Name: 숙주-병원체 상호작용 연구를 위한 마우스 전립선 오가노이드 기반 모델 생성 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-02-27T14:20:00.000+00:00
Duration: 8 min 5 s
Description: 배우세요 마우스 전립선 오가노이드에서 2D 상피 배양 모델을 생성하는 방법을. UPEC 감염 연구를 위한 숙주-병원체 상호작용 분석에 활용할 수 있는 생리학적으로 관련성 높은 플랫폼을 제공합니다.

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<table><tbody><tr><td>48개의 웰 플레이트</td><td>사르스테트</td><td>83.3923</td><td>바닥 모양: 평평한 형태</td></tr><tr><td>5&알파;-안드로스탄-17&베타;-올-3-1 디하이드로테스토스테론</td><td>시그마-올드리치</td><td>A8380</td><td>DHT로 지정되었습니다. 기본 해법 10&mu; 100% 에탄올에 M이 함정</td></tr><tr><td>8웰 PET 슬라이드, 웰당 40개의 전극을 포함하며,</td><td>응용 생물물리학</td><td>8W10E+</td><td>TEER 측정에 사용되는 슬라이드</td></tr><tr><td>96개의 웰 플레이트</td><td>사르스테트</td><td>82.1583</td><td>바닥 모양: 원뿔형</td></tr><tr><td>전진 달베코' 개조된 이글 중형/F12 및 nbsp;</td><td>써모피셔 사이언티브</td><td>12634028</td><td>10 mmol L&minus를 보완하면 adDMEM/F12+/+로 지정되었으며; HEPES 1개와 글루타맥스 1개</td></tr><tr><td>암피칠린</td><td>로스</td><td>K029.2&nbsp;</td><td>농축 재고 100 mg/mL</td></tr><tr><td>항-CD24a 항체</td><td>단백질 기술</td><td>10600-1-AP</td><td>1차 항체; 1x PBS 1%BSA에 1:100 희석</td></tr><tr><td>항사이토케라틴 5 알렉사 플루오르 647 항체 &nbsp;</td><td>Abcam&nbsp;</td><td>AB193895</td><td>1차 항체; 1x PBS 1%BSA에 1:100 희석</td></tr><tr><td>항토끼 IgG 알렉사 플루어488&nbsp; 항체</td><td>인비트로젠</td><td>A21441</td><td>2차 항체; 1x에 1:500 희석 PBS 1%BSA</td></tr><tr><td>항-ZO-1 다클론 항체</td><td>단백질 기술</td><td>21773-1-AP</td><td>1차 항체; 1x PBS 1%BSA에서 1:750 희석</td></tr><tr><td>B27, 50배</td><td>써모피셔 사이언티브</td><td>12587010</td><td></td></tr><tr><td>소 혈청알부민(BSA) 프락션 V, 뉴질랜드-기원</td><td>로스</td><td>8076.3</td><td>1x PBS에서 1% 사용 블로킹 버퍼의 구성 요소</td></tr><tr><td>챔버드 &마이크로 슬라이드 8 웰</td><td>이비디</td><td>80806</td><td>표면 변형: ibiTreat</td></tr><tr><td>원뿔관 (15 mL)</td><td>시그마 올드리치</td><td>T1943</td><td>평평한 바닥이 작은 펠릿에 더 좋습니다.</td></tr><tr><td>디나트륨 에틸렌디아미네테트라-아세테이트 2H2O (EDTA)</td><td>로스&nbsp;</td><td>8043.2</td><td>수제 제품: 400mL H2O에 93.0g, pH를 8.0으로 조절하고, H2O와 최대 500mL까지 부피를 조절합니다; 0.5만 만 EDTA; 유동세포계 버퍼의 구성 요소</td></tr><tr><td>둘벡코의 균형 소금 용액(DPBS)</td><td>깁코</td><td>14190-144</td><td>PBS</td></tr><tr><td>에코 회전 현미경 &nbsp;</td><td>메아리</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ECIS&nbsp; Z-쎄타 -& nbsp; 임피던스 기반 셀 분석 시스템</td><td>응용 생물물리학</td><td>ECIS&nbsp; Z-쎄타</td><td>시스템에는 16 및/또는 96 우물 스테이션이 포함됩니다; 외부 제어 모듈; 노트북 PC; ECIS 제어, 획득 및 디스플레이 소프트웨어; 자동 셀 이동 및 전기천공을 위한 고가 필드 모듈 &nbsp;</td></tr><tr><td>태아 소 혈청(FBS) 우수</td><td>시그마 올드리치</td><td>S0615</td><td>유세포계 버퍼의 구성 요소; 293T 세포주 배양 배양 성분; 배양 배양HEK293T 세포주 구성 요소</td></tr><tr><td>플래시 팔로이딘 레드 594</td><td>바이오레전드</td><td>424203</td><td>1x PBS 1%BSA에 1:250 희석</td></tr><tr><td>유세포계 완충기</td><td></td><td></td><td>PBS 1배, FBS 10%, 5mM EDTA</td></tr><tr><td>겐타미신&nbsp;</td><td>시그마 올드리치</td><td>G1272</td><td></td></tr><tr><td>글루타맥스&nbsp;</td><td>써모피셔 사이언티브</td><td>35050-038</td><td>l-알라닐-L-글루타민 디펩타이드, adDMEM/F12++&nbsp의 성분;</td></tr><tr><td>하버드 바이오크롬 울트로스펙 10 셀 밀도계</td><td>피셔 사이언티브</td><td>10704417</td><td></td></tr><tr><td>HCS 셀마스크 진한 빨간색 스테인</td><td>라이프 테크놀로지</td><td>H32721</td><td>1x의 PBS 1%BSA에 1:1,000 희석</td></tr><tr><td>HEK293T 마우스 Noggin-Fc 발현 벡터로 트랜스펙션한 세포주</td><td>클레버스 교수님의 세포주</td><td></td><td>노긴 생산에 사용되었으며; 배양액: 500ml DMEM, 고포도당, GlutaMAX, 피루베이트 (Gibco Life Technologies, 31966)+ 50ml FBS; Farin 외, 위장병학 143.6 (2012): 1518-1529</td></tr><tr><td>HEPES&nbsp;</td><td>써모피셔 사이언티브</td><td>15630056</td><td>adDMEM/F12+++&nbsp의 성분;</td></tr><tr><td>호에스트(Hoechst 33342)와 nbsp;</td><td>라이프 테크놀로지</td><td>H3570</td><td>1x PBS에서 1:5,000 희석</td></tr><tr><td>인간 표피 성장인자(EGF)와 nbsp;</td><td>페프로텍</td><td>AF-100-15</td><td>농축 스톡 500 및 마이크로; g/mL</td></tr><tr><td>접종 루프</td><td>사르스테트</td><td>86.1567.010</td><td></td></tr><tr><td>접종관</td><td>사르스테트</td><td>62.515.006</td><td></td></tr><tr><td>라이카 스텔라리스 5 공초점 현미경</td><td>라이카</td><td></td><td></td></tr><tr><td>루리아 베르타니 브로스 (LB 브로스)</td><td>로스&nbsp;</td><td>X968.1</td><td></td></tr><tr><td>마트리젤</td><td>코닝</td><td>356231</td><td>세포외 기질 (ECM)</td></tr><tr><td>N-아세틸시스테인&nbsp;</td><td>시그마-올드리치</td><td>A9165-25G</td><td>농도 500 mM</td></tr><tr><td>노긴 CM</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>노보세포 양자와 nbsp;</td><td>애질런트</td><td></td><td>플로우 사이토미터</td></tr><tr><td>파라포름알데히드 (PFA)</td><td>시그마 올드리치</td><td>P6148</td><td>4% 복용 시 1x PBS, 4% 자당</td></tr><tr><td>프리모신</td><td>인비보젠</td><td>앤트-pm-1</td><td></td></tr><tr><td>Q-VETTES 세미마이크로</td><td>레이티오랩</td><td>2712120</td><td></td></tr><tr><td>로키 (Y-27632)</td><td>아브몰</td><td>M1817</td><td>RhoA/ROCK 억제제; 농도 스톡 10 mM</td></tr><tr><td>R-스포딘1 CM</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>293T 세포주 발현 중인 R-스폰딘1</td><td>시그마 올드리치</td><td>SCC111</td><td>R-spo1 CM을 생산하는 데 사용됨; 배양액: 500ml DMEM, 고포도당, GlutaMAX, 피루베이트 (Gibco Life Technologies, 31966)+ 60ml FBS&nbsp;</td></tr><tr><td>TGF&beta; i (A-83-01)</td><td>토크리스</td><td>2939</td><td>ALK4/5/7 억제제; 농축 스톡 5 mM&nbsp;</td></tr><tr><td>트리톤 X-100&nbsp;</td><td>시그마 올드리치</td><td>T9284</td><td>PBS에 희석된 0.5% 1회 사용</td></tr><tr><td>TrypLE Express 효소&nbsp;</td><td>깁코</td><td>12605028</td><td>3D 마우스 전립선 오가노이드 소화를 위한 효소 세포 해리제(Enzymatic cell dissociation agent)</td></tr><tr><td>요로병원성 대장균 균주 UTI89</td><td>도브린트 교수님의 WT 균주</td><td></td><td>pFPV-mCherry(추가유전자 #20956)로 변환됨</td></tr></tbody></table>

숙주-병원체 상호작용 연구를 위한 마우스 전립선 오가노이드 기반 모델 생성

Generation of a Mouse Prostate Organoid-Based Model for Studying Host-Pathogen Interactions

Aging men are highly affected by prostate diseases, such as benign prostatic hyperplasia, prostatitis, and prostate cancer. Together, these conditions ...

generation-mouse-prostate-organoid-based-model-for-studying-host

Research

연구

JoVE Journal

Immunology and Infection

면역학 및 감염학

종양에서 유래한 오가노이드는 종양의 병리학적 특징과 장기 특이적 세포 계통을 유지할 수 있는 일종의 3D 세포 배양 모델입니다. 예시 프로토콜에서는 과학자들이 유전자 조작 마우스 모델로부터 전립선 종양으로부터 오가노이드를 생성하는 것을 볼 수 있습니다.

종양에서 오가노이드 준비: 3D 체외 종양 모델

이 비디오에서는 매트릭스 겔링 기반 배양 기술을 사용하여 분리된 마우스 전립선 상피 세포를 배양하는 방법을 보여줍니다. 이 접근법은 유전적 또는 약리학적 조작에 반응하여 3D 선상 구조를 형성하기 위한 전립선 상피 세포의 분화 능력에 대한 보완적인 정보를 제공할 수 있습니다.

전립선 오가노이드 분석법(Prostate Organoid Assay): 전립선 상피 세포의 분화 능력을 연구하기 위한 매트릭스 겔 링 기반 생체 외 배양 기술

줄기세포 유래 배양은 감염병을 모델링할 수 있는 엄청난 잠재력을 가지고 있습니다. 여기에서는 성체 줄기 세포에서 유래한 마우스 및 인간 위 오가노이드의 배양에 대해 설명합니다. 오가노이드에는 위 병원균인 헬리코박터 파일로리(Helicobacter pylori)가 미세주입됩니다.

감염증에 대한 모델로 Organoids : 헬리코박터 파이로리의 인간의 문화와 쥐 위장 Organoids 및 미세 주입

유전자 조작된 생쥐 전립선 암 메커니즘을 조사를 위해 유용한 모델이 있습니다. 여기를 식별 하 고 마우스 비뇨 생식 기 시스템에서 전립선 엽 해 부, 조직학에 따라 구분 하 고 분리 다운스트림 분석에 대 한 spheroids로 기본 전립선 세포에는 생체 외에서 문화 프로토콜 선물이.

식별, 조직학 특성화 및 체 외 3D 회전 타원 체 문화 모델에 대 한 마우스 전립선 돌출부의 해 부

여기, 우리 인간의 기본 전립선 organoid 처리 안내 다음 끝점 표현 형을 평가 하는 것이 좋습니다 프로토콜을 제시. 시드, 문화 유지 보수, 매트릭스 젤에서 복구 형태 론 적 정량화, 포함 및 단면, FFPE 단면, 전체 마운트 얼룩, 및 상업적인 분석의 응용 프로그램 설명 합니다.

처리 및 인간의 기본 전립선 Organoid 문화에 대 한 평가

우리는 전립선 종양 해부에 초점을 맞춘 마우스 전립선 암 모델의 부검 및 해부를위한 방법을 보여줍니다. 마우스 전립선 종양 오르가노이드의 생성을 위한 단계별 프로토콜도 제시된다.

전립선암의 유전자 조작 마우스 모델에서 종양 오르가노이드의 생성

마우스 전립선 오르가노이드는 분화를 조절하는 메커니즘을 평가하는 유망한 맥락을 나타낸다. 이 논문은 전립선 오르가노이드를 확립하기 위한 개선된 접근법을 설명하고, (1) 오르가노이드로부터 단백질 용해액을 수집하고, (2) 전체 마운트 공초점 현미경검사법에 대한 수정 및 얼룩 오르가노이드를 수집하는 방법을 소개합니다.

유기체 배양을 사용하여 마우스 전립선 상피 세포의 분화 능력 평가

여기에 제시된 것은 전립선 상피 오르가노이드의 약리학적 반응을 연구하는 프로토콜이다. 오르가노이드는 생체 생물학과 밀접하게 유사하며 환자 유전학을 재현하여 매력적인 모델 시스템을 만듭니다. 전립선 오르가노이드는 야생형 전립선, 유전자 조작 마우스 모델, 양성 인간 조직 및 고급 전립선암에서 확립될 수 있습니다.

약리학적 반응에 유전형과 돌연변이 단면도를 번역하는 공구로 전립선 오르가노이드 문화

환자 BMPC 견본및 뼈 전이성 전립선암의 이종이식의 3차원 배양은 낭종, 스페로이드 및 복잡한, 종양 같이 organoids의 결과로 그들의 본래 종양의 기능적인 이질성을 유지합니다. 이 원고는 IFC를 사용하여 이기종 환자 유래 샘플 및 이들의 분석의 3D 배양에 대한 최적화 전략 및 프로토콜을 제공한다.

환자 전립선암 뼈 전이 표본 및 이종이식에서 파생된 3차원(3D) 오르가노이드의 설립 및 분석

전립선암 이질성과 치료 저항성은 여전히 과제로 남아 있습니다. 우리는 주요 부모 종양 특성을 보존하는 환자 유래 오가노이드(PDO)를 생성하기 위한 프로토콜을 설명합니다. 이 표준화된 모델은 약물 스크리닝 및 정밀 의학 발전을 지원합니다.

환자 유래 전립선암 오가노이드의 확립 및 유지: 상세한 실험 프로토콜

이 연구는 조직 줄기세포에서 유래한 장 오가노이드를 이용한 세균 감염의 시험관 내 조사 방법을 제시합니다. 이 프로토콜은 2차원에서 오가노이드를 배양하고 구분하는 방법, 침착성 대장균으로 감염시키는 방법, 그리고 상피 장벽 돌파, 감염 영상, 상피 RNA 반응 등 주요 측정값을 평가하는 방법을 설명합니다.

숙주-박테리아 상호작용을 연구하기 위한 침입 또는 저저막 추출물에 적용한 2차원 오가노이드 배양

배우세요 마우스 전립선 오가노이드에서 2D 상피 배양 모델을 생성하는 방법을. UPEC 감염 연구를 위한 숙주-병원체 상호작용 분석에 활용할 수 있는 생리학적으로 관련성 높은 플랫폼을 제공합니다.

숙주-병원체 상호작용 연구를 위한 마우스 전립선 오가노이드 기반 모델 생성

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