Name: 인간 경추 오가노이드의 생성 및 유전적 조작 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-03-10T13:20:00.000+00:00
Duration: 10 min 29 s
Description: 배우세요 인간 경추 오가노이드 생성 및 유전적 조작 방법을. Dispase와 트립신 소화법으로 상피세포를 분리하고, nucleofection으로 siRNA 유전자 침묵화를 수행하여 자궁경부 줄기세포 생물학과 질병 메커니즘을 연구할 수 있습니다.

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<ol><li>Singh, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+estimates+of+incidence+and+mortality+of+cervical+cancer+in+2020%3Aa+baseline+analysis+of+the+WHO+Global+Cervical+Cancer+Elimination+Initiative%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Glob+Health%22%5BJournal%5D)">Global estimates of incidence and mortality of cervical cancer in 2020:a baseline analysis of the WHO Global Cervical Cancer Elimination Initiative.</a> Lancet Glob Health. 11 (2), e197-e206 (2023).</li>
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<li>Myeong, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microbial+metabolites+control+self-renewal+and+precancerous+progression+of+human+cervical+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Microbial metabolites control self-renewal and precancerous progression of human cervical stem cells.</a> Nat Commun. 16 (1), 2327(2025).</li>
<li>Rock, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Basal+cells+as+stem+cells+of+the+mouse+trachea+and+human+airway+epithelium%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Basal cells as stem cells of the mouse trachea and human airway epithelium.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 106 (31), 12771-12775 (2009).</li>
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<li>Ko, K. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Key+genetic+determinants+driving+esophageal+squamous+cell+carcinoma+initiation+and+immune+evasion%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">Key genetic determinants driving esophageal squamous cell carcinoma initiation and immune evasion.</a> Gastroenterol. 165 (3), 613-628 (2023).</li>
<li>Choi, Y. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((YAP1+regulates+esophageal+stem+cells%27+self-renewal+and+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Res+Commun%22%5BJournal%5D)">YAP1 regulates esophageal stem cells' self-renewal and differentiation.</a> Biochem Biophys Res Commun. 726, 150280(2024).</li>
<li>Oh, B., Kim, J., Kim, N., Jeong, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+cancer+organoid+system+to+evaluate+the+cytotoxicity+of+natural+killer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Lung cancer organoid system to evaluate the cytotoxicity of natural killer cells.</a> Int J Stem Cells. 18 (1), 99-106 (2025).</li>
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<li>Jeong, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+KEAP1%2FNFE2L2+mutations+in+the+chemotherapeutic+response+of+patients+with+non-small+cell+lung+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Role of KEAP1/NFE2L2 mutations in the chemotherapeutic response of patients with non-small cell lung cancer.</a> Clin Cancer Res. 26 (1), 274-281 (2020).</li>
<li>Zhang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetically+defined%2C+syngeneic+organoid+platform+for+developing+combination+therapies+for+ovarian+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discov%22%5BJournal%5D)">Genetically defined, syngeneic organoid platform for developing combination therapies for ovarian cancer.</a> Cancer Discov. 11 (2), 362-383 (2021).</li>
<li>Lohmussaar, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+organoids+model+cervical+tissue+dynamics+and+viral+oncogenesis+in+cervical+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Patient-derived organoids model cervical tissue dynamics and viral oncogenesis in cervical cancer.</a> Cell Stem Cell. 28 (8), 1380-1396 (2021).</li>
<li>Chumduri, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Opposing+Wnt+signals+regulate+cervical+squamocolumnar+homeostasis+and+emergence+of+metaplasia%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Opposing Wnt signals regulate cervical squamocolumnar homeostasis and emergence of metaplasia.</a> Nat Cell Biol. 23 (2), 184-197 (2021).</li>
<li>He, X. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PTEN-deficient+intestinal+stem+cells+initiate+intestinal+polyposis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Genet%22%5BJournal%5D)">PTEN-deficient intestinal stem cells initiate intestinal polyposis.</a> Nat Genet. 39 (2), 189-198 (2007).</li>
<li>Wang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pten+deletion+leads+to+the+expansion+of+a+prostatic+stem%2Fprogenitor+cell+subpopulation+and+tumor+initiation%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Pten deletion leads to the expansion of a prostatic stem/progenitor cell subpopulation and tumor initiation.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 103 (5), 1480-1485 (2006).</li>
<li>Yanagi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pten+controls+lung+morphogenesis%2C+bronchioalveolar+stem+cells%2C+and+onset+of+lung+adenocarcinomas+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Pten controls lung morphogenesis, bronchioalveolar stem cells, and onset of lung adenocarcinomas in mice.</a> J Clin Invest. 117 (10), 2929-2940 (2007).</li>
<li>Jeong, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+KEAP1%2FNRF2+and+TP53+mutations+in+lung+squamous+cell+carcinoma+development+and+radiation+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discov%22%5BJournal%5D)">Role of KEAP1/NRF2 and TP53 mutations in lung squamous cell carcinoma development and radiation resistance.</a> Cancer Discov. 7 (1), 86-101 (2017).</li>
<li>Liu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+dissection+of+cellular+and+molecular+features+underlying+human+cervical+squamous+cell+carcinoma+initiation+and+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Adv%22%5BJournal%5D)">Single-cell dissection of cellular and molecular features underlying human cervical squamous cell carcinoma initiation and progression.</a> Sci Adv. 9 (4), eadd8977(2023).</li>
<li>Koster, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modelling+Chlamydia+and+HPV+co-infection+in+patient-derived+ectocervix+organoids+reveals+distinct+cellular+reprogramming%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Modelling Chlamydia and HPV co-infection in patient-derived ectocervix organoids reveals distinct cellular reprogramming.</a> Nat Commun. 13 (1), 1030(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>P4 일차 세포 4D-뉴클레오펙터 X 키트</td><td>론자</td><td>V4XP-4032</td><td></td></tr><tr><td>96웰 초저 부착판</td><td>SPL</td><td>39796</td><td></td></tr><tr><td>셀 스트레너 40 및 마이크로; m</td><td>SPL</td><td>93040</td><td></td></tr><tr><td>50mL 원뿔형 튜브 500/박스</td><td>언어치료사(SLP)</td><td>SPL50050</td><td></td></tr><tr><td>15ml 원뿔관</td><td>사르스테트</td><td>62.554.502</td><td></td></tr><tr><td>크라이오퓨어 튜브 1.8 mL - 흰색</td><td>사르스테트</td><td>72.379P</td><td></td></tr><tr><td>37 & deg; C, 5% CO2 및 nbsp; 인큐베이터</td><td>에펜도르프</td><td>9734IQ905476</td><td></td></tr><tr><td>세포 배양 삽입물</td><td>SPL</td><td>37024</td><td></td></tr><tr><td>아마사 4D 핵 핵 검사</td><td>론자</td><td>AAF-1003X</td><td></td></tr><tr><td>블로킹 버퍼(DPBS에서 BCS 2%)</td><td>깁코 / 웰진</td><td>BCS: 26010074; DPBS: LB001-02</td><td></td></tr><tr><td>디스페이즈 II 분말</td><td>깁코</td><td>17105041</td><td></td></tr><tr><td>DNAse I</td><td>효소학</td><td>M059L</td><td></td></tr><tr><td>마트리젤</td><td>코닝</td><td>356231</td><td></td></tr><tr><td>적혈구 용해 완충제</td><td>바이오세상</td><td>R2015</td><td></td></tr><tr><td>트립LE 익스프레스</td><td>깁코</td><td>12605</td><td></td></tr><tr><td>워시 버퍼 (HBSS)</td><td>JBI</td><td>BL003-1</td><td></td></tr><tr><td>고급 DMEM/F12</td><td>깁코</td><td>12634028</td><td></td></tr><tr><td>글루타맥스 보충제</td><td>깁코</td><td>35050-061</td><td></td></tr><tr><td>페니실린&대시; 스트렙토마이신</td><td>바이오웨스트</td><td>L0022-100</td><td></td></tr><tr><td>젠장</td><td>깁코</td><td>15630-080</td><td></td></tr><tr><td>B27 보충제</td><td>깁코</td><td>17504044</td><td></td></tr><tr><td>노긴</td><td>페프로텍</td><td>118214</td><td></td></tr><tr><td>N-아세틸-l-시스테인</td><td>시그마</td><td>A9165</td><td></td></tr><tr><td>Y-27632</td><td>스템셀 테크놀로지</td><td>72307</td><td></td></tr><tr><td>FGF2</td><td>페프로텍</td><td>100-18B-50UG</td><td></td></tr><tr><td>FGF7</td><td>페프로텍</td><td>AF-100-19-250UG</td><td></td></tr><tr><td>A83-01</td><td>셀렉켐</td><td>S7692&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>포스콜린</td><td>시그마</td><td>F6886</td><td></td></tr><tr><td>신경굴린 1</td><td>페프로텍</td><td>100-03-50UG</td><td></td></tr><tr><td>NGF</td><td>페프로텍</td><td>AF-450-01-100UG</td><td></td></tr><tr><td>R-스폰딘</td><td>중국생물학</td><td>11083-HNAS</td><td></td></tr><tr><td>HGF</td><td>페프로텍</td><td>100-39H-250ug</td><td></td></tr><tr><td>FGF10</td><td>페프로텍</td><td>100-26</td><td></td></tr><tr><td>페트리디시 35 mm&nbsp;</td><td>SPL</td><td>10035</td><td></td></tr><tr><td>오가노이드 배지 레시피</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td><스트롱>이름</스트롱></td><td>Company</td><td><스트롱>카탈로그 번호</스트롱></td><td><강>집중</강></td></tr><tr><td>고급 DMEM/F12</td><td>깁코</td><td>12634028</td><td></td></tr><tr><td>글루타맥스 보충제</td><td>깁코</td><td>35050-061</td><td>1회</td></tr><tr><td>페니실린&대시; 스트렙토마이신</td><td>바이오웨스트</td><td>L0022-100</td><td>1회</td></tr><tr><td>젠장</td><td>깁코</td><td>15630-080</td><td>10 mM</td></tr><tr><td>B27 보충제</td><td>깁코</td><td>17504044</td><td>비타민 A 없는 <브루/> 1회</td></tr><tr><td>노긴</td><td>페프로텍</td><td>118214</td><td>100 ng/ml</td></tr><tr><td>N-아세틸-l-시스테인</td><td>시그마</td><td>A9165</td><td>1 mM</td></tr><tr><td>Y-27632</td><td>스템셀 테크놀로지</td><td>72307</td><td>10 uM</td></tr><tr><td>FGF2</td><td>페프로텍</td><td>100-18B-50UG</td><td>50 ng/ml</td></tr><tr><td>FGF7</td><td>페프로텍</td><td>AF-100-19-250UG</td><td>25 ng/ml</td></tr><tr><td>FGF10</td><td>페프로텍</td><td>100-26</td><td>100 ng/ml</td></tr><tr><td>A83-01</td><td>셀렉켐</td><td>S7692&nbsp;</td><td>500 nM</td></tr><tr><td>포스콜린</td><td>시그마</td><td>F6886</td><td>10 & 뮤; M</td></tr><tr><td>신경굴린 1</td><td>페프로텍</td><td>100-03-50UG</td><td>50 ng/ml</td></tr><tr><td>NGF</td><td>페프로텍</td><td>AF-450-01-100UG</td><td>20 ng/ml</td></tr><tr><td>R-스폰딘</td><td>중국생물학</td><td>11083-HNAS</td><td>100 ng/ml</td></tr><tr><td>HGF</td><td>페프로텍</td><td>100-39H-250ug</td><td>25 ng/ml</td></tr></tbody></table>

인간 경추 오가노이드의 생성 및 유전적 조작

Generation and Genetic Manipulation of Human Cervical Organoids

Cervical cancer is the fourth most common cancer in women and most frequently affects the uterine ectocervix. The uterine ectocervix is lined by ...

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Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

신경 상피 조직의 전례 없는 복잡성으로 인해 인간의 뇌 발달을 모델링하는 데 방해를 받았습니다. 여기에서는 인간 뇌 발달의 초기 사건을 묘사하고 체외에서 소두증을 모델링하기 위해 뇌 오가노이드의 강력한 생성 방법을 설명합니다.

IPSC 파생 된 인간의 두뇌 Organoids의 세대는 초기 신경 발달 장애를 모델링하기

대뇌 organoids 초기 인간의 두뇌 개발에서 체 외에서조사 하는 새로운 모델 시스템을 나타냅니다. 이 문서는 효율적으로 중요 한 특성 및 유효성 검사 단계를 포함 하 여 인간 유도 만능 줄기 세포에서 균질 등 개 형 organoids를 생성 하는 상세한 방법론을 제공 합니다.

인간에서 표준화 되 고 재현 가능한 개 타입 대뇌 Organoids의 생성 유도 만능 줄기 세포

상피 및 기질 세포로 구성되는 인간 1 차 자궁내막 오르가노이드를 생성하고 네이티브 자궁내막 조직의 특성을 유지하는 프로토콜이 제시된다. 이 프로토콜은 자궁 조직 획득에서 자궁 내막 오르가노이드의 조직학적 처리에 이르는 방법을 설명합니다.

다세포 인간 1 차 자궁 내막 오르가노이드의 생성

이 프로토콜은 인간 만능 세포를 장내 오가노이드로 분화할 수 있습니다. 이 프로토콜은 세포를 최종 내배엽, 후장 내배엽 및 장 상피의 집단으로 분화하여 정상적인 인간 발달을 모방합니다. 따라서 이 프로토콜은 장 발달과 질병 모델링 응용 분야를 모두 연구하는 데 적합합니다.

발달 및 질병 모델링 응용 분야를 위한 hiPSC 유래 장 오가노이드 생성

당사는 2D 및 3D 인간 유도 다능성 줄기세포(hIPSC)의 생성 및 특성화에 대한 상세한 프로토콜뿐만 아니라 1차 실슘(PC) 생체 발생 및 기능의 질적 및 정량적 분석을 가능하게 하는 보완적 방법론을 제시합니다.

2D 및 3D 인간 유도 만능 줄기 세포 기반 모델은 신코르티컬 개발 중 1 차용성 개입을 해부합니다.

여기에서는 인간 만능 줄기 세포 유래 소장 및 결장 오가노이드를 생성, 유지 및 특성화하는 자세한 방법에 대해 설명합니다. 이러한 방법은 재현성을 개선하고, 확장성을 확장하며, 오가노이드의 도금 및 패시징에 필요한 작업 시간을 단축하도록 설계되었습니다.

인간 만능 줄기 세포 유래 장 및 결장 오가노이드의 생성, 유지 및 특성화

대뇌 오가노이드는 장기 발달 및 인간 질병 병리학을 연구하기위한 전례없는 기회를 제공합니다. 대뇌 오가노이드 배양 시스템으로 큰 성공을 거두었지만이 기술을 적용하는 데는 여전히 운영상의 어려움이 있습니다. 본 프로토콜은 중간 변화 및 오가노이드 전달을 용이하게 하는 대뇌 오가노이드 절차를 기술한다.

측면 소프트 라이트 조명을 통한 대뇌 오가노이드 문화 촉진

영장류 대뇌 오가노이드의 전기천공법은 영장류(병리)생리학적 신피질 발달에 가까운 모델 시스템에서 다양한 전구체 유형과 뉴런에 일시적인 유전자 변형을 도입하는 정확하고 효율적인 접근 방식을 제공합니다. 이를 통해 신경 발달 및 진화 과정을 연구 할 수 있으며 질병 모델링에도 적용 할 수 있습니다.

유전자 변형을 위한 영장류 대뇌 오가노이드의 표적 미세주입 및 전기천공

여기서는 쥐의 장 오가노이드를 생성하고 여러 다운스트림 응용 분야에서 사용하는 프로토콜을 제시합니다. 쥐는 종종 선호되는 전임상 모델이며, 강력한 장 오가노이드 시스템은 in vivo 연구에 수반되는 in vitro 시스템의 필요성을 충족시킵니다.

쥐 장 오가노이드의 생성과 조작

이 프로토콜은 인간 만능 줄기세포를 사용하여 혈관 오가노이드를 생성하는 방법을 제시합니다.

인간 유도 만능 줄기 세포(Human-Induced Pluripotent Stem Cells)에서 혈관 오가노이드 생성

배우세요 인간 경추 오가노이드 생성 및 유전적 조작 방법을. Dispase와 트립신 소화법으로 상피세포를 분리하고, nucleofection으로 siRNA 유전자 침묵화를 수행하여 자궁경부 줄기세포 생물학과 질병 메커니즘을 연구할 수 있습니다.

인간 경추 오가노이드의 생성 및 유전적 조작

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