Name: Sandell-Kolthoff 반응을 이용한 인간 간 미세체에서 데이오디나아제 1 활성의 색도 평가 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-04-10T13:05:00.000+00:00
Duration: 8 min
Description: 배우세요 인간 간 미세체에서 Sandell-Kolthoff 반응을 이용한 DIO1 활성 색도 평가 방법을. 이 비방사성 분석법은 갑상선 호르몬 항상성을 교란하는 화학물질을 선별하는 데 활용됩니다.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Kabir, E. R., Rahman, M. S., Rahman, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+on+endocrine+disruptors+and+their+possible+impacts+on+human+health%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Toxicol+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">A review on endocrine disruptors and their possible impacts on human health.</a> Environ Toxicol Pharmacol. 40 (1), 241-258 (2015).</li>
<li>Yue, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+exposure+to+a+mixture+of+endocrine+disruptors+and+serum+levels+of+thyroid+hormones%3A+a+cross-sectional+study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Environ+Sci%22%5BJournal%5D)">Human exposure to a mixture of endocrine disruptors and serum levels of thyroid hormones: a cross-sectional study.</a> J Environ Sci. 125, 641-649 (2023).</li>
<li>Köhrle, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+deiodinase+family%3A+selenoenzymes+regulating+thyroid+hormone+availability+and+action%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Mol+Life+Sci%22%5BJournal%5D)">The deiodinase family: selenoenzymes regulating thyroid hormone availability and action.</a> Cell Mol Life Sci. 57 (13), 1853-1863 (2000).</li>
<li>Zhang, J., Lazar, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mechanism+of+action+of+thyroid+hormones%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Physiol%22%5BJournal%5D)">The mechanism of action of thyroid hormones.</a> Annu Rev Physiol. 62 (1), 439-466 (2000).</li>
<li>França, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+type+1+iodothyronine+deiodinase+%28DIO1%29+mutations+cause+abnormal+thyroid+hormone+metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22Thyroid%22%5BJournal%5D)">Human type 1 iodothyronine deiodinase (DIO1) mutations cause abnormal thyroid hormone metabolism.</a> Thyroid. 31 (2), 202-207 (2020).</li>
<li>Weber, A. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+the+predictivity+of+the+DIO1-SK+assay+to+investigate+DIO1+inhibition+in+human+liver+microsomes%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Vitro+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Assessment of the predictivity of the DIO1-SK assay to investigate DIO1 inhibition in human liver microsomes.</a> Appl Vitro Toxicol. 9 (2), 44-59 (2023).</li>
<li>Weber, A. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+approach+method+to+study+thyroid+hormone+disruption%3A+optimization+and+standardization+of+an+assay+to+assess+the+inhibition+of+DIO1+enzyme+in+human+liver+microsomes%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Vitro+Toxicol%22%5BJournal%5D)">A new approach method to study thyroid hormone disruption: optimization and standardization of an assay to assess the inhibition of DIO1 enzyme in human liver microsomes.</a> Appl Vitro Toxicol. 8 (3), 67-82 (2022).</li>
<li>Renko, K., Hoefig, C. S., Hiller, F., Schomburg, L., Köhrle, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+iopanoic+acid+as+substrate+of+type+1+deiodinase+by+a+novel+nonradioactive+iodide-release+assay%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Identification of iopanoic acid as substrate of type 1 deiodinase by a novel nonradioactive iodide-release assay.</a> Endocrinology. 153 (5), 2506-2513 (2012).</li>
<li>Renko, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+improved+nonradioactive+screening+method+identifies+genistein+and+xanthohumol+as+potent+inhibitors+of+iodothyronine+deiodinases%5BTitle%5D)+AND+%22Thyroid%22%5BJournal%5D)">An improved nonradioactive screening method identifies genistein and xanthohumol as potent inhibitors of iodothyronine deiodinases.</a> Thyroid. 25 (8), 962-968 (2015).</li>
<li>Olker, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Screening+the+ToxCast+phase+1%2C+phase+2%2C+and+e1k+chemical+libraries+for+inhibitors+of+iodothyronine+deiodinases%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+Sci%22%5BJournal%5D)">Screening the ToxCast phase 1, phase 2, and e1k chemical libraries for inhibitors of iodothyronine deiodinases.</a> Toxicol Sci. 168 (2), 430-442 (2019).</li>
<li>Sane, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+and+characterization+of+highly+potent+and+isoenzyme-selective+inhibitors+of+deiodinase+type+I+via+a+nonradioactive+high-throughput+screening+method%5BTitle%5D)+AND+%22Thyroid%22%5BJournal%5D)">Identification and characterization of highly potent and isoenzyme-selective inhibitors of deiodinase type I via a nonradioactive high-throughput screening method.</a> Thyroid. 35 (5), 576-589 (2025).</li>
<li>Visser, T. J., Van Overmeeren, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Binding+of+radioiodinated+propylthiouracil+to+rat+liver+microsomal+fractions%3A+stimulation+by+substrates+for+iodothyronine+5%E2%80%B2-deiodinase%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+J%22%5BJournal%5D)">Binding of radioiodinated propylthiouracil to rat liver microsomal fractions: stimulation by substrates for iodothyronine 5′-deiodinase.</a> Biochem J. 183 (1), 167-169 (1979).</li>
<li>Hindrichs, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+and+fast+online+SPE-LC-MS%2FMS+method+to+quantify+thyroid+hormone+metabolites+in+rat+plasma%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Res+Toxicol%22%5BJournal%5D)">A novel and fast online SPE-LC-MS/MS method to quantify thyroid hormone metabolites in rat plasma.</a> Chem Res Toxicol. 37 (1), 33-41 (2024).</li>
<li>Kolthoff, I. M., Sandell, E. B., Lingane, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modified+persulfate-arsenite+method+for+manganese%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">A modified persulfate-arsenite method for manganese.</a> Anal Chem. 8 (1), 73-73 (1936).</li>
<li>Stefanidis, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+the+robustness+and+accuracy+of+the+deiodinase+1+Sandell%E2%80%93Kolthoff+assay%3A+a+comparative+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Vitro+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Assessment of the robustness and accuracy of the deiodinase 1 Sandell–Kolthoff assay: a comparative analysis.</a> Appl Vitro Toxicol. 10 (4), 80-90 (2024).</li>
<li>Satya, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidance+document+on+standardised+test+guidelines+for+evaluating+chemicals+for+endocrine+disruption%5BTitle%5D)+AND+%22OECD+Environ+Health+Saf+Publ%22%5BJournal%5D)">Guidance document on standardised test guidelines for evaluating chemicals for endocrine disruption.</a> OECD Environ Health Saf Publ. 150, (2012).</li>
<li>Joseph, O., Eberle, M., Lieberman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolites+in+urine+that+interfere+with+the+Sandell%E2%80%93Kolthoff+assay+for+urinary+iodine%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Trace+Elem+Res%22%5BJournal%5D)">Metabolites in urine that interfere with the Sandell–Kolthoff assay for urinary iodine.</a> Biol Trace Elem Res. 202 (2), 466-472 (2024).</li>
<li>May, W., Wu, D., Eastman, C., Bourdoux, P., Maberly, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+automated+urinary+iodine+methods%3A+problems+of+interfering+substances+identified%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Chem%22%5BJournal%5D)">Evaluation of automated urinary iodine methods: problems of interfering substances identified.</a> Clin Chem. 36 (6), 865-869 (1990).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1-티오-&베타;-D-포도당 나트륨 염</td><td>시그마-올드리치</td><td>T6375-1G</td><td>CAS 10593-29-0</td></tr><tr><td>3,3',5'-트리이오도티로닌 (rT3)&nbsp;</td><td>산타크루즈 바이오테크놀로지</td><td>SC-209692</td><td>CAS 5817-39-0</td></tr><tr><td>6-프로필-2-티오라실 (6PTU)</td><td>수펠코</td><td>P3755-10G</td><td>CAS 51-52-5</td></tr><tr><td>아세트산</td><td>써모피셔</td><td>9526-33</td><td>CAS 64-19-7</td></tr><tr><td>분석 균형</td><td>NA</td><td>NA</td><td>0.1mg 가독성으로 최대 30g까지 정확히 측정할 수 있습니다</td></tr><tr><td>비소 산화나트륨 (NaAsO2)</td><td>써모피셔</td><td>041533.AP</td><td>CAS 7784-46-5</td></tr><tr><td>분석판 (96웰 포맷)</td><td>머크</td><td>Z707902-108EA</td><td>예: 조직 배양 플레이트, 96웰 플레이트, 평평한 바닥, 폴리스티렌, 0.34 cm2, 멸균, 108/cs, TPP</td></tr><tr><td>오로티오글루코스 (ATG)</td><td>시그마-올드리치</td><td>A0606-5MG</td><td>CAS 12192-57-3</td></tr><tr><td>원심분리관 15번과 50번, mL</td><td>머크</td><td>Z707724-800EA, Z707716-320EA</td><td>예: TPP 원심분리관, 용량 15 및 50 mL, 폴리프로필렌, 그리고 nbsp;</td></tr><tr><td>마이크로타이터 플레이트용 스윙아웃 로터가 있는 원심분리기</td><td>NA</td><td>NA</td><td>96 깊이의 웰 플레이트와 그 위에 96 웰 필터 플레이트(최소 약 6cm 높이)를 설치할 수 있을 만큼 충분히 높아야 합니다</td></tr><tr><td>세륨 (IV) 황암모늄 (Ce(NH4)4(SO4)4)</td><td>시그마-올드리치</td><td>22269-100G-F</td><td>CAS 10378-47-9</td></tr><tr><td>CO2 인큐베이터</td><td>NA</td><td>NA</td><td>37도 온도를 유지할 수 있습니다; C, 5% CO2 및 등; 습도 90%</td></tr><tr><td>딥웰 플레이트 (96웰 포맷)</td><td>수펠코</td><td>575653-U</td><td>예: SPE 96-깊이 사각형 우물 수집판, 웰 부피 2 mL, 폴리프로필렌</td></tr><tr><td>디메틸 설폭사이드 (DMSO)</td><td>AppliChem</td><td>A3672,0250</td><td>CAS 67-68-5</td></tr><tr><td>디티오트레이톨 (DTT)</td><td>시그마-올드리치</td><td>D9779-1G</td><td>CAS 3483-12-3</td></tr><tr><td>에틸렌디아미네테트라아세트산(EDTA)&nbsp;</td><td>시그마-올드리치</td><td>APO456787707-500G</td><td>CAS 6381-92-6</td></tr><tr><td>필터 플레이트 (96웰 포맷)</td><td>머크</td><td>WHA77002810</td><td>예: 마이크로플레이트, 96웰, 투명 폴리스티렌, 800 및 마이크로; L, DNA 결합, 왓트맨</td></tr><tr><td>가스 밀폐 플레이트 실러</td><td>써모피셔</td><td>232698</td><td>예: 밀봉 테이프, 폴리에스터, 멸균, 밀봉 테이프, 폴리에스터, 멸균, Nunc</td></tr><tr><td>젠장</td><td>판 바이오텍</td><td>P05-01100</td><td>CAS 7365-45-9</td></tr><tr><td>인간 간 미세체</td><td>바이오비트</td><td>X008070</td><td>예: INVITROCYP 150-공여자 통합 인간 간 미세체</td></tr><tr><td>요오화 (IC 표준)</td><td>수펠코</td><td>41271-100ML</td><td>예: IC용 요오드 표준 기준, 물에 1000 mg/L, 시그마-알드리치</td></tr><tr><td>Dowex 50WX2 같은 이온 교환 수지</td><td>로스</td><td>334.4</td><td>CAS 12612-37-2; 메시 100-200</td></tr><tr><td>마이크로 원심분리기 튜브 1.5 & nbsp; mL</td><td>머크</td><td>EP0030120086-1PAK</td><td>예: 에펜도르프 &; 세이프락 마이크로 원심분리기 튜브, 용량 1.5 mL, 천연</td></tr><tr><td>50에서 300m까지 공급할 수 있는 멀티채널 디스펜서; &micro; 한 걸음당 L.</td><td>NA</td><td>NA</td><td>NA</td></tr><tr><td>10에서 100까지 공급이 가능한 다중 채널 피펫; &micro; 한 걸음당 L.</td><td>NA</td><td>NA</td><td>NA</td></tr><tr><td>전극 및 교정 완충 장치가 포함된 pH 미터</td><td>NA</td><td>NA</td><td>+/- 0.1 pH 단위를 읽을 수 있습니다</td></tr><tr><td>흡광도 측정용 광도계</td><td>테칸 트레이딩 AG</td><td>NA</td><td>예: 선라이즈 흡광도 리더기, INSTSUN-3</td></tr><tr><td>1에서 10까지 공급할 수 있는 피펫; &micro; L</td><td>NA</td><td>NA</td><td>NA</td></tr><tr><td>10개에서 100개까지 공급할 수 있는 피펫; &micro; L</td><td>NA</td><td>NA</td><td>NA</td></tr><tr><td>100에서 1000/nbsp까지 공급할 수 있는 피펫; &micro; L&nbsp;</td><td>NA</td><td>NA</td><td>NA</td></tr><tr><td>대용량용 피펫</td><td>NA</td><td>NA</td><td>혈청학적 피펫, 예: 10, 25, 50 mL</td></tr><tr><td>플레이트 셰이커</td><td>써모피셔</td><td>NA</td><td>예: Thermo Scientific H+P MONOSHAKE VORTEXER MICROTITER PLATE, 직접 제어됨</td></tr><tr><td>리피터 피펫</td><td>NA</td><td>NA</td><td>NA</td></tr><tr><td>염화나트륨(NaCl)</td><td>시그마-올드리치</td><td>S9888-25G</td><td>CAS: 7647-14-5, 예: 염화나트륨, ACS 시약 등; 99.0 %</td></tr><tr><td>통계 소프트웨어</td><td>NA</td><td>NA</td><td>분석법 특성을 반영하는 회귀분석을 수행하고 억제 농도를 계산할 수 있습니다. 예: GraphPad Prims 8, GraphPad</td></tr><tr><td>황산(H2SO4)&nbsp;</td><td>수펠코</td><td>1007311000</td><td>CAS 7664-93-9</td></tr><tr><td>부피 플라스크</td><td>NA</td><td>NA</td><td>정의된 부피로 인증됨</td></tr></tbody></table>

sandell-kolthoff 반응을 이용한 인간 간 미세체에서 데이오디나아제 1 활성의 색도 평가

Colorimetric Assessment of Deiodinase 1 Activity in Human Liver Microsomes Using the Sandell-Kolthoff Reaction

Sandell-Kolthoff 반응을 이용한 인간 간 미세체에서 데이오디나아제 1 활성의 색도 평가

This method enables the identification of test substances that inhibit DIO1 activity and may thus interfere with thyroid hormone homeostasis. The protocol ...

colorimetric-assessment-deiodinase-1-activity-human-liver-microsomes

Research

연구

JoVE Journal

Biochemistry

생화학

inducible 리진 탈카복실화효소의 활동은 톨루엔에 차등 용해도를 부가물을 형성 2,4,6 - trinitrobenzensulfonic의 소산으로 기판 L - 라이신과 제품 cadaverine을 반응에 의해 모니터링됩니다.

의 활동을 측정하는 어세이 대장균은 라이신 Decarboxyase을 Inducible

이 비디오에서는 마우스 간 조직에서 비헴철 함량을 측정하는 비색 측정 기반 방법을 설명합니다. Bathophenanthroline sulfonate는 환원제의 존재 하에서 발색 기질로 사용되며, 이는 철을 chelatable 철 철로 변환합니다.

Bathophenanthroline Sulfonate-based colorimetric assay: 마우스 간 조직에서 비헴철의 정량화를 위한 간단하고 빠른 방법

이 논문은 세포 내 ROS 수준과 미토콘드리아 막 전위와 형태학을 동시에 정량화하기위한 고 - 내용 현미경 검사 워크 플로우를 제시한다. 세포 투과성 형광 리포터 분자 5- (and- 6) - 클로로 메틸 -2 ', 7'- 디클로로 디 히드로 플루 오렌 시스 디 아세테이트, 아세틸 에스테르 (CM-H 2 DCFDA) 및 테트라 메틸 로다 민 메틸 에스테르 (TMRM)...

고감도 현미경을 이용한 세포 산화 환원 프로파일 링

체외 시스템의 신진 대사 능력은 약물 및 독성 물질의 생체 내 변화 및 처분을위한 핵심 요구 사항입니다. 이러한 프로토콜에서는, I는 세포 배양 대사 위상을 평가하기위한 기준 대사 프로브의 적용을 설명한다.

질량 분석 및 Luminogenic 기반의 접근 방법은 단계 I 대사 역량의의 특성을<em&gt; 체외</em&gt; 세포 배양

여기, 우리는 현미경으로 시각화 하 고 세포와 조직 활동, 기능 및 subcellular 지 방화에 dehydrogenases의 활동을 계량 하는 데 사용할 수 있는 프로토콜을 제시.

신진 대사 매핑: 양적 효소 Cytochemistry 및 Histochemistry Dehydrogenases 세포와 조직에서의 활동을 결정 하

우리 nicotinatmide 아데닌 디뉴클레오티드 인산 (NAD(P)H) + H + 조직 샘플에서 직접 생성 하는 효소 효소 활동의 공간적 분포를 매핑하기 위한 프로토콜 설명.

매핑 대사: 조직에서 직접 젖 산 효소 활동 모니터링

여기 포유류 세포에서 대량 autophagic 격리 활동을 측정 하기 위한 간단 하 고 잘 검증 된 프로토콜을 설명 합니다. 메서드를 사용 하면 전체 셀룰러 LDH 수준에 비해 sedimentable 셀 분수에 젖 산 효소 (LDH)의 비율을 측정에 기반.

젖 산 효소 격리 분석 결과-간단 하 고 신뢰할 수 있는 결정 하는 방법을 포유류 세포에서 대량 Autophagic 격리 활동

여기서, 동물 조직에서 헴철 함량을 측정하기 위한 프로토콜이 제공되며, 대부분의 실험실에서 쉽게 구현할 수 있는 간단하고 잘 확립된 비색 분석법을 사용한다.

Bathophenanthroline-based Colorimetric Assay를 이용한 조직 비헴철 함량 측정

다세포 3D 종양 스페로이드는 폐 선암 세포, 섬유아세포 및 단핵구로 준비한 후 이러한 스페로이드에서 암 관련 섬유아세포(CAF)를 분리했습니다. 분리된 CAF를 정상 섬유아세포와 비교하여 미토콘드리아 막횡단 전위, 활성 산소 종 및 효소 활성을 연구하여 미토콘드리아 건강을 평가했습니다.

3D 다세포 폐 종양 스페로이드에서 분리된 암 관련 섬유아세포의 미토콘드리아 건강 평가

여기에서 우리는 분자 산소를 소비하는 능력과 독립적으로 포유류 세포의 미토콘드리아 기능을 직접 측정하기 위한 분석 모음을 제시합니다.

포유류의 미토콘드리아 기능을 측정하기 위한 산소 비의존적 분석

이 프로토콜은 고처리량 스크리닝 접근 방식을 사용하여 형광 염료 프로브로 디하이드로에티듐(DHE)을 사용하여 세포 내 활성 산소종(ROS)을 정량화하는 새로운 방법을 설명합니다. 이 프로토콜은 세 가지 서로 다른 간세포 암종 세포주에서 세포 내 활성 산소종(ROS)의 정량적 평가 방법을 설명합니다.

Dihydroethidium(DHE) 형광 염료를 사용한 활성 산소종(ROS) 생성의 고처리량 스크리닝 평가

배우세요 인간 간 미세체에서 Sandell-Kolthoff 반응을 이용한 DIO1 활성 색도 평가 방법을. 이 비방사성 분석법은 갑상선 호르몬 항상성을 교란하는 화학물질을 선별하는 데 활용됩니다.

Sandell-Kolthoff 반응을 이용한 인간 간 미세체에서 데이오디나아제 1 활성의 색도 평가

더 많은 동영상 탐색