Name: 인공 다이어트 실험을 사용하여 Aphids에 니코틴 공차 테스트 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-05-14T16:17:00.000+00:00
Duration: 6 min 19 s
Description: 학습하세요 인공 다이어트 실험을 통해 담배에 적응한 진딧물과 그렇지 않은 진딧물의 니코틴 내성 차이를 평가하는 방법을. 이 연구는 해충 관리 전략 수립에 중요한 식물-곤충 상호작용 메커니즘을 밝힙니다.

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본 실험에서는 4 성인 aphids는 작은 플라스틱 컵에 포함되어 있습니다. 그들은 컵 상단 끌었 parafilm 2 층 사이 pipetted 액체 음식에서 공급. 삼일 후에 먹이가 니코틴의 다른 농도를 포함하는 다이어트의 독성은 각 컵에 성인과 애벌레 aphids를 세어 다이어트를 제어하는​​ 비교됩니다. <ol><li> 자당 20 아미노산을 포함하는 솔루션을 확인하십시오. Aphids는 최소한 1 주일 동안 정상적인 수준에서 재현이 다이어트에 존속 수 있습니다. 인공 다이어트에 대한 첨부 파일을 참조하시기 바랍니다. </li><li> 니코틴을 포함한 6 개의 eppendorf 튜브에 나누어지는이 다이어트 1 ML합니다. 0 - 500μM까지, 사용하는 니코틴의 다양한 농도와 관련하여 그들을 분류. </li><li> 적색 또는 녹색 중 4 aphids를 선택하고 이러한 실험 컵에 넣어. </li><li> aphids을 선택할 때, 그것은 그들이 일관 시대의 것이 중요합니다. 일반적으로, 유사한 크기 및 색상 (그들이 나이가되면 붉은 aphids가 어둡게 해)의 aphids을 찾습니다. </li><li> parafilm 한 조각으로 컵 커버. parafilm 2 조각 사이에 음식을 묶으십시오. 부분 컵의 가장자리 주위에 두 번째 parafilm 수준을 스트레칭. 나누어지는는 액체 레이어 사이의 식단, 그리고 상위 레이어를 아래로 밀봉. </li><li> 실험에 대한 데이터를 수집 수있는 시간 후 3 일 오랜 일 photoperiod의 불빛 아래 곤충 방에이 컵 보관하십시오. </li></ol> 방문하십시오 <a href="http://arjournals.annualreviews.org/doi/abs/10.1146/annurev.arplant.59.032607.092825" target="_blank">식물 생물학의 연간 리뷰</a> 곤충 herbivory이 프로토콜과 식물 면역에 대한 자세한 내용은.

저자들은 공개할 이해관계가 없음을 밝힙니다.

인공 다이어트 실험을 사용하여 aphids에 니코틴 공차 테스트

Testing Nicotine Tolerance in Aphids Using an Artificial Diet Experiment

식물 곤충 먹이에 대한 응답으로 여러 seconday의 metabolites의 생산을 upregulate 수 있습니다. 이러한 metabolites, 니코틴의 하나는 잘 insecticidal 속성을 가지고 알고 있습니다. 하나 herbivory에 담배 식물의 반응, 또는 곤충에 의해시 gnawed되고,이 neurotoxic 알칼로이드의 생산을 증가하는 것입니다. 여기, 우리는 녹색 복숭아 진딧물, Myzus의 persicae의 담배 맞게 변형가 감염 담배를하지 않는 이러한 곤충의 변형보다 니코틴의 높은 수준을 용인할 수 있는지의 문제를 해결하기 위해 실험을 설정하는 방법을 보여줍니다 것입니다 현장.

이 비디오와 분석이 보여주는 것을 테스트하지 않는 분야와 하나의 담배 공장을 감염 시켰어 aphids 하나의 두 가지 유형으로 니코틴의 내성.

인공 다이어트 실험을 사용하여 Aphids에 니코틴 공차 테스트

식물은 곤충의 섭식에 반응하여 다양한 이차 대사산물의 생산을 상향 조절할 수 있습니다. 이러한 대사산물 중 하나인 니코틴은 잘...

식물은 곤충의 먹이에 대한 반응으로 다양한 2차 대사 산물의 생산을 상향 조절할 수 있습니다. 곤충이 아닌 초식에 대한 담배 식물의 한 가지 반응은 니코틴을 사용하여 신경 독성 알칼로이드 니코틴의 생산을 증가시키는 것입니다. 예를 들어, 진딧물에 대한 식물 2차 대사 산물의 독성을 평가하기 위한 실험을 설정하는 방법을 시연하겠습니다.MiSiS persky의 특정 계통, 녹색 복숭아 진딧물은 재배 담배를 전문으로하기 위해 적응했습니다. 여기서 우리는 이러한 담배 적응 계통이 비적응 계통에 비해 니코틴에 대한 저항력이 증가했다는 가설을 세웁니다. 안녕하세요, 제 이름은 존 램지입니다.저는 보 톰슨 식물 연구소(Bo Thompson Institute for Plant Research)의 조지 잰더(George Jander) 연구실에서 재학 중인 대학원생입니다. 오늘은 진딧물에 대한 식물 대사 산물의 독성을 측정하는 절차를 보여 드리겠습니다. 이 절차는 식물 대사 산물이 관심 있는 인공 식단을 준비하는 것을 포함합니다.이 경우 니코틴을 다양한 농도로 첨가하여 진딧물을 가두어 이 식단을 먹고 며칠 후에 진딧물을 세어 다양한 농도의 니코틴에 대한 생존율과 번식력을 측정합니다. 시작하겠습니다. 실험과 함께.우리는 인공 식단으로 진딧물을 키울 수 있으며, 식물 혈관 조직에 특수 S 스타일을 삽입하고 유수 수액을 섭취하는 먹이 스타일을 활용할 수 있습니다. 우리는 A가 조우한 것과 유사한 액체 식단을 준비하여 이 용액에 자당과 아미노산으로 구성된 식물을 먹였습니다. 그런 다음 다양한 농도의 식물 대사 산물을 첨가합니다.우리는 이 경우 니코틴의 독성을 분석하는 데 관심이 있습니다. 이 실험에서는 4마리의 성충 진딧물을 작은 플라스틱 컵에 담았습니다. 그들은 3일 후에 컵 위에 뻗어 있는 두 층의 생물막 사이에 피펫으로 주입된 액체 다이어트를 통해 먹이를 먹습니다.다양한 농도의 니코틴을 함유한 사료의 섭식 독성을 각 컵에 있는 성충 진딧물과 유충 진딧물을 계수하여 대조 식단과 비교합니다. 이제 실험적인 식단을 준비할 차례입니다. 나는 여기에 자당과 20 개의 아미노산 용액을 가지고 있습니다.진딧물은 이 식단으로 최소 일주일 동안 생존하고 정상적으로 번식할 수 있습니다. 이제 저는 이 식단을 1밀리리터로 분취하고, 이 펜더 튜브에서 0에서 500마이크로몰까지의 다양한 농도의 니코틴을 함유한 Alec Watts를 만든 다음 4개의 진딧물을 빨간색 또는 녹색으로 선택하여 이 실험용 컵에 넣습니다. 붓을 사용하여 잎에서 진딧물을 섬세하게 들어 올려 실험용 컵에 넣습니다.진딧물을 선택할 때는 일반적인 크기와 색이 더 어두운 진딧물을 선택하는 것이 중요한데, 이 곤충은 나이가 더 많아 이 실험에 적합하지 않을 수 있습니다. 그런 다음 진딧물을 담기 위해 컵 위에 첫 번째 층의 핌을 늘립니다. 다음으로, 두 파라폼 레이어 사이에 100마이크로리터의 액체 다이어트를 분주한 다음 컵 가장자리 주위에 고정하는 두 번째 파라폼 레이어를 늘립니다.실험을 통해 공기 흐름이 잘 되는지 확인하기 위해 이 공기 구멍을 찔렀고, 이 컵을 이 튜브 홀더에 넣고 조명 아래에서 긴 하루 동안 사진을 찍을 수 있는 곤충실의 선반에 놓을 것입니다. 자, 여기서 우리는 제가 방금 보여준 실험과 같은 방식으로 3일 전에 설정한 실험의 결과를 볼 수 있습니다. 나는 0 마이크로 몰, 10 마이크로 몰, 100 마이크로 몰, 100 마이크로 몰 및 1000 마이크로 몰 또는 1 밀리 몰 니코틴 식단에 녹색과 빨간색 진딧물을 각각 한 컵씩 가지고 있습니다.그리고 대조군 다이어트의 경우 제로 마이크로몰 니코틴을 볼 수 있는데, 붉은색 진딧물과 녹색 진딧물 모두 생존하고 번식하고 있습니다. 마찬가지로, 10마이크로몰 다이어트에는 많은 수의 붉은진딧물 자손이 있습니다. 우리는 여전히 녹색 성인이 있지만 자손이 많지 않습니다.따라서 그들은 니코틴의 영향을 10마이크로몰 정도로 낮은 농도에서도 느낄 수 있습니다. 여기에는 100마이크로몰 니코틴 식단에서 살아남은 성인 녹색 진딧물은 없지만 붉은 진딧물은 대조군과 동일한 수준에서 생존하고 번식하고 있습니다. 1000 마이크로 몰 니코틴이 함유 된 다이어트에서 볼 수 있습니다.녹색 진딧물이나 붉은 진딧물 모두 살아남을 수 없습니다. 따라서 이를 바탕으로 적색 MiSiS 계통이 담배 밭에 침투할 수 있게 한 적응 중 하나가 니코틴을 해독하는 향상된 능력일 가능성을 고려할 수 있습니다. 우리는 방금 인공 사료를 사용하여 아피스에 대한 식물 2차 대사 산물의 독성을 측정하는 실험을 설정하는 방법을 보여드렸습니다.이러한 실험을 설정할 때 기억해야 할 중요한 것은 크기와 색깔이 같을 뿐만 아니라 유사한 발달 단계에 있는 식물에서 온 곤충을 선택하는 것입니다. 그게 다야. 시청해 주셔서 감사드리며 실험에 행운을 빕니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

씹는 곤충 herbivores 식물의 저항은 여러 가지 방법으로 테스트할 수 있습니다. 여기, 우리는 선택과 해충 종 피에리스 rapae에 대한 저항을 식별하는 모델 식물 Arabidopsis thaliana의와 노 선택 실험을 셋업하는 방법을 보여줍니다.

씹는 곤충에 A.의 thaliana의 저항을 테스트하기 위해 선택과 노 - 선택 Assays

Aphids는 식물 바이러스의 효과적인 송신기입니다. 바이러스의 진딧물 microinjection, 우리가 오늘이 표시됩니다 절차는, 연구자, 창자를 거치지 않고 직접 진딧물의 hemocoel에 circulative 방식으로 바이러스 전송을위한 2 개의 주요 장벽 중 하나를 바이러스를 주입 수 있도록하는 기술입니다. 동일한 기술은 또한 RNAi을 위해 dsRNA를 주입하는 데 사용됩니다.

Microinjection을 사용 Aphids에 바이러스성 전송 생리 장벽을 테스트

이 비디오는 선호 물질을 섭취한 후 파리의 복부 착색을 평가하여 맛이 다른 착색 용액에 대한 매력 또는 회피를 측정하는 데 사용되는 행동 방법인 미각 선호도 분석에 대해 설명합니다. 주요 프로토콜은 다양한 자당 농도의 용액에 대한 파리의 선호도를 측정하는 데 사용되는 절차를 보여줍니다.

Taste Preference Assay: 초파리의 섭식 행동을 측정하는 방법

용액의 영양분과 독소에 대해 자유롭게 움직이는 호박벌(Bombus terrestris)의 입 부분의 단기 미각 반응을 조사하기 위한 새로운 행동 분석법이 설명되어 있습니다.

소설 행동 분석은 (엉망으로 꿀벌을 자유롭게 이동 개인의 미각 응답을 조사하기<em&gt; 뒤의 terrestris</em&gt;)

미각은 유익한 물질에 대한 끌림과 독성 물질의 회피를 용이하게 하는 중요한 감각 과정입니다.  이 프로토콜은 주어진 화합물에 대한 초파리 미각 선호도를 결정하기 위한 간단한 섭취 분석을 설명합니다.

성인을위한 맛의 기본 설정 분석<em&gt; 초파리</em

진딧물 진딧물 nerii 벌레 가족 (Apocyanaceae)에 높은 방어 식물에 colonizes 고 식물 곤충 상호 작용을 공부 하는 수많은 기회를 제공 합니다. 문화, 그리고 생성 및 분자의 분석 및 진딧물의 유지 보수에 대 한 프로토콜의 시리즈 제시 하는 여기, 그리고 A. nerii에 대 한-omic 데이터.

생물 학적 문화와 진딧물 nerii에 유전자 발현 측정 유지: 식물 곤충 상호 작용에 대 한 비-모델 시스템

여기, 우리는 건설 및 기술 바람 터널의 사용 냄새 중재 곤충과 행동 분석에 대 한. 바람 터널 설계와 시각적 자극 없이 여러 방법으로 악취 소스 출시를 촉진 한다. 풍 동 실험은 행동 활성 휘발성 화학 물질을 식별 하는 중요 한 방법.

냄새에 대 한 바람 터널 중재 곤충 행동 분석 실험

본 프로토콜은 카나비노이드 연구에서 담배 혼웜 만두카 sexta 를 사용하기위한 교육 정보를 제공합니다.  여기에 설명된 방법은 칸 나비 디올 (CBD) 치료에 대한 응답으로 곤충 모델의 생리적 및 행동 변화를 모니터링하는 모든 필요한 공급 및 프로토콜을 포함한다.

카나비노이드 전임상 연구를 위한 곤충 모델 시스템으로 담배 혼웜

이 프로토콜은 나비목 곤충 유충에 대한 식물 화학 물질의 잠재적 독성 효과를 평가하기 위한 의무 섭식 분석을 설명합니다. 이것은 확장성이 뛰어난 곤충 생물 검정으로 치사 및 치사 용량, 억제 활동 및 생리학적 효과를 쉽게 최적화할 수 있습니다. 이것은 친환경 살충제를 스크리닝하는 데 사용할 수 있습니다.

Helicoverpa armigera에 대한 Phytochemicals의 살충 효과를 평가하기 위한 공급 분석 시스템 개발

이 프로토콜은 단일유전학적 곤충인 겨자 진딧물(Lipaphis erysimi (Kalt .))에 대한 곤충병원성 곰팡이(EPF)의 효과를 평가하기 위해 최적화된 분리형 잎 생물검정 시스템을 제공합니다. 이 방법은 페트리 접시 실험 중 데이터 수집 프로세스를 간략하게 설명하여 연구원이 겨자 진딧물 및 기타 단일유전 곤충에 대한 EPF의 독성을 일관되게 측정할 수 있도록 합니다.

Parthenogenetic 곤충, 겨자 진딧물, Lipaphis erysimi (Kalt.)에 대한 곤충 병원성 곰팡이의 무균 효과 평가

이 논문은 인공 식단으로 통제된 실험실 조건에서 양배추 흰 나비를 기르기 위한 자세한 프로토콜을 제시하며, 이를 통해 조기 생애 영양 및 독소 노출을 정밀하게 조작할 수 있습니다. 대표적인 결과는 이 프로토콜로 중금속 독성을 분석할 수 있는 방법을 보여줍니다.

통제 된 조건에서 양배추 흰 나비 (Pieris rapae) 키우기 : 중금속 내성 사례 연구

학습하세요 인공 다이어트 실험을 통해 담배에 적응한 진딧물과 그렇지 않은 진딧물의 니코틴 내성 차이를 평가하는 방법을. 이 연구는 해충 관리 전략 수립에 중요한 식물-곤충 상호작용 메커니즘을 밝힙니다.

인공 다이어트 실험을 사용하여 Aphids에 니코틴 공차 테스트

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