Name: 동일한 식도암 환자로부터 종양 오가노이드, 암 관련 섬유아세포 및 대응 섬유아세포의 형성 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-04-03T14:10:00.000+00:00
Duration: 6 min 51 s
Description: 배우세요 식도편평세포암 환자에서 종양 오가노이드, 암 관련 섬유아세포 및 대응 섬유아세포를 동시에 분리하는 방법을. 환자 일치 세포 모델로 종양-기질 상호작용 연구의 재현성을 높입니다.

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<ol><li>Sung, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+Cancer+Statistics+2020%3A+GLOBOCAN+estimates+of+incidence+and+mortality+worldwide+for+36+cancers+in+185+countries%5BTitle%5D)+AND+%22CA+Cancer+J+Clin%22%5BJournal%5D)">Global Cancer Statistics 2020: GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries.</a> CA Cancer J Clin. 71 (3), 209-249 (2021).</li>
<li>Abbas, G., Krasna, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Overview+of+esophageal+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Cardiothorac+Surg%22%5BJournal%5D)">Overview of esophageal cancer.</a> Ann Cardiothorac Surg. 6 (2), 131-136 (2017).</li>
<li>Morgan, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+burden+of+colorectal+cancer+in+2020+and+2040%3A+Incidence+and+mortality+estimates+from+GLOBOCAN%5BTitle%5D)+AND+%22Gut%22%5BJournal%5D)">Global burden of colorectal cancer in 2020 and 2040: Incidence and mortality estimates from GLOBOCAN.</a> Gut. 72 (2), 338-344 (2023).</li>
<li>Lagergren, J., Smyth, E., Cunningham, D., Lagergren, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oesophageal+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Oesophageal cancer.</a> Lancet. 390 (10110), 2383-2396 (2017).</li>
<li>Lordick, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oesophageal+cancer%3A+ESMO+Clinical+Practice+Guidelines+for+diagnosis%2C+treatment+and+follow-up%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Oncol%22%5BJournal%5D)">Oesophageal cancer: ESMO Clinical Practice Guidelines for diagnosis, treatment and follow-up.</a> Ann Oncol. 27 (suppl 5), v50-v57 (2016).</li>
<li>Chhabra, Y., Weeraratna, A. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibroblasts+in+cancer%3A+Unity+in+heterogeneity%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Fibroblasts in cancer: Unity in heterogeneity.</a> Cell. 186 (8), 1580-1609 (2023).</li>
<li>Caligiuri, G., Tuveson, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activated+fibroblasts+in+cancer%3A+Perspectives+and+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Activated fibroblasts in cancer: Perspectives and challenges.</a> Cancer Cell. 41 (3), 434-449 (2023).</li>
<li>Mezawa, Y., Orimo, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+roles+of+tumor-+and+metastasis-promoting+carcinoma-associated+fibroblasts+in+human+carcinomas%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Tissue+Res%22%5BJournal%5D)">The roles of tumor- and metastasis-promoting carcinoma-associated fibroblasts in human carcinomas.</a> Cell Tissue Res. 365 (3), 675-689 (2016).</li>
<li>Mezawa, Y., Orimo, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phenotypic+heterogeneity%2C+stability+and+plasticity+in+tumor-promoting+carcinoma-associated+fibroblasts%5BTitle%5D)+AND+%22FEBS+J%22%5BJournal%5D)">Phenotypic heterogeneity, stability and plasticity in tumor-promoting carcinoma-associated fibroblasts.</a> FEBS J. 289 (9), 2429-2447 (2022).</li>
<li>Qiu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer-associated+fibroblasts%3A+An+emerging+target+against+esophageal+squamous+cell+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Lett%22%5BJournal%5D)">Cancer-associated fibroblasts: An emerging target against esophageal squamous cell carcinoma.</a> Cancer Lett. 546, 215860(2022).</li>
<li>Xue, M., Tong, Y., Xiong, Y., Yu, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+cancer-associated+fibroblasts+in+the+progression%2C+therapeutic+resistance+and+targeted+therapy+of+oesophageal+squamous+cell+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Oncol%22%5BJournal%5D)">Role of cancer-associated fibroblasts in the progression, therapeutic resistance and targeted therapy of oesophageal squamous cell carcinoma.</a> Front Oncol. 13, 1257266(2023).</li>
<li>Dunbar, K. J., Wong, K. K., Rustgi, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer-associated+fibroblasts+in+esophageal+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Mol+Gastroenterol+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Cancer-associated fibroblasts in esophageal cancer.</a> Cell Mol Gastroenterol Hepatol. 17 (5), 687-695 (2024).</li>
<li>Pimkhaokham, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonrandom+chromosomal+imbalances+in+esophageal+squamous+cell+carcinoma+cell+lines%3A+Possible+involvement+of+the+ATF3+and+CENPF+genes+in+the+1q32+amplicon%5BTitle%5D)+AND+%22Jpn+J+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Nonrandom chromosomal imbalances in esophageal squamous cell carcinoma cell lines: Possible involvement of the ATF3 and CENPF genes in the 1q32 amplicon.</a> Jpn J Cancer Res. 91 (11), 1126-1133 (2000).</li>
<li>Kijima, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+organoids+reveal+therapy+resistance+of+esophageal+and+oropharyngeal+squamous+cell+carcinoma+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Mol+Gastroenterol+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional organoids reveal therapy resistance of esophageal and oropharyngeal squamous cell carcinoma cells.</a> Cell Mol Gastroenterol Hepatol. 7 (1), 73-91 (2019).</li>
<li>Fuchino, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+residual+cancer+by+comparison+of+a+pair+of+organoids+established+from+a+patient+with+esophageal+squamous+cell+carcinoma+before+and+after+neoadjuvant+chemotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Cell%22%5BJournal%5D)">Characterization of residual cancer by comparison of a pair of organoids established from a patient with esophageal squamous cell carcinoma before and after neoadjuvant chemotherapy.</a> Hum Cell. 37 (2), 491-501 (2024).</li>
<li>Shen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advancing+precision+medicine+in+esophageal+squamous+cell+carcinoma+using+patient-derived+organoids%5BTitle%5D)+AND+%22J+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Advancing precision medicine in esophageal squamous cell carcinoma using patient-derived organoids.</a> J Transl Med. 22 (1), 1168(2024).</li>
<li>Zhang, S., Wang, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+to+establish+patient-derived+xenograft+and+organoid+for+radiosensitivity+of+esophageal+squamous+cell+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol to establish patient-derived xenograft and organoid for radiosensitivity of esophageal squamous cell carcinoma.</a> STAR Protoc. 5 (4), 103273(2024).</li>
<li>Miyoshi, H., Stappenbeck, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+expansion+and+genetic+modification+of+gastrointestinal+stem+cells+in+spheroid+culture%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">In vitro expansion and genetic modification of gastrointestinal stem cells in spheroid culture.</a> Nat Protoc. 8 (12), 2471-2482 (2013).</li>
<li>Mashima, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((KIF24+depletion+induces+clustering+of+supernumerary+centrosomes+in+PDAC+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sci+Alliance%22%5BJournal%5D)">KIF24 depletion induces clustering of supernumerary centrosomes in PDAC cells.</a> Life Sci Alliance. 5 (11), e202201470(2022).</li>
<li>Hogstrom, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+isolation+of+hormone+receptor-positive+breast+cancer+organoids+and+fibroblasts+reveals+stroma-mediated+resistance+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Simultaneous isolation of hormone receptor-positive breast cancer organoids and fibroblasts reveals stroma-mediated resistance mechanisms.</a> J Biol Chem. 299 (8), 105021(2023).</li>
<li>Schuth, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-specific+modeling+of+stroma-mediated+chemoresistance+of+pancreatic+cancer+using+a+three-dimensional+organoid-fibroblast+co-culture+system%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Clin+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Patient-specific modeling of stroma-mediated chemoresistance of pancreatic cancer using a three-dimensional organoid-fibroblast co-culture system.</a> J Exp Clin Cancer Res. 41 (1), 312(2022).</li>
<li>Farin, H. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Colorectal+cancer+organoid-stroma+biobank+allows+subtype-specific+assessment+of+individualized+therapy+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discov%22%5BJournal%5D)">Colorectal cancer organoid-stroma biobank allows subtype-specific assessment of individualized therapy responses.</a> Cancer Discov. 13 (10), 2192-2211 (2023).</li>
<li>Zapatero, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trellis+tree-based+analysis+reveals+stromal+regulation+of+patient-derived+organoid+drug+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Trellis tree-based analysis reveals stromal regulation of patient-derived organoid drug responses.</a> Cell. 187 (25), 7335-7349 (2024).</li>
<li>Rademaekers, M., Johansson, E. O., Johansson, E., Roberg, K., Wiechec, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor-matched+and+unmatched+cancer+associated+fibroblasts+exhibit+differential+effect+on+proliferation+and+FMOD+and+MMP9+gene+expression+in+head+and+neck+squamous+cell+carcinoma+cells+when+co-cultured+in+spheroids%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell+Int%22%5BJournal%5D)">Tumor-matched and unmatched cancer associated fibroblasts exhibit differential effect on proliferation and FMOD and MMP9 gene expression in head and neck squamous cell carcinoma cells when co-cultured in spheroids.</a> Cancer Cell Int. 24 (1), 190(2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>100mm 접시</td><td>TPP</td><td>93100</td><td></td></tr><tr><td>100배 페니실린-스트렙토마이신 (PS)</td><td>나칼라이</td><td>26253-84</td><td></td></tr><tr><td>15ml 튜브</td><td>패스트진</td><td>FG2001</td><td></td></tr><tr><td>24웰 세포 배양 플레이트</td><td>TPP</td><td>92024</td><td></td></tr><tr><td>48웰 세포 배양 플레이트</td><td>TPP</td><td>92448</td><td></td></tr><tr><td>50ml 튜브</td><td>패스트진</td><td>FG2004</td><td></td></tr><tr><td>60mm 접시</td><td>TPP</td><td>93060</td><td></td></tr><tr><td>6웰 세포 배양 플레이트</td><td>TPP</td><td>92006</td><td></td></tr><tr><td>A83-01</td><td>케이맨</td><td>9001799</td><td></td></tr><tr><td>고급 DMEM/F12&nbsp;</td><td>깁코</td><td>12634010</td><td>오가노이드 기저 배지 = 고급 DMEM/F12 + 글루타MAX + 1배 PS</td></tr><tr><td>Alexa488 항마우스 IgG</td><td>인비트로젠</td><td>A11029</td><td></td></tr><tr><td>암포테리신 B</td><td>서모피셔</td><td>15290018</td><td></td></tr><tr><td>항비멘틴 항체 (V9)</td><td>산타크루즈</td><td>SC-6260</td><td>사용 시 1/500 희석</td></tr><tr><td>B-27</td><td>서모피셔</td><td>17504044</td><td></td></tr><tr><td>병뚜껑 필터</td><td>사르토리우스</td><td>180F15</td><td></td></tr><tr><td>셀 스트레이너, 100 및 마이크로; m 모공</td><td>BD 팔콘</td><td>352360</td><td></td></tr><tr><td>콜라게나아제, 제1형</td><td>시그마</td><td>C0130</td><td></td></tr><tr><td>콜라겐 코팅 60mm 디셰</td><td>이와키</td><td>4010-010</td><td></td></tr><tr><td>디메틸 설폭사이드 (DMSO)</td><td>와코</td><td>043-07216</td><td></td></tr><tr><td>디스파스 I</td><td>고도 슈세이</td><td>386-02271</td><td></td></tr><tr><td>둘벡코의 변형 독수리 미디엄(DMEM)</td><td>나칼라이</td><td>08459-64</td><td></td></tr><tr><td>이클립스 Ti2</td><td>니콘</td><td></td><td></td></tr><tr><td>태아 소 혈청 (FBS)</td><td>세라나</td><td>S-FBS-CO-015</td><td></td></tr><tr><td>섬유아세포 성장 배양체 2</td><td>프로모션셀</td><td>C-23020</td><td>섬유아세포 배양지-1 = 섬유아세포 성장 배양체 2</td></tr><tr><td>G418</td><td>인비보젠</td><td>앤트-GN-1</td><td></td></tr><tr><td>글루타맥스&nbsp;</td><td>깁코</td><td>35050061</td><td></td></tr><tr><td>HFDM-1</td><td>KSK</td><td>87-160</td><td>섬유아세포 매체-2 = HFDM-1 + 1% FBS + 1 × PS</td></tr><tr><td>Hoechst33342&nbsp;</td><td>나칼라이</td><td>04929-82</td><td></td></tr><tr><td>하이그로마이신</td><td>인비보젠</td><td>앤트-HG-1</td><td></td></tr><tr><td>IncuCyte 시스템</td><td>에센 바이오사이언스</td><td></td><td></td></tr><tr><td>L-WRN 세포</td><td>ATCC</td><td>CRL-3276</td><td></td></tr><tr><td>마트리젤</td><td>코닝</td><td>354234</td><td>저저막 매트릭스 = 마트리젤</td></tr><tr><td>N2</td><td>서모피셔</td><td>17502048</td><td></td></tr><tr><td>N-아세틸-L-시스테인</td><td>와코</td><td>017-05131</td><td></td></tr><tr><td>니코티나마이드</td><td>TCI</td><td>N0078</td><td></td></tr><tr><td>인산염 완충 식염수(PBS)</td><td>나칼라이</td><td>14249-24</td><td></td></tr><tr><td>프리모신</td><td>인비보젠</td><td>ANT-PM-05</td><td></td></tr><tr><td>재조합 인간 EGF</td><td>PEPROTECH</td><td>AF-100-15</td><td></td></tr><tr><td>재조합 인간 FGF-10</td><td>PEPROTECH</td><td>PEP-100-26</td><td></td></tr><tr><td>SB202190</td><td>셀렉</td><td>S1077</td><td></td></tr><tr><td>메스, 11호</td><td>깃털</td><td>8-3086-02</td><td></td></tr><tr><td>스템풀</td><td>스미토모 베이클라이트</td><td>MS-90150</td><td>저부착 15 mL 튜브 = STEMFULL</td></tr><tr><td>트립LE 익스프레스</td><td>깁코</td><td>12605028</td><td>오르가노이드 포 트립신 = TrypLE Express</td></tr><tr><td>트립신</td><td>나칼라이</td><td>35556-44</td><td></td></tr><tr><td>Y-27632</td><td>셀렉</td><td>S1049</td><td></td></tr></tbody></table>

동일한 식도암 환자로부터 종양 오가노이드, 암 관련 섬유아세포 및 대응 섬유아세포의 형성

Establishment of Tumor Organoids, Carcinoma-Associated Fibroblasts, and Counterpart Fibroblasts from the Same Esophageal Cancer Patient

In esophageal squamous cell carcinoma (ESCC), the acquisition of treatment resistance and tumor recurrence remain major clinical challenges. ...

establishment-tumor-organoids-carcinoma-associated-fibroblasts

Research

연구

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Cancer Research

암 연구

이 프로토콜은 단일 세포 소화가 있거나없는 식도 선암종 오가노이드의 계대 배양 및 냉동 보존 방법을 설명하여 연구자가 실험 설계에 따라 적절한 전략을 선택할 수 있도록합니다.

식도 선암종 오가노이드의 하위 배양 및 동결 보존 : 단일 세포 소화를위한 장단점

이 프로토콜은 화학적 발암을 통해 유도된 정상, 전종양 및 편평 세포 암종 병변을 나타내는 쥐 구강-식도 3D 오가노이드를 생성하고 특성화하는 주요 단계를 설명합니다.

3D 오가노이드에서 구강-식도 편평 세포 암종 모델링

오가노이드-섬유아세포 공동배양은 생체 내 줄기세포 틈새를 연구하기 위한 모델을 제공한다. 여기서, 식도 오가노이드-섬유아세포 공동배양을 위한 프로토콜이 기재되어 있다. 또한 전체 마운트 이미징을 사용하여 섬유아세포-오가노이드 상호작용을 시각화합니다.

Functional Characterization and Visualization of Espacageal Fibroblasts using organoid co-cultures (오가노이드 공동 배양을 이용한 식도 섬유아세포의 기능적 특성 분석 및 시각화)

종양 오가노이드는 암 연구와 개인 맞춤형 의학에 대한 접근 방식에 혁명을 일으켰습니다. 이는 임상적으로 관련성이 높은 종양 모델을 나타내며 이를 통해 연구자들은 임상에서 종양보다 한 발 앞서 나갈 수 있습니다. 이 프로토콜은 신선한 췌장 종양 조직 샘플과 췌장 선암 기원의 환자 유래 이종이식에서 종양 오가노이드를 확립합니다.

췌장암 유래 종양 오가노이드 및 섬유아세포를 신선한 조직에서 확립

본 프로토콜은 종양 진행의 여러 단계를 나타내는 식도 오가노이드 모델의 확립 및 조직학적 분석을 설명합니다. 이 방법을 통해 연구자들은 정상 조직에서 암 조직으로 전환하는 동안 세포 형태, 공간 조직 및 분자 마커 발현 패턴의 변화를 연구할 수 있습니다.

정상 조직에서 암 조직으로의 진행을 모델링하는 식도 오가노이드의 확립 및 조직학적 분석

있도록 매우 민감한 탐지 목표 인간의 대 장 암 (CRC) 세포 조직 정착, 우리 여기 PDX 파생 CRC organoid 셀에 녹색 형광 단백질 (GFP) lentiviral 입자의 효율적인 변환에 대 한 프로토콜을 표시 스테레오-형광 현미경 관찰 받는 쥐로 그들의 주입에의...

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환자 BMPC 견본및 뼈 전이성 전립선암의 이종이식의 3차원 배양은 낭종, 스페로이드 및 복잡한, 종양 같이 organoids의 결과로 그들의 본래 종양의 기능적인 이질성을 유지합니다. 이 원고는 IFC를 사용하여 이기종 환자 유래 샘플 및 이들의 분석의 3D 배양에 대한 최적화 전략 및 프로토콜을 제공한다.

환자 전립선암 뼈 전이 표본 및 이종이식에서 파생된 3차원(3D) 오르가노이드의 설립 및 분석

암세포와 섬유아세포를 공동 주입하고 시간 경과에 따른 종양 성장을 모니터링하는 프로토콜이 제공됩니다. 이 프로토콜은 종양 성장의 조절자로서 섬유아세포의 역할에 대한 분자적 기초를 이해하는 데 사용할 수 있습니다.

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이 논문은 삼중 음성 유방암의 합성 뮤린 모델과 종양 미세 환경을 대상으로 설계된 새로운 나노 입자의 전임상 연구를위한 응용 프로그램에서 1 차 암 관련 섬유 아세포의 격리 및 배양에 대한 프로토콜을 제공하는 것을 목표로합니다.

표적 나노 입자의 연구를 위한 유방암의 합성 Murine 모형에서 1 차적인 암 관련섬유세포의 격리

매우 정확한 체외 고처리량 분석 시스템은 암 조직과 유사하지만 96웰 및 384웰 플레이트를 가진 체외 고처리량 분석 시스템에 적합하지 않은 환자 유래 종양 오르가노이드(PdOs)를 사용하여 항암제를 평가하기 위해 개발되었다.

환자 유래 종양 오르가노이드를 사용하여 시험관 분석에서 높은 처리량

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동일한 식도암 환자로부터 종양 오가노이드, 암 관련 섬유아세포 및 대응 섬유아세포의 형성

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