Name: 클로닝을 위한 핵 기증자로서 냉동 보존된 말 정액에서 체세포를 분리하는 간단한 미세 흡기 기법 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-12-19T13:05:00.000+00:00
Duration: 4 min 36 s
Description: 배우세요 냉동 보존된 말 정액에서 미세 흡기 기법으로 체세포를 분리하는 방법을. 이 기술은 정자 오염을 줄이고 즉시 복제에 사용할 수 있는 핵 기증자 세포를 확보하여 고유전가치 개체 복원에 활용됩니다.

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<ol><li>Pandey, A., Gupta, S. C., Gupta, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+potential+of+cultured+skin+fibroblast%2C+cumulus%2C+and+granulosa+cell+to+produce+somatic+cell+nuclear+transfer+%28SCNT%29+preimplantation+embryos+in+buffaloes+%28Bubalus+bubalis%29+in+relation+to+gene+expressions%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Reprogram%22%5BJournal%5D)">Comparative potential of cultured skin fibroblast, cumulus, and granulosa cell to produce somatic cell nuclear transfer (SCNT) preimplantation embryos in buffaloes (Bubalus bubalis) in relation to gene expressions.</a> Cell Reprogram. 12 (3), 357-368 (2010).</li>
<li>Galli, C., Duchi, R., Moor, R. M., Lazzari, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mammalian+leukocytes+contain+all+the+genetic+information+necessary+for+the+development+of+a+new+individual%5BTitle%5D)+AND+%22Cloning%22%5BJournal%5D)">Mammalian leukocytes contain all the genetic information necessary for the development of a new individual.</a> Cloning. 1 (3), 161-170 (1999).</li>
<li>Olsson, P. O., Yeonwoo, J., Park, K., Yoo, Y. M., Hwang, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+births+from+urine+derived+cells%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Live births from urine derived cells.</a> PLoS One. 18 (1), e0278607(2023).</li>
<li>Vignon, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+potential+of+bovine+embryos+reconstructed+from+enucleated+matured+oocytes+fused+with+cultured+somatic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22C+R+Acad+Sci+III%22%5BJournal%5D)">Developmental potential of bovine embryos reconstructed from enucleated matured oocytes fused with cultured somatic cells.</a> C R Acad Sci III. 321 (9), 735-745 (1998).</li>
<li>Nel-Themaat, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation%2C+culture+and+characterisation+of+somatic+cells+derived+from+semen+and+milk+of+endangered+sheep+and+eland+antelope%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Fertil+Dev%22%5BJournal%5D)">Isolation, culture and characterisation of somatic cells derived from semen and milk of endangered sheep and eland antelope.</a> Reprod Fertil Dev. 19 (4), 576-584 (2007).</li>
<li>Kjelland, M. E., Liu, J., Hyatt, D., Kraemer, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collection%2C+isolation%2C+and+culture+of+somatic+cells+from+avian+semen%5BTitle%5D)+AND+%22Avian+Biol+Res%22%5BJournal%5D)">Collection, isolation, and culture of somatic cells from avian semen.</a> Avian Biol Res. 6 (4), 255-260 (2013).</li>
<li>Nel-Themaat, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cloned+embryos+from+semen.+Part+1%3A+in+vitro+proliferation+of+epithelial+cells+on+embryonic+fibroblasts+after+isolation+from+semen+by+gradient+centrifugation%5BTitle%5D)+AND+%22Cloning+Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Cloned embryos from semen. Part 1: in vitro proliferation of epithelial cells on embryonic fibroblasts after isolation from semen by gradient centrifugation.</a> Cloning Stem Cells. 10 (1), 143-160 (2008).</li>
<li>Liu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+culture+systems+for+attachment+and+proliferation+of+epithelial+cells+cultured+from+ovine+semen%5BTitle%5D)+AND+%22Anim+Reprod+Sci%22%5BJournal%5D)">Evaluation of culture systems for attachment and proliferation of epithelial cells cultured from ovine semen.</a> Anim Reprod Sci. 115 (1-4), 49-57 (2009).</li>
<li>Liu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Embryo+production+and+possible+species+preservation+by+nuclear+transfer+of+somatic+cells+isolated+from+bovine+semen%5BTitle%5D)+AND+%22Theriogenology%22%5BJournal%5D)">Embryo production and possible species preservation by nuclear transfer of somatic cells isolated from bovine semen.</a> Theriogenology. 74 (9), 1629-1635 (2010).</li>
<li>Saini, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+culture+of+epithelial+cells+from+stored+buffalo+semen+and+their+use+for+the+production+of+cloned+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Fertil+Dev%22%5BJournal%5D)">Isolation and culture of epithelial cells from stored buffalo semen and their use for the production of cloned embryos.</a> Reprod Fertil Dev. 31 (10), 1581-1588 (2019).</li>
<li>Brom-de-Luna, J. G., Canesin, H. S., Wright, G., Hinrichs, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Culture+of+somatic+cells+isolated+from+frozen-thawed+equine+semen+using+fluorescence-assisted+cell+sorting%5BTitle%5D)+AND+%22Anim+Reprod+Sci%22%5BJournal%5D)">Culture of somatic cells isolated from frozen-thawed equine semen using fluorescence-assisted cell sorting.</a> Anim Reprod Sci. 190, 10-17 (2018).</li>
<li>Ramos, B., Rodríguez, A. A., Rosales, A. M., Montiel, A. J., Hernández, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+somatic+cell+populations+in+cryopreserved+equine+semen+as+a+source+of+donor+nuclei+for+somatic+cloning%3A+preliminary+results%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Fertil+Dev%22%5BJournal%5D)">Identification of somatic cell populations in cryopreserved equine semen as a source of donor nuclei for somatic cloning: preliminary results.</a> Reprod Fertil Dev. 37 (1), (2025).</li>
<li>Moulavi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interspecies+somatic+cell+nuclear+transfer+in+Asiatic+cheetah+using+nuclei+derived+from+post-mortem+frozen+tissue+in+absence+of+cryo-protectant+and+in+vitro+matured+domestic+cat+oocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Theriogenology%22%5BJournal%5D)">Interspecies somatic cell nuclear transfer in Asiatic cheetah using nuclei derived from post-mortem frozen tissue in absence of cryo-protectant and in vitro matured domestic cat oocytes.</a> Theriogenology. 90, 197-203 (2017).</li>
<li>Wakayama, S., Ito, D., Ooga, M., Wakayama, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Production+of+mouse+offspring+from+zygotes+fertilized+with+freeze-dried+spermatids%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Production of mouse offspring from zygotes fertilized with freeze-dried spermatids.</a> Sci Rep. 12 (1), 18430(2022).</li>
<li>Wakayama, S., Ito, D., Hayashi, E., Ishiuchi, T., Wakayama, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Healthy+cloned+offspring+derived+from+freeze-dried+somatic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Healthy cloned offspring derived from freeze-dried somatic cells.</a> Nat Commun. 13 (1), 3666(2022).</li>
<li>Loi, P., Fulka, J., Hildebrand, T., Ptak, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genome+of+non-living+cells%3A+Trash+or+recycle%5BTitle%5D)+AND+%22Reproduction%22%5BJournal%5D)">Genome of non-living cells: Trash or recycle.</a> Reproduction. 142 (4), 497-503 (2011).</li>
<li>Wakayama, S., Wakayama, T., Wells, D. N. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWakayama%2C+S+%22Encyclopedia+of+Life+Sciences%22">Encyclopedia of Life Sciences</a>. , 1-10 (2023).</li>
<li>Lanza, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extension+of+cell+life-span+and+telomere+length+in+animals+cloned+from+senescent+somatic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Extension of cell life-span and telomere length in animals cloned from senescent somatic cells.</a> Science. 288, 665-669 (2000).</li>
<li>González-Bermúdez, B., Guinea, G. V., Plaza, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+micropipette+aspiration%3A+applications+in+cell+biomechanics%2C+models%2C+and+extended+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+J%22%5BJournal%5D)">Advances in micropipette aspiration: applications in cell biomechanics, models, and extended studies.</a> Biophys J. 116 (4), 587-594 (2019).</li>
<li>Hochmuth, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micropipette+aspiration+of+living+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomech%22%5BJournal%5D)">Micropipette aspiration of living cells.</a> J Biomech. 33 (1), 15-22 (2000).</li>
<li>Vajta, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Production+of+a+healthy+calf+by+somatic+cell+nuclear+transfer+without+micromanipulators+and+carbon+dioxide+incubators+using+the+handmade+cloning+%28HMC%29+and+the+submarine+incubation+system+%28SIS%29%5BTitle%5D)+AND+%22Theriogenology%22%5BJournal%5D)">Production of a healthy calf by somatic cell nuclear transfer without micromanipulators and carbon dioxide incubators using the handmade cloning (HMC) and the submarine incubation system (SIS).</a> Theriogenology. 62 (8), 1465-1472 (2004).</li>
<li>Alteri, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Revisiting+embryo+assisted+hatching+approaches%3A+A+systematic+review+of+the+current+protocols%5BTitle%5D)+AND+%22J+Assist+Reprod+Genet%22%5BJournal%5D)">Revisiting embryo assisted hatching approaches: A systematic review of the current protocols.</a> J Assist Reprod Genet. 35 (3), 367-391 (2018).</li>
<li>Briski, O., Salamone, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Past%2C+present+and+future+of+ICSI+in+livestock+species%5BTitle%5D)+AND+%22Anim+Reprod+Sci%22%5BJournal%5D)">Past, present and future of ICSI in livestock species.</a> Anim Reprod Sci. 246, 106925(2022).</li>
<li>Wall, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pronuclear+microinjection%5BTitle%5D)+AND+%22Cloning+Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Pronuclear microinjection.</a> Cloning Stem Cells. 3 (4), 209-220 (2001).</li>
<li>Selokar, N. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hope+for+restoration+of+dead+valuable+bulls+through+cloning+using+donor+somatic+cells+isolated+from+cryopreserved+semen%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Hope for restoration of dead valuable bulls through cloning using donor somatic cells isolated from cryopreserved semen.</a> PLoS One. 9 (3), e90755(2014).</li>
<li>Selokar, N. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Buffalo+%28Bubalus+bubalis%29+SCNT+embryos+produced+from+somatic+cells+isolated+from+frozen-thawed+semen%3A+Effect+of+trichostatin+A+on+the+in+vitro+and+in+vivo+developmental+potential%2C+quality+and+epigenetic+status%5BTitle%5D)+AND+%22Zygote%22%5BJournal%5D)">Buffalo (Bubalus bubalis) SCNT embryos produced from somatic cells isolated from frozen-thawed semen: Effect of trichostatin A on the in vitro and in vivo developmental potential, quality and epigenetic status.</a> Zygote. 24 (4), 549-553 (2016).</li>
<li>Guevorkian, K., Maître, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micropipette+aspiration%3A+A+unique+tool+for+exploring+cell+and+tissue+mechanics+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Micropipette aspiration: A unique tool for exploring cell and tissue mechanics in vivo.</a> Methods Cell Biol. 139, 187-201 (2017).</li>
<li>Duah, E. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Production+of+hand-made+cloned+buffalo+%28Bubalus+bubalis%29+embryos+from+nonviable+somatic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22In+Vitro+Cell+Dev+Biol+Anim%22%5BJournal%5D)">Production of hand-made cloned buffalo (Bubalus bubalis) embryos from nonviable somatic cells.</a> In Vitro Cell Dev Biol Anim. 52 (10), 983-988 (2016).</li>
<li>Loi, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nuclei+of+nonviable+ovine+somatic+cells+develop+into+lambs+after+nuclear+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Reprod%22%5BJournal%5D)">Nuclei of nonviable ovine somatic cells develop into lambs after nuclear transplantation.</a> Biol Reprod. 67 (1), 126-132 (2002).</li>
<li>Fahrudin, M., Otoi, T., Suzuki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+competence+of+bovine+embryos+reconstructed+by+the+transfer+of+somatic+cells+derived+from+frozen+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vet+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Developmental competence of bovine embryos reconstructed by the transfer of somatic cells derived from frozen tissues.</a> J Vet Med Sci. 63 (10), 1151-1154 (2001).</li>
<li>Podico, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-layer+colloid+centrifugation+as+a+method+to+process+urine-contaminated+stallion+semen+after+freezing-thawing%5BTitle%5D)+AND+%22J+Equine+Vet+Sci%22%5BJournal%5D)">Single-layer colloid centrifugation as a method to process urine-contaminated stallion semen after freezing-thawing.</a> J Equine Vet Sci. 87, 102910(2020).</li>
<li>Zhang, Y. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+porcine+urine-derived+cells+as+nuclei+donor+for+somatic+cell+nuclear+transfer%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vet+Sci%22%5BJournal%5D)">Evaluation of porcine urine-derived cells as nuclei donor for somatic cell nuclear transfer.</a> J Vet Sci. 23 (2), e40(2022).</li>
<li>Mizutani, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+cloned+mice+and+nuclear+transfer+embryonic+stem+cell+lines+from+urine-derived+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Generation of cloned mice and nuclear transfer embryonic stem cell lines from urine-derived cells.</a> Sci Rep. 6, 23808(2016).</li>
<li>Long, S., Kenworthy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Round+cells+in+diagnostic+semen+analysis%3A+a+guide+for+laboratories+and+clinicians%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Biomed+Sci%22%5BJournal%5D)">Round cells in diagnostic semen analysis: a guide for laboratories and clinicians.</a> Br J Biomed Sci. 79, 10129(2022).</li>
<li>Johanisson, E., Campana, A., Luthi, R., de Agostini, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+%27round+cells%27+in+semen+analysis%3A+a+comparative+study%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Reprod+Update%22%5BJournal%5D)">Evaluation of 'round cells' in semen analysis: a comparative study.</a> Hum Reprod Update. 6 (4), 404-412 (2000).</li>
<li>Graber, M., Lane, B., Lamia, R., Pastoriza-Munoz, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bubble+cells%3A+Renal+tubular+cells+in+the+urinary+sediment+with+characteristics+of+viability%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Soc+Nephrol%22%5BJournal%5D)">Bubble cells: Renal tubular cells in the urinary sediment with characteristics of viability.</a> J Am Soc Nephrol. 1 (7), 999-1004 (1991).</li>
<li>Rahmanian, N., Bozorgmehr, M., Torabi, M., Akbari, A., Zarnani, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+separation%3A+Potentials+and+pitfalls%5BTitle%5D)+AND+%22Prep+Biochem+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Cell separation: Potentials and pitfalls.</a> Prep Biochem Biotechnol. 47 (1), 38-51 (2017).</li>
<li>Håård, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+frozen+stallion+semen+in+Europe%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Vet+Scand+Suppl%22%5BJournal%5D)">Use of frozen stallion semen in Europe.</a> Acta Vet Scand Suppl. 88, 123-127 (1992).</li>
<li>Klug, E., Treu, H., Hillmann, H., Heinze, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Results+of+insemination+of+mares+with+fresh+and+frozen+stallion+semen%5BTitle%5D)+AND+%22J+Reprod+Fertil+Suppl%22%5BJournal%5D)">Results of insemination of mares with fresh and frozen stallion semen.</a> J Reprod Fertil Suppl. 23, 107-110 (1975).</li>
<li>Pukazhenthi, B., Comizzoli, P., Travis, A. J., Wildt, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+emerging+technologies+to+the+study+and+conservation+of+threatened+and+endangered+species%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Fertil+Dev%22%5BJournal%5D)">Applications of emerging technologies to the study and conservation of threatened and endangered species.</a> Reprod Fertil Dev. 18 (1-2), 77-90 (2006).</li>
<li>Swanson, W. F., Magarey, G. M., Herrick, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sperm+cryopreservation+in+endangered+felids%3A+developing+linkage+of+in+situ-ex+situ+populations%5BTitle%5D)+AND+%22Soc+Reprod+Fertil+Suppl%22%5BJournal%5D)">Sperm cryopreservation in endangered felids: developing linkage of in situ-ex situ populations.</a> Soc Reprod Fertil Suppl. 65, 417-432 (2007).</li>
<li>Lagutina, I., Fulka, H., Lazzari, G., Galli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interspecies+somatic+cell+nuclear+transfer%3A+Advancements+and+problems%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Reprogram%22%5BJournal%5D)">Interspecies somatic cell nuclear transfer: Advancements and problems.</a> Cell Reprogram. 15 (5), 374-384 (2013).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>2 베타 머캅토에탄올</td><td>시그마</td><td>M7522</td><td>체세포 배양</td></tr><tr><td>1개의 DPBS</td><td>GIBCO</td><td>참조번호-21600010</td><td>체세포 조작</td></tr><tr><td>절대 에탄올</td><td>하이셀</td><td>엘 크리솔 50181-1L73</td><td>피펫 제작을 위해</td></tr><tr><td>항생제-항흡입제 100배</td><td>인비트로 SA. 사랑스럽고; 시코</td><td></td><td>체세포 배양</td></tr><tr><td>붕규산 모세혈관 (1.0 mm 길이 및 시간; 0.78 mm 내경 및 시간 길이 100 mm)</td><td>하버드 어퍼퍼러스, 미국</td><td>EC1-30-0035</td><td>피펫 제작을 위해</td></tr><tr><td>BSA</td><td>시그마</td><td>A3311</td><td>체세포 배양</td></tr><tr><td>DMEM/F12 중간 크기</td><td>GIBCO</td><td>참조-12500-062</td><td>체세포 배양</td></tr><tr><td>말 냉동 보존 정액 샘플</td><td></td><td></td><td>냉동 보존된 정액 샘플은 상업용 유통업체로부터 입수했으며, 액체 질소에 19년 이상 보존되어 있었습니다. 모든 냉동 말 정액 샘플은 멕시코 관련 수의학 당국이 승인한 상업적 유통업체로부터 획득되었으며, 이는 멕시코 공식 표준 NOM-027-ZOO-1995, 가축 정액의 동물 위생 과정에 따른 것입니다.</td></tr><tr><td>접안렌즈 조준점</td><td></td><td>피펫 제작용 도구</td><td>필수 장비</td></tr><tr><td>태아 소 혈청</td><td>GIBCO</td><td>참조번호-26140-079</td><td>체세포 배양</td></tr><tr><td>하이드로플루산산</td><td>시그마-올드리치</td><td>339261</td><td>피펫 제작을 위해</td></tr><tr><td>역광현미경</td><td>이클립스, TE 200</td><td>니콘</td><td>체세포 미세조작</td></tr><tr><td>실험실 및 nbsp; 드라이 오븐</td><td></td><td>피펫 제작용 도구</td><td>필수 장비</td></tr><tr><td>마이크로포지</td><td></td><td>피펫 제작용 도구</td><td>필수 장비</td></tr><tr><td>역현미경용 마이크로매니퓰레이터 세트</td><td></td><td>세포의 미세 조작</td><td>필수 장비</td></tr><tr><td>마이크로피펫 풀러</td><td>P-97, 서터 계기</td><td>피펫 제작용 도구</td><td>다음 설정을 사용하세요. 열기: 720; 풀: 30; 속도: 50; 시간: 220; 압력</td></tr><tr><td>광유</td><td>시그마</td><td>M8410</td><td>체세포 조작</td></tr><tr><td>Nunclon&nbsp; 세포 배양 접시, 직경 및 시간; H 35 mm & 시간; 10mm</td><td>눈클론</td><td>눈 153066</td><td></td></tr><tr><td>PVA</td><td>시그마</td><td>P8136</td><td>체세포 배양</td></tr><tr><td>PVP</td><td>시그마</td><td>P5288</td><td>체세포 배양</td></tr><tr><td>트리판 블루 용액 0.4%</td><td>GIBCO</td><td>심판- 15250061</td><td>세포 염료</td></tr></tbody></table>

클로닝을 위한 핵 기증자로서 냉동 보존된 말 정액에서 체세포를 분리하는 간단한 미세 흡기 기법

A Simple Microaspiration Technique for Isolating Somatic Cells from Cryopreserved Equine Semen as Nuclear Donors for Cloning

표 1은 미세 흡인 기법이 냉동 보존된 말 정액에서 체세포를 효율적으로 회수하며, 세 마리의 종마에서 시간당 317.7± 9.60에서 424.7 ± 33.65 세포/시간 포획 속도를 보여줍니다. 종마 #03은 장기 보관 샘플에서도 이 방법의 효과가 입증되어 가장 높은 수확량을 보였습니다. 데이터는 이 기술이 정액에서 체세포를 일관되고 효과적으로 분리하며, 평균 포획률과 표준편차가 효율과 일관성을 정량적으로 측정하여 체세포 핵 이식에 적용할 수 있음을 보여줍니다.
각 체세포 분리는 큰 흡인 힘이 필요하지 않았으나, 일부 세포는 과정 중 마이크로피펫 끝에 부착하는 경향이 있었다. 조작 과정에서 관찰된 특징 중 하나는 분리된 세포의 강성과 낮은 변형성이었습니다.
<p class="jove_content" fo:keep-togethe...

Semen is a complex fluid that, in addition to spermatozoa, contains other cell populations, including immune cells, immature male germ cells, epithelial ...

a-simple-microaspiration-technique-for-isolating-somatic-cells-from

Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

이 영화와 프로토콜은 핵 이전을 학습 수 있도록 도와 드리기위한 것입니다.

마우스 Oocytes에 핵 전송

심장 핵​​은 밀도 침강 통해 격리 및 유동세포계측법 의해 cardiomyocyte 핵 파악하고 정렬하는 pericentriolar 소재 1 (PCM-1)에 대한 항체로 immunolabeled있다.

사후 조직에서 Cardiomyocyte 핵의 분리

효소 세제를 피 설치류 자료에서 고환 세포 현탁액의 기계적 준비를위한 새로운 프로토콜이 설명되어 있습니다. 방법은 매우 간단하고 빠르고, 재현성 및 흐름 정렬 및 RNA 추출에 적합한 좋은 품질의 세포 현탁액을 렌더링합니다.

고환 세포 현탁액의 준비를 위해 간단하고 효율적인 기술

MicroSecure Vitrification은 FDA 우수 제조 및 조직 취급 관행을 준수하는 비상업적인 무균 폐쇄 유리화 장치 시스템으로 개발되었습니다. 소수성 플러그 배아 빨대가 업계에서 철수함에 따라 유리화 절차는 표준 내부 면 플러그 앞에 내부 씰을 포함하도록 수정되었습니다.

수정 MicroSecure의 유리화 : 인간 배반포를위한 안전 간단하고 매우 효과적인 냉동 보존 절차

이 프로토콜 cloacal 마사지를, 조류, 그리고 수정 상업 추출 키트를 사용 하 여 새 정자에서 DNA 추출에서 정액을 수집 하는 비-침략 적 수동 기술에 설명 합니다.

조류 정액 컬렉션 Cloacal 마사지와 정액에서 DNA의 분리

마우스 trichostatin A, 비타민 C, 그리고 이온된 소 혈 청 알 부 민을 사용 하 여 복제 하는 극적으로 향상 된 방법을 설명 합니다. 우리는 복제 된 배아의 효율적인 개발을 지 원하는 단순화, 재현 가능한 프로토콜을 보여줍니다. 따라서,이 메서드는 마우스 복제에 대 한 표준화 된 절차 될 수 있다.

Trichostatin A와 비타민 C의 조합 치료 체세포 핵 이식에 의해 생쥐 복제의 효율성 향상

이 문서는 반 복제 배아의 건설을 위한 정액을 대신하기 위하여 parthenogenetic haploid 배아 줄기 세포의 사용을 입증하는 것을 작정입니다.

정자의 대체로 마우스 파르테노유전학 Haploid 배아 줄기 세포의 응용 프로그램

여기에서 우리는 세포핵 준비를 설명하는 프로토콜을 제시합니다. 심장 조직을 단일 세포로 미세 해부 및 효소 해리한 후, 전구 세포를 동결한 다음, 순수 생존 세포를 분리하여 단일 핵 RNA 시퀀싱 및 고처리량 시퀀싱 분석을 통한 전이효소 접근 가능한 염색질에 대한 단일 핵 분석에 사용했습니다.

단일 세포 분해능에서 후성유전체 및 유전자 발현 프로파일링을 위한 마우스 심장 전구 세포에서 핵 분리

이 연구는 다운스트림 단일 핵 RNA 염기서열 분석을 위해 냉동 포유류 조직에서 고품질 핵을 분리하는 간단하고 빠르며 부분적으로 자동화된 프로토콜을 설명합니다.

단일 핵 염기서열분석을 위해 냉동 포유류 조직에서 단일 핵을 분리하기 위한 간단하고 빠르며 부분적으로 자동화된 프로토콜

당사는 단일핵 차세대 염기서열분석 분석을 지원하기 위해 동결보존, 유도만능줄기세포, 유래 기질/내피세포 및 혈액 세포 유형에서 고품질 핵을 추출하기 위한 프로토콜을 설명합니다. 고품질의 온전한 핵을 생산하는 것은 멀티오믹스 실험에 필수적이지만 일부 실험실에서는 이 분야의 진입 장벽이 될 수 있습니다.

Cryopreserved In Vitro 유래 혈액 세포로부터 핵 분리

관상동맥 내막 절제술 조직 샘플은 최적화된 해리 프로토콜을 사용하여 단일 핵을 분리하기 위해 처리되었습니다. 분리된 핵의 무결성은 세 가지 보완적 접근법을 통해 검증되었습니다: 막 무결성 평가를 위한 트리판 블루 배제 염색, 핵 형태를 확인하기 위한 DAPI 기반 공초점 현미경, 핵수율과 순도를 정량화하는 유세포 측정법.

관상동맥 우회 이식 환자의 관상동맥 내적출술 조직에서 단일 핵 분리

배우세요 냉동 보존된 말 정액에서 미세 흡기 기법으로 체세포를 분리하는 방법을. 이 기술은 정자 오염을 줄이고 즉시 복제에 사용할 수 있는 핵 기증자 세포를 확보하여 고유전가치 개체 복원에 활용됩니다.

클로닝을 위한 핵 기증자로서 냉동 보존된 말 정액에서 체세포를 분리하는 간단한 미세 흡기 기법

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