2026년 3월 13일
여기서는 제브라피시 사육 재순환을 위한 새롭고 건설이 쉬우며 저비용의 프로토콜을 소개합니다.
예산을 절약하는 연구실과 교육 프로그램을 위해 저렴한 순환식 제브라피시 사육 시스템을 설계하고 시험했습니다. 기존의 많은 제브라피시 사육 시스템은 소규모 연구실에는 비용이 너무 부담스러워서, 우리는 저렴한 사육 시스템을 설계했습니다. 우선, 지지 브래킷을 필요한 높이에 고정하여 하우징 레일을 조립한 후 수직 리턴 파이프를 설치하세요.
톱을 사용해 직경 3.81센티미터의 폴리염화비닐 파이프를 세 조각으로 나누었고, 각각은 길이가 약 121.92센티미터였습니다. 그 다음 121.92cm 파이프 구간마다 두 번씩 세로로 절단하여 U자형 트로프를 만듭니다. 각 U자형 트로프를 선반 위에 올려놓고, 한쪽 끝은 주 수직 리턴의 T자 조인트에 삽입합니다.
미리 삽입한 줄이나 철사를 사용해 각 트로프의 반대쪽 끝을 고정하여 수직 리턴의 T자 조인트 쪽으로 부드럽게 내려가는 경사를 만듭니다. 트로프를 조절하여 주 수직 리턴 쪽으로 1.5도에서 2도 경사를 만듭니다. 조립된 선반 아래에 배수 분조를 위치시킵니다.
대면 상단과 첫 번째 선반 하단 사이에 약 14.29센티미터의 간격을 확보하세요. 대야를 선반에서 약간 돌출되어 돌출된 수직 회수관과 일치하도록 조정하여 물이 다시 대야로 돌아오도록 하세요. 섬프 여과 및 온도 제어 시스템을 설치한 후, 물 펌프를 탱크 리턴 시스템의 지지 브래킷과 정렬하여 섬프 분지 안에 위치시킵니다.
1.905cm 길이의 비닐 튜브를 69.85cm 길이로 잘라내고, 튜브를 펌프에 연결하세요. T자 커플러를 튜빙에 연결하세요. 이 T자 커플러를 두 번째 선반 바로 아래에 위치시키고, 배수 분지의 반대편을 향하게 하세요.
박스 커터를 사용해 1.905cm 길이의 비닐 튜브를 36.195cm 길이로 자르고, 이전 단계에서 T 커플러의 반대편에 직접 고정합니다. 36.195cm와 36.83cm 비닐 튜브를 T 커플러에 순차적으로 연결하고, 각 구간 뒤에 새로운 T 커플러를 추가하고, 배수 분지 반대편을 향한 두 번째 선반 약간 아래에 위치시킵니다. 그 다음, 1.905에서 1.27cm 감삭 엘보우를 1.27cm 수컷 어댑터와 함께 튜빙에 연결하세요.
감소 엘보우와 수컷 어댑터는 네 번째 선반 상단에 놓으세요. 엘보우와 어댑터를 비닐 압력 해제 라인에 연결하도록 방향을 맞추세요. 이 라인은 다시 섬프로 내려가세요. 1.58cm 길이의 비닐 튜브를 7.62cm 길이로 자릅니다.
튜빙을 선반 상단의 1.27cm 수컷 어댑터에 연결하고, 튜브의 자유 끝에 볼 밸브를 연결하세요. 다음으로 박스 커터를 사용해 1.58cm 길이의 비닐 튜브를 213.36cm 길이로 절단했습니다. 튜빙을 볼 밸브의 자유 피팅에 연결하세요.
튜빙을 랙 상단을 가로질러 연결한 후 하우징 랙 다리를 따라 아래로 전달하여 섬프 분지로 연결하세요. 고정 스트랩을 사용해 하우징 레일 다리에 튜브를 고정하세요. 그 후 박스 커터를 사용해 1.575cm 길이의 비닐 튜브를 세 조각으로 나누고, 각각 길이는 6.35센티미터입니다.
각 부품을 주 급수관의 세 개의 자유 T-커플러 중 하나에 연결하고, 각 튜빙 구간의 자유 끝에 볼 조인트를 연결하세요. 다음으로, 볼 조인트의 자유 끝에 길이 6.35센티미터의 비닐 튜브 세 개를 부착하고, 각 1.58센티미터 튜빙 구간에 1.58센티미터에서 0.95센티미터 리듀서(리듀서)를 연결합니다. 0.95cm 길이의 튜빙을 세 조각으로 나누고, 각각 길이는 5.715센티미터입니다.
각 부품을 리듀서에 연결하고, 각 튜빙 구간에 0.95cm 나일론 T-커플러를 부착하세요. 길이 5.08센티미터인 0.9525센티미터 비닐 튜브 6개를 구해 각 조각을 나일론 T-커플러에 연결하세요. 여섯 개의 튜브 조각마다 호스 클램프를 연결하세요.
사용 가능한 각 튜빙 끝에 강철 수족관 밸브를 끼우고 호스 클램프를 단단히 고정하세요. 고정 스트랩을 사용해 각 강철 수족관 밸브를 위 선반에 고정하세요. 마지막으로 박스 커터를 사용해 각 탱크에 도달할 수 있도록 0.43센티미터 길이의 비닐 튜브를 절단했습니다.
프로토콜에 따라 3층 순환식 제브라피시 사육 시스템이 구축되었습니다. 주간 측정을 기준으로 집수 전도도는 연중 비교적 안정적으로 유지되었습니다. 21일간의 평가 기간 동안 전도도는 변동이 있었으나, 제브라피시에게는 안전한 600에서 1,000 마이크로지멘스 /센티미터 내에 머물렀습니다.
아질산염은 21일 동안 매일 낮은 등급에 머물렀습니다. 질산염은 21일 중 18일간 저등급에 머물렀고, 3일간 중간 등급에 머물러 제브라피시의 안전 범위 내에 머물렀습니다. 같은 3주 동안 총 18개의 교미 배를 통해 번식 성공률이 확인되었습니다.
총 18쌍의 교미 중 11쌍이 성공하여 약 70%의 교미 성공률에 해당합니다. 24시간 배아 생존율은 거의 70%에 달했으며, 성공적인 교미의 평균 산란 크기는 약 150개의 배아였습니다. 이 프로토콜은 연구자들이 연구 또는 교육 목적으로 사용할 수 있는 제브라피시 사육 시스템을 구축할 수 있게 합니다.
적절한 튜빙 연결, 리턴 라인의 경사, 그리고 안전한 피팅은 일정한 물 순환을 유지하고 누수를 방지하는 데 필수적입니다. 향후 연구에서는 더 큰 제브라피시 군락과 자동 수질 모니터링을 위해 시스템을 수정할 수 있습니다.
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본 논문은 저렴하고 견고하며 제작이 용이하도록 설계된 맞춤형 제브라피시 순환식 사육 랙을 소개합니다. 이 시스템은 수질 조건의 불일치나 수조의 취약성과 같이 기존의 다른 맞춤형 솔루션에서 흔히 발생하는 문제점들을 해결하여, 제브라피시를 이용한 장기 연구 및 교육용 응용 분야에 적합하게 제작되었습니다.
신뢰할 수 있고 확장 가능한 제브라피시 사육 시설은 초기 단계의 신약 개발에서 in vivo 모델의 연속성과 실험 재현성을 확보하는 데 매우 중요합니다. 본 맞춤형 재순환 시스템은 비용 및 운영상의 장벽을 해결하여, 자원이 제한된 R&D 환경에서도 장기적인 다세대 연구를 가능하게 합니다. 안정적인 수생 모델 인프라는 신약 개발 파이프라인 전반에 걸쳐 강력한 표현형 스크리닝 및 타겟 검증 워크플로우를 지원합니다.
이 순환식 사육 시스템은 초기 발견부터 전임상 연구에 이르기까지 제브라피쉬 모델의 역할을 뒷받침하며, 가설 기반 및 스크리닝 기반 워크플로우를 모두 지원합니다.