Name: 시냅스와 재조합 평가를 위한 마우스 난모세포에서 퍼진 감수분열 염색체 준비(Preparation of Meiotic Chromosome Spreads from Mouse Oocytes for Assessment of Synapse and Recombination) (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-18T15:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 24 s
Description: 배우세요 마우스 난모세포에서 감수분열 염색체 퍼짐 준비법을 통해 시냅스와 재조합을 평가하는 방법을. 이 기술은 생식 세포 발달 연구에 필수적인 도구입니다.

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<table><tbody><tr><td>0.45 & μ; 주사기 필터</td><td>밀리포어 시그마</td><td>SLHAR33SB</td><td>입으로 작동하는 피펫을 만들기 위해</td></tr><tr><td>0.5 M EDTA, pH 8.0</td><td>코닝</td><td>46-034-CI&nbsp;</td><td>HEB를 위해</td></tr><tr><td>1mL 멸균 주사기, 25게이지 16mm 바늘</td><td>피셔 사이언티브</td><td>14-817-125 &nbsp;</td><td>난소 파열을 위해</td></tr><tr><td>100 x 15 mm 페트리 접시</td><td>VWR</td><td>25384-302&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>14.6cm 일회용 붕규산 유리 파스퇴르 피펫</td><td>피셔 사이언티브</td><td>13-678-20B&nbsp;</td><td>입으로 작동하는 피펫을 만들기 위해</td></tr><tr><td>35 x 10mm 페트리 접시</td><td>코닝</td><td>351008</td><td></td></tr><tr><td>40 mm x 0.45 mm #3 곤충학용 스테인리스 스틸 핀</td><td>아마존</td><td>B0CSSPW5S7</td><td>해부를 위한 태아 쥐를 고정하기 위해</td></tr><tr><td>아세트산, 빙하</td><td>피셔 사이언티브</td><td>A38-212</td><td>카르노이 고정액에 대해서는</td></tr><tr><td>교정된 미세모세관 피펫용 흡입관 조립체</td><td>밀리포어 시그마</td><td>A5177-5EA</td><td>입으로 작동하는 피펫을 만들기 위해</td></tr><tr><td>B.P.I. 시계 유리</td><td>NDS 테크놀로지스&nbsp;</td><td>1580-00</td><td>또는 직경 30mm, 깊이 12mm의 배아 접시(Electron Microscopy Sciences SKU: 70543-30)를 사용할 수 있습니다.</td></tr><tr><td>붕산</td><td>피셔 사이언티브</td><td>BP168-1</td><td>HEB의 pH 조절을 위해 PFA를 사용합니다</td></tr><tr><td>소 혈청 알부민</td><td>밀리포어 시그마</td><td>A7906-100G</td><td>ADB를 위해</td></tr><tr><td>CO2 탱크</td><td></td><td></td><td>인큐베이터를 위해</td></tr><tr><td>코닝 현미경 슬라이드</td><td>밀리포어 시그마</td><td>CLS294875X25</td><td>L x W 75mm x 25mm, 한쪽 면은 서리가 있습니다.</td></tr><tr><td>코닝 현미경 슬라이드, 한쪽 면과 한쪽 끝에 서리가 낀</td><td>VWR</td><td>294875X25</td><td></td></tr><tr><td>유리 유리 직사각형. 60 x 24 mm, #1.5</td><td>VWR</td><td>48393-251</td><td></td></tr><tr><td>해부 접시</td><td>전자현미경 과학</td><td>70540</td><td></td></tr><tr><td>해리 현미경</td><td></td><td></td><td>어떤 표준 모델</td></tr><tr><td>해부 가위, 날카로운 끝, 4.5"</td><td>VWR</td><td>82027-578</td><td></td></tr><tr><td>아주 가늘고 날카로운 팁 겸자</td><td>VWR</td><td>76548-836</td><td></td></tr><tr><td>기엠사 스테인</td><td>밀리포어 시그마</td><td>GS500-500</td><td>키아스마 스프레드를 염색하기 위해</td></tr><tr><td>ImmEdge 소수성 장벽 PAP 펜</td><td>벡터 연구소</td><td>H-4000</td><td></td></tr><tr><td>인큐베이터</td><td></td><td></td><td>CO2와 워터 재킷 기술이 적용된 표준 모델</td></tr><tr><td>체외수정 워크스테이션</td><td>K-시스템즈</td><td></td><td>열선 벤치탑이 있는 모든 모델이요</td></tr><tr><td>코닥 포토-플로 200 솔루션</td><td>BH 사진 & 비디오</td><td>1464510</td><td>슬라이드 워시용</td></tr><tr><td>메탄올</td><td>피셔 사이언티브</td><td>A412-4</td><td>카르노이 고정액에 대해서는</td></tr><tr><td>MP 생의학 코플린 염색 병</td><td>피셔 사이언티브</td><td>ICN17006201</td><td></td></tr><tr><td>일반 염소 혈청</td><td>깁코</td><td>16210-072</td><td>ADB를 위해</td></tr><tr><td>파라포름알데히드, EM 등급, 정제 프릴</td><td>전자현미경 과학</td><td>19200</td><td></td></tr><tr><td>퍼마운트</td><td>피셔 사이언티브</td><td>SP15-100</td><td>for&nbsp; 키아스마 스프레드용 슬라이드 장착</td></tr><tr><td>NucBlue 스테인이 있는 ProLong 유리 안티페이드 마운턴트</td><td>써모 사이언티픽</td><td>P36985</td><td>면역염색 슬라이드를 장착하기 위해</td></tr><tr><td>실리콘 튜브, 내부 직경: 0.125", 외부 직경: 0.25"</td><td>VWR</td><td>89068-474</td><td>입으로 작동하는 피펫을 만들기 위해</td></tr><tr><td>시트레이트 이하이드레이트 나트륨</td><td>피셔 사이언티브</td><td>S279-500</td><td>HEB의 경우 저장액 용액</td></tr><tr><td>스테인트레이 슬라이드 스테인 시스템</td><td>전자현미경 과학</td><td>71396-B</td><td>가습 챔버로 사용하세요. 검은 뚜껑을 사용해 면역형광 염색을 해야 합니다. 또는 불투명한 슬라이드 박스나 타퍼 바닥에 젖은 종이 타월을 깔아 가습 챔버로 사용할 수도 있습니다.</td></tr><tr><td>스트리퍼 팁 - 100</td><td>쿠퍼 서지컬</td><td>MXL3-100</td><td>입으로 작동하는 피펫을 위한</td></tr><tr><td>스트리퍼 팁 - 150</td><td>쿠퍼 서지컬</td><td>MXL3-150</td><td>입으로 작동하는 피펫을 위한</td></tr><tr><td>자당</td><td>밀리포어 시그마</td><td>S-8501</td><td>HEB의 경우 자당 저장량 용액</td></tr><tr><td>트리스 베이스</td><td>피셔 사이언티브</td><td>BP152-5</td><td>HEB를 위해</td></tr><tr><td>트리톤 X-100</td><td>피셔 사이언티브</td><td>BP151-100&nbsp;</td><td>PFA, ADB, 그리고 Triton-PBS를 위해</td></tr><tr><td>유나이티드 사이언티픽 코플린 스테인 병</td><td>피셔 사이언티브</td><td>S17495A</td><td>광감성 2차 항체를 첨가한 후 세척과 블로킹 슬라이드를 위한 불투명 흰색 플라스틱</td></tr><tr><td>유나이티드 사이언티픽 유리 오목 슬라이드</td><td>피셔 사이언티브</td><td>S139533</td><td>두께 1.3mm, 웰 수 2개</td></tr><tr><td>바나스 마이크로디스천 가위 5mm 직선</td><td>VWR</td><td>76457-358</td><td></td></tr><tr><td>자이스 악시오 이미지r.Z2, 콜리브리 7</td><td>칼 자이스</td><td>000000-2624-307</td><td></td></tr><tr><td>젠 블루 3.11 소프트웨어</td><td>칼 자이스</td><td></td><td>이미지 획득 및 분석 소프트웨어</td></tr><tr><td>항체</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>알렉사 플루어 488 AffiniPure F(ab')? 단편 염소 항생쥐 IgG, Fc 단편 특이적</td><td>잭슨 면역연구소 주식회사</td><td>115-546-071</td><td>사용 1:1,000 희석</td></tr><tr><td>알렉사 플루어 488 AffiniPure F(ab')? 염소 단편 항토끼 IgG, Fc 단편 특이적</td><td>잭슨 면역연구소 주식회사</td><td>111-546-046</td><td>사용 1:1,000 희석</td></tr><tr><td>알렉사 플루어 647 AffiniPure F(ab')? 단편 염소 반인간 IgG, Fc&gamma; 조각 특이적</td><td>잭슨 면역연구소 주식회사</td><td>109-606-170</td><td>사용 1:1,000 희석</td></tr><tr><td>알렉사 플루어 647 AffiniPure 염소 항기니피그 IgG, Fc 조각 특정</td><td>잭슨 면역연구소 주식회사</td><td>106-605-008</td><td>사용 1:1,000 희석</td></tr><tr><td>기니피그 안티-MLH3 pAb</td><td></td><td></td><td>Thermo-Fisher로 맞춤 제작, 1:500 희석 비율 사용</td></tr><tr><td>기니피그 항-SYCP1 pAb</td><td></td><td></td><td>크리스터 하움름으로부터; &wooml; g (Kouznetsova et al. 2005), 1:200 희석 비율을 사용함</td></tr><tr><td>인간 항중심체 단백질 pAb</td><td>항체(Antibodies Inc.)</td><td>15-234</td><td>사용 1:1,000 희석</td></tr><tr><td>마우스 항-MLH1 mAb</td><td>BD 생명과학</td><td>550838</td><td>사용 1:100 희석</td></tr><tr><td>마우스 항-SYCP3 mAb</td><td>앱캠</td><td>AB97672</td><td>사용 1:1,000 희석</td></tr><tr><td>래빗 안티HORMAD1 pAb</td><td>단백질 기술</td><td>13917-1-AP</td><td>사용된 1:500 희석</td></tr><tr><td>토끼 항MSH4 pAb</td><td>아클론</td><td>A8556</td><td>사용 1:100 희석</td></tr><tr><td>래빗 항-RAD51 pAb</td><td>밀리포어</td><td>PC130</td><td>사용된 1:500 희석</td></tr><tr><td>토끼 항-SYCP3 pAb</td><td>앱캠</td><td>AB15093</td><td>사용 1:1,000 희석</td></tr><tr><td>로다민 레드-X (RRX) AffiniPure F(ab')? 단편 염소 항생쥐 IgG, Fc 단편 특이적</td><td>잭슨 면역연구소 주식회사</td><td>115-296-071</td><td>사용 1:1,000 희석</td></tr><tr><td>로다민 레드-X (RRX) AffiniPure F(ab')? 염소 단편 항토끼 IgG, Fc 단편 특이적</td><td>잭슨 면역연구소 주식회사</td><td>111-296-046</td><td>사용 1:1,000 희석</td></tr></tbody></table>

시냅스와 재조합 평가를 위한 마우스 난모세포에서 퍼진 감수분열 염색체 준비(preparation of meiotic chromosome spreads from mouse oocytes for assessment of synapse and recombination)

Preparation of Meiotic Chromosome Spreads from Mouse Oocytes for Assessment of Synapsis and Recombination

시냅스와 재조합 평가를 위한 마우스 난모세포에서 퍼진 감수분열 염색체 준비(Preparation of Meiotic Chromosome Spreads from Mouse Oocytes for Assessment of Synapse and Recombination)

Three critical and interdependent processes define meiotic prophase I: homologous chromosomes must pair together, a proteinaceous structure called the ...

preparation-meiotic-chromosome-spreads-from-mouse-oocytes-for

Research

연구

JoVE Journal

Developmental Biology

발생생물학

Oocytes는 meiotic 성숙하는 동안 염색체 분리의 오류로 인해 aneuploidy하는 경향이 있습니다. Aneuploid 계란은 다운 증후군과 같은 불임, 유산 또는 발달 장애를 일으킬 수 있습니다. 여기서 우리는 oocytes과 meiotic 성숙을 연구하고 ploidy 평가 방법에 선택의 자료를 소개하는 방법을 설명합니다.

마우스 Oocyte의 Microinjection, 성숙과 Ploidy 평가

여기서는 마우스 난자 감수 스핀들 어셈블리 및 조직을 평가하기 위해 면역 분석 하였다 특정 된 siRNA 매개 mRNA의 파괴를위한 프로토콜을 제시한다. 이 프로토콜은 성적 증명서의 체외 고갈과 다른 스핀들 및 / 또는 난자에 MTOC 관련 요인의 기능 평가에 적합합니다.

siRNA를 매개 음소거로 마우스 난 모세포의 감수 스핀들 평가

감수 분열은 gametes DNA 복제의 단일 라운드와 염색체 분리의 두 연속 라운드를 통해 형성 되는 발달 과정입니다. 포유류 감수 분열 meiotic 염색체 스프레드를 준비 하는 기법을 이용 하 여 시험 될 수 있다. 여기, 마우스 spermatocytes에서 표면 확산 핵을 준비 하는 방법을 설명 합니다.

Meiotic 염색체의 준비에서 마우스 Spermatocytes 확산

포유류에서 oogenesis 오류가, 특히 염색체 missegregation 인 것으로 알려져 있다. 이 원고 chromatin 확산 마우스 의향에 대 한 준비 방법에 설명 합니다 분열 I 및 II 준비 oocytes. 이러한 기본 기술을 chromatin-바인딩 단백질 및 포유류 oogenesis 전체 염색체 형태학 연구에 대 한 수 있습니다.

Chromatin 확산 마우스 Oocyte 진행 의향에서 분열 II의 분석에 대 한 준비

인간의 질병과 관련 된 유전자 변종 발견 될 하기 시작, 그것은 점점 더 빠르게 그 확인 된 이체의 생물학적 의미를 평가 하는 시스템을 개발 하는 것이 중요 되고있다. 이 프로토콜에는 인간 유전자 기능 여성 감수 분열 동안 마우스 oocytes를 사용 하 여 나로 평가 하는 방법을 설명 합니다.

감수 분열 동안 인간 유전자 기능을 평가 하기 위해 마우스 Oocytes를 사용 하 여 나

핵 표면 퍼짐은 만피증 도중 염색체 사건을 공부하기 위한 필수적인 공구입니다. 여기서 우리는 제브라피쉬 정자세포로부터 의한 1단계 진행 중에 메오성 염색체를 준비하고 시각화하는 방법을 시연한다.

제브라피쉬 정자세포에서 메오틱 염색체 스프레드 의 준비

염색체 분리의 오류는 난 모세포에서 공통적 인 특징입니다. 따라서 스핀들 어셈블리 체크 포인트를 연구하면 건강한 알을 생산하는 데 필요한 메커니즘에 대한 중요한 단서를 얻을 수 있습니다. 본 프로토콜은 마우스 난모세포에서 스핀들 어셈블리 체크포인트 무결성을 평가하기 위한 세 가지 보완 분석을 설명합니다.

마우스 난 모세포의 스핀들 어셈블리 체크 포인트 무결성 평가

이 프로토콜은 생쥐의 임신 중 모계 혈관 구조의 변화를 평가하는 기술을 설명합니다. 입체학적 방법을 사용하여 탈피나선동맥의 리모델링을 정량적으로 평가하고 결과는 면역조직화학을 사용하여 정성적으로 확인했습니다.

마우스 자궁에서 임신 기간 동안 산모의 혈관 재 평가

여기에서 우리는 핵소체 조직을 기반으로 마우스의 전 정부 난자의 특성에 대한 프로토콜을 제시한다.

핵소체 염색질 조직을 바탕으로 마우스 전 정부 난 모세포의 분리 및 특성

이 원고는 형태 학적 및 생화학 적으로 말의 난 모세포를 특성화하기위한 실험적 접근법을 기술한다. 특히, 본 연구는 초음파 유도 난자 채취 (OPU)에 의한 미성숙 및 성숙한 난 모세포를 수집하는 방법과 염색체 분리, 스핀들 형태, 전 세계 히스톤 아세틸 화 및 mRNA 발현을 조사하는 방법을 설명한다.

말의 난 모세포에서의 염색체 분리, 히스톤 아세틸 화 및 스핀들 형태의 분석

배우세요 마우스 난모세포에서 감수분열 염색체 퍼짐 준비법을 통해 시냅스와 재조합을 평가하는 방법을. 이 기술은 생식 세포 발달 연구에 필수적인 도구입니다.

시냅스와 재조합 평가를 위한 마우스 난모세포에서 퍼진 감수분열 염색체 준비(Preparation of Meiotic Chromosome Spreads from Mouse Oocytes for Assessment of Synapse and Recombination) (동영상) | JoVE Journal

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