Name: 근위 관 상피 세포에서 저산소증/재산소화 손상 모델링 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-11-21T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 23 s
Description: 학습하세요 근위 관 상피 세포에서 저산소증/재산소화 손상 모델링 방법을. RT-qPCR과 산소 소비율 분석으로 신장 손상 표지자와 미토콘드리아 기능을 평가하여 신장 허혈-재관류 손상 메커니즘을 연구하고 치료 전략을 개발할 수 있습니다.

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<table><tbody><tr><td>384웰 qPCR 플레이트</td><td>응용 생명 시스템</td><td>4309849</td><td></td></tr><tr><td>원심분리기</td><td>오르토알레사</td><td>바이오센22R</td><td></td></tr><tr><td>클로로포름</td><td>VWR</td><td>0757-500ML</td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F12</td><td>깁코</td><td>21331020</td><td></td></tr><tr><td>표피 성장 인자</td><td>시그마-올드리치</td><td>E9644</td><td></td></tr><tr><td>에탄올</td><td>PanReac 응용화학</td><td>141086.1214</td><td></td></tr><tr><td>FCS</td><td>바이오웨스트</td><td>S181B-500</td><td></td></tr><tr><td>가열 블록</td><td>에펜도르프</td><td>서모믹서 C</td><td></td></tr><tr><td>하이드로코르티손</td><td>시그마-올드리치</td><td>H0135</td><td></td></tr><tr><td>저산소 인큐베이터</td><td>멤머트</td><td>ICO 50med</td><td></td></tr><tr><td>IFN-및 감마;</td><td>ProspecBIo</td><td>CYT-358</td><td></td></tr><tr><td>인큐베이터</td><td>멤머트</td><td>ICO 105</td><td></td></tr><tr><td>이소프로파놀</td><td>VWR</td><td>0918-1L</td><td></td></tr><tr><td>ITSe</td><td>깁코</td><td>41400045</td><td></td></tr><tr><td>L-글루타민</td><td>깁코</td><td>25030081</td><td></td></tr><tr><td>멀티채널 피펫</td><td>에펜도르프</td><td>3125000052</td><td></td></tr><tr><td>비CO2 인큐베이터</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>PCR 프라이머</td><td>유로핀스 지노믹스</td><td></td><td></td></tr><tr><td>페니실린 - 스트렙토마이신</td><td>깁코</td><td>15140-122</td><td></td></tr><tr><td>qPCR 마스터 믹스</td><td>NZYTech</td><td>MB22303</td><td></td></tr><tr><td>실시간 qPCR 시스템</td><td>응용 생명 시스템</td><td>QuantStudio 5</td><td></td></tr><tr><td>역전사 마스터 믹스</td><td>NZYTech</td><td>MB12502</td><td>효소 혼합물 함유</td></tr><tr><td>RNAse 없는 물</td><td>하이클론</td><td>SH3053802</td><td></td></tr><tr><td>Seahorse XF 세포 미토 스트레스 테스트 키트</td><td>애질런트</td><td>103015-100</td><td>올리고마이신, FCCP, 안티마이신 A, 로테논 포함</td></tr><tr><td>Seahorse XF DMEM 미디엄</td><td>애질런트</td><td>103575-100</td><td></td></tr><tr><td>해마 XF 포도당</td><td>애질런트</td><td>03577-100</td><td></td></tr><tr><td>해마 XF 글루타민</td><td>애질런트</td><td>103579-100</td><td></td></tr><tr><td>시호스 XF 피루베이트</td><td>애질런트</td><td>103578-100</td><td></td></tr><tr><td>Seahorse XFe96 분석기</td><td>애질런트</td><td>S7800BR</td><td></td></tr><tr><td>시호스 XFe96 플럭스팩</td><td>애질런트</td><td>103792-100</td><td>XFe96 세포 배양 마이크로플레이트와 XFe96 센서 카트리지 포함</td></tr><tr><td>열 사이클러</td><td>바이오-래드</td><td>T100 열 사이클러</td><td></td></tr><tr><td>트리이오도티로닌</td><td>시그마-올드리치</td><td>T5516</td><td></td></tr><tr><td>트리졸</td><td>인비트로젠</td><td>15596026</td><td></td></tr><tr><td>UV-VIS 분광광도계</td><td>드노빅스</td><td>DS-11</td><td></td></tr></tbody></table>

근위 관 상피 세포에서 저산소증/재산소화 손상 모델링

Modeling Hypoxia/Reoxygenation Injury in Proximal Tubular Epithelial Cells

Kidney transplantation accounts for approximately 60%-65% of all transplanted solid organs. Most donor kidneys are obtained from deceased individuals, ...

modeling-hypoxiareoxygenation-injury-proximal-tubular-epithelial

Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

호흡과 산화 인산화와와 세포 생존에 관련된 mitochondrial 기능에 단백질 키나제 C (PKC) isozymes의 활성화 효과가 설명되어 있습니다. 접근 방식은 선택적으로 mitochondrial 기능과 세포의 에너지 상태를 결정하는 주요 세포 배양 및 assays의 다양한 PKC isozymes을 overexpress하는 adenoviral 기술을 적응.

신장 세포 Overexpressing 단백질 키나제 C Isozymes에 Mitochondrial 기능 및 세포 생존 능력의 평가

출처: Alluri, H., et.al. 혈액-뇌 장벽 기능 장애를 연구하기 위한 체외허혈-재관류 손상 모델로서의 산소-포도당 결핍 및 재산소화. J. Vis. 특급 (2015). 이 비디오는 저산소 및 영양 결핍 상태를 시뮬레이션하여 산소-포도당 결핍 및 그에 따른 재산소화가 쥐의 뇌 미세혈관 내피 세포(RBMEC)에 미치는 영향을 보여줍니다. 이러한 상태는 ATP 고갈, 세포 내 칼슘 증가, 반응성 산소종(ROS)의 생성을 초래하여 세포 접합 단백질을 분해하고 스트레스 섬유 형성을 유도하여 세포 간 상호 작용을 약화시킵니다.

산소-포도당 결핍 및 재산소화가 세포-세포 상호작용에 미치는 영향

Ischemia-Reperfusion (IR) 손상은 높은 이환율 및 사망률과 관련이 있습니다. 여기에 설명된 산소-포도당 결핍 및 재산소화(OGD-R)의 체외 모델의 목표는 다양한 세포, 특히 혈액-뇌 장벽(BBB) 내피 세포에 대한 허혈 재관류 손상의 영향을 평가하는 것입니다.

같은 산소 포도당 박탈과 재산 소화<em&gt; 체외</em&gt; 허혈 - 재관류 손상 모델 공부 뇌 혈관 장벽 부전

이 프로토콜에는 분리 하 고 마우스 기본 신장 관 세포 이후에 하위 신장 생물학 기능 비보 전, 미토 콘 드리 아 생체를 포함 하 여 평가 양식 수 있는 특성화 하는 비용 효율적인 접근 방식을 제공 합니다.

마우스 기본 신장 관 상피 세포의 고립, 특성, 및 높은 처리량 세포 외 유출 분석

이 프로토콜은 극성이 역인 작은 장 장내염을 활용하여 정점 표면에 접근 할 수있는 apical-out 괴사 장염 (NEC) 인 - 접시 모델을 설명합니다. 우리는 NEC 관련 상피 파괴를 검출하기위한 면역 형광 염색 프로토콜 및 NEC-in-a-dish 프로토콜을 실시한 apical-out enteroids의 생존력을 결정하는 방법을 제공합니다.

체외 괴사성 장염의 Apical-Out Enteroid 모델

여기에서는 신장 피질에서 인간 신장 세뇨관 상피 세포(HRTEC)의 1차 배양을 얻어 세포외 기질(3D-HRTEC)에서 단층 및 3차원 배양을 개발하기 위한 프로토콜에 대해 설명합니다.

Development of human renal tubular epithelial cell primary cultures in monolayers and three-dimensional conditions(단층 및 3차원 조건에서의 인간 신장 세뇨관 상피 세포 1차 배양 개발)

우리는 원발성 신근위세뇨관 상피 세포를 분리 및 배양하기 위해 전체 인간 신장을 처리하기 위한 최적화된 프로토콜과 이러한 세포를 3차원, 미세유체, 미세생리학적 플랫폼에서 적용하여 신장 근위세뇨관을 재현하기 위한 최적화된 프로토콜을 제시합니다.

1차 인간 근위세뇨관 상피 세포의 분리 및 신장 근위세뇨관의 미세생리학적 모델 생성에 사용

자가 조립식 인간 심장 오가노이드(hCOs)는 인간 심장 발달과 질병을 모델링하기 위한 신흥 시스템입니다. 여기서는 저산소 재산소화를 통한 hCO의 생성 및 손상 방법론과 손상 후 예상되는 조직학적 및 기능적 결과에 대한 세부 정보를 제공합니다.

자가 조립 인간 심장 세포에서의 저산소증-재산소화 손상 모델

우리가 공기 - 액체 인터페이스에서 차별화된 성장을 포함한 인간 기관지기도 조직의 explants에서 기본 인간 기관지 상피 세포의 성장에 대한 자세한 방법을 설명합니다. 이 방법은 인간의 폐 건강과 질병의기도 상피의 역할을 조사하는 주요 세포의 풍부한 소스를 제공합니다.

Explants에서 들어라 기본 인간 기관지 상피 세포

처프 긴 noncoding RNAs의 게놈에 바인딩 사이트 (lncRNAs)를 매핑하는 소설 및 신속한 기술입니다. 방법은 lncRNA 바인딩된 게놈 사이트의 열거를 허용하는 안티 센스가 원래의 oligonucleotides의 특이성을 이용합니다.

RNA 정제에 의한 염색질 절연 (처프)

학습하세요 근위 관 상피 세포에서 저산소증/재산소화 손상 모델링 방법을. RT-qPCR과 산소 소비율 분석으로 신장 손상 표지자와 미토콘드리아 기능을 평가하여 신장 허혈-재관류 손상 메커니즘을 연구하고 치료 전략을 개발할 수 있습니다.

근위 관 상피 세포에서 저산소증/재산소화 손상 모델링

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