인공 다이어트 실험을 사용하여 Aphids에 니코틴 공차 테스트

식물은 곤충의 먹이에 대한 반응으로 다양한 2차 대사 산물의 생산을 상향 조절할 수 있습니다. 곤충이 아닌 초식에 대한 담배 식물의 한 가지 반응은 니코틴을 사용하여 신경 독성 알칼로이드 니코틴의 생산을 증가시키는 것입니다. 예를 들어, 진딧물에 대한 식물 2차 대사 산물의 독성을 평가하기 위한 실험을 설정하는 방법을 시연하겠습니다.

MiSiS persky의 특정 계통, 녹색 복숭아 진딧물은 재배 담배를 전문으로하기 위해 적응했습니다. 여기서 우리는 이러한 담배 적응 계통이 비적응 계통에 비해 니코틴에 대한 저항력이 증가했다는 가설을 세웁니다. 안녕하세요, 제 이름은 존 램지입니다.

저는 보 톰슨 식물 연구소(Bo Thompson Institute for Plant Research)의 조지 잰더(George Jander) 연구실에서 재학 중인 대학원생입니다. 오늘은 진딧물에 대한 식물 대사 산물의 독성을 측정하는 절차를 보여 드리겠습니다. 이 절차는 식물 대사 산물이 관심 있는 인공 식단을 준비하는 것을 포함합니다.

이 경우 니코틴을 다양한 농도로 첨가하여 진딧물을 가두어 이 식단을 먹고 며칠 후에 진딧물을 세어 다양한 농도의 니코틴에 대한 생존율과 번식력을 측정합니다. 시작하겠습니다. 실험과 함께.

우리는 인공 식단으로 진딧물을 키울 수 있으며, 식물 혈관 조직에 특수 S 스타일을 삽입하고 유수 수액을 섭취하는 먹이 스타일을 활용할 수 있습니다. 우리는 A가 조우한 것과 유사한 액체 식단을 준비하여 이 용액에 자당과 아미노산으로 구성된 식물을 먹였습니다. 그런 다음 다양한 농도의 식물 대사 산물을 첨가합니다.

우리는 이 경우 니코틴의 독성을 분석하는 데 관심이 있습니다. 이 실험에서는 4마리의 성충 진딧물을 작은 플라스틱 컵에 담았습니다. 그들은 3일 후에 컵 위에 뻗어 있는 두 층의 생물막 사이에 피펫으로 주입된 액체 다이어트를 통해 먹이를 먹습니다.

다양한 농도의 니코틴을 함유한 사료의 섭식 독성을 각 컵에 있는 성충 진딧물과 유충 진딧물을 계수하여 대조 식단과 비교합니다. 이제 실험적인 식단을 준비할 차례입니다. 나는 여기에 자당과 20 개의 아미노산 용액을 가지고 있습니다.

진딧물은 이 식단으로 최소 일주일 동안 생존하고 정상적으로 번식할 수 있습니다. 이제 저는 이 식단을 1밀리리터로 분취하고, 이 펜더 튜브에서 0에서 500마이크로몰까지의 다양한 농도의 니코틴을 함유한 Alec Watts를 만든 다음 4개의 진딧물을 빨간색 또는 녹색으로 선택하여 이 실험용 컵에 넣습니다. 붓을 사용하여 잎에서 진딧물을 섬세하게 들어 올려 실험용 컵에 넣습니다.

진딧물을 선택할 때는 일반적인 크기와 색이 더 어두운 진딧물을 선택하는 것이 중요한데, 이 곤충은 나이가 더 많아 이 실험에 적합하지 않을 수 있습니다. 그런 다음 진딧물을 담기 위해 컵 위에 첫 번째 층의 핌을 늘립니다. 다음으로, 두 파라폼 레이어 사이에 100마이크로리터의 액체 다이어트를 분주한 다음 컵 가장자리 주위에 고정하는 두 번째 파라폼 레이어를 늘립니다.

실험을 통해 공기 흐름이 잘 되는지 확인하기 위해 이 공기 구멍을 찔렀고, 이 컵을 이 튜브 홀더에 넣고 조명 아래에서 긴 하루 동안 사진을 찍을 수 있는 곤충실의 선반에 놓을 것입니다. 자, 여기서 우리는 제가 방금 보여준 실험과 같은 방식으로 3일 전에 설정한 실험의 결과를 볼 수 있습니다. 나는 0 마이크로 몰, 10 마이크로 몰, 100 마이크로 몰, 100 마이크로 몰 및 1000 마이크로 몰 또는 1 밀리 몰 니코틴 식단에 녹색과 빨간색 진딧물을 각각 한 컵씩 가지고 있습니다.

그리고 대조군 다이어트의 경우 제로 마이크로몰 니코틴을 볼 수 있는데, 붉은색 진딧물과 녹색 진딧물 모두 생존하고 번식하고 있습니다. 마찬가지로, 10마이크로몰 다이어트에는 많은 수의 붉은진딧물 자손이 있습니다. 우리는 여전히 녹색 성인이 있지만 자손이 많지 않습니다.

따라서 그들은 니코틴의 영향을 10마이크로몰 정도로 낮은 농도에서도 느낄 수 있습니다. 여기에는 100마이크로몰 니코틴 식단에서 살아남은 성인 녹색 진딧물은 없지만 붉은 진딧물은 대조군과 동일한 수준에서 생존하고 번식하고 있습니다. 1000 마이크로 몰 니코틴이 함유 된 다이어트에서 볼 수 있습니다.

녹색 진딧물이나 붉은 진딧물 모두 살아남을 수 없습니다. 따라서 이를 바탕으로 적색 MiSiS 계통이 담배 밭에 침투할 수 있게 한 적응 중 하나가 니코틴을 해독하는 향상된 능력일 가능성을 고려할 수 있습니다. 우리는 방금 인공 사료를 사용하여 아피스에 대한 식물 2차 대사 산물의 독성을 측정하는 실험을 설정하는 방법을 보여드렸습니다.

이러한 실험을 설정할 때 기억해야 할 중요한 것은 크기와 색깔이 같을 뿐만 아니라 유사한 발달 단계에 있는 식물에서 온 곤충을 선택하는 것입니다. 그게 다야. 시청해 주셔서 감사드리며 실험에 행운을 빕니다.