2025년 12월 12일
여기서는 쥐의 초기 구간(간질성 주사)과 꼬리부고(혈관 내 주사)에서 염증 자극을 유도하는 두 가지 뚜렷한 외과적 주사 모델을 설명한다. 이 방법들은 부고고의 다양한 부위에서 특정 부위 반응을 연구할 수 있게 합니다.
우리는 남성 생식력에서 부고체 생리학에 미치는 염증의 영향을 조사합니다. 손상 없이 정밀하게 구획화된 염증 유발제 주입. 마우스 모델에서 부고체관은 고급 외과 기술과 훈련이 결합되어야 합니다.
먼저, 마취된 동물을 수술 현장에 누운 자세로 눕히세요. 전기 트리머 펜을 사용해 쥐 복부의 털을 완전히 제거하세요. 그 다음, 멸균 면을 0.25% 클로르헥시딘 용액에 적셔 사용하세요.
그리고 복부 무균을 위해 알코올을 사용했습니다. 15 사이즈 메스로 복벽 오른쪽에 약 4밀리미터 수직 절개를 내세요. 이제 각도가 있는 둔한 수술용 겸자로 피부를 부드럽게 떼어내세요.
그 후 같은 메스를 사용해 첫 번째 절개 부위 옆에 복막에 약 4밀리미터 수직 절개를 추가로 합니다. 음낭 오른쪽을 부드럽게 밀어 고환의 부고환을 복강에서 조심스럽게 들어 올립니다. 굽은 수술용 겸자를 사용해 부고환 흰 지방 조직을 부드럽게 당겨 부고환의 초기 구간을 위치시킵니다.
부고체 백색 지방 조직의 도움을 받아 절개 부위의 초기 마디를 노출합니다. 다음으로, 주입액이 미리 적재된 해밀턴 주사기를 초기 세그먼트의 첫 번째 세그먼트와 약 90도 평행한 각도로 위치시킵니다. 베벨이 아래로 향하도록 바늘을 조심스럽게 간질 공간에 삽입하세요.
그 후 굽은 수술용 겸자를 바늘 삽입 부위에 위치시키고 부고체 캡슐과 바늘을 부드럽게 집습니다. 주사기 플런저를 천천히 눌러서 자극액 전체가 주입될 때까지 유지하세요. 굽은 수술용 겸자를 제자리에 둔 채 조심스럽게 바늘을 제거하고 약 30초 후에 굽은 수술용 겸자를 떼어줍니다.
다음으로, 부고환 백색 지방 조직을 사용해 고환 조직을 부드럽게 복강으로 되돌려 넣습니다. 복막을 확인하고 바늘 홀더와 5-0 수술 봉합사를 사용해 두 개의 봉합 봉합을 하고, 피부 절개는 두 개의 봉합 봉합으로 봉합합니다. 수술 후에는 쥐를 관찰하여 적절한 수술 후 회복 상태를 확인하세요.
마취를 투여한 후, 생쥐를 수술 부위에 누운 자세로 눕히세요. 검지와 엄지를 음낭 아래에 대고 고환과 부고환의 위치를 촉지하고 확인하세요. 필요하다면 복부 옆면을 음낭 쪽으로 부드럽게 마사지하여 고환과 부고환을 제자리에 맞게 안내하세요.
전기 트리머 펜을 사용해 음낭 삼각술을 하여 털을 완전히 제거하고, 멸균 면을 0.25% 클로르헥시딘 용액에 적신 후 알코올로 소독합니다. 검지와 엄지로 음낭 아래를 부드럽게 늘려 음낭 피부를 늘려주세요. 15 사이즈 메스를 사용해 음낭 내측 부분에 약 2밀리미터 수직 절개를 합니다.
이제 왼쪽 고환과 부고환을 부드럽게 복강 안으로 옮기되, 오른쪽 고환과 부고환은 음낭에 남겨두세요. 검지와 엄지는 오른쪽 고환과 부고환 아래에 위치시키고, 음낭 피부를 부드럽게 늘려 주세요. 그 후 각도가 있는 둔끝 수술용 겸자를 사용해 내부 정막 끝을 조심스럽게 열고 닫아 내부 정막과 질 튜닉을 파열시킵니다.
다음으로, 검지와 엄지의 압력을 풀고, 각도 있는 수술용 겸자를 질 튜닉의 구멍을 통해 음낭 밑부분 쪽으로 삽입합니다. 겸자를 사용해 원위 부고환 지방을 조심스럽게 당겨 고리부고환을 정확히 잡아내세요. 이제 정관을 국소화하고 곧은 수술용 겸자를 그 아래에 위치시킵니다.
불독 핀셋 클램프를 정관에 올려 꼬리부고와 클램프 사이에 충분한 공간을 확보하세요. 그 다음, 주입액이 미리 적재된 해밀턴 주사기를 정관과 평행한 각도로 약 10도에서 15도 정도 각도로 위치시키고, 베벨이 위를 향하게 하여 바늘을 정관에 삽입합니다. 직선 수술용 겸자를 부드럽게 눌러 정관을 풀고, 주사기 플런저를 천천히 눌러서 전체 자극액을 주입하세요.
이제 직선 수술용 겸자를 제거하세요. 곡선형 수술용 겸자를 사용해 바늘 삽입 부위 주변을 부드럽게 꼬집은 후 조심스럽게 주사기를 빼냅니다. 약 30초 후, 곡선형 수술용 겸자와 불독 핀셋 클램프를 제거하고 정관을 부드럽게 음낭으로 되돌립니다.
다음으로, 질 튜닉을 확인하고 바늘 홀더와 5-0 사이즈 수술용 봉합사를 이용해 한 땀으로 봉합합니다. 검지로 오른쪽 고환과 부고환을 부드럽게 복부 안으로 밀어 넣고, 왼쪽 고환과 부고환을 음낭 안으로 옮기세요. 마지막으로, 바늘 홀더와 5-0 사이즈 수술용 봉합사를 사용해 음낭 피부 절개를 두 개의 봉합사로 봉합하고, 생쥐를 관찰하여 수술 후 회복을 잘 확인하세요.
초기 구간의 간질성 주입으로 인해 주입된 청색 에반스 염료는 주사 후 최대 30분간 주로 1구간에 제한되었고, 이후 초기 구간의 인접 구간과 부고고로 확산되었습니다. 정관내 주입은 정관에 주입되어, 주사 후 최대 30분간 블루 에반스 염료를 10구간의 내강 내에 가두었습니다. 조직학적 사진 현미경 촬영은 식염수 조절 주사가 치료 후 72시간 동안 부고환 형태에 변화를 주지 않았음을 확인했습니다.
초기 구간에 간질성 LPS 주사를 투여하면 치료 72시간 후 간질성 부종과 강렬한 간질, 상피내, 하루내면역세포 침윤이 발생하였습니다. LPS 또는 LTA를 고추부고에 주입하면 치료 72시간 후 간질성 부종과 간질성 및 하내구획에 면역세포 침윤이 발생하였습니다. 국소적인 부고체 염증과 그것이 남성 생식력에 미치는 영향을 연구하는 재현 가능한 동물 모델의 부재.
염증을 유발하는 화학물질을 직접 국소 주입하면 부고상 결과에서 특정 면역 반응을 정밀하게 분석할 수 있습니다.
전체 스크립트를 보고 수천 개의 과학 동영상에 액세스하세요
본 논문은 마우스 부고환의 특정 부위에 염증성 자극을 유도하기 위한 두 가지 서로 다른 외과적 주입 모델을 설명합니다. 간질 주입은 초기 분절을 대상으로 하며, 혈관 내 주입은 부고환 미부를 대상으로 합니다. 이러한 방법들은 부고환의 부위 특이적 반응 연구를 용이하게 합니다.
병원체 관련 분자 패턴(PAMPs)으로 유도된 부고환염의 부위 특이적 마우스 모델은 남성 불임과 관련된 염증 기전을 분석할 수 있는 제어된 플랫폼을 제공합니다. 이러한 모델은 감염으로 인한 생식 기능 장애를 완화하기 위한 중재법의 기전적 위험 제거 및 표적 검증을 가능하게 합니다. 이 모델들의 전략적 가치는 중개 연구에 대한 예측 신뢰도를 높이고 초기 단계의 치료 가설 검증을 지원하는 데 있습니다.
이 마우스 모델들은 초기 발견부터 전임상 단계까지의 연속선상에 위치하여, 생식기 염증 연구를 위한 가설 검증, 타겟 확인 및 중개 연구의 연속성을 가능하게 합니다.