>
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<li>Park, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Promoting+axon+regeneration+in+the+adult+CNS+by+modulation+of+the+PTEN%2FmTOR+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Promoting axon regeneration in the adult CNS by modulation of the PTEN/mTOR pathway.</a> Science. 322 (5903), 963-966 (2008).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0.5% 에리스로마이신 안과용 연고&nbsp;</td><td>바우쉬+롬</td><td>24208-910-55</td><td></td></tr><tr><td>0.5% 프로파라카인 염산염&nbsp;</td><td>바우쉬+롬</td><td>24208-730-06</td><td></td></tr><tr><td>10% 중성 완충 포르말린&nbsp;</td><td>VWR</td><td>89370-094</td><td></td></tr><tr><td>10cm 페리디</td><td>코 닝</td><td>430167</td><td></td></tr><tr><td>PBS 10배</td><td>피셔 사이언티픽</td><td>BP399 시리즈</td><td>물에 희석하여 1x PBS 및 오토클레이브를 만듭니다.&nbsp;</td></tr><tr><td>2.0ml 튜브</td><td>VWR</td><td>525-1136</td><td></td></tr><tr><td>30 게이지 주입 바늘</td><td>엑셀린트 인터내셔널</td><td>26437</td><td></td></tr><tr><td>30mm 페리디</td><td>송골매</td><td>35208</td><td></td></tr><tr><td>벤질 알코홀&nbsp;</td><td>아크로스 오가닉스</td><td>447000010</td><td></td></tr><tr><td>벤질 벤즈에이트</td><td>아크로스 오가닉스</td><td>105860010</td><td></td></tr><tr><td>질산셀룰로오스 멤브레인 필터</td><td>사이티바</td><td>7188-002</td><td></td></tr><tr><td>커버 슬립</td><td>전자현미경 과학</td><td>72204-01</td><td></td></tr><tr><td>양면 테이프</td><td>스카치</td><td>597020</td><td></td></tr><tr><td>에탄올</td><td>데콘 연구소</td><td>2716</td><td>AP 염색 후 탈수질을 위해 Fisher Bioreagents(Cat#: BP2818)를 피하십시오. 이 시약은 망막을 왜곡합니다.</td></tr><tr><td>집게</td><td>테드 펠라</td><td>505</td><td></td></tr><tr><td>가열 패드</td><td>테라템</td><td>710298-001</td><td></td></tr><tr><td>인슐린 주사기</td><td>BD</td><td>329424</td><td></td></tr><tr><td>케타민</td><td>데크라</td><td>17033010110</td><td></td></tr><tr><td>현미경</td><td>자이스</td><td>Axio 이미저 2</td><td></td></tr><tr><td>매니큐어</td><td>전자현미경 과학</td><td>72180</td><td></td></tr><tr><td>나노필 인젝터</td><td>세계 정밀 기기</td><td>나노필</td><td></td></tr><tr><td>나노필 바늘</td><td>세계 정밀 기기</td><td>NF25BL</td><td></td></tr><tr><td>NBT/BICP 시약 키트</td><td>인비트로젠</td><td>N6547</td><td></td></tr><tr><td>NMDA</td><td>시그마-알드리치</td><td>M3262</td><td></td></tr><tr><td>페인트 브러시</td><td>킹아트</td><td>6650</td><td></td></tr><tr><td>슬라이드 유리</td><td>피셔 사이언티픽</td><td>12-550-15</td><td></td></tr><tr><td>실체 현미경</td><td>모틱</td><td>DM143</td><td></td></tr><tr><td>해바라기씨 오일</td><td>시그마-알드리치</td><td>S5007</td><td></td></tr><tr><td>타목시펜</td><td>시그마-알드리치</td><td>티5648</td><td>타목시펜 용액을 4도 및 온도에서 보관하십시오. 차광 상자에 C. 일주일 이내에 타목시펜 용액을 사용하십시오.</td></tr><tr><td>반나 가위&nbsp;</td><td>정밀 과학 도구</td><td>15000-00</td><td></td></tr><tr><td>수조</td><td>랩 라인</td><td>18052</td><td></td></tr><tr><td>자일라진</td><td>데크라</td><td>17033-0099-05</td><td>상품명: 롬푼</td></tr></tbody></table>

n-메틸-d-아스파르트산(nmda) 유발 흥분독성 하에서 망막신경절세포의 해부학적 특징 검사

Examination of Anatomical Features of Retinal Ganglion Cells Under N-methyl-D-aspartic Acid (NMDA)-induced Excitotoxicity

유리체에 NMDA를 적용하면 RGC 사멸이 유도되며, 이는 전통적으로 RGC 마커를 사용한 조직학적 염색 또는 면역형광(IF) 염색을 사용하여 검출되었습니다. 우리의 실험 설정에서 범-RGC 마커 RBPMS와 함께 기존의 IF 전략을 사용하여 NMDA 주사 1주일 후에 RGC의 수가 약 65% 감소했음을 확인했습니다(그림 2E-G). 이전 연구에서는 Tbr2 발현 RGC가 실제로 ipRGC임을 발견했습니다34,35. Tbr2CreER2에서 AP 염색 사용; RosaiAP 망막에서 우리는 소수의 Tbr2 발현 RGC만이 생존한 반면 대부분의 Tbr2 발현 RGC 및 AC는 주사 후 1주일 후에 사라진 것을 관찰했습니다(그림 2A,B</s...

N-메틸-D-아스파르트산(NMDA) 유발 흥분독성 하에서 망막신경절세포의 해부학적 특징 검사

Retinal ganglion cells (RGCs) are the output neurons of the retina, responsible for transmitting visual information to the brain. In the mature mouse ...

examination-anatomical-features-retinal-ganglion-cells-under-n-methyl

Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

Intravitreous 주사는 안구 질환 또는 현지 치료의 직접적인 응용 프로그램으로 시각 과학 연구에 널리 사용되는 기법입니다. 이 동영상은 유리 피펫과 1ml 주사기를 사용하여 intravitreous 사출을위한 프로토콜을 보여주었다. 과다 출혈 및 렌즈 손상을 피하에 대한 유용한 팁은 주어집니다.

안구 질환 모델 구축을위한 Intravitreous 사출

이 비디오는 망막 신경절 세포의 개수 (RGCs)를 quantifying하고 RGCs의 크기를 측정, 내부 핵 층의 두께를 측정 포함 망막의 morphometric 분석의 세 가지 유형을 보여줍니다. 기술 morphometric 분석을위한 간단하면서도 과학적인 플랫폼을 제공할 수 있습니다.

망막 섹션 Morphometric 분석

이 동영상은 순진 마우스 시각 투사의 조영 증강 자기 공명 영상과 급성 시신경 압박 손상 및 만성 시신경 변성과 관련된 시신경 변성의 반복 및 종 생체 내 연구에, 임상 3 T 스캐너를 사용하는 방법을 보여줍니다 녹아웃 마우스 (P50 KO).

마우스의 조영 증강 MRI에 의한 시신경 섬유 무결성의 생체 내 이미징

면역 프로토콜은 망막에있는 특정 단백질의 현지화를 연구하는 데 사용됩니다. 칼슘 이미징 기술은 망막 신경절 세포 축색 돌기 칼슘 역학을 연구하기 위해 사용된다.

Wholemount 쥐의 망막에서 면역 조직 화학 및 칼슘 이미징 방법

이 프로토콜 분리 하 고 기본 마우스 뇌과 립 신경 (CGNs) 6-7 주 오래 된 강아지, 손실에 대 한 CGNs의 효율적인 변환 및 기능 연구의 이득에서에서 경작 하 고 NMDA 유발 신경 excitotoxicity, 모델링에 대 한 간단한 방법을 설명 합니다. 낮은 칼륨-유도 된 세포 죽음, DNA 손상 및 산화 스트레스 같은 문화 모델을 사용 하...

신경 죽음 및 마우스 기본 소 뇌과 립 신경에 변성을 모델링

이 프로토콜의 목표는 더 큰 규모에 NMDA 수용 체 (NMDAR)의 연구를 촉진 하기 위하여 작은 분자의 modulatory 효력의 검사 및 치료 응용 프로그램입니다.

글리신/D-떠들고와 조미료에 감도와 NMDA 수용 체를 공부 하는 높은 처리량 칼슘-플럭스 분석 결과

생체 내 이미징은 건강 및 질병 생물학 연구를위한 강력한 도구입니다. 이 프로토콜은 표준 2 광자 현미경으로 마우스 망막의 경공 영상을 설명합니다. 또한 망막의 여러 세포 코호트를 형광으로 표지하는 다양한 생체 내 이미징 방법을 보여줍니다.

경동공 이광자 마우스 망막의 생체 내 이미징

이 문서는 공초점 살아있는 현미경 검사를 사용하여 1 차해 및 피질 뉴런에 있는 급성 동요에 기초 redox 상태 및 redox 반응에 있는 다름을 결정하는 프로토콜을 기술합니다. 프로토콜은 최소한의 수정으로 다른 세포 유형 및 현미경에 적용 될 수 있습니다.

비율 표시기를 사용하여 1 차 신경에 있는 미토콘드리아 글루타티온 Redox 상태의 살아있는 화상 진찰

메탄올은 망막 전체 마운트 제제 및 장기 보관을 위한 보조 고정 배지로 사용할 수 있으며, 이는 망막 신경절 세포의 조사에 유용합니다.

망막 신경절 세포 조사를 위한 메탄올 기반 전체 마운트 준비

이 동영상은 우수한 colliculus (SC)의 표면에 플루오로 - 금 (FG)를 적용하여 RGC의 역행 라벨링 방법을 설명합니다. 기술은 두개골을 시추 피질을 aspirating와 SC의 전체 등의 표면 위에 젤라틴 스폰지를 적용 포함됩니다.

우수한 Colliculus의 표면에 플루오로 - 골드의 응용 프로그램에 의해 망막 신경절 세포의 퇴보 라벨링

학습하세요 NMDA 유발 흥분독성 하에서 망막신경절세포의 해부학적 특징을 유전자 지향적 알칼리성 인산효소 표지법으로 검사하는 방법입니다. 마우스 망막을 이용하여 퇴행 과정에서 새로운 표현형을 식별하고 망막 생물학 및 잠재적 치료 표적에 대한 이해를 높입니다.

N-메틸-D-아스파르트산(NMDA) 유발 흥분독성 하에서 망막신경절세포의 해부학적 특징 검사

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