Name: 곤충병원성 진균의 독성 스크리닝을 위한 고추총채벌레(Scirtothrips dorsalis Hood) 사육 시스템 구축 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-18T15:50:00.000+00:00
Duration: 11 min 35 s
Description: 배우세요 고추총채벌레(Scirtothrips dorsalis) 대량 사육을 위한 분리엽 생물검정법을 활용한 방법입니다. 높은 생존률과 동기화된 발달을 통해 곤충병원성 진균의 독성을 효과적으로 선별할 수 있습니다.

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<ol><li>Kumar, V., Kakkar, G., McKenzie, C. L., Seal, D. R., Osborne, L. S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKumar%2C+V+%22Weed+and+pest+control-conventional+and+new+challenges%22">Weed and pest control-conventional and new challenges</a>. , 53-77 (2013).</li>
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<li>Panyasiri, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Control+efficacy+of+Purpureocillium+lilacinum+against+chilli+thrips+%28Scirtothrips+dorsalis%29+on+chili+plant%5BTitle%5D)+AND+%22Insects%22%5BJournal%5D)">Control efficacy of Purpureocillium lilacinum against chilli thrips (Scirtothrips dorsalis) on chili plant.</a> Insects. 13 (8), 684(2022).</li>
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<li>Lee, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcriptional+response+of+bean+bug+%28Riptortus+pedestris%29+upon+infection+with+entomopathogenic+fungus%2C+Beauveria+bassiana+JEF-007%5BTitle%5D)+AND+%22Pest+Manag+Sci%22%5BJournal%5D)">Transcriptional response of bean bug (Riptortus pedestris) upon infection with entomopathogenic fungus, Beauveria bassiana JEF-007.</a> Pest Manag Sci. 75 (2), 333-345 (2019).</li>
<li>Yang, Y. -T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Up-regulation+of+carbon+metabolism-related+glyoxylate+cycle+and+toxin+production+in+Beauveria+bassiana+JEF-007+during+infection+of+bean+bug%2C+Riptortus+pedestris+%28Hemiptera%3A+Alydidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Fungal+Biol%22%5BJournal%5D)">Up-regulation of carbon metabolism-related glyoxylate cycle and toxin production in Beauveria bassiana JEF-007 during infection of bean bug, Riptortus pedestris (Hemiptera: Alydidae).</a> Fungal Biol. 120 (10), 1236-1248 (2016).</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>#00 곤충 핀</td><td>엔토스핑크스&nbsp;</td><td>DMM0220</td><td>영국산</td></tr><tr><td>1.5 mL 원심분리기 튜브</td><td>코닝 법인</td><td>MCT-175-C</td><td>미국에서 제조</td></tr><tr><td>10 & 뮤; L 접종 루프</td><td>NEST 사이언티픽</td><td>718201</td><td>미국에서 제조</td></tr><tr><td>100 bp DNA 사다리 III</td><td>제네에이드</td><td>엔씨007</td><td>대만에서 제조되었습니다.</td></tr><tr><td>2x SuperRed PCR 마스터 믹스</td><td>바이오툴</td><td>TE-SR01 시리즈</td><td>대만산</td></tr><tr><td>6cm 페트리 접시</td><td>알파 플러스 사이언티픽</td><td>16021</td><td>대만산</td></tr><tr><td>한천</td><td>바이오맨 사이언티픽</td><td>AGR001.1</td><td>미생물학 등급</td></tr><tr><td>아가로스</td><td>바이오맨 사이언티픽</td><td>PB1200 시리즈</td><td>대만산</td></tr><tr><td>BioGreen Safe DNA 젤 완충액</td><td>바이오맨 사이언티픽</td><td>SDB001T</td><td>대만산</td></tr><tr><td>Easy DNA 고속 추출 조직 키트</td><td>피셔 바이오텍</td><td>ET-100</td><td>https://www.fisherbiotec.com.au/wp-content/uploads/2021/11/FB-EDNA-DNA-Kits-flyer-11Nov21.pdf(호주제)</td></tr><tr><td>포워드 프라이머: LCO 1490</td><td>유전체학&nbsp;</td><td>PO-PR220919G6</td><td>시퀀스: 5'-GGT CAA CAA ATC ATA AAG ATA TTG G-3'</td></tr><tr><td>GenepHlow 젤/PCR 키트</td><td>제네에이드</td><td>DFH300</td><td>http://www.protech-bio.com/UserFiles/file/Gene-Spin%20Genomic%20DNA%20Kit.pdf</td></tr><tr><td>유리 사육 컨테이너&NBSP;</td><td>Sunshine Lab 장비 회사</td><td></td><td>크기: 높이 35mm, 내경 45mm. 플라스틱 또는 유리 컵의 모든 유사 크기로 repalce할 수 있습니다.</td></tr><tr><td>혈구계</td><td>폴 마리엔펠트</td><td>640030</td><td>독일에서 만든</td></tr><tr><td>부 화기</td><td>하이포인트</td><td>F740</td><td>대만산</td></tr><tr><td>가죽 커터</td><td>실제 수제 워크숍</td><td></td><td><a href="https://shopee.tw/jj891004?categoryId=100636&amp; entryPoint=ShopByPDP& itemId=16023929406">https://shopee.tw/jj891004? categoryId=100636& entryPoint=ShopByPDP& itemId=16023929406</a></td></tr><tr><td>MiniAmp 열 순환기</td><td>써모 피셔 사이언티픽</td><td>A37834</td><td>미국에서 제조</td></tr><tr><td>광학 현미경&nbsp;</td><td>니콘</td><td>&nbsp; Ci-L</td><td>일본 업체</td></tr><tr><td>페인팅 브러쉬</td><td>Tian Cheng 브러시 회사</td><td>4716608400352</td><td>크기 0 또는 1 원형 브러시에 해당하는 끝이 가는 수채화 브러시로 교체할 수 있습니다.</td></tr><tr><td>종이 타월</td><td>5월 꽃</td><td>BLS007-8</td><td>대만산</td></tr><tr><td>파라필름 M</td><td>베미스</td><td>PM-996</td><td>미국에서 제조</td></tr><tr><td>펠렛 유봉</td><td>바이오맨 사이언티픽</td><td>GT100R</td><td>대만산</td></tr><tr><td>리버스 프라이머: HCO 2198</td><td>유전체학&nbsp;</td><td>PO-PR220919G6</td><td>시퀀스: 5'-TAA ACT TCA GGG TGA CCA AAA AAT CA-3'</td></tr><tr><td>Sabouraud 포도당 국물</td><td>하이미디어</td><td>MH033-500G</td><td>인도에서 만든</td></tr><tr><td>실체현미경</td><td>솝탑</td><td>SZN71 시리즈</td><td>대만산</td></tr><tr><td>TAE 버퍼 50X</td><td>바이오맨 사이언티픽</td><td>TAE501000</td><td>대만산</td></tr><tr><td>트윈 80</td><td>PanReac AppliChem</td><td>142050.1661</td><td>대만산</td></tr><tr><td>지퍼 백</td><td>웬첸 플라스틱 회사</td><td>1809000061</td><td>크기: 너비 12cm, 길이 17cm. (대만제)</td></tr></tbody></table>

곤충병원성 진균의 독성 스크리닝을 위한 고추총채벌레(scirtothrips dorsalis hood) 사육 시스템 구축

Establishment of a Chilli Thrips (Scirtothrips dorsalis Hood) Rearing System for Virulence Screening of Entomopathogenic Fungi

이 연구에서 제시된 실험적 흐름도는 현장 수집부터 EPF 분리물의 독성 스크리닝에 이르기까지 고추 총채벌레의 안정적인 사육 시스템이 확립될 수 있음을 보여주었습니다(그림 1). 형태학적 관찰을 통해 고추 총채벌레를 다른 꽃 총채벌레와 구별할 수 있지만, PCR 앰플리콘 크기 및 COI 염기서열 분석을 포함한 부분 COI 염기서열을 분자 마커로 사용하면 현장에서 채취한 총채벌레를 고추총채벌레로 식별하는 것을 추가로 확인할 수 있습니다(그림 3). 분리된 잎 사육 시스템은 총채벌레가 자손을 번식시킬 수 있는 더 나은 제어 환경(즉, 온도 및 습도)과 충분한 먹이 공급원을 제공합니다. 따라서 사육 용기에서 안정적인 고추 총채벌레 식민지를 보장합니다. 독성 스크리닝 생물 검정(그림 4)에서 대조군 처리에서 총채벌레의 생...

곤충병원성 진균의 독성 스크리닝을 위한 고추총채벌레(Scirtothrips dorsalis Hood) 사육 시스템 구축

The chilli thrips (Scirtothrips dorsalis Hood) is an economically significant pest of ornamental and food crops in Taiwan. Entomopathogenic fungi (EPF) ...

고추 총채벌레는 여러 작물에서 잘 연구된 해충입니다. 우리의 연구는 고추 총채벌레 사육 시스템의 개선에 초점을 맞추고 있으며 향후 실험을 위해 곤충 병원성 곰팡이 스크리닝에 대한 적용을 확장합니다. 최근 연구는 우리에 있는 전체 식물에서 고추 총채벌레를 대량 사육하는 데 중점을 두었습니다. 일부는 분리된 잎과 같은 대안을 모색하고 있지만 명확하고 상세한 방법은 아직 잘 설명되지 않았습니다.본 연구는 분리된 잎을 기반으로 한 새로운 총채벌레 대량 사육 방법을 확립하여 안정적인 고추총채벌레 군집을 보장할 수 있습니다. 또한, 곤충병원성 진균 독성 스크리닝을 위해 안정적이고 재현 가능한 생물 분석 시스템이 개발되었습니다. 이 프로토콜은 리프 디스크를 사용하여 총채벌레를 마스터하기 위한 명확하고 표준화된 방법의 부족을 해결하여 단계 관리를 개선하고 자원 사용을 줄이는 데 중점을 둡니다.이 프로토콜은 발달 단계 제어를 단순화하고 공간과 노동력 수요를 줄이며 대규모의 신뢰할 수 있는 생물 분석에 적합한 일관된 총채벌레 공급을 제공합니다. 우리 연구실은 대량 사육 방법을 최적화하고 이 프로토콜을 다양한 총채벌레 종에 적용하여 환경 및 취급 조건을 개선하여 생물학적 분석을 위한 일관되고 건강한 개체군을 보장하는 데 중점을 둘 것입니다. 또한 대량 사육 시스템을 확장하여 온실 시험을 사용할 수 있습니다.시작하려면 고추 총채벌채가 들끓는 잎과 꽃을 자릅니다. 플라스틱 지퍼백에 옮기고 찢어진 부분을 유지하기 위해 내부에 약간의 공기가 있는 가방을 밀봉하십시오. 다음으로 높이 35mm, 내경 45mm의 유리 사육 용기를 얻습니다.용기 바닥에 직경 40mm의 원형 종이 타월 3겹을 놓습니다. 습도를 유지하기 위해 종이 타월에 여과된 물을 8-10방울 떨어뜨립니다. 이제 어린 망고 잎을 깨끗이 씻으십시오.광학현미경으로 검사하여 곤충 알이나 기타 곤충 오염이 있는지 확인하십시오. 가죽 커터를 사용하여 망고 잎을 직경 40mm의 원형 디스크로 자르고 유리 사육 용기 안의 젖은 종이 타월 위에 놓습니다. 광학 현미경으로 10배 배율로 고추 총채벌레를 관찰합니다.미세한 페인팅 브러시를 사용하여 수컷 5마리와 암컷 5마리로 구성된 성체 총채벌채벌레 10마리를 준비된 유리 사육 용기에 옮깁니다. 그런 다음 각 유리 사육 용기를 두 겹의 파라필름으로 밀봉합니다. 적절한 환기를 보장하기 위해 숫자 0-0 곤충 핀을 사용하여 파라필름에 약 40개의 작

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Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

이 프로토콜은 곰팡이 entomopathogen을 소개하는 두 접종 방법을...

Endophytes로 곰팡이 Entomopathogens 구축 : Endophytic 생물학적 방제 향해

여기서는 농업에서 해충 방제를위한 "최적의"곤충 병원성 균류 인 Metarhizium anisopliae 의 분리, 확인, 스크리닝 및 선택을 포함한 효과적인 제균제 개발에 관한 지식 기반 개발과 관련된 여러 단계를보고합니다 .

개발<em&gt; 메타 리지 움 anisopliae</em&gt; Mycoinsecticide로서의 : 분리에서 현장 성능까지

여기에서는 CRISPR/Cas9 기반 게놈 편집을 통해 게놈을 수정하거나 생식계열 형질전환을 통해 표시된 전치 요소를 추가할 목적으로 세포 전 옥수수 식물 호퍼 배아를 수집하고 미세 주입하기 위한 프로토콜입니다.

CRISPR/Cas9 게놈 편집을 위한 옥수수 Planthopper, Peregrinus maidis, 배아의 미세주입

여기서 우리는 토양 샘플에서 entomopathogenic 균류 (EPF)를 분리하고 선택하는 데 사용 된 식사 벌레 (Tenebrio molitor)-미끼 시스템을 기반으로 프로토콜을 제시합니다. 효과적인 코니디아 번호(ECN) 포뮬러는 현장에서 해충 미생물 조절을 위한 생리적 특성에 기초하여 높은 스트레스 내성 EPF를 선택하는 데 사용된다.

토양 샘플에서 내토모 병원성 곰팡이의 격리 및 선택 및 곤충 해충에 대한 곰팡이 독성의 평가

엔토모병원성 진균 콜로니는 테네브리오 미끼, 갤러리아 미끼 및 선택적 인공 배지, 즉 클로람페니콜, 티아벤다졸 및 시클로헥시미드(CTC 배지)로 보충된 효모 추출물이 풍부한 감자 덱스트로스 한천을 사용하여 열대 토양 샘플로부터 분리된다.

토양 샘플에서 엔토모병원성 곰팡이를 분리하는 방법의 비교

본 프로토콜은 Ditylenchus dipsaci를 배양, 수집 및 스크리닝하기 위한 안정적이고 간단한 방법을 기술한다.

식물 기생 선충류 Ditylenchus dipsaci 배양 및 스크리닝

이 프로토콜은 나비목 곤충 유충에 대한 식물 화학 물질의 잠재적 독성 효과를 평가하기 위한 의무 섭식 분석을 설명합니다. 이것은 확장성이 뛰어난 곤충 생물 검정으로 치사 및 치사 용량, 억제 활동 및 생리학적 효과를 쉽게 최적화할 수 있습니다. 이것은 친환경 살충제를 스크리닝하는 데 사용할 수 있습니다.

Helicoverpa armigera에 대한 Phytochemicals의 살충 효과를 평가하기 위한 공급 분석 시스템 개발

이 프로토콜은 단일유전학적 곤충인 겨자 진딧물(Lipaphis erysimi (Kalt .))에 대한 곤충병원성 곰팡이(EPF)의 효과를 평가하기 위해 최적화된 분리형 잎 생물검정 시스템을 제공합니다. 이 방법은 페트리 접시 실험 중 데이터 수집 프로세스를 간략하게 설명하여 연구원이 겨자 진딧물 및 기타 단일유전 곤충에 대한 EPF의 독성을 일관되게 측정할 수 있도록 합니다.

Parthenogenetic 곤충, 겨자 진딧물, Lipaphis erysimi (Kalt.)에 대한 곤충 병원성 곰팡이의 무균 효과 평가

여기에서 우리는 숲 나무 천공충에서 곤충병원성 균류를 얻기 위한 프로토콜과 딱정벌레목 모델 곤충을 사용하여 곤충병원성 활성을 평가하는 대체 방법을 제시합니다. 이 방법은 자연 산림에서 나무를 뚫는 곤충 해충으로부터 곤충 병원성 곰팡이 자원을 탐사하는 데 효율적이고 편리합니다.

Isolation, Behavioral Identification, and Pathogenicity Assessment of Entomopathogenic Fungi from a Forest Wood Borer(포레스트 우드 보어의 곤충병원성 곰팡이의 격리, 행동 식별 및 병원성 평가)

이 동영상은 실험실에서 뒤쪽 아노 펠 레스 gambiae하는 데 사용되는 일반적인 기법을 보여줍니다. 실험실 모기를 돌보는위한 방법은 혈액 먹이 어른 pupae에 애벌레에서 유기체의 생명주기의 모든 단계를 통해 증명하고 있습니다.

모스키토 리어링 (A. gambiae)에 대한 프로토콜

배우세요 고추총채벌레(Scirtothrips dorsalis) 대량 사육을 위한 분리엽 생물검정법을 활용한 방법입니다. 높은 생존률과 동기화된 발달을 통해 곤충병원성 진균의 독성을 효과적으로 선별할 수 있습니다.

곤충병원성 진균의 독성 스크리닝을 위한 고추총채벌레(Scirtothrips dorsalis Hood) 사육 시스템 구축

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