Name: 고급 장액성 난소 암종 모델링을 위한 나팔관 상피 세포의 마우스 유래 오가노이드 라인 개발 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-06T14:30:00.000+00:00
Duration: 6 min 51 s
Description: 배우세요 고급 장액성 난소 암종 연구를 위한 마우스 나팔관 상피 세포 오가노이드 개발 방법을. 이 프로토콜은 종양 면역 상호작용을 연구하는 동종 모델을 제공하여 암 치료 전략 발전에 기여합니다.

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<ol><li>Korch, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DNA+profiling+analysis+of+endometrial+and+ovarian+cell+lines+reveals+misidentification%2C+redundancy+and+contamination%5BTitle%5D)+AND+%22Gynecol.+Oncol%22%5BJournal%5D)">DNA profiling analysis of endometrial and ovarian cell lines reveals misidentification, redundancy and contamination.</a> Gynecol. Oncol. 127 (1), 241-248 (2012).</li>
<li>Domcke, S., Sinha, R., Levine, D. A., Sander, C., Schultz, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluating+cell+lines+as+tumour+models+by+comparison+of+genomic+profiles%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Evaluating cell lines as tumour models by comparison of genomic profiles.</a> Nat Commun. 4, 2126(2013).</li>
<li>Anglesio, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Type-specific+cell+line+models+for+type-specific+ovarian+cancer+research%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Type-specific cell line models for type-specific ovarian cancer research.</a> PLoS One. 8 (9), e72162(2013).</li>
<li>Beaufort, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ovarian+cancer+cell+line+panel+%28OCCP%29%3A+Clinical+importance+of+in+vitro+morphological+subtypes%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Ovarian cancer cell line panel (OCCP): Clinical importance of in vitro morphological subtypes.</a> PLoS One. 9 (9), e103988(2014).</li>
<li>Walton, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CRISPR%2FCas9-mediated+Trp53+and+Brca2+knockout+to+generate+improved+murine+models+of+ovarian+high-grade+serous+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">CRISPR/Cas9-mediated Trp53 and Brca2 knockout to generate improved murine models of ovarian high-grade serous carcinoma.</a> Cancer Res. 76 (20), 6118-6129 (2016).</li>
<li>Labidi-Galy, S. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+grade+serous+ovarian+carcinomas+originate+in+the+fallopian+tube%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Commun%22%5BJournal%5D)">High grade serous ovarian carcinomas originate in the fallopian tube.</a> Nat. Commun. 8 (1), 1093(2017).</li>
<li>Cancer Genome Atlas Research Network. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrated+genomic+analyses+of+ovarian+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Integrated genomic analyses of ovarian carcinoma.</a> Nature. 474 (7353), 609-615 (2011).</li>
<li>Kim, J., Coffey, D. M., Creighton, C. J., Yu, Z., Hawkins, S. M., Matzuk, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-grade+serous+ovarian+cancer+arises+from+fallopian+tube+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">High-grade serous ovarian cancer arises from fallopian tube in a mouse model.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 109 (10), 3921-3926 (2012).</li>
<li>Sherman-Baust, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+genetically+engineered+ovarian+cancer+mouse+model+based+on+fallopian+tube+transformation+mimics+human+high-grade+serous+carcinoma+development%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pathol%22%5BJournal%5D)">A genetically engineered ovarian cancer mouse model based on fallopian tube transformation mimics human high-grade serous carcinoma development.</a> J Pathol. 233 (3), 228-237 (2014).</li>
<li>Perets, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transformation+of+the+fallopian+tube+secretory+epithelium+leads+to+high-grade+serous+ovarian+cancer+in+Brca%3BTp53%3BPten+models%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Transformation of the fallopian tube secretory epithelium leads to high-grade serous ovarian cancer in Brca;Tp53;Pten models.</a> Cancer Cell. 24 (6), 751-765 (2013).</li>
<li>Vooijs, M., Berns, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+highly+efficient+ligand-regulated+Cre+recombinase+mouse+line+shows+that+LoxP+recombination+is+position+dependent%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+Rep%22%5BJournal%5D)">A highly efficient ligand-regulated Cre recombinase mouse line shows that LoxP recombination is position dependent.</a> EMBO Rep. 2 (4), 293-297 (2001).</li>
<li>Semprini, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cryptic+loxP+sites+in+mammalian+genomes%3A+genome-wide+distribution+and+relevance+for+the+efficiency+of+BAC%2FPAC+recombineering+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Nucleic+Acids+Res%22%5BJournal%5D)">Cryptic loxP sites in mammalian genomes: genome-wide distribution and relevance for the efficiency of BAC/PAC recombineering techniques.</a> Nucleic Acids Res. 35 (5), 1402-1410 (2007).</li>
<li>Loonstra, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Growth+inhibition+and+DNA+damage+induced+by+Cre+recombinase+in+mammalian+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Growth inhibition and DNA damage induced by Cre recombinase in mammalian cells.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 98 (16), 9209-9214 (2001).</li>
<li>Zhang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetically+defined%2C+syngeneic+organoid+platform+for+developing+combination+therapies+for+ovarian+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discov%22%5BJournal%5D)">Genetically defined, syngeneic organoid platform for developing combination therapies for ovarian cancer.</a> Cancer Discov. 11 (2), 362-383 (2021).</li>
<li>Yver, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetically+defined+syngeneic+mouse+models+of+ovarian+cancer+as+tools+for+the+discovery+of+combination+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discov%22%5BJournal%5D)">Genetically defined syngeneic mouse models of ovarian cancer as tools for the discovery of combination immunotherapy.</a> Cancer Discov. 11 (2), 384-407 (2021).</li>
<li>Lõhmussaar, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+the+origin+of+high-grade+serous+ovarian+cancer+using+CRISPR-modification+of+mouse+organoids%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Commun%22%5BJournal%5D)">Assessing the origin of high-grade serous ovarian cancer using CRISPR-modification of mouse organoids.</a> Nat. Commun. 11 (1), 2660(2020).</li>
<li>Maniati, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+ovarian+cancer+models+recapitulate+the+human+tumor+microenvironment+and+patient+response+to+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">Mouse ovarian cancer models recapitulate the human tumor microenvironment and patient response to treatment.</a> Cell Reports. 30 (2), 525-540.e7 (2020).</li>
<li>Ford, M. J., Harwalkar, K., Yamanaka, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+to+generate+mouse+oviduct+epithelial+organoids+for+viral+transduction+and+whole-mount+3D+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol to generate mouse oviduct epithelial organoids for viral transduction and whole-mount 3D imaging.</a> STAR Protoc. 3 (1), 101164(2022).</li>
<li>Xie, Y., Park, E. -S., Xiang, D., Li, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+organoid+culture+reveals+enrichment+of+organoid-forming+epithelial+cells+in+the+fimbrial+portion+of+mouse+fallopian+tube%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res%22%5BJournal%5D)">Long-term organoid culture reveals enrichment of organoid-forming epithelial cells in the fimbrial portion of mouse fallopian tube.</a> Stem Cell Res. 32, 51-60 (2018).</li>
<li>Zhao, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoids%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Methods+Primers%22%5BJournal%5D)">Organoids.</a> Nat Rev Methods Primers. 2, 94(2022).</li>
<li>Orkin, R. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+murine+tumor+producing+a+matrix+of+basement+membrane%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">A murine tumor producing a matrix of basement membrane.</a> J Exp Med. 145 (1), 204-220 (1977).</li>
<li>Homology-directed repair using the Alt-R CRISPR-Cas9 System and HDR Donor Oligos. , Integrated DNA Technologies (IDT). 
 <a target="_blank" href="https://idtsfprod.blob.core.windows.net/sitefinity/docs/default-source/protocol/homology-directed-repair-using-the-alt-r-crispr-cas9-system-and-hdr-donor-oligos.pdf?sfvrsn=47121607_6">https://idtsfprod.blob.core.windows.net/sitefinity/docs/default-source/protocol/homology-directed-repair-using-the-alt-r-crispr-cas9-system-and-hdr-donor-oligos.pdf?sfvrsn=47121607_6</a> (2022).</li>
<li>Santoro, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+multiple+facets+of+ovarian+high+grade+serous+carcinoma%3A+A+review+on+morphological%2C+immunohistochemical+and+molecular+features%5BTitle%5D)+AND+%22Crit+Rev+Oncol+Hematol%22%5BJournal%5D)">The multiple facets of ovarian high grade serous carcinoma: A review on morphological, immunohistochemical and molecular features.</a> Crit Rev Oncol Hematol. 208, 104603(2025).</li>
<li>Lisio, M. -A., Fu, L., Goyeneche, A., Gao, Z., Telleria, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-grade+serous+ovarian+cancer%3A+Basic+sciences%2C+clinical+and+therapeutic+standpoints%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">High-grade serous ovarian cancer: Basic sciences, clinical and therapeutic standpoints.</a> Int J Mol Sci. 20 (4), 952(2019).</li>
<li>Silva-Pedrosa, R., Salgado, A. J., Ferreira, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Revolutionizing+disease+modeling%3A+The+emergence+of+organoids+in+cellular+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Revolutionizing disease modeling: The emergence of organoids in cellular systems.</a> Cells. 12 (6), 930(2023).</li>
<li>Claassen, D. A., Desler, M. M., Rizzino, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ROCK+inhibition+enhances+the+recovery+and+growth+of+cryopreserved+human+embryonic+stem+cells+and+human+induced+pluripotent+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Reprod+Dev%22%5BJournal%5D)">ROCK inhibition enhances the recovery and growth of cryopreserved human embryonic stem cells and human induced pluripotent stem cells.</a> Mol Reprod Dev. 76 (8), 722-732 (2009).</li>
<li>Leibowitz, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chromothripsis+as+an+on-target+consequence+of+CRISPR-Cas9+genome+editing%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Genet%22%5BJournal%5D)">Chromothripsis as an on-target consequence of CRISPR-Cas9 genome editing.</a> Nat Genet. 53 (6), 895-905 (2021).</li>
<li>Kopper, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+organoid+platform+for+ovarian+cancer+captures+intra-+and+interpatient+heterogeneity%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">An organoid platform for ovarian cancer captures intra- and interpatient heterogeneity.</a> Nat Med. 25 (5), 838-849 (2019).</li>
<li>Kossaï, M., Leary, A., Scoazec, J. -Y., Genestie, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ovarian+cancer%3A+A+heterogeneous+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Pathobiology%22%5BJournal%5D)">Ovarian cancer: A heterogeneous disease.</a> Pathobiology. 85 (1-2), 41-49 (2018).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>칼슘, 마그네슘, 중탄산나트륨 없이 HBSS에 0.25% 트립신, 0.1% EDTA 함유</td><td>코닝</td><td>25053CI</td><td></td></tr><tr><td>A83-01</td><td>토크리스 생명과학</td><td>2939</td><td></td></tr><tr><td>고급 DMEM/F12</td><td>깁코</td><td>12-634-028</td><td></td></tr><tr><td>나이 C57BL/6J (여성)</td><td>잭슨 연구소</td><td>000664</td><td></td></tr><tr><td>올프렙 DNA/RNA 미니 키트</td><td>치아겐</td><td>80204</td><td>DNA/RNA 추출을 위해</td></tr><tr><td>Alt-R S.p. Cas9-GFP V3</td><td>통합 DNA 기술</td><td>10008100</td><td></td></tr><tr><td>항-Ki67 항체</td><td>앱캠</td><td>AB15580</td><td></td></tr><tr><td>오토클립 시스템</td><td>파인 사이언스 툴즈</td><td>12020-00</td><td>IBI 이후 상처 봉합을 위한</td></tr><tr><td>B-27 보충제(50배), 혈청 무첨가</td><td>깁코</td><td>17-504-001</td><td></td></tr><tr><td>블라스티딘 HCl (10 mg/mL) 50 mg</td><td>인비보젠</td><td>앤트-BL-05</td><td></td></tr><tr><td>소 혈청 알부민</td><td>시그마 올드리치</td><td>A9647</td><td></td></tr><tr><td>버퍼 RLT 플러스</td><td>치아겐</td><td>1053393</td><td>DNA/RNA 추출 전에 세포를 용해하는 데</td></tr><tr><td>셀 복구 솔루션</td><td>코닝</td><td>354253</td><td></td></tr><tr><td>콜라게나제/히알루로니다제가</td><td>스템셀 테크놀로지</td><td>07912</td><td></td></tr><tr><td>코랄라이트 594-팔로이딘 (빨간색)</td><td>단백질 기술</td><td>PF00003</td><td></td></tr><tr><td>커버 유리 15CIR-1</td><td>피셔브랜드</td><td>12-545-83</td><td></td></tr><tr><td>표지 유리 24mm 및 예리함; 40 mm-1</td><td>피셔브랜드</td><td>12-544-12</td><td></td></tr><tr><td>CTS(세포 치료 시스템) N-2 보충제</td><td>깁코</td><td>A1370701</td><td></td></tr><tr><td>다피</td><td>로슈</td><td>10236276001</td><td></td></tr><tr><td>소 췌장에서 추출한 디옥시리보뉴클레아제 I(DNAse I)</td><td>시그마 올드리치</td><td>D5025</td><td></td></tr><tr><td>디프코 스킴 밀크</td><td>벡턴 디킨슨</td><td>232100</td><td></td></tr><tr><td>분산</td><td>스템셀 테크놀로지</td><td>07913</td><td></td></tr><tr><td>DMEM 검사에 L-글루타민, 4.5 g/L 포도당, 피루브산나트륨</td><td>코닝</td><td>10013CV</td><td></td></tr><tr><td>DNase I 재조합, RNase 없는 상태</td><td>로슈</td><td>04716728001</td><td></td></tr><tr><td>둘벡코의 인산염 완충 용액</td><td>시그마 올드리치</td><td>D8537</td><td></td></tr><tr><td>듀몽 #5 - 세라믹 코팅 겸자</td><td>파인 사이언스 툴즈</td><td>11252-50</td><td>난관 절리를 위해</td></tr><tr><td>태아 소 혈청</td><td>코닝</td><td>35-010-CV</td><td>56 & 도에서 열-비활성화; 60분간 C.</td></tr><tr><td>파인 가위 - 터프컷</td><td>파인 사이언스 툴즈</td><td>14058-09</td><td>난관 채취 및 IBI 절개를 위해</td></tr><tr><td>Geneticin 선택적 항생제(G418 황산염) (50 mg/mL)</td><td>깁코</td><td>10131027</td><td></td></tr><tr><td>글루타맥스 보충제 (100배)</td><td>깁코</td><td>35-050-061</td><td></td></tr><tr><td>염소 항토끼 IgG (H+L) 교차흡착 2차 항체, 시아닌3</td><td>인비트로젠</td><td>A10520</td><td></td></tr><tr><td>그라페 겸자</td><td>파인 사이언스 툴즈</td><td>11053-10</td><td>조직 취급을 위해</td></tr><tr><td>HEPES 버퍼</td><td>코닝</td><td>25060CI</td><td></td></tr><tr><td>인간 R-스폰딘 1 재조합 단백질</td><td>페프로텍</td><td>120-38</td><td></td></tr><tr><td>인슐린 주사기, U-100 0.5 mL 0.36 mm (28 G) x 12.7 mm (1/2" )</td><td>BD</td><td>BD329461</td><td></td></tr><tr><td>인슐린-트랜스페린-셀레늄 (ITS -G) (100x)</td><td>깁코</td><td>41-400-045</td><td></td></tr><tr><td>L-글루타민 200 mM (100x)</td><td>깁코</td><td>25-030-081</td><td></td></tr><tr><td>마트리젤 GFR 저저막 매트릭스</td><td>코닝</td><td>356231</td><td>BMM</td></tr><tr><td>마우스 EGF 재조합 단백질</td><td>페프로텍</td><td>315-09</td><td></td></tr><tr><td>마우스 FGF 염기성 재조합 단백질</td><td>페프로텍</td><td>450-33</td><td></td></tr><tr><td>마우스 노긴 재조합 단백질</td><td>페프로텍</td><td>250-38</td><td></td></tr><tr><td>마우스 Wnt-3a 재조합 단백질</td><td>페프로텍</td><td>315-20</td><td></td></tr><tr><td>N2 보완</td><td>깁코</td><td>17502048</td><td></td></tr><tr><td>N-아세틸시스테인 아마이드</td><td>시그마 올드리치</td><td>A0737</td><td></td></tr><tr><td>네온 NxT 전기천공 시스템</td><td>인비트로젠</td><td>네온1</td><td>CRISPR-Cas9 전기천공을 위한</td></tr><tr><td>네온 NxT 전기천공 시스템 10-&mu; 1채널 진공관이 장착된 L 키트</td><td>인비트로젠</td><td>N1025</td><td>전기천공용 소모품, 유전체 편집 버퍼를 포함</td></tr><tr><td>니코티나마이드</td><td>시그마 올드리치</td><td>N3376</td><td></td></tr><tr><td>일반 쥐 혈청</td><td>인비트로젠</td><td>10410</td><td></td></tr><tr><td>일반 쥐 혈청</td><td>스템셀 테크놀로지</td><td>13551</td><td></td></tr><tr><td>옵티-MEM I 환원 혈청 배지</td><td>깁코</td><td>31985070</td><td></td></tr><tr><td>PAX8 다클론 항체</td><td>단백질 기술</td><td>10336-1-AP</td><td></td></tr><tr><td>페니실린-스트렙토마이신 (10,000 U/mL)</td><td>깁코</td><td>15-140-122</td><td></td></tr><tr><td>푸로마이신</td><td>시그마 올드리치</td><td>P8833</td><td></td></tr><tr><td>셀렉트프로스트 25mm 및 급성; 75mm 및 급성; 1.0mm</td><td>피셔브랜드</td><td>12-550-003</td><td></td></tr><tr><td>트리톤 X-100</td><td>피셔 바이오리에이전트</td><td>BP151</td><td></td></tr><tr><td>TrypLE Express 효소 (1x), 페놀 레드 없음</td><td>깁코</td><td>12-604-013</td><td></td></tr><tr><td>바나스 스프링 가위 - 4mm 커팅 엣지</td><td>파인 사이언스 툴즈</td><td>15019-10</td><td>난관 절리를 위해</td></tr><tr><td>Y27632</td><td>스템셀 테크놀로지</td><td>72304</td><td>로키나아제(ROCK) 억제제&nbsp;</td></tr></tbody></table>

고급 장액성 난소 암종 모델링을 위한 나팔관 상피 세포의 마우스 유래 오가노이드 라인 개발

Development of Mouse-Derived Organoid Lines from Fallopian Tube Epithelial Cells for High Grade Serous Ovarian Carcinoma Modeling

Effective modeling of diseases in realistic environments is crucial to improve our understanding of diverse pathologies. In this aspect, organoids offer a ...

development-mouse-derived-organoid-lines-from-fallopian-tube

Research

연구

JoVE Journal

Cancer Research

암 연구

에 대한 면역 적격 마우스에 묽은 난소암의 Orthotopic 모델 생체내에</em종양 면역 응답> 종양 이미징 및 모니터링

RNA 무결성을 유지하면서 개별 세그먼트의 수집을 허용하는 마우스 배반의 미세 절제 방법이 제시된다. 또한, 비효소 성 배관 세포 해리 절차가 설명된다. 이 방법은 기능적으로 상이한 배반 분과 및 해리된 배관 세포의 후속 유전자 및 단백질 분석에 적합합니다.

뮤린 오비덕트의 미세 절제 및 해리: 개별 세그먼트 식별 및 단일 세포 격리

이 프로토콜은 유전자 발현 및 조직학적 분석을 위한 마우스 자궁내막 상피 오가노이드를 확립하는 방법론을 설명합니다.

마우스 자궁에서 3D 자궁 내막 오가노이드 확립

이 프로토콜은 차등 원심분리를 통해 원발성 정상 및 종양 유방 조직에서 상피 오가노이드를 생성하는 접근 방식에 대해 논의합니다. 또한 3차원 배양 및 포매된 오가노이드의 면역형광 이미징에 대한 지침이 포함되어 있습니다.

계대증 없이 정상 및 종양 유방 조직에서 마우스 및 인간 상피 오가노이드 생성 및 이미징

환자 유래 오가노이드(PDO)는 시험관 내에서 종양 환경을 모방할 수 있는 3차원(3D) 배양물입니다. 고급 장액성 난소암에서 PDO는 새로운 바이오마커 및 치료제를 연구하기 위한 모델을 나타냅니다.

고급 장액성 난소암 환자 유래 오가노이드의 생성 및 배양

이 프로토콜은 마우스 난관에서 국소적으로 제한된 CRISPR 매개 게놈 편집을 위한 미세주입 및 생체 내 전기천공을 설명합니다.

생체 내 미세주입 및 전기천공을 사용한 체세포 게놈 공학 마우스 모델

이 프로토콜은 다양한 질병 단계의 난소암 오가노이드 확립을 위한 체계적인 프레임워크를 제공하고 환자별 변동성 문제를 해결하여 수율을 높이고 후속 응용 분야에서 강력한 장기 확장을 가능하게 합니다. 여기에는 조직 처리, 파종, 배지 요구 사항 조정 및 면역형광 염색을 위한 자세한 단계가 포함됩니다.

난소암 오가노이드의 바이오뱅킹 전략: 조직학적 아형 및 질병 단계에 걸친 환자 간 이질성 해결

이 프로토콜은 일차 인간 난소 표면 상피(hOSE) 세포에서 3차원(3D) 조직 오가노이드를 확립하는 방법을 설명합니다. 이 프로토콜에는 갓 채취한 난소에서 hOSE 분리, hOSE의 세포 확장, 동결 보존-해동 절차 및 오가노이드 유도가 포함됩니다. 면역형광(Immunofluorescence), 정량 분석(quantitative analysis) 및 스크리닝 플랫폼으로서의 유용성 입증(showcasing utility as a screening platform)이 포함되어 있습니다.

조직 재생을 연구하기 위한 플랫폼으로서의 인간 난소 표면 상피 오가노이드

이 프로토콜은 인간 나팔관 상피 세포를 분리하기 위한 1일 방법을 설명합니다. 분리된 상피 세포는 2차원(2D) 배양으로 도말링하거나 단일 세포 현탁액으로 해리할 수 있으며 유세포 분석 및 단일 세포 RNA 염기서열 분석을 포함한 다운스트림 실험에 활용할 수 있습니다.

단세포 분석을 위한 인간 나팔관 상피를 추출하는 효율적인 방법

우리는 기질이 풍부한 난소 분획에서 마우스 난소 체세포를 분리하고, 스캐폴드 없는 접근법을 사용하여 마우스 난소 체세포 오가노이드를 생성하는 방법을 설명합니다.

난소 미세환경 탐구: 마우스 난소 체세포의 분리, 2D 배양 및 오가노이드 배양 방법

배우세요 고급 장액성 난소 암종 연구를 위한 마우스 나팔관 상피 세포 오가노이드 개발 방법을. 이 프로토콜은 종양 면역 상호작용을 연구하는 동종 모델을 제공하여 암 치료 전략 발전에 기여합니다.

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