Name: 세 가지 방법론의 비교 분석을 사용하여 암세포 증식에 대한 SASP 요인의 영향 평가 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-09-19T14:20:00.000+00:00
Duration: 8 min 57 s
Description: 학습하세요 HeLa 세포에서 SASP 요인이 비노화 세포 증식에 미치는 영향을 실시간 임피던스 모니터링과 라이브 세포 이미징을 활용한 세 가지 체외 모델로 평가하는 방법을. 이 기법은 암 미세환경에서 세포 간 상호작용을 동적으로 분석하여 종양 진행 메커니즘 연구에 활용됩니다.

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<ol><li>Su, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell-cell+communication%3A+new+insights+and+clinical+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Signal+Transduct+Target+Ther%22%5BJournal%5D)">Cell-cell communication: new insights and clinical implications.</a> Signal Transduct Target Ther. 9 (1), 196(2024).</li>
<li>Hayflick, L., Moorhead, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+serial+cultivation+of+human+diploid+cell+strains%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Cell+Res%22%5BJournal%5D)">The serial cultivation of human diploid cell strains.</a> Exp Cell Res. 25, 585-621 (1961).</li>
<li>Ewald, J. A., Desotelle, J. A., Wilding, G., Jarrard, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapy-induced+senescence+in+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22J+Natl+Cancer+Inst%22%5BJournal%5D)">Therapy-induced senescence in cancer.</a> J Natl Cancer Inst. 102 (20), 1536-1546 (2010).</li>
<li>Wang, B., Kohli, J., Demaria, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Senescent+Cells+in+Cancer+Therapy%3A+Friends+or+Foes%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Cancer%22%5BJournal%5D)">Senescent Cells in Cancer Therapy: Friends or Foes.</a> Trends Cancer. 6 (10), 838-857 (2020).</li>
<li>Wang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Common+Hallmarks+and+Interconnected+Pathways+of+Aging%2C+Circadian+Rhythms%2C+and+Cancer%3A+Implications+for+Therapeutic+Strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Research+%28Wash+D+C%29%22%5BJournal%5D)">The Common Hallmarks and Interconnected Pathways of Aging, Circadian Rhythms, and Cancer: Implications for Therapeutic Strategies.</a> Research (Wash D C). 8, 0612(2025).</li>
<li>Simay, Y. D., Ozdemir, A., Ibisoglu, B., Ark, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+connection+between+the+cardiac+glycoside-induced+senescent+cell+morphology+and+Rho%2FRho+kinase+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Cytoskeleton+%28Hoboken%29%22%5BJournal%5D)">The connection between the cardiac glycoside-induced senescent cell morphology and Rho/Rho kinase pathway.</a> Cytoskeleton (Hoboken). 75 (11), 461-471 (2018).</li>
<li>Ozdemir, A., Simay Demir, Y. D., Yesilyurt, Z. E., Ark, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Senescent+cells+and+SASP+in+cancer+microenvironment%3A+New+approaches+in+cancer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Protein+Chem+Struct+Biol%22%5BJournal%5D)">Senescent cells and SASP in cancer microenvironment: New approaches in cancer therapy.</a> Adv Protein Chem Struct Biol. 133, 115-158 (2023).</li>
<li>Narita, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rb-mediated+heterochromatin+formation+and+silencing+of+E2F+target+genes+during+cellular+senescence%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Rb-mediated heterochromatin formation and silencing of E2F target genes during cellular senescence.</a> Cell. 113 (6), 703-716 (2003).</li>
<li>Heckenbach, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nuclear+morphology+is+a+deep+learning+biomarker+of+cellular+senescence%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Aging%22%5BJournal%5D)">Nuclear morphology is a deep learning biomarker of cellular senescence.</a> Nat Aging. 2 (8), 742-755 (2022).</li>
<li>Coppe, J. P., Desprez, P. Y., Krtolica, A., Campisi, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+senescence-associated+secretory+phenotype%3A+the+dark+side+of+tumor+suppression%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Pathol%22%5BJournal%5D)">The senescence-associated secretory phenotype: the dark side of tumor suppression.</a> Annu Rev Pathol. 5, 99-118 (2010).</li>
<li>Kuilman, T., Peeper, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Senescence-messaging+secretome%3A+SMS-ing+cellular+stress%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">Senescence-messaging secretome: SMS-ing cellular stress.</a> Nat Rev Cancer. 9 (2), 81-94 (2009).</li>
<li>Simay Demir, Y. D., Ozdemir, A., Sucularli, C., Benhur, E., Ark, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+implication+of+ROCK+2+as+a+potential+senotherapeutic+target+via+the+suppression+of+the+harmful+effects+of+the+SASP%3A+Do+senescent+cancer+cells+really+engulf+the+other+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Signal%22%5BJournal%5D)">The implication of ROCK 2 as a potential senotherapeutic target via the suppression of the harmful effects of the SASP: Do senescent cancer cells really engulf the other cells.</a> Cell Signal. 84, 110007(2021).</li>
<li>Demaria, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+Senescence+Promotes+Adverse+Effects+of+Chemotherapy+and+Cancer+Relapse%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discov%22%5BJournal%5D)">Cellular Senescence Promotes Adverse Effects of Chemotherapy and Cancer Relapse.</a> Cancer Discov. 7 (2), 165-176 (2017).</li>
<li>Bogdanowicz, D. R., Lu, H. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multifunction+co-culture+model+for+evaluating+cell-cell+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Multifunction co-culture model for evaluating cell-cell interactions.</a> Methods Mol Biol. 1202, 29-36 (2014).</li>
<li>Ozdemir, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+glycoside-induced+cell+death+and+Rho%2FRho+kinase+pathway%3A+Implication+of+different+regulation+in+cancer+cell+lines%5BTitle%5D)+AND+%22Steroids%22%5BJournal%5D)">Cardiac glycoside-induced cell death and Rho/Rho kinase pathway: Implication of different regulation in cancer cell lines.</a> Steroids. 109, 29-43 (2016).</li>
<li>zdemir, A., Ibisoglu, B., Simay, Y. D., Polat, B., Ark, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ouabain+induces+Rho-dependent+rock+activation+and+membrane+blebbing+in+cultured+endothelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Ouabain induces Rho-dependent rock activation and membrane blebbing in cultured endothelial cells.</a> Mol Biol. 49 (1), 138-143 (2015).</li>
<li>Lee, B. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Senescence-associated+beta-galactosidase+is+lysosomal+beta-galactosidase%5BTitle%5D)+AND+%22Aging+Cell%22%5BJournal%5D)">Senescence-associated beta-galactosidase is lysosomal beta-galactosidase.</a> Aging Cell. 5 (2), 187-195 (2006).</li>
<li>Simay Demir, Y. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antimigratory+effect+of+pyrazole+derivatives+through+the+induction+of+STAT1+phosphorylation+in+A549+cancer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharm+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Antimigratory effect of pyrazole derivatives through the induction of STAT1 phosphorylation in A549 cancer cells.</a> J Pharm Pharmacol. 73 (6), 808-815 (2021).</li>
<li>Ariffin, N. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+CellProfiler+pipeline+analysis+of+cell+migration%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Histochem%22%5BJournal%5D)">The CellProfiler pipeline analysis of cell migration.</a> Acta Histochem. 125 (7), 152074(2023).</li>
<li>Li, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decoding+the+crossroads+of+aging+and+cancer+through+single-cell+analysis%3A+Implications+for+precision+oncology%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Cancer%22%5BJournal%5D)">Decoding the crossroads of aging and cancer through single-cell analysis: Implications for precision oncology.</a> Int J Cancer. 157 (5), 807-818 (2025).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>µ-슬라이드 8 우물 높이</td><td><img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/68883/68883eq1.jpg" style="margin: auto; ">비디</td><td>80806</td><td></td></tr><tr><td>0.05% 트립신-EDTA (1배)</td><td>깁코</td><td>25300-054</td><td></td></tr><tr><td>아미콘 울트라 원심 필터 유닛 (울트라셀-3K)</td><td>밀리포어</td><td>UFC200324</td><td></td></tr><tr><td>CO2 인큐베이터 (37° C, 5% CO2)</td><td>산요</td><td></td><td></td></tr><tr><td>CO2-컨트롤러 2000 </td><td>Pecon </td><td></td><td></td></tr><tr><td>DMEM</td><td>깁코</td><td>41966-029</td><td></td></tr><tr><td>독소루비신</td><td>토크리스</td><td>2252</td><td></td></tr><tr><td>E-플레이트 삽입 16번과 nbsp;</td><td>ACEA 바이오사이언스/애질런트</td><td>6 465 382 001</td><td></td></tr><tr><td>E-플레이트 뷰 16 </td><td>ACEA 바이오사이언스/애질런트</td><td>300 601 140</td><td></td></tr><tr><td>FBS</td><td>깁코</td><td>A5256701</td><td></td></tr><tr><td>헬라 셀</td><td><img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/68883/68883eq2.jpg" style="margin: auto; ">AP 연구소, 앙카라, 터키</td><td>HÜ KÜ K No: 90061901 </td><td></td></tr><tr><td>라이카 DMi8 역형 형광 현미경  </td><td>라이카</td><td></td><td></td></tr><tr><td>인산염 완충 식염수(PBS)</td><td>깁코</td><td>70011-044</td><td></td></tr><tr><td>노화 관련 &amp;베타;-갈락토시다제(SA-β-gal) 염색 키트  </td><td>세포 신호 전달</td><td>9860S</td><td></td></tr><tr><td>스테이지 상단 인큐베이션 시스템</td><td>Pecon </td><td></td><td></td></tr><tr><td>온도 조절기 2002-2 </td><td>Pecon </td><td></td><td></td></tr><tr><td>트라이판 블루 다이</td><td>시그마</td><td>T8154</td><td></td></tr><tr><td>xCELLigence RTCA DP 시스템  </td><td>ACEA 바이오사이언스/애질런트</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

세 가지 방법론의 비교 분석을 사용하여 암세포 증식에 대한 sasp 요인의 영향 평가

Evaluating the Effect of SASP Factors on the Proliferation of Cancer Cells Using a Comparative Analysis of Three Distinct Methodologies

이 대표적인 실험 세트는 노화 암세포에서 파생된 노화 관련 분비 표현형이 다른 암세포에 미치는 잠재적 영향을 조사했습니다. 따라서 72시간 동안 독소루비신으로 치료하면 SA-β-Gal 염색을 이용하여 HeLa 세포에서 노화를 유도할 수 있는지 여부를 먼저 확인하였다. 노화 세포에서 리소좀 효소 β-갈락토시다아제는 낮은 pH에서도 활성 상태를 유지하고 발색 기질 X-gal을 절단하여 파란색 침전물을 형성합니다17. 따라서 파란색으로 염색된 세포의 존재는 세포 노화의 유도를 나타냅니다. 독소루비신 치료는 대조군에 비해 HeLa 세포에서 통계적으로 유의미한 노화 유도를 가져왔고, p &lt; 0.0001. (그림 1A,B, n=3). 형태학적 분석은 또한 노화 세포가 대조군 세포에 비해 더 크고 납작한 외관을 나타낸 것으로 나타났습니다. <stron...

세 가지 방법론의 비교 분석을 사용하여 암세포 증식에 대한 SASP 요인의 영향 평가

Chemotherapy-induced senescent cancer cells also secrete various factors, called senescence-associated secretory phenotype, to regulate their ...

evaluating-effect-sasp-factors-on-proliferation-cancer-cells-using

Research

연구

JoVE Journal

Cancer Research

암 연구

여기에서는 전이의 in vivo chicken embryo chorio-allantoic membrane(CAM) 모델과 결합된 종양 세포 대사의 실시간 모니터링을 사용하여 종양 세포를 DNA를 손상시키는 화학 요법에 감작하는 능력에 대해 새로운 항암 표적/제제를 평가하는 데 사용됩니다.

암 약물 과민 반응의 효과를 평가<em&gt; 체외</em&gt; 및<em&gt; 생체</em

주변 정상 조직의 침입은 악성 종양을 정의하는 특징입니다. 우리는 여기에서 여러 진행성 인간 암 모델로 예시된 자연 3D 바이오매트릭스로의 침입에 대한 간단한 반자동 마이크로 플레이트 분석을 제공합니다.

3 차원 (3D) 종양 회전 타원체 침공 분석

이 방법은 스페로이드에서 주변 3D 매트릭스로의 암세포 침입을 평가합니다.  스페로이드는 행잉 드롭 배양 방법을 통해 생성된 다음 기저막 재료와 I형 콜라겐으로 구성된 매트릭스에 내장됩니다.  이후에 스페로이드 외부로의 침입이 모니터링됩니다.

암 세포 회전 타원체 분석은 3D 설정에 침략을 평가하기 위해

이 프로토콜은 유방암 세포주에서 세포 증식을 분석하기 위한 세 가지 다른 방법의 사용을 설명합니다. 여기에는 기존 세포 계수, 발광 기반 세포 생존율 및 세포 이미저 사용을 통한 세포 계수의 사용이 포함됩니다. 각각은 세포 증식의 재현 가능한 측정에 이점을 제공합니다.

유방암 세포주에서 세포 증식을 결정하기위한 세 가지 방법 비교

전임상 시험에서 인간 대상 시험으로 전환되는 새로운 약물 표적을 식별하는 것은 과학적인 우선 순위입니다. 이를 위해 여기에서는 유전자 고갈이 암 세포주 스페로이드에 미치는 영향을 조사하기 위한 기능적 유전체학 접근 방식을 설명하며, 이는 생체 내에서 인간 암을 보다 적절하게 모델링합니다.

기능 유전체학에게 검사를 활용하여 암 세포 회전 타원체 문화에 잠재적으로 소설 약 표적을 식별하는

여기, 췌장암 세포 및 섬유 아 세포, 세포 외 유출 분석기를 사용 하 여 대사 기능을 측정 하 여 다음의 3 차원 (3D) 회전 타원 체 공동 문화의 준비에 대 한 메서드를 설명 합니다.

준비 및 췌장암 세포 및 섬유 아 세포의 3 차원 회전 타원 체 공동 문화의 변화 분석 결과

우리는 치료 평가 우리 셀 라인에 머리와 목 편평 상피 세포 암에 대 한 실험적인 치료 regimens의 현재 표준 테스트를 가능 하 게 한 회전 타원 체를 기반으로, 3 차원 생체 외에서 모델의 진화 설명 민감성 및 미래에 인간의 표본에서 1 차 셀에 저항.

머리와 목 편평 상피 세포 암에 대 한 회전 타원 체 기반 3D 셀 문화 모델에서 테스트 하는 치료

다양 한 질병의 표시 더 순수 관련 모델 개발 및 구현에 약물 발견 프로그램 되. 여기에 설명 된 새로운 모델 시스템 spheroids를 경작 하 고 종양학 신약에 대 한 검색 하는 높은 처리량 1536-잘 접시 기반 시스템에서 상영 될 수 방법을 3 차원 종양을 보여 줍니다.

마약 검사에 대 한 높은 처리량 3 차원 종양 Spheroids의 생성

여기에서, 우리는 2D 문화 보다는 생체 내 종양의 물리 화학 구배를 모방하는 3D 암 세포 스페로이드에 있는 생존과 죽음을 평가하기 위한 몇몇 간단한 방법을 제시합니다. 따라서 스페로이드 모델은 생체 내 조건으로의 번역을 개선하여 암 약물 효능의 평가를 허용합니다.

암세포의 3D 스페로이드 배양에서 세포 생존력과 사망 평가

이 프로토콜은 Caco2 결장 아데노암종 세포에서 3차원 스페로이드를 생성하고 성장시키는 새로운 견고하고 재현 가능한 배양 시스템을 제공합니다. 결과는 화학요법에 대한 반응을 포함하여 암 줄기 세포 생물학을 공부하는 이 접근의 적합성을 위한 개념증명을 제공합니다.

대장암 줄기세포를 연구하는 스페로이드의 3차원 모델

현재 프로토콜은 원발성 암세포에서 3D 종양 배양 모델을 생성하고 세포 생존력 분석 및 현미경 검사를 사용하여 약물에 대한 민감도를 평가하는 것을 설명합니다.

환자 유래 종양 샘플에서 3차원 스페로이드 설정 및 약물에 대한 민감도 평가

학습하세요 HeLa 세포에서 SASP 요인이 비노화 세포 증식에 미치는 영향을 실시간 임피던스 모니터링과 라이브 세포 이미징을 활용한 세 가지 체외 모델로 평가하는 방법을. 이 기법은 암 미세환경에서 세포 간 상호작용을 동적으로 분석하여 종양 진행 메커니즘 연구에 활용됩니다.

세 가지 방법론의 비교 분석을 사용하여 암세포 증식에 대한 SASP 요인의 영향 평가

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