Name: 시험관 내 근형성 연구를 위한 골격근 위성 세포 분리 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-02-24T14:20:00.000+00:00
Duration: 7 min 56 s
Description: 배우세요 생쥐 골격근에서 위성 세포를 분리하고 풍부하게 하는 최적화된 프로토콜을. 효소적 소화, 기계적 분해, 자기 활성화 세포 분류를 사용하여 97% 이상의 높은 순도와 생존율을 달성합니다. 근육 재생 및 질병 모델링 연구에 적합합니다.

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<li>Lee, D. H., Kwak, K. B., Park, Y. C., Chung, C. H., Ha, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Purification+and+characterization+of+myoblast+fusion+inhibitor%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cells%22%5BJournal%5D)">Purification and characterization of myoblast fusion inhibitor.</a> Mol Cells. 1, 177-182 (1991).</li>
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<li>Kohen, N. T., Little, L. E., Healy, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+Matrigel+interfaces+during+defined+hESC+culture%5BTitle%5D)+AND+%22Biointerphases%22%5BJournal%5D)">Characterization of Matrigel interfaces during defined hESC culture.</a> Biointerphases. 4 (4), 69-79 (2009).</li>
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<li>Le Grand, F., Rudnicki, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skeletal+muscle+satellite+cells+and+adult+myogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Skeletal muscle satellite cells and adult myogenesis.</a> Curr Opin Cell Biol. 19 (6), 628-633 (2007).</li>
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<li>Hindi, L., McMillan, J., Afroze, D., Hindi, S., Kumar, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation%2C+culturing%2C+and+differentiation+of+primary+myoblasts%5BTitle%5D)+AND+%22Bio+Protoc%22%5BJournal%5D)">Isolation, culturing, and differentiation of primary myoblasts.</a> Bio Protoc. 7 (9), (2017).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0.25% 트립신-EDTA&nbsp;</td><td>깁코</td><td>25200-056</td><td></td></tr><tr><td>100 & 마이크로; M 세포 스트레이너&nbsp;</td><td>VWR</td><td>732-2759</td><td></td></tr><tr><td>30 & 마이크로; M 스트레이너&nbsp;</td><td>밀텐이 바이오텍</td><td>130-041-407</td><td></td></tr><tr><td>40 & 마이크로; M 세포 스트레이너&nbsp;</td><td>VWR</td><td>732-2757</td><td></td></tr><tr><td>70 & 마이크로; M 세포 스트레이너&nbsp;</td><td>VWR</td><td>130-095-823</td><td></td></tr><tr><td>아세트산&nbsp;</td><td>포크</td><td>568760114</td><td>dH2O에 최종 농도가 20 mM로 용해되어 0.2 & 마이크로로 멸균; M 필터</td></tr><tr><td>알렉사 플루어 488, 당나귀 안티 래빗</td><td>인비트로젠&nbsp;</td><td>A21206</td><td>블로킹 용액에 1:250 희석으로 용해(8.7절 참조)</td></tr><tr><td>알렉사 플루어 488, 염소 쥐 방지 및 nbsp;</td><td>앱캠</td><td>AB150113</td><td>블로킹 용액에 1:250 희석으로 용해(8.7절 참조)</td></tr><tr><td>염화암모늄(NH4Cl)&nbsp;</td><td>바이오샵</td><td>AMC303.500</td><td>최종 농도 50 mM까지 물에 녹입니다</td></tr><tr><td>안티페이드 마운팅 미디어</td><td>벡타쉴드</td><td>H-2000-10</td><td></td></tr><tr><td>항-PAX7 항체</td><td>앱캠</td><td>AB187339</td><td>블로킹 용액에 1:100 희석 비율로 용해(8.7절 참조)</td></tr><tr><td>기본 섬유아세포 성장 인자&nbsp;</td><td>코닝</td><td>354060</td><td>멸균된 dH2O에 용해되어 10 및 마이크로 농도로 사용; g/mL&nbsp;</td></tr><tr><td>베타딘, 100 mg/mL</td><td>에지스 제약회사</td><td></td><td></td></tr><tr><td>세포 배양 플레이트, 6웰, Cell+</td><td>사스테트</td><td>83.3902.300</td><td></td></tr><tr><td>닭 배아 추출물&nbsp;</td><td>MP 생의학</td><td>2850145</td><td></td></tr><tr><td>콜라겐 I, 랫테일</td><td>깁코</td><td>A10483-01</td><td>20 mM 아세트산에 용해됨;</td></tr><tr><td>콜라게나제, 제1형</td><td>시그마</td><td>C0130-500MG</td><td>DMEM에 용해되어 0.2 & 마이크로로 멸균; M 필터</td></tr><tr><td>해리 튜브 (gentleMACS C 튜브)</td><td>밀텐이 바이오텍</td><td>130-093-237</td><td></td></tr><tr><td>둘벡코의 변형 이글 미디엄, 고포도당</td><td>깁코</td><td>31966-021</td><td></td></tr><tr><td>EDTA</td><td>인비트로젠</td><td>AM9260G</td><td></td></tr><tr><td>팔콘 원뿔 원심분리관, 15 mL</td><td>코닝</td><td>352096</td><td></td></tr><tr><td>팔콘 원뿔 원심분리관, 50 mL</td><td>코닝</td><td>352070</td><td></td></tr><tr><td>태아 소 혈청</td><td>깁코</td><td>10082147</td><td></td></tr><tr><td>말 혈청 &nbsp;</td><td>깁코</td><td>26050088</td><td></td></tr><tr><td>자기 라벨링 시약 (위성 셀 격리 키트)</td><td>밀텐이 바이오텍</td><td>130-104-268</td><td></td></tr><tr><td>자기 분리기 (MidiMACS 분리기)</td><td>밀텐이 바이오텍</td><td>130-042-302</td><td></td></tr><tr><td>마트리겔&nbsp;</td><td>코닝</td><td>CLS356234</td><td>DMEM에 10% 농도로 용해하고 nbsp;</td></tr><tr><td>PBS에서 파라포름알데히드 4%</td><td>써모피셔 사이언티브</td><td>J61899. AK</td><td></td></tr><tr><td>페니실린-스트렙토마이신&nbsp;</td><td>깁코</td><td>15140122</td><td></td></tr><tr><td>인산 완충 식염수&nbsp;</td><td>VWR</td><td>392-0334</td><td></td></tr><tr><td>분리 기둥 (LS 기둥)</td><td>밀텐이 바이오텍</td><td>130-042-401</td><td></td></tr><tr><td>골격근 미오신 항체, MHC</td><td>산타크루즈</td><td>SC-32732</td><td>블로킹 용액에 1:50 희석으로 용해(8.7절 참조)</td></tr><tr><td>TC-접시, 100 x 20 mm</td><td>사스테트</td><td>83.3902</td><td></td></tr><tr><td>조직 해리기 (GentleMACS 해리기)</td><td>밀텐이 바이오텍</td><td>130-093-235</td><td></td></tr><tr><td>트리톤 X-100&nbsp;</td><td>시그마-올드리치</td><td>X100-1L</td><td></td></tr></tbody></table>

시험관 내 근형성 연구를 위한 골격근 위성 세포 분리

Isolation of Skeletal Muscle Satellite Cells for In Vitro Myogenesis Studies

Skeletal muscle regeneration and growth depend on satellite cells, the muscle tissue&#39;s resident stem cells. Currently, these cells serve as ...

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Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

마이크로 해부 explants 기술은 골격 근육 줄기 세포의 원천으로 청소년, 성인이나 배아 근육에서 proliferative 골격근 세포를 분리를위한 강력하고 안정적​​인 방법입니다. 유니 클리,이 세포는 clonally 생체내 이식에 사용되는 골격 근육 줄기 세포 라인을 생산하기 위해 파생되었습니다.

성인 및 배아 골격근의 Microexplant 문화 및 골격 근육 줄기 세포의 분리

이 비디오는 조직 해부, 효소 분해 및 후속 기계 및 원심 정제를 통해 쥐 머리 분지 근육 조직에서 위성 세포를 분리하는 방법을 보여줍니다. 그런 다음 세포는 세포외 기질로 코팅된 웰에 파종되어 근아세포로 분화되고 최종적으로 근관과 성숙한 근섬유로 분화됩니다.

쥐의 머리 근육 조직에서 위성 세포를 분리하는 기술

myofibers의 절연과 문화는 황금...

성인 골격근의 개인 Myofibers 및 위성 세포의 분리와 문화

정지 위성 세포의 순수 인구의 분리 및 배양은 근육 줄기 세포 집단은 근육 줄기 세포 생물학 및 재생뿐만 아니라, 근육 퇴행 위축 및 기타 퇴행성 질환의 치료를위한 줄기 세포 이식의 이해에 중요하다.

근육 위성 세포의 분리, 문화, 및 이식

체외 배양 시스템은 척추 근육 생성에 대한 우리의 이해에 필수적인 입증했다. 그러나, 많은, 특히 기초 분류군, nonmammalian 골격 근육 발달과 성장에 대해 배웠 겠죠. 이 조직, 근육 조직 전구 세포 (MPC를)의 성체 줄기 세포를 분리하고, 차 문화 속에서 자신의 자기 갱신, 증식 및 분화를 유지하기위한 효율적이고 강력한 프로토콜에 걸쳐 보존 및 분기 규제 메커니즘의 식별 가능 척추 동물의 계통.

기초 척추 계통의 주요 근원 성 전구 세포 / 근원 세포 배양의 준비

인간의 근육에서 유래한 주요 부착 세포 유형은 근육 세포와 섬유아세포입니다. 여기에서 세포 집단은 CD56 항원을 기반으로 하는 자기 활성화 세포 분류를 사용하여 농축됩니다. 이후 특정 항체를 사용한 면역 라벨링과 이미지 분석 기법을 사용하여 개별 세포의 세포질 및 핵 특성을 정량화할 수 있습니다.

인간의 골격근에서 기본 근육 조직 세포와 섬유 아 세포의 분리 및 정량 면역 세포 화학 특성

이 프로토콜은 9 주 된 쥐의 branchiomeric 머리 근육에서 위성 세포의 분리에 대해 설명합니다. 근육은 다른 아가미 아치에서 시작. 이어서, 위성 세포 분화를 연구하기 mm 크기의 스폿 코팅에 배양했다. 이 접근 방법은 위성 세포의 팽창 및 계대를 피한다.

쥐 머리 Branchiomeric 근육에서 분리 및 위성 세포의 특성

위성 세포의 정확한 식별 다양 한 생리 및 병 적인 조건 하에서 그들의 기능을 공부 하는 것이 필수적입니다. 이 문서는 얼룩 면역 형광 기반으로 성인 골격 근육 섹션에 위성 셀을 식별 하는 프로토콜을 제공 합니다.

Pax7 Laminin 항 체와 면역 형광에 의해 골격 근육 인공위성 세포의 식별

이 프로토콜은 1) 성체 마우스 비복근에서 일차 섬유아세포를 분리하고 배양하는 방법과 2) 자당 밀도 구배와 웨스턴 블롯 분석을 결합한 차등 초원심분리 방법을 사용하여 엑소좀을 정제하고 특성화하는 방법을 보여줍니다.

골격근 섬유아세포(Skeletal Muscle Fibroblast)에서 엑소좀의 분리 및 특성 분석(Isolation and Characterization of Exosomes from Skeletal Muscle Fibroblasts)

여기서, 우리는 동종구균 돌연변이 라민 Δ8-11 마우스 모델, 에머리-드레이퍼스 근 위축증(EDMD)에 대한 매우 가혹한 모델으로부터 초기 산후 발달 단계에서 단일 근육 섬유를 효율적으로 획득하는 방법을 제안한다.

초기 산후 발달에 있는 에머리 드레이푸스 근 이영양증의 Murine 모형에서 단 근섬유 격리 및 문화

골격근은 상주 줄기세포를 포함한 여러 세포 유형으로 구성되어 있으며, 각 세포 유형은 근육 항상성과 재생에 특별한 기여를 합니다. 여기에서는 근육 줄기 세포의 2D 배양과 생리학적, in vivo 및 환경적 특성의 많은 부분을 보존하는 ex vivo 환경에서의 근육 세포 틈새에 대해 설명합니다.

틈새 및 줄기 세포 정지를 재현하기 위한 쥐 골격근의 분획되지 않은 대량 배양

배우세요 생쥐 골격근에서 위성 세포를 분리하고 풍부하게 하는 최적화된 프로토콜을. 효소적 소화, 기계적 분해, 자기 활성화 세포 분류를 사용하여 97% 이상의 높은 순도와 생존율을 달성합니다. 근육 재생 및 질병 모델링 연구에 적합합니다.

시험관 내 근형성 연구를 위한 골격근 위성 세포 분리

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