Name: 자연 살해 세포 활성화의 신속한 무표지 분석을 위한 현장 배치 가능한 렌즈 프리 이미징 플랫폼 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-08T14:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 34 s
Description: 배우세요 렌즈 프리 그림자 영상 기술을 활용한 무표지 NK 세포 활성 분석 방법을. 30초 내 단일 세포 수준에서 면역 기능을 신속하게 평가하고 선천성 면역 지수(I3)로 건강한 기증자와 면역저하 환자를 구분하는 효율적인 플랫폼입니다.

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<table><tbody><tr><td>1.7 mL 미세 원심분리기 튜브</td><td>액시젠</td><td>MCT-175-C</td><td>멸균, DNase/RNase 프리</td></tr><tr><td>분석 슬라이드</td><td>메타면역테크</td><td>AS050-G</td><td>Cellytics 시스템 전용 슬라이드 50 슬라이드 한 상자에</td></tr><tr><td>소프트웨어가 포함된 Cellytics 시스템</td><td>메타면역테크</td><td>CS001</td><td>렌즈 없는 섀도우 이미징 플랫폼</td></tr><tr><td>원심분리기(스윙 버킷 로터)</td><td>라보진</td><td>1580 르</td><td>300&ndash; 500 &회; G 범위</td></tr><tr><td>CMOS 이미지 센서</td><td>Cellytics 장치에 포함</td><td>통합</td><td>회절 이미징에 사용</td></tr><tr><td>사이토스핀 원심분리기</td><td>나스코코리아</td><td>TXT3 사이토 원심분리기</td><td>사이토스핀 염색용</td></tr><tr><td>디지털 히팅 블록(37 &deg; C)</td><td>다이한 사이언티픽</td><td>DH입니다. WHB00349</td><td>세포 배양용</td></tr><tr><td>ELISA 키트(IFN-&감마;)</td><td>R& D 시스템</td><td>DIF50C</td><td>인간 IFN-&감마; ELISA 키트</td></tr><tr><td>Guava easyCyte 유세포 분석기</td><td>밀리포어</td><td>0500-5005</td><td>CD107a 발현 분석용</td></tr><tr><td>헤마 3 스탯 팩</td><td>써모피셔</td><td>122-911</td><td>사이토스핀 염색용</td></tr><tr><td>IL-12 (재조합 인간)</td><td>R& D 시스템</td><td></td><td>ASC의 구성 요소</td></tr><tr><td>IL-2(재조합 인간)</td><td>페프로텍</td><td>200-02</td><td>ASC의 구성 요소</td></tr><tr><td>마그네틱 분리 랙</td><td>메타면역테크</td><td>M13R8</td><td>비드 분리용</td></tr><tr><td>현미경 슬라이드</td><td>마리엔펠트</td><td>1000612</td><td>사이토스핀 준비용</td></tr><tr><td>NK 활성화 키트</td><td>메타면역테크</td><td>MIT2301V, MIT2301A</td><td>NK 세포 활성화용</td></tr><tr><td>NK Sep 키트</td><td>메타면역테크</td><td>MIT2301-500</td><td>NK 세포 분리용</td></tr><tr><td>PE 마우스 항인간 CD107a, 100test</td><td>BD 생명과학</td><td>555801</td><td>CD107a 발현 분석용</td></tr><tr><td>핀홀 조리개</td><td>Cellytics 장치에 포함</td><td>통합</td><td>LSIT 조명 경로에 사용</td></tr><tr><td>피펫(2&ndash; 20 & 마이크로; 엘, 20&ndash; 200 & 마이크로; L)</td><td>액시젠</td><td>T-200-Y</td><td>볼륨 조절 가능</td></tr><tr><td>섀도우 캘리브레이션 슬라이드</td><td>메타면역테크</td><td>AS050-G</td><td>장치 교정용. 1개의 분석 슬라이드 박스에 1개의 교정 슬라이드</td></tr><tr><td>와류 믹서</td><td>머크&nbsp;</td><td>SI-0246A</td><td>재현탁용</td></tr></tbody></table>

자연 살해 세포 활성화의 신속한 무표지 분석을 위한 현장 배치 가능한 렌즈 프리 이미징 플랫폼

Field-Deployable Lens-Free Imaging Platform for Rapid Label-Free Analysis of Natural Killer Cell Activation

이 프로토콜에 따라 LSIT 플랫폼은 세포의 형태학적 변화를 기반으로 NK 세포 활성화에 대한 정량적이고 무표지 평가를 가능하게 합니다. 그림 2A 는 ASC 유무에 관계없이 2시간 배양 후 건강한 기증자로부터 1차 NK 세포의 Hema-3 염색 사이토스핀 제제를 보여줍니다. ASC에 의한 활성화는 비히클(자극되지 않은) 대조군에 비해 주로 세포 확대 및 내부 복잡성 또는 세분성 증가와 같은 현저한 변화를 초래합니다. 이러한 변화는 섀도우 회절 패턴의 형태로 캡처되며, 이는 통합 소프트웨어를 사용하여 LSIT 플랫폼에서 분석하여 각 셀에 대한 주요 형태 측정 매개변수를 추출합니다(그림 2B). 이 프로토콜은 서로 다른 NK 세포 활성화 상태를 효과적으로 구별하고 전반적인 선천성 면역 기능을 평가할 수 있습니다.
섀도우 매개변수의 재현성을 평가하기 위해 비히클 및 ASC 자극...

Natural killer (NK) cells are important effectors of innate immunity that eliminate virus-infected and malignant cells. Monitoring NK cell activity is ...

field-deployable-lens-free-imaging-platform-for-rapid-label-free

Research

연구

JoVE Journal

Bioengineering

생명공학

세포의 Lensfree 온 - 칩 이미징 및 특성은 그림이다. 이 온칩 세포 이미징 접근 방식은 자원 가난한 설정을 위해 특히 적합, 의료 진단 및 높은 처리량 세포 생물학 애플 리케이션을위한 소형 및 비용 효율적인 도구를 제공합니다.

셀 Lensless 온 - 칩 영상은 높은 처리량 세포 생물학 및 의료 진단을위한 새로운 도구를 제공합니다

여기, 우리는 마우스 노상 강도의 백혈구가 추적 연구 비침습 두 개의 광자 (2P) 현미경의 접근 방식을 설명합니다. 우리는 조직 이미징 준비의 기술적 측면을 논의하고 실행 및 데이터를 수집하도록 설정 초기의 전형적인 실험을 통해 독자를 걸어보세요.

백혈구 호밍 및 마이 그 레이션의 비침습 영상 생체내에</em

이 비디오에서는 살아있는 T 세포와 항원 제시 세포 간의 상호 작용을 시각화하기 위한 격자 광시트 현미경 기술에 대해 설명합니다. 이 방법은 초박형 격자 광시트를 상호 작용하는 세포 쌍에 집중시켜 일련의 2차원 이미지를 얻고, 이를 결합하여 세포-세포 상호 작용의 시공간 역학을 나타내는 고해상도 4차원 이미지를 얻는 것을 포함합니다.

살아있는 세포에서 수용체-리간드 상호작용을 시각화하기 위한 Lattice Light Sheet 현미경 검사

이 비디오는 지원되는 지질 이중층(SLB)에서 자연살해(NK) 세포의 면역학적 시냅스 형성을 시각화하는 기술을 보여줍니다. SLB는 먼저 형광단 표지된 NK 세포 활성화 수용체 리간드로 표지된 다음 NK 세포로 배양합니다. 그 후, 세포는 중합된 액틴 및 퍼포린 양성 용해 과립을 위해 염색됩니다. 이 접근 방식을 사용하면 STED(Stimulated Emission Depletion) 현미경을 사용하여 시냅스 형성을 시각화할 수 있습니다.

지원되는 지질 이중층에서 NK 세포 면역학적 시냅스 형성의 초고해상도 이미징

여기에서 우리는 두 가지 색상 STED의 nanoscopy에 의해 유리에 효과적으로 요약 NK 세포의 세포 독성 면역 시냅스 이미징을위한 프로토콜을 보여줍니다. 이 방법을 사용하여 우리는 시냅스 단백질과 세포 골격의 하위 100 nm의 분해능을 얻을 수 있습니다.

이중 색깔 시간 게이트 자극 방출 고갈 (STED) Nanoscopy에 의한 면역 시냅스의 시각화

여기에서는 면역학적 시냅스를 형성하는 유리 지지 지질 이중층 기술과 STED(Stimulated Emission Depletion) 현미경의 초고해상도 이미징 기술의 조합을 설명합니다. 이 프로토콜의 목표는 이러한 두 가지 기술을 성공적으로 수행하는 데 필요한 지침을 사용자에게 제공하는 것입니다.

유리 - 지원 평면 지질 이중층에 자연 살해 세포 면역 시냅스의 슈퍼 해상도 이미징

간 셀룰러 통신은 내부와 세포 외부의 각종 생리 활성 조절에 중요​​하다. 이 논문은 단일 세포 분비물의 시공간적 특성을 측정하기위한 프로토콜을 설명합니다. 이를 달성하기 위해, 종합 접근법 생균 이미징 감지 라벨없는 nanoplasmonic을 통합하는 데 사용된다.

단일 세포 분비물의 공간 - 시간 영상의 레이블이없는 기술

렌즈 무료 비디오 현미경 셀 문화 인큐베이터 안에 직접 모니터링할 수 있습니다. 여기 우리가 획득 하 고 배양된 HeLa 세포의 2.7 하루 종일 수집 분석 하는 데 사용 하는 전체 프로토콜 설명, 개별 셀 형태학 및 10584 세포 주기6 측정 추적 2.2 x 10의 데이터 집합에 지도.

동적에 대 한 렌즈 무료 비디오 현미경 및 부착 세포 배양의 정량 분석

우리의 림프 구 정량 위상 이미징 및 기계 학습 알고리즘을 사용 하 여 레이블 없는 식별 프로토콜을 설명 합니다. 림프 톨의 3 차원 굴절률 tomograms의 측정 3D 형태학 및 생화학 정보 개별 셀에 대 한 다음 종류의 식별을 위한 기계 학습 알고리즘으로 분석을 제시.

라벨-무료 3 차원 양적 위상 이미징 사용 하 여 림프 구의 식별 및 기계 학습

이 프로토콜의 목표는 살아있는 세포에 있는 표면 수용체 역학을 4 차원으로 가시화하기 위하여 격자 빛 시트 현미경 검사를 사용하는 방법을 보여주기 위한 것입니다. 여기서CD4+ 원발성 T 세포상에 T 세포 수용체가 도시된다.

격자 광 시트 현미경을 사용하여 표면 T 세포 수용체 역학 4 차원 시각화

배우세요 렌즈 프리 그림자 영상 기술을 활용한 무표지 NK 세포 활성 분석 방법을. 30초 내 단일 세포 수준에서 면역 기능을 신속하게 평가하고 선천성 면역 지수(I3)로 건강한 기증자와 면역저하 환자를 구분하는 효율적인 플랫폼입니다.

자연 살해 세포 활성화의 신속한 무표지 분석을 위한 현장 배치 가능한 렌즈 프리 이미징 플랫폼

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