수정된 염화철 유도 상시상동 혈전증 형성

우리 분야에서는 상시상동 혈전증에 대한 여러 모델링 방법이 사용됩니다. 그러나 염화철 유도법은 단순하고 비용이 저렴해 널리 사용되고 있습니다. 우리는 피질 손상을 줄이고 부비동 혈전을 시각화함으로써 염화철에 의한 상시상동 혈전증 모델을 정교화하는 것을 목표로 합니다.

먼저, 마취된 쥐의 양쪽 눈에 안과 연고를 바르고 두피 털을 조심스럽게 면도하세요. 그 후 의료용 테이프를 사용해 쥐를 설치류 수술 플랫폼에 엎드린 자세로 고정시킵니다. 온찜질팩을 사용해 체온을 약 37도 정도로 유지하세요.

면도한 두피를 5% 포비돈-요오딘으로 철저히 소독하고, 75% 알코올을 투여한 후 각각 세 번 반복합니다. 발가락 꼬집는 반사로 마취 깊이를 확인한 후, 두피에 15밀리미터 중앙 피부 절개를 하세요. 둔기 해리를 사용해 근막과 골막을 분리하여 두개골을 완전히 노출시킵니다.

두개골을 두개골 드릴로 얇게 하여 상시상동이 명확히 노출될 때까지 합니다. 람다에서 시작해 시상봉합선을 따라 10밀리미터 앞으로 확장됩니다. 기저 경막과 상시상동에 손상을 주지 않도록 간헐적 드릴링 기법을 사용하고, 피질에 대한 열 손상을 방지하기 위해 드릴 비트를 반복적으로 생리식염수로 세척하세요. 기초 상태를 영상으로 촬영한 후, 노출된 상시상동 표면에 40% 염화철 용액에 적신 2-0 실크 봉합사 10밀리미터 구간을 5분간 감싸세요.

봉합선을 새로 적신 세그먼트로 교체하고 5분 더 붙입니다. 그 후 수술 부위를 0.5밀리리터 생리식염수로 세 번 헹구어 잔류 염화철을 제거합니다. 4-0 실크 봉합사로 중단 봉합을 하여 피부를 봉합하고, 포비돈-요오딘으로 부위를 소독합니다.

쥐가 완전히 깨어날 때까지 관찰한 후 다시 우리로 돌려보내세요. 레이저 스펙클 대비 영상 시스템과 해당 소프트웨어인 RF LSI 버전 5를 켜세요. 온라인 모드 버튼을 눌러 라이브 이미징을 활성화하세요.

인디케이터 레이저가 시야 내 중앙에 맞출 때까지 기기의 높이와 위치를 조절합니다. 쥐를 폼 플랫폼 위에 올려놓고, 상시상동이 인디케이터 레이저와 일치할 때까지 위치를 조정하세요. 이미지가 선명하게 표시될 때까지 배율과 초점을 조절하세요.

의사 색상 임계값의 하한과 상한을 설정하여 의사 색상 이미지의 시각적 외관을 최적화합니다. 상시상동(upper sagittal sinus) 위에 원형 ROI를 설정하고, 정맥 흐름을 기록하며, 원본과 의사 컬러 이미지를 저장하세요. 이소플루란, 초음파 젤, 일회용 면도날, 의료 테이프를 준비하고 필요한 모든 기기를 점검하세요.

3차원 획득 모터를 영상 시스템에 설치하세요. 그 다음 UHF 57X 트랜스듀서를 설치하고 모터를 초기화하세요. 마취 후 쥐를 37도 섭씨로 설정한 온도 정전기 판 위에 엎드린 자세로 눕히고, 의료용 테이프로 머리와 팔다리를 부드럽게 고정합니다.

노출된 두피 위에 초음파 젤을 고르게 바르세요. 쥐의 위치와 방향을 변환기에 대해 조정하여 상시상동과 하강내 혈전이 명확히 관찰될 때까지 조정합니다. 3차원 영상 B 모드(스텝 사이즈 0.04mm)를 사용해 시상면의 상시상동 단층촬영 영상을 획득한 후, 같은 설정으로 관상면에서 단층촬영 영상을 촬영합니다.

상시상동에서 혈류를 관찰하기 위해 컬러 도플러 모드를 사용하고, 펄스파 도플러 모드를 적용해 혈류 속도를 측정합니다. 마취를 중단하고 쥐가 완전히 깨어날 때까지 관찰하세요. 그 다음, 쥐를 다시 우리에 넣으세요.

마지막으로 획득한 이미지를 내보내고 Vevo LAB 소프트웨어로 분석합니다. 상시상동 내 최대 시상면 및 관상단면적, 혈전 부피, 그리고 부비동의 최대 혈류 속도를 기록하세요. 국소 염화철 도포 후 레이저 스펙클 조영 영상 검사에서 상시상동의 국소 혈류가 기저선에 비해 유의미하게 감소한 것으로 확인되었습니다.

수술 후 7일째에 소동물 초음파로 상시상동에서 혈전 형성과 부분 하강 재관화가 확인되었습니다. 펄스파 도플러 초음파는 상시상동의 잔여 내강 내에서 측정 가능한 혈류 속도를 보여주었습니다. 3차원 초음파 영상을 통해 두께 0.04mm의 직렬 이미지 단편을 사용하여 상시상동 혈전의 체적 측정이 가능했습니다.

우리의 정교한 모델은 덜 침습적이며 초음파 영상과 더 잘 호환되어, 보다 신뢰할 수 있고 직접적인 치료 개발 및 평가를 가능하게 합니다. 수술 중 레이저 스펙클 대비 영상이 모델의 성공을 확인하고, 수술 후 고해상도 초음파가 혈전 형성, 용해, 내강 재개설을 동적으로 모니터링하도록 해야 합니다.