Name: 심근손상의 정확하고 신뢰할 수 있는 분석을 위한 현미경 2,3,5-트리페닐테트라졸륨 염화염법 분석법 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-11-28T12:30:00.000+00:00
Duration: 11 min 17 s
Description: 학습하세요 개선된 TTC 염색법을 활용한 심근손상 현미경 분석 기법. 냉동절단 및 Langendorff 관류 장치를 사용하여 심근경색 크기와 심근세포 생존율을 정확하게 평가하는 신뢰할 수 있는 방법을 확인하세요.

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<ol><li>Bolli, R., Becker, L., Gross, G., Mentzer, R., Balshaw, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+protection+at+a+crossroads%3A+the+need+for+translation+into+clinical+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Myocardial protection at a crossroads: the need for translation into clinical therapy.</a> Circ Res. 95 (2), 125-134 (2004).</li>
<li>Murphy, E., Steenbergen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+underlying+acute+protection+from+cardiac+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Mechanisms underlying acute protection from cardiac ischemia-reperfusion injury.</a> Physiol Rev. 88 (2), 581-609 (2008).</li>
<li>Bohl, S., Medway, D. J., Schulz-Menger, J., Schneider, J. E., Neubauer, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Refined+approach+for+quantification+of+in+vivo+ischemia-reperfusion+injury+in+the+mouse+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Refined approach for quantification of in vivo ischemia-reperfusion injury in the mouse heart.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 297 (6), H2054-H2058 (2009).</li>
<li>Liepinsh, E., Kuka, J., Zvejniece, L., Vilskersts, R., Dambrova, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+heart+and+brain+tissue+preparation+for+digital+macro+photography+after+ischemia-reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Rodent heart and brain tissue preparation for digital macro photography after ischemia-reperfusion.</a> J Vis Exp. (180), e62942(2022).</li>
<li>Kim, S. -C., Boehm, O., Meyer, R., Hoeft, A., Knüfermann, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+murine+closed-chest+model+of+myocardial+ischemia+and+reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">A murine closed-chest model of myocardial ischemia and reperfusion.</a> J Vis Exp. (65), e3896(2012).</li>
<li>Lindsey, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+for+experimental+models+of+myocardial+ischemia+and+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Guidelines for experimental models of myocardial ischemia and infarction.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 314 (4), H812-H838 (2018).</li>
<li>Ding, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+refined+TTC+assay+precisely+detects+cardiac+injury+and+cellular+viability+in+the+infarcted+mouse+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">A refined TTC assay precisely detects cardiac injury and cellular viability in the infarcted mouse heart.</a> Sci Rep. 14 (1), 25214(2024).</li>
<li>Zhu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IL-6+coaxes+cellular+dedifferentiation+as+a+pro-regenerative+intermediate+that+contributes+to+pericardial+ADSC-induced+cardiac+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">IL-6 coaxes cellular dedifferentiation as a pro-regenerative intermediate that contributes to pericardial ADSC-induced cardiac repair.</a> Stem Cell Res Ther. 13 (1), 44(2022).</li>
<li>Zhu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sfrp1+as+a+pivotal+paracrine+factor+in+the+trained+pericardial+stem+cells+that+foster+reparative+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Sfrp1 as a pivotal paracrine factor in the trained pericardial stem cells that foster reparative activity.</a> Stem Cells Transl Med. 13 (2), 137-150 (2023).</li>
<li>Yellon, D. M., Hausenloy, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Myocardial reperfusion injury.</a> N Engl J Med. 357, 1121-1135 (2007).</li>
<li>Li, C., Chen, M., Zhang, D., Xu, T., Wang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+injury+induced+by+obstructive+jaundice%3A+a+comprehensive+review%5BTitle%5D)+AND+%22Perioper+Precis+Med%22%5BJournal%5D)">Cardiac injury induced by obstructive jaundice: a comprehensive review.</a> Perioper Precis Med. 28 (1), 28-38 (2025).</li>
<li>Chang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%C3%9F-tubulin+contributes+to+Tongyang+Huoxue+decoction-induced+protection+against+hypoxia%2Freoxygenation-induced+injury+of+sinoatrial+node+cells+through+SIRT1-mediated+regulation+of+mitochondrial+quality+surveillance%5BTitle%5D)+AND+%22Phytomedicine%22%5BJournal%5D)">ß-tubulin contributes to Tongyang Huoxue decoction-induced protection against hypoxia/reoxygenation-induced injury of sinoatrial node cells through SIRT1-mediated regulation of mitochondrial quality surveillance.</a> Phytomedicine. 108, 154502(2023).</li>
<li>Li, Z., Hu, B., Zou, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Research+advances+in+understanding+the+role+and+mechanism+of+pyroptosis+in+myocardial+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Perioper+Precis+Med%22%5BJournal%5D)">Research advances in understanding the role and mechanism of pyroptosis in myocardial ischemia-reperfusion injury.</a> Perioper Precis Med. 2 (2), 52-63 (2024).</li>
<li>Ouyang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+immunostaining-based+approach+for+assessing+myocardial+viability+in+the+infarcted+mouse+hearts%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cardiovasc+Med%22%5BJournal%5D)">An immunostaining-based approach for assessing myocardial viability in the infarcted mouse hearts.</a> Front Cardiovasc Med. 12, 1598314(2025).</li>
<li>Benedek, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+TTC+staining+for+the+evaluation+of+tissue+injury+in+the+early+phases+of+reperfusion+after+focal+cerebral+ischemia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Use of TTC staining for the evaluation of tissue injury in the early phases of reperfusion after focal cerebral ischemia in rats.</a> Brain Res. 1116 (1), 159-165 (2006).</li>
<li>Lindsey, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+for+in+vivo+mouse+models+of+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Guidelines for in vivo mouse models of myocardial infarction.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 321 (6), H1056-H1073 (2021).</li>
<li>Lujan, H. L., Janbaih, H., Feng, H. -Z., Jin, J. -P., DiCarlo, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+ischemia%2C+reperfusion%2C+and+infarction+in+chronically+instrumented%2C+intact%2C+conscious%2C+and+unrestrained+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Regul+Integr+Comp+Physiol%22%5BJournal%5D)">Myocardial ischemia, reperfusion, and infarction in chronically instrumented, intact, conscious, and unrestrained mice.</a> Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 302 (12), R1384-R1400 (2012).</li>
<li>Redfors, B., Shao, Y., Omerovic, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+infarct+size+and+area+at+risk+assessment+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Clin+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Myocardial infarct size and area at risk assessment in mice.</a> Exp Clin Cardiol. 17 (4), 268-272 (2012).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1.25배 목표</td><td>올림포스</td><td>플랜아포 1.25X/0.04</td><td>영상</td></tr><tr><td>10 mL 주사기</td><td>B. 브라움</td><td>4617100V</td><td>역관류</td></tr><tr><td>2,3,5-트리페닐테트라졸륨 클로라이드</td><td>밀리포어</td><td>1.08380.0100</td><td>화학물질</td></tr><tr><td>20G 캐뉼라</td><td>BD</td><td>305895</td><td>역관류</td></tr><tr><td>3&nbsp; mL 주사기</td><td>B. 브라움</td><td>4617022V</td><td>역관류</td></tr><tr><td>3방향 스톱콕</td><td>B. 브라움</td><td>16494C</td><td>역관류</td></tr><tr><td>아쿠아마운트&nbsp;</td><td>BDH</td><td>362262H</td><td>사이로섹션</td></tr><tr><td>밸런스</td><td>오하우스</td><td>해당 없음</td><td>화학물질 무게 측정</td></tr><tr><td>쌍안경 마이크로스코프</td><td>라이카</td><td>MZ6</td><td>캐뷸레이션</td></tr><tr><td>C57BL/6J</td><td>장비에</td><td>해당 없음</td><td>동물</td></tr><tr><td>카메라</td><td>올림포스</td><td>UC30</td><td>영상</td></tr><tr><td>표지 슬립</td><td>에프레디아</td><td>BB02400500A113MN20</td><td>사이로섹션</td></tr><tr><td>크라이오스탯</td><td>라이카</td><td>M850</td><td>사이로섹션</td></tr><tr><td>더블 디스틸드 워터</td><td>밀리포어</td><td>해당 없음</td><td>용해 화학물질</td></tr><tr><td>미세한 해부 가위</td><td>에스큘럽</td><td>BC702R</td><td>외과 기구</td></tr><tr><td>미세 해리 겸자;</td><td>에스큘럽</td><td>FM001R</td><td>외과 기구</td></tr><tr><td>유리 현미경 슬라이드</td><td>엥겔브레히트</td><td>11102</td><td>사이로섹션</td></tr><tr><td>이미지J</td><td>NIH</td><td>1.54g</td><td>영상 처리</td></tr><tr><td>이소플루란</td><td>피라말</td><td>14150097146754</td><td>화학물질</td></tr><tr><td>이소프로판올</td><td>로스</td><td>그리고 nbsp; 0733.1</td><td>화학물질</td></tr><tr><td>광학 현미경</td><td>올림포스</td><td>BX61</td><td>영상</td></tr><tr><td>미세 박리 겸자;</td><td>F.S.T.</td><td>11152-10</td><td>외과 기구</td></tr><tr><td>OCT 복합물</td><td>사쿠라</td><td>4583</td><td>화학물질</td></tr><tr><td>페트리 접시</td><td>테르노 사이언티픽</td><td>172931</td><td>역관류</td></tr><tr><td>인산염 완충 식염수</td><td>로스</td><td>9143.1</td><td>화학물질</td></tr><tr><td>Rstudio</td><td>포싯 소프트웨어</td><td>2024.09.0</td><td>영상 처리</td></tr><tr><td>실크 봉합</td><td>F.S.T.</td><td>18020-60</td><td>역관류</td></tr><tr><td>소프트웨어</td><td>올림포스</td><td>셀센스 V3.2</td><td>영상</td></tr><tr><td>스테인리스 해부 가위</td><td>에스큘럽</td><td>BC257R</td><td>외과 기구</td></tr><tr><td>잠보니 해법</td><td>모르피스토</td><td>12773.0050</td><td>화학물질</td></tr></tbody></table>

심근손상의 정확하고 신뢰할 수 있는 분석을 위한 현미경 2,3,5-트리페닐테트라졸륨 염화염법 분석법

A Microscopic 2,3,5-Triphenyltetrazolium Chloride Assay for Accurate and Reliable Analysis of Myocardial Injury

In this protocol, we present a refined 2,3,5-Triphenyltetrazolium Chloride (TTC)-based method for the accurate and reliable analysis of myocardial ...

a-microscopic-235-triphenyltetrazolium-chloride-assay-for-accurate

Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

복잡한 생물학적 시료의 측정 생체 점점 의사 결정 임상 지침입니다. 우리는 동시에 심장 미오신 결합 단백 C, 크레아틴 키나제 MB, 심근 경색 및 건강한 대조군과 과목에서 혈청 샘플에서 심장 트로포 닌 I를 측정하는 매우 민감한 방법을 설명합니다.

Electrochemiluminescence의 면역에 의한 혈청 심장 마이 오신 결합 단백질-C의 결정에 대한 민감하고 구체적인 정량 방법

최소한의 침습적 조작으로 마우스의 심근 경색에 대한 재현성이 높은 모델을 설명합니다. 모델을 쉽게 수행할 수 있어 재현성과 생존율이 높습니다. 따라서 설명된 모델은 3R 원칙(Replacement, Refinement and Reduction)에 의해 요청되는 대로 필요한 동물의 수를 줄일 것입니다.

쥐 심근 경색을 유도 최소 침습 수술

이 방법은 실험적으로 유도된 심근 허혈이 있는 마우스에서 요오드화 조영제를 사용하여 심장 형태, 기능, 관류, 대사 및 생존력을 평가하기 위해 Quantum Micro-Computed Tomography(MicroCT)를 사용하는 방법을 설명합니다. 이 기술은 인간 심장 질환의 다양한 동물 모델의 비파괴 고처리량 종단 생체 내 이미징에 적용할 수 있습니다.

심근 구조, 기능의 생체 양적 평가에서 관류 및 생존 능력은 심장 마이크로 컴퓨터 단층 촬영을 사용하여

심장 비대와 리모델링을 유도하는 복부 대동맥 수축의 쥐 모델을 설명합니다. 효율적이고 재현성이 높으며 최소 침습적 방법을 사용하여 심근 비대 및 기능 장애 연구를 위한 간단하면서도 유용한 플랫폼을 제공합니다.

쥐의 복부 대동맥의 수축을 통해 심장 리모델링의 모델

설치류의 심근경색(MI)에 대한 사후 평가는 염색된 심장 절편에 대한 경색의 정량화를 기반으로 합니다. 우리는 적출된 쥐 심장의 기저부에서 정점까지의 체계적인 샘플링과 삼색으로 염색된 조직학적 절편의 이미지 분석을 사용하여 경색 크기를 정량화하는 정확한 방법을 설명합니다.

쥐의 만성 심근 경색의 조직 학적 정량

이 프로토콜은 MRI와 전체 심장 심근 조직의 3 차원 비교를위한 새로운 방법을 설명합니다. 이는 심근 경색의 만성 돼지 모델의 경색 경계 영역에서 심근 내 주입의 정확한 평가를 위해 설계되었습니다.

3D 전체 심장 심근 조직 분석

여기 심근 국 소 빈 혈 또는 reperfusion 상해의 병 태 생리학의 이해에 변환 값을 증가 하기 위하여 급성 심근 경색의 설립된 돼지 모델의 샘플링 절차를 표준화 프로토콜 설명 그리고 새로운 약 후보자를 테스트 합니다.

조직 및 혈액 샘플링 절차의 표준화에 의해 닫힌된 가슴 돼지 심근 경색 모델의 개선

여기, 선물이 hypoxia/reoxygenation 또는 보호 에이전트 없이 노출 되 고 후 세포의 미토 콘 드리 아 막 잠재력을 평가 하기 위해 JC 1 염료를 사용 하는 프로토콜.

Hypoxia/Reoxygenation 후 심장 Myocytes에서 미토 콘 드리 아 막 잠재력을 측정 하기 위한 교류 Cytometry 기반 분석

적절한 마취 하에 쥐의 심장은 늑간 공간을 통해 외부화되었고, 대부분의 실험실에서 쉽게 구할 수 있는 재료를 사용하여 좌측 전방 하행 동맥(LAD)을 결찰하여 심근경색을 성공적으로 유도했습니다.

생쥐의 심근경색 유도를 위한 수정된 간단한 방법

이 연구는 비정상적인 체액을 가진 쥐의 심근 허혈-재관류 손상(MIRI)에 대한 전통적인 위구르 약초 제제인 Munziq의 심장 보호 효과를 조사합니다. 포괄적인 실험 방법을 통해 NF-κB 신호 경로를 억제하여 MIRI를 완화할 수 있는 Munziq의 잠재력을 입증했습니다.

Herbal Munziq은 염증을 억제하여 심근 허혈-재관류 손상을 개선합니다.

재관류 급성 심근경색증(repAMI)에서 심장 손상의 3차원(3D) 재구성은 관련 질병에 영향을 미치는 패턴의 충실한 정량화 및 공동 국소화를 가능하게 합니다. 여기에서는 심장 손상, 위험 영역 및 면역 세포 반응의 동시 측정을 위해 자동화 가능한 라이트 시트 유도 이미징 접근 방식이 제공됩니다.

라이트 시트 형광 현미경을 이용한 재관류 급성 심근경색증의 심장 손상 및 면역 반응의 동시 3D 분석

학습하세요 개선된 TTC 염색법을 활용한 심근손상 현미경 분석 기법. 냉동절단 및 Langendorff 관류 장치를 사용하여 심근경색 크기와 심근세포 생존율을 정확하게 평가하는 신뢰할 수 있는 방법을 확인하세요.

심근손상의 정확하고 신뢰할 수 있는 분석을 위한 현미경 2,3,5-트리페닐테트라졸륨 염화염법 분석법

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