Name: 확장 현미경: 기존 현미경을 이용한 고해상도 형광 영상 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-12-19T12:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 53 s
Description: 배우세요 저온 고정과 확장 현미경을 결합한 고해상도 세포 영상 기법을 통해 미토콘드리아와 미세소관의 원생 구조를 보존하는 방법을. 이 프로토콜은 표준 광학 현미경으로 초고해상도 이미징을 가능하게 합니다.

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<ol><li>Jacquemet, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+cell+biologist%27s+guide+to+super-resolution+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Sci%22%5BJournal%5D)">The cell biologist's guide to super-resolution microscopy.</a> J Cell Sci. 133 (11), jcs240713(2020).</li>
<li>Chen, F., Tillberg, P. W., Boyden, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optical+imaging%3A+expansion+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Optical imaging: expansion microscopy.</a> Science. 347 (6221), 543-548 (2015).</li>
<li>Laporte, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time-series+reconstruction+of+the+molecular+architecture+of+human+centriole+assembly%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Time-series reconstruction of the molecular architecture of human centriole assembly.</a> Cell. 187 (9), 2158-2174 (2024).</li>
<li>Steib, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((WDR90+is+a+centriolar+microtubule+wall+protein+important+for+centriole+architecture+integrity%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">WDR90 is a centriolar microtubule wall protein important for centriole architecture integrity.</a> Elife. 9, e57205(2020).</li>
<li>Le Borgne, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+evolutionary+conserved+proteins+CEP90%2C+FOPNL%2C+and+OFD1+recruit+centriolar+distal+appendage+proteins+to+initiate+their+assembly%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biol%22%5BJournal%5D)">The evolutionary conserved proteins CEP90, FOPNL, and OFD1 recruit centriolar distal appendage proteins to initiate their assembly.</a> PLoS Biol. 20 (9), e3001782(2022).</li>
<li>Bertiaux, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expansion+microscopy+provides+new+insights+into+the+cytoskeleton+of+malaria+parasites+including+the+conservation+of+a+conoid%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biol%22%5BJournal%5D)">Expansion microscopy provides new insights into the cytoskeleton of malaria parasites including the conservation of a conoid.</a> PLoS Biol. 19 (3), e3001020(2021).</li>
<li>Liffner, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atlas+of+Plasmodium+falciparum+intraerythrocytic+development+using+expansion+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Atlas of Plasmodium falciparum intraerythrocytic development using expansion microscopy.</a> Elife. 12, RP88088(2023).</li>
<li>Amodeo, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+the+novel+mitochondrial+genome+segregation+factor+TAP110+in+Trypanosoma+brucei%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Sci%22%5BJournal%5D)">Characterization of the novel mitochondrial genome segregation factor TAP110 in Trypanosoma brucei.</a> J Cell Sci. 134 (5), jcs254300(2021).</li>
<li>Corrales, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tubulin+detyrosination+shapes+Leishmania+cytoskeletal+architecture+and+virulence%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Tubulin detyrosination shapes Leishmania cytoskeletal architecture and virulence.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 122 (3), e2415296122(2025).</li>
<li>Brunet, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drosophila+Alms1+proteins+regulate+centriolar+cartwheel+assembly+by+enabling+Plk4-Ana2+amplification+loop%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+J%22%5BJournal%5D)">Drosophila Alms1 proteins regulate centriolar cartwheel assembly by enabling Plk4-Ana2 amplification loop.</a> EMBO J. 44 (8), 2396(2025).</li>
<li>Langner, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrastructure+expansion+microscopy+%28U-ExM%29+of+mouse+and+human+kidneys+for+analysis+of+subcellular+structures%5BTitle%5D)+AND+%22Cytoskeleton+%28Hoboken%29%22%5BJournal%5D)">Ultrastructure expansion microscopy (U-ExM) of mouse and human kidneys for analysis of subcellular structures.</a> Cytoskeleton (Hoboken). 81 (11), 618-638 (2024).</li>
<li>Mercey, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+connecting+cilium+inner+scaffold+provides+a+structural+foundation+that+protects+against+retinal+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biol%22%5BJournal%5D)">The connecting cilium inner scaffold provides a structural foundation that protects against retinal degeneration.</a> PLoS Biol. 20 (6), e3001649(2022).</li>
<li>Steib, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TissUExM+enables+quantitative+ultrastructural+analysis+in+whole+vertebrate+embryos+by+expansion+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep+Methods%22%5BJournal%5D)">TissUExM enables quantitative ultrastructural analysis in whole vertebrate embryos by expansion microscopy.</a> Cell Rep Methods. 2 (10), 100311(2022).</li>
<li>Freifeld, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expansion+microscopy+of+zebrafish+for+neuroscience+and+developmental+biology+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Expansion microscopy of zebrafish for neuroscience and developmental biology studies.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 114 (50), E10799-E10808 (2017).</li>
<li>Yu, C. J., Orozco Cosio, D. M., Boyden, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ExCel%3A+super-resolution+imaging+of+C.+elegans+with+expansion+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">ExCel: super-resolution imaging of C. elegans with expansion microscopy.</a> Methods Mol Biol. 2468, 141-203 (2022).</li>
<li>Tillberg, P. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protein-retention+expansion+microscopy+of+cells+and+tissues+labeled+using+standard+fluorescent+proteins+and+antibodies%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Protein-retention expansion microscopy of cells and tissues labeled using standard fluorescent proteins and antibodies.</a> Nat Biotechnol. 34 (9), 987-992 (2016).</li>
<li>Gambarotto, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+cellular+ultrastructures+using+expansion+microscopy+%28U-ExM%29%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Imaging cellular ultrastructures using expansion microscopy (U-ExM).</a> Nat Methods. 16 (1), 71-74 (2019).</li>
<li>Ku, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiplexed+and+scalable+super-resolution+imaging+of+three-dimensional+protein+localization+in+size-adjustable+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Multiplexed and scalable super-resolution imaging of three-dimensional protein localization in size-adjustable tissues.</a> Nat Biotechnol. 34 (9), 973-981 (2016).</li>
<li>Schnell, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunolabeling+artifacts+and+the+need+for+live-cell+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Immunolabeling artifacts and the need for live-cell imaging.</a> Nat Methods. 9 (2), 152-158 (2012).</li>
<li>Dubochet, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cryo-EM-the+first+thirty+years%5BTitle%5D)+AND+%22J+Microsc%22%5BJournal%5D)">Cryo-EM-the first thirty years.</a> J Microsc. 245 (3), 221-224 (2012).</li>
<li>Neuhaus, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ethane-freezing%2Fmethanol-fixation+of+cell+monolayers%3A+a+procedure+for+improved+preservation+of+structure+and+antigenicity+for+light+and+electron+microscopies%5BTitle%5D)+AND+%22J+Struct+Biol%22%5BJournal%5D)">Ethane-freezing/methanol-fixation of cell monolayers: a procedure for improved preservation of structure and antigenicity for light and electron microscopies.</a> J Struct Biol. 121 (3), 326-342 (1998).</li>
<li>Kellenberger, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+potential+of+cryofixation+and+freeze+substitution%3A+observations+and+theoretical+considerations%5BTitle%5D)+AND+%22J+Microsc%22%5BJournal%5D)">The potential of cryofixation and freeze substitution: observations and theoretical considerations.</a> J Microsc. 161 (Pt 2), 183-203 (1991).</li>
<li>Laporte, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualizing+the+native+cellular+organization+by+coupling+cryofixation+with+expansion+microscopy+%28Cryo-ExM%29%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Visualizing the native cellular organization by coupling cryofixation with expansion microscopy (Cryo-ExM).</a> Nat Methods. 19 (2), 216-222 (2022).</li>
<li>Hinterndorfer, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrastructure+expansion+microscopy+reveals+the+cellular+architecture+of+budding+and+fission+yeast%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Sci%22%5BJournal%5D)">Ultrastructure expansion microscopy reveals the cellular architecture of budding and fission yeast.</a> J Cell Sci. 135 (24), jcs260240(2022).</li>
<li>Mikus, F., Dey, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrastructure+expansion+microscopy+%28U-ExM%29+of+the+fission+yeast+Schizosaccharomyces+pombe%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Ultrastructure expansion microscopy (U-ExM) of the fission yeast Schizosaccharomyces pombe.</a> Methods Mol Biol. 2862, 47-59 (2025).</li>
<li>Ben Chaabene, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toxoplasma+gondii+rhoptry+discharge+factor+3+is+essential+for+invasion+and+microtubule-associated+vesicle+biogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biol%22%5BJournal%5D)">Toxoplasma gondii rhoptry discharge factor 3 is essential for invasion and microtubule-associated vesicle biogenesis.</a> PLoS Biol. 22 (8), e3002745(2024).</li>
<li>Shah, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Life-cycle-coupled+evolution+of+mitosis+in+close+relatives+of+animals%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Life-cycle-coupled evolution of mitosis in close relatives of animals.</a> Nature. 630 (8015), 116-122 (2024).</li>
<li>Klena, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+in-depth+guide+to+the+ultrastructural+expansion+microscopy+%28U-ExM%29+of+Chlamydomonas+reinhardtii%5BTitle%5D)+AND+%22Bio+Protoc%22%5BJournal%5D)">An in-depth guide to the ultrastructural expansion microscopy (U-ExM) of Chlamydomonas reinhardtii.</a> Bio Protoc. 13 (17), e4792(2023).</li>
<li>van den Hoek, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+situ+architecture+of+the+ciliary+base+reveals+the+stepwise+assembly+of+intraflagellar+transport+trains%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">In situ architecture of the ciliary base reveals the stepwise assembly of intraflagellar transport trains.</a> Science. 377 (6605), 543-548 (2022).</li>
<li>Mikus, F., et al. Charting the landscape of cytoskeletal diversity in microbial eukaryotes. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMikus%2C+F+%22bioRxiv%22">bioRxiv</a>. , (2024).</li>
<li>Petrich, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expanding+insights%3A+harnessing+expansion+microscopy+for+super-resolution+analysis+of+HIV-1-cell+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Viruses%22%5BJournal%5D)">Expanding insights: harnessing expansion microscopy for super-resolution analysis of HIV-1-cell interactions.</a> Viruses. 16 (10), 1610(2024).</li>
<li>Louvel, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((iU-ExM%3A+nanoscopy+of+organelles+and+tissues+with+iterative+ultrastructure+expansion+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">iU-ExM: nanoscopy of organelles and tissues with iterative ultrastructure expansion microscopy.</a> Nat Commun. 14 (1), 7893(2023).</li>
<li>Lemaître, F., et al. Unveiling the molecular architecture of T cells and immune synapses with cryo-expansion microscopy. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aLema%C3%AEtre%2C+F+%22bioRxiv%22">bioRxiv</a>. , (2025).</li>
<li>Millierioux, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((De+novo+biosynthesis+of+sterols+and+fatty+acids+in+the+Trypanosoma+brucei+procyclic+form%3A+carbon+source+preferences+and+metabolic+flux+redistributions%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">De novo biosynthesis of sterols and fatty acids in the Trypanosoma brucei procyclic form: carbon source preferences and metabolic flux redistributions.</a> PLoS Pathog. 14 (5), e1007116(2018).</li>
<li>Bangs, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+cloning+and+cellular+localization+of+a+BiP+homologue+in+Trypanosoma+brucei%3A+divergent+ER+retention+signals+in+a+lower+eukaryote%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Sci%22%5BJournal%5D)">Molecular cloning and cellular localization of a BiP homologue in Trypanosoma brucei: divergent ER retention signals in a lower eukaryote.</a> J Cell Sci. 105 (Pt 4), 1101-1113 (1993).</li>
<li>Dolgin, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%27Expansion+microscopy%27+turns+ten%3A+how+a+tissue-swelling+method+brought+super-resolution+imaging+to+the+masses%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">'Expansion microscopy' turns ten: how a tissue-swelling method brought super-resolution imaging to the masses.</a> Nature. 637 (8046), 752-754 (2025).</li>
<li>Tosetti, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Essential+function+of+the+alveolin+network+in+the+subpellicular+microtubules+and+conoid+assembly+in+Toxoplasma+gondii%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Essential function of the alveolin network in the subpellicular microtubules and conoid assembly in Toxoplasma gondii.</a> Elife. 9, e56635(2020).</li>
<li>Gorilak, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expansion+microscopy+facilitates+quantitative+super-resolution+studies+of+cytoskeletal+structures+in+kinetoplastid+parasites%5BTitle%5D)+AND+%22Open+Biol%22%5BJournal%5D)">Expansion microscopy facilitates quantitative super-resolution studies of cytoskeletal structures in kinetoplastid parasites.</a> Open Biol. 11 (9), 210131(2021).</li>
<li>Halpern, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hybrid+structured+illumination+expansion+microscopy+reveals+microbial+cytoskeleton+organization%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Nano%22%5BJournal%5D)">Hybrid structured illumination expansion microscopy reveals microbial cytoskeleton organization.</a> ACS Nano. 11 (12), 12677-12686 (2017).</li>
<li>Gao, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expansion+stimulated+emission+depletion+microscopy+%28ExSTED%29%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Nano%22%5BJournal%5D)">Expansion stimulated emission depletion microscopy (ExSTED).</a> ACS Nano. 12 (5), 4178-4185 (2018).</li>
<li>Zwettler, F. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+resolution+imaging+by+post-labeling+expansion+single-molecule+localization+microscopy+%28Ex-SMLM%29%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Molecular resolution imaging by post-labeling expansion single-molecule localization microscopy (Ex-SMLM).</a> Nat Commun. 11 (1), 3388(2020).</li>
<li>Daetwyler, S., Fiolka, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Light-sheets+and+smart+microscopy%2C+an+exciting+future+is+dawning%5BTitle%5D)+AND+%22Commun+Biol%22%5BJournal%5D)">Light-sheets and smart microscopy, an exciting future is dawning.</a> Commun Biol. 6 (1), 502(2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>5ml 튜브 금속 홀더</td><td>도미니크 뒤처</td><td>QB-E5</td><td>동결 치환 단계</td></tr><tr><td>620 수동 크라이오 플런저</td><td>호스트</td><td>https://rhost-em.com/</td><td>냉동 고정 단계</td></tr><tr><td>아세톤 99.8% 아크로실</td><td>아크로스 오가닉스</td><td>고양이. 번호 67-64-1 & nbsp;</td><td>동결 치환 단계</td></tr><tr><td>아크릴라마이드 40% (AA)</td><td>시그마-올드리치</td><td>A4058</td><td>확장 절차 & nbsp; (닻 내리기)</td></tr><tr><td>아크릴산 &nbsp;</td><td>시그마-올드리치</td><td>8.00181&nbsp;</td><td>팽창 절차 (폴리머)</td></tr><tr><td>과황산암모늄(APS)</td><td>써모피셔</td><td>17874</td><td>팽창 절차 (폴리머)</td></tr><tr><td>생검 펀치</td><td>도미니크 뒤처</td><td>PUK-40</td><td>변성 전에 젤을 절단할 때 필요하며;</td></tr><tr><td>BSA</td><td>시그마-올드리치</td><td>P1379</td><td>면역 염색&nbsp;</td></tr><tr><td>세포 챔버 아토플루어</td><td>인비트로젠</td><td>A7816</td><td>24mm 커버슬립에 맞게 개조된 영상 챔버</td></tr><tr><td>세포 챔버</td><td>생애 이매그닝 서비스</td><td>10900</td><td>18mm 커버슬립에 맞게 개조된 영상 챔버</td></tr><tr><td>커버슬립 12mm&nbsp;</td><td>도미니크 뒤처</td><td>100040</td><td>성장 세포 / T. brucei 부착</td></tr><tr><td>커버슬립 24mm&nbsp;</td><td>도미니크 뒤처</td><td>900547</td><td>영상 촬영 및 nbsp;</td></tr><tr><td>커버슬립 18mm</td><td>VWR</td><td>631-0153</td><td>영상 촬영 및 nbsp;</td></tr><tr><td>에탄 가즈&nbsp;</td><td>린데 가즈</td><td>88888DE</td><td>냉동 고정에 필요하다</td></tr><tr><td>포름알데히드 36.5&ndash; 38% (FA)</td><td>시그마-올드리치</td><td>그리고 nbsp; F8775</td><td>확장 절차 & nbsp; (닻 내리기)</td></tr><tr><td>글루타알드헤하이드 25% (조지아)</td><td>시그마-올드리치</td><td>그리고 nbsp; G5882</td><td>동결 치환 단계</td></tr><tr><td>글리세롤 &nbsp;</td><td>유로메덱스&nbsp;</td><td>EU3550</td><td>장기 젤 저장 및 nbsp;</td></tr><tr><td>액체 질소 &nbsp;</td><td>린데 가즈</td><td>2200975</td><td>냉동 고정(시스템 냉각)에 필요함</td></tr><tr><td>마이크로튜브 클리어락 5ml&nbsp;</td><td>도미니크 뒤처</td><td>390932A</td><td>냉동 대체에 필요하다</td></tr><tr><td>니들 18G</td><td>도미니크 뒤처</td><td>050123B</td><td>아세톤 수집이 필요해</td></tr><tr><td>N,N-메틸비사크릴아마이드 2% (BIS)</td><td>시그마-올드리치</td><td>M1533, SIGMA</td><td>팽창 절차 (폴리머)</td></tr><tr><td>파라포름알데히드 16% (PFA)</td><td>응급의료 서비스</td><td>고양이. 번호 15710</td><td>동결 치환 단계</td></tr><tr><td>폴리-D-라이신</td><td>시그마-올드리치</td><td>P1024</td><td>샘플/이미징용 코팅 커버슬립 등;</td></tr><tr><td>폴리-L-라이신</td><td>시그마-올드리치</td><td>P1274</td><td>샘플/이미징용 코팅 커버슬립 등;</td></tr><tr><td>압력 재조정기와 nbsp;</td><td>린데 가즈</td><td>CPLH0SJ-린224</td><td>에탄 교란을 허용하는 압력 재조정기(냉동 고정)</td></tr><tr><td>Seringe Terumo 10ml</td><td>도미니크 뒤처</td><td>50132</td><td>아세톤 수집이 필요해</td></tr><tr><td>실리콘 엘라스토머 키트</td><td>다우</td><td>4001834</td><td>실리온 웰 플레이트 준비(면역염색) 키트 및 nbsp;</td></tr><tr><td>아크릴레이트 나트륨 97-99% (SA)</td><td>시그마-올드리치</td><td>408220</td><td>팽창 절차 (폴리머)</td></tr><tr><td>AK 사이언티픽</td><td>R624</td><td>팽창 절차 (폴리머)</td><td></td></tr><tr><td>도데실 황산나트륨</td><td>유로메덱스</td><td>EU0660</td><td>팽창 절차(변성)</td></tr><tr><td>테트라메틸레틸렌디아민 (TEMED)</td><td>써모피셔</td><td>17919</td><td>팽창 절차 (폴리머)</td></tr><tr><td>튜브 & nbsp;</td><td>써모 사이언티픽</td><td>8060-0060</td><td>에탄 차단(냉동 고정)용 튜빙</td></tr><tr><td>트윈-20</td><td>유로메덱스</td><td>1005-7</td><td>면역 염색&nbsp;</td></tr><tr><td>핀셋 듀몽 n&deg; 5&nbsp;</td><td>파인사이언스툴스</td><td>11255-20</td><td>커버 슬립 조작 및 nbsp;</td></tr></tbody></table>

확장 현미경: 기존 현미경을 이용한 고해상도 형광 영상

Expansion Microscopy: High-Resolution Fluorescent Imaging with a Conventional Microscope

Expansion microscopy (ExM) is an innovative super-resolution fluorescence microscopy technique that physically enlarges biological specimens, enabling ...

expansion-microscopy-high-resolution-fluorescent-imaging-with

Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

그들의 모국어 microenvironment에서 진화 많은 생물 학적 및 임상 상황에서는 그것은 세포 프로세스를 연구에 유리합니다. 여기 우리는 세포 배양, 동물 실험 및 임상 환자 연구에 실시간 영상을 제공할 수있는 저비 용의 광섬유 현미경의 조립 및 사용에 대해 설명합니다.

고해상도 광섬유 Microendoscopy에 대한 현장에서 세포 이미징

살아있는 세포 내부의 동적 단백질에 대한 시공간 정보는 생물학을 이해하는 데 매우 중요합니다. f3D-SIM(fast 3D-structured illumination microscopy)이라고 하는 초고해상도 현미경 검사의 한 유형은 박테리아의 사이토키네틱 Z 고리에 대한 고유한 정보, 즉 구슬 모양의 모양과 고리 내 FtsZ의 빠른 역학을 모두 보여줍니다.

고속 3D 구조 조명 현미경을 사용하여 라이브 박테리아의 Cytokinetic Z 반지의 슈퍼 해상도 이미징 (F3D-SIM)

여기에 우리가 현재 기존의 피 형광 이미징, 단일 분자 검출 기반 슈퍼 해상도 이미징, 및 다중 색상 단일 분자 검출 병합, 통합된 현미경 시스템 구축의 실용적인 가이드 포함 단일 분자 형광 공명 에너지 비용 효율적인 방법으로 하나의 설정으로 이미지를 전송 합니다.

실시 한 형광 현미경으로 여러 영상 모드

임상 조직 견본의 나노 규모 화상 진찰은 질병 병인의 이해를 향상할 수 있습니다. 확장 병리학 (ExPath)은 표준 임상 조직 샘플과의 호환성을 위해 변형 된 확장 현미경 검사법 (ExM)의 버전으로, 기존의 회절 제한된 현미경을 사용하여 생체 분자의 나노 스케일 구성을 탐구합니다.

물리적 및 등방성 확장을 통해 인간 조직 섹션의 나노 스코프 이미징

제시된 방법은 확장 현미경으로 형광 표지된 세포 단백질의 시각화를 가능하게 하고 전통적인 현미경에 70 nm의 해상도로 이끌어 냅니다.

확장 현미경 검사법을 가진 Podocytic 단백질 Nephrin, 액틴 및 포도신의 화상 진찰

여기에서는 기존의 레이저 스캐닝 컨포칼 현미경을 사용하여 초고해상도 이미징을 달성하기 위해 초기 초파리 배아에서 확장 현미경을 구현하기 위한 프로토콜을 제시합니다.

초고해상도 이미징을 위해 확장 현미경을 사용하여 전체 마운트 초파리 배아를 물리적으로 확대

여기에 제시된 확장 현미경(ExM)의 새로운 버전인 Magnify는 최대 11배 확장을 위해 수정되어 포괄적인 생체 분자 클래스 배열을 보존하고 광범위한 조직 유형과 호환됩니다. 이를 통해 기존의 회절 제한 현미경을 사용하여 생체 분자의 나노 크기 구성을 조사할 수 있습니다.

Universal Molecular Retention with 11-Fold Expansion Microscopy(11배 팽창 현미경을 통한 범용 분자 유지)

이 연구는 샤가스병의 원인이 되는 병원체인 트리파노소마 크루지(Trypanosoma cruzi)의 3가지 체외 수명 주기 단계에서 초구조 확장 현미경 검사를 수행하기 위한 상세한 프로토콜을 보여줍니다. 당사는 세포골격 단백질(cytoskeletal proteins) 및 범단백질체(pan-proteome) 라벨링에 최적화된 기술을 포함합니다.

Ultrastructural Expansion Microscopy in Three In Vitro Life Cycle Stages of Trypanosoma cruzi(트리파노소마 크루즈 의 3가지 체외 수명 주기 단계에서의 초구조 확장 현미경)

여기에서는 대사 올리고당 엔지니어링, 클릭 화학 및 확장 현미경 검사를 결합한 간단한 프로토콜을 제안하며, 이를 통해 일상적인 현미경 장비를 사용하여 향상된 해상도로 세포 내 시알릴화된 N-당단백질의 바이오이미징을 가능하게 합니다.

Click Chemistry and Expansion Microscopy를 사용한 세포 내 사이알릴화 시각화

이 프로토콜은 고해상도 셀룰러 및 아셀룰러 이미징을 위한 다중화 배열 검출기와 통합된 레이저 스캐닝 공초점 현미경 시스템의 첨단 영상 응용과 공유 자원 관리를 상세히 설명합니다. 이 워크플로우는 단일 플랫폼 내에서 공초점에서 초해상도(~120 nm)까지 다중 모달 이미징을 가능하게 하여 나노스케일 시각화를 더욱 쉽게 접근할 수 있게 합니다.

초해상도 영상 및 공유 관리: 다중화 검출이 포함된 공초점 현미경 프로토콜

배우세요 저온 고정과 확장 현미경을 결합한 고해상도 세포 영상 기법을 통해 미토콘드리아와 미세소관의 원생 구조를 보존하는 방법을. 이 프로토콜은 표준 광학 현미경으로 초고해상도 이미징을 가능하게 합니다.

확장 현미경: 기존 현미경을 이용한 고해상도 형광 영상

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