Name: 시험관 내 상피 오가노이드-T 세포 공동 배양 시스템을 이용한 상류 기억 CD8 T 세포 분화 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-02-03T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 48 s
Description: 배우세요 상피 오가노이드-T 세포 공동 배양 시스템을 이용한 상류 기억 CD8 T 세포 분화 방법을. 이 기법은 면역 반응 연구에 활용됩니다.

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<ol><li>Rosato, P. C., Beura, L. K., Masopust, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+resident+memory+T+cells+and+viral+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Virol%22%5BJournal%5D)">Tissue resident memory T cells and viral immunity.</a> Curr Opin Virol. 22, 44-50 (2017).</li>
<li>Park, C. O., Kupper, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+emerging+role+of+resident+memory+T+cells+in+protective+immunity+and+inflammatory+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">The emerging role of resident memory T cells in protective immunity and inflammatory disease.</a> Nat Med. 21, 688-697 (2015).</li>
<li>Schenkel, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resident+memory+CD8+T+cells+trigger+protective+innate+and+adaptive+immune+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Resident memory CD8 T cells trigger protective innate and adaptive immune responses.</a> Science. 346 (6205), 98-101 (2014).</li>
<li>Ariotti, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skin-resident+memory+CD8+%2B+T+cells+trigger+a+state+of+tissue-wide+pathogen+alert%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Skin-resident memory CD8 + T cells trigger a state of tissue-wide pathogen alert.</a> Science. 346 (6205), 101-105 (2014).</li>
<li>Christo, S. N., Park, S. L., Mueller, S. N., Mackay, L. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Multifaceted+Role+of+Tissue-Resident+Memory+T+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">The Multifaceted Role of Tissue-Resident Memory T Cells.</a> Annu Rev Immunol. 42 (1), 317-345 (2024).</li>
<li>Gavil, N. V., Cheng, K., Masopust, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resident+memory+T+cells+and+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">Resident memory T cells and cancer.</a> Immunity. 57 (8), 1734-1751 (2024).</li>
<li>Christo, S. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Discrete+tissue+microenvironments+instruct+diversity+in+resident+memory+T+cell+function+and+plasticity%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Immunol%22%5BJournal%5D)">Discrete tissue microenvironments instruct diversity in resident memory T cell function and plasticity.</a> Nat Immunol. 22 (9), 1140-1151 (2021).</li>
<li>Pan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Survival+of+tissue-resident+memory+T+cells+requires+exogenous+lipid+uptake+and+metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Survival of tissue-resident memory T cells requires exogenous lipid uptake and metabolism.</a> Nature. 543, 252-256 (2017).</li>
<li>Hasan, M. H., Beura, L. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+interactions+in+resident+memory+T+cell+establishment+and+function%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Immunol%22%5BJournal%5D)">Cellular interactions in resident memory T cell establishment and function.</a> Curr Opin Immunol. 74, 68-75 (2022).</li>
<li>Ulibarri, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epithelial+organoid+supports+resident+memory+CD8+T+cell+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Epithelial organoid supports resident memory CD8 T cell differentiation.</a> Cell Rep. 43 (8), 114621(2024).</li>
<li>Evrard, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+protein+expression+profiling+resolves+circulating+and+resident+memory+T+cell+diversity+across+tissues+and+infection+contexts%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">Single-cell protein expression profiling resolves circulating and resident memory T cell diversity across tissues and infection contexts.</a> Immunity. 56 (7), 1664-1680.e9 (2023).</li>
<li>Borges da Silva, H., Wang, H., Qian, L. J., Hogquist, K. A., Jameson, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ARTC2.2%2FP2RX7+Signaling+during+Cell+Isolation+Distorts+Function+and+Quantification+of+Tissue-Resident+CD8%2B+T+Cell+and+Invariant+NKT+Subsets%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">ARTC2.2/P2RX7 Signaling during Cell Isolation Distorts Function and Quantification of Tissue-Resident CD8+ T Cell and Invariant NKT Subsets.</a> J Immunol. 202 (7), 2153-2163 (2019).</li>
<li>Künzli, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-lived+T+follicular+helper+cells+retain+plasticity+and+help+sustain+humoral+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Immunol%22%5BJournal%5D)">Long-lived T follicular helper cells retain plasticity and help sustain humoral immunity.</a> Sci Immunol. 5 (45), eaay5552(2020).</li>
<li>Kang, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+induced+alveolar+assembloids+with+functional+alveolar-like+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Generation of induced alveolar assembloids with functional alveolar-like macrophages.</a> Nat Commun. 16, 3346(2025).</li>
<li>Lin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+gastrointestinal+assembloids+to+study+the+interplay+between+epithelial+crypts+and+their+mesenchymal+niche%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Establishment of gastrointestinal assembloids to study the interplay between epithelial crypts and their mesenchymal niche.</a> Nat Commun. 14, 3025(2023).</li>
<li>Park, S. E., Georgescu, A., Huh, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoids-on-a-chip%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Organoids-on-a-chip.</a> Science. 364 (6444), 960-965 (2019).</li>
<li>Quintard, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+microfluidic+platform+integrating+functional+vascularized+organoids-on-chip%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">A microfluidic platform integrating functional vascularized organoids-on-chip.</a> Nat Commun. 15, 1452(2024).</li>
<li>Vincenti, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue-resident+memory+CD8%2B+T+cells+cooperate+with+CD4%2B+T+cells+to+drive+compartmentalized+immunopathology+in+the+CNS%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Tissue-resident memory CD8+ T cells cooperate with CD4+ T cells to drive compartmentalized immunopathology in the CNS.</a> Sci Transl Med. 14 (640), eabl6058(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>16% 파라포름알데히드 수용액</td><td>전자현미경 과학</td><td>15710-S</td><td></td></tr><tr><td>24웰 폴리스티렌 비처리 다정 티수스 배양판</td><td>VWR 인터내셔널</td><td>10861-558</td><td></td></tr><tr><td>2-머캅토에탄올</td><td>깁코</td><td>21985023</td><td></td></tr><tr><td>3mL 멸균 주사기</td><td>피셔 사이언티브</td><td>14-955-457</td><td></td></tr><tr><td>5 mL, 그리고 nbsp; 스냅캡, 그리고 nbsp; 멸균 둥근 바닥 폴리스티렌 시험관</td><td>팔콘</td><td>352058</td><td></td></tr><tr><td>60 mm 페트리 접시</td><td>피셔 사이언티브</td><td>FB0875713A&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>70 & mu; 멸균 세포 체류</td><td>피셔 사이언티브</td><td>22-363-548</td><td></td></tr><tr><td>96웰 비처리 폴리스티렌 라운드 바텀 마이크로플레이트</td><td>그레이너 바이오-원</td><td>650101</td><td></td></tr><tr><td>96웰 폴리스티렌 비처리 다중 웰 조직 배양 플레이트</td><td>VWR 인터내셔널</td><td>10861-562</td><td></td></tr><tr><td>알부민 소/분율 V</td><td>열보 사이언티브 케미컬스</td><td>J6465518</td><td></td></tr><tr><td>염화암모늄</td><td>피셔 사이언티브</td><td>A661-500</td><td></td></tr><tr><td>암포테리신 B&nbsp;</td><td>시그마-올드리치</td><td>A9528-100MG</td><td></td></tr><tr><td>B-27 보충</td><td>깁코</td><td>17504044</td><td></td></tr><tr><td>ioTek 세포 5 세포 영상 멀티모드 리더</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F12 1:1 미디엄</td><td>시티바</td><td>SH30271. FS</td><td></td></tr><tr><td>둘벡코의 인산염 완충염 용액 1회</td><td>코닝</td><td>21031CV</td><td></td></tr><tr><td>에틸렌디아미네테트라아세트산 (0.5 M 용액/pH 8.0)</td><td>피셔 사이언티브</td><td>BP2482-500</td><td></td></tr><tr><td>초고운 미세 해부 가위</td><td>로보즈 외과 기기 회사</td><td>RS-5882</td><td></td></tr><tr><td>태아 소 혈청 - 숯/덱스트론 처리</td><td>R& D 시스템즈</td><td>S11650</td><td></td></tr><tr><td>Flowjo v10 소프트웨어</td><td>벡턴, 디킨슨 앤 컴퍼니</td><td>플로우조 (RRID:SCR_008520)</td><td></td></tr><tr><td>그라페 겸자</td><td>로보즈 외과 기기 회사</td><td>RS-5135</td><td></td></tr><tr><td>HEPES 솔루션</td><td>시티바</td><td>SH30237.01</td><td></td></tr><tr><td>L-글루타민 (200 mM)</td><td>깁코</td><td>A2916801</td><td></td></tr><tr><td>마그넷 5mL</td><td>바이오레전드</td><td>480019</td><td></td></tr><tr><td>마우스 CD8 Na&iuml; 베 T 세포 분리 키트</td><td>바이오레전드</td><td>480044</td><td></td></tr><tr><td>마우스 EGF 재조합 단백질</td><td>깁코</td><td>315091MG</td><td></td></tr><tr><td>비필수 아미노산 용액 (100배)</td><td>깁코</td><td>11140050</td><td></td></tr><tr><td>페니실린-스트렙토마이신 용액</td><td>시티바</td><td>SV30010</td><td></td></tr><tr><td>중탄산칼륨</td><td>MP 생의학</td><td>0215255780</td><td></td></tr><tr><td>정제된 항마우스 CD3&엡실론; 항체</td><td>바이오레전드</td><td>100360</td><td></td></tr><tr><td>재조합 마우스 B7.1 (CD80)-Fc 키메라 (캐리어 없음)</td><td>바이오레전드</td><td>555406</td><td></td></tr><tr><td>재조합 마우스 IL-12 (p70) (운반체 없음)</td><td>바이오레전드</td><td>577004</td><td></td></tr><tr><td>재조합 쥐 IL-2 (캐리어 없음)</td><td>바이오레전드</td><td>575406</td><td></td></tr><tr><td>저축 성장 인자 기저막 추출물</td><td>R& D 시스템즈</td><td>BME001-10</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640 미디어</td><td>시티바</td><td>SH30027.LS</td><td></td></tr><tr><td>아지드 나트륨</td><td>피셔 사이언티브</td><td>S227I-25</td><td></td></tr><tr><td>피루베이트 나트륨 (100 mM)</td><td>깁코</td><td>11360070</td><td></td></tr><tr><td>트립신 0.25% 프로테아제와 돼지 트립신 함께합니다</td><td>시티바</td><td>SH30042.02</td><td></td></tr><tr><td>생존 염료 (레드 780)</td><td>사이텍 바이오사이언스</td><td>13-0865-T100</td><td></td></tr></tbody></table>

시험관 내 상피 오가노이드-t 세포 공동 배양 시스템을 이용한 상류 기억 cd8 t 세포 분화

In Vitro Resident Memory CD8 T Cell Differentiation Using Epithelial Organoid-T Cell Co-culture System

시험관 내 상피 오가노이드-T 세포 공동 배양 시스템을 이용한 상류 기억 CD8 T 세포 분화

Barrier mucosal tissues play an important role in the differentiation and function of resident T cells. Among the diverse cell populations within these ...

in-vitro-resident-memory-cd8-t-cell-differentiation-using-epithelial

Research

연구

JoVE Journal

Immunology and Infection

면역학 및 감염학

이 프로토콜은 기본 Lgr5-positve organoid 문화와 레트로 바이러스 전달의 후속 성능을 설명합니다. 이 시험관의 Organotypic에 소설에서 수행 할 기능 연구를 전달 유전자의 Cre 호텔 유도 과발현 또는 최저을 가능하게하고 있습니다   모델 시스템.

차 소장 Organoid 문화에서 레트로 바이러스 감염의 비디오 프로토콜

마우스 배아 줄기 세포는 OP9-DL1 공동 배양 시스템을 사용하여 in vitro에서 T 세포로 분화할 수 있습니다. 이 절차를 성공적으로 수행하려면 시약/세포 유지 관리 및 주요 기술에 민감한 단계에 세심한 주의를 기울여야 합니다. 여기에서는 이러한 중요한 매개변수에 대해 논의하고 이 기술의 채택을 장려하기 위한 자세한 프로토콜을 제공합니다.

T 세포의 유도 체외 마우스 배아 줄기 세포에서

우리는 수술 조직과 생검에서 수집한 결장 소굴에서 인간 장류를 확립하고 결장 소굴에서 콜로노이드를 확립하는 방법을 설명합니다. 이 방법론적 기사에서는 인간 장 및 콜로노이드의 성공적인 성장과 유지에 필수적인 배양 방식을 제시합니다.

전체 조직과 조직 검사에서 인간 상피 Enteroids과 Colonoids 설립

현재의 2D 배양 시스템이 in vivo 시나리오를 모방하지 않기 때문에 in vitro에서 수질 흉선 상피 세포를 연구하는 것은 대체로 성공적이지 못했습니다. 본 명세서에 기술된 3D 배양 시스템(변형된 피부 유기형 배양 모델)은 mTEC 증식, 분화 및 난잡한 유전자 발현의 유지를 재현하는 데 탁월한 것으로 입증되었습니다.

수질 흉선 상피 세포의 증식, 분화 및 무차별 유전자 발현을 지원하는 3D의 Organotypic 공동 문화 모델

본 문서에서는 3차원(3D) 흉선 배양 시스템에 의해 종양 항원 특이적 유도 만능 줄기 세포 유래 흉선 이주자(iTE)를 생성하는 새로운 방법을 설명한다. iTE는 증식, 기억 형성 및 종양 억제 능력을 가진 순진한 T 세포와 밀접하게 관련된 T 세포의 균질한 서브세트이다.

뮤린 유도 만능 줄기 세포 유래 종양 항원 특이적 흉선 유이주자를 생성하는 3차원 흉선 배양 시스템

생체 외에서 B 세포 플라즈마 세포 차별화 모델을 보고 다단계 문화 시스템을 사용 하 여, 우리.

수명이 긴 플라즈마 세포에 인간의 정상적인 메모리 B 세포의 체 외 분화 모델

여기에서, 우리는 장 장벽 기능, 투과성 및 수송을 연구하기 위한 인간 오가노이드 유래 장 상피 단층의 제조를 기술한다. 오가노이드가 외부 자극에 대한 원래의 상피 조직 반응을 나타내기 때문에, 이들 모델은 세포주의 확장성과 일차 조직의 관련성 및 복잡성의 이점을 결합한다.

오가노이드 유래 상피 단층: 장 장벽 기능을 위한 임상적으로 관련된 시험관내 모델

이 프로토콜은 뮤린 소장 오가노이드를 확립하고, 뮤린 소장 라미나 프로프리아로부터 유형 1 선천성 림프성 세포를 분리하고, 장 상피 세포와 유형 1 선천성 림프 세포 간의 양방향 상호 작용을 연구하기 위해 두 세포 유형 간의 3 차원 (3D) 공동 배양을 수립하기위한 자세한 지침을 제공합니다.

뮤린 소장 상피 오가노이드와 선천적 림프성 세포의 공동 배양

이 프로토콜은 종양 침윤 림프구(TIL)와 공동 배양된 환자 유래 대장암(CRC) 오가노이드 모델을 만들어 이들의 상호 작용과 치료 잠재력을 연구하는 방법을 설명합니다. 이 모델은 종양 미세환경에서 면역 반응을 탐색하고 맞춤형 CRC 치료를 위한 TIL 기반 요법의 효능을 예측할 수 있는 전임상 플랫폼을 제공합니다.

환자 유래 대장직장 종양 오가노이드(Patient-derived Colorectal Tumor Organoids)와 종양 침윤 림프구(TIL)의 공동 배양 시스템 구축

이 프로토콜은 조절 T 세포가 이펙터 T 세포의 증식 및 분화에 미치는 영향을 조사하기 위한 시험관 내 공동 배양 전략을 제공합니다.

시험관 내 조절 T 세포의 기능 분석: 증식과 분화에 초점을 맞춘다

배우세요 상피 오가노이드-T 세포 공동 배양 시스템을 이용한 상류 기억 CD8 T 세포 분화 방법을. 이 기법은 면역 반응 연구에 활용됩니다.

시험관 내 상피 오가노이드-T 세포 공동 배양 시스템을 이용한 상류 기억 CD8 T 세포 분화

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