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</ol>

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<table><tbody><tr><td>3% H2O2</td><td>Caelo</td><td>15301730</td><td></td></tr><tr><td>50 ml conical tube</td><td>Greiner Bio-One</td><td></td><td>Falcon-type conical tube</td></tr><tr><td>Agar Petri dish</td><td>Handmade&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Anaesthesia Unit</td><td>BioMedical Instruments</td><td>Univentor 1200</td><td></td></tr><tr><td>BioCam DupleX</td><td>3Brain</td><td>BioCAM DupleX</td><td>CMOS-HD-MEA platform</td></tr><tr><td>Blade (5*)</td><td>Apollo Herkenrath</td><td>09-025-056</td><td></td></tr><tr><td>Brainwave Software 5</td><td>3Brain</td><td>Version 5</td><td>CMOS-HD-MEA platform</td></tr><tr><td>Breathing mask</td><td>Narishige</td><td>GM-4</td><td></td></tr><tr><td>Bulk Fill Flowable: Compula Refill</td><td>Dentsply Sirona</td><td>267-0195</td><td>For cement</td></tr><tr><td>Capsule Dispenser Gun&nbsp;</td><td>Dentsply Sirona</td><td>296-0003</td><td>For cement</td></tr><tr><td>Carbogen</td><td>Air Liquide</td><td>Air Liqiuide (House system)</td><td></td></tr><tr><td>Cavity Block Glass</td><td>AIM</td><td>AIM</td><td>40 mm x 40 mm</td></tr><tr><td>Clamp (3*)</td><td>DIEFFENBACH</td><td>12-1003-04</td><td>stainless steel 4cm</td></tr><tr><td>Computer</td><td>Dell</td><td>Precission 3431</td><td></td></tr><tr><td>CorePlateTM 1W 38/60</td><td>3Brain</td><td>Accura HD-MEA</td><td>CMOS-HD-MEA chip</td></tr><tr><td>Drill accessory (13)</td><td>FST</td><td>19007-07</td><td>Tip: 7mm</td></tr><tr><td>Drill accessory (13)</td><td>FST</td><td>19007-09</td><td>Tip: 9mm</td></tr><tr><td>Eco wipes - wipe dispenser</td><td>Dr Schumacher</td><td>00-915SE001 (1x1)&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Eco wipes - wipe rolls</td><td>Dr Schumacher</td><td>00-915SE001 (6x1)</td><td></td></tr><tr><td>ELASTOSIL</td><td>Wacker</td><td>RT 601 A/B</td><td></td></tr><tr><td>Electrode</td><td>Microprobes</td><td>SNEX-100</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>Carl Roth GmbH + Co. KG</td><td>Art-Nr. T913.3</td><td></td></tr><tr><td>Excavator (10)</td><td>HLW Dental-Instruments Germany</td><td>S-10.28-6</td><td></td></tr><tr><td>Forceps (5)</td><td>FST</td><td>18025-10</td><td>Stainless Steel 10cm</td></tr><tr><td>Forceps (6)</td><td>Aesculap</td><td>BD311R</td><td>9cm</td></tr><tr><td>Forceps (7)</td><td>FST</td><td>91100-12</td><td>Stainless Steel 12cm</td></tr><tr><td>Forceps (8)</td><td>FST</td><td>11231-20</td><td>Stainless Steel 11cm</td></tr><tr><td>Forceps (8*)&nbsp;</td><td>Karl Hammacher</td><td>9.160 160</td><td>Wironit 10,5cm</td></tr><tr><td>Forceps (9)</td><td>FST</td><td>11200-33</td><td>Dumoxel 13,5cm</td></tr><tr><td>Forceps (9)</td><td>FST</td><td>11200-33</td><td>Dumoxel 13,5cm</td></tr><tr><td>Heated surgical table+integrated gas exhaust</td><td>BioMedical Instruments</td><td>BioMedical Instruments</td><td></td></tr><tr><td>heliobond</td><td>Ivoclar Vivadent</td><td>42040</td><td></td></tr><tr><td>Ice Machine</td><td>Scotsman</td><td>AF 80 AS / WS</td><td></td></tr><tr><td>Inflow and outflow needles</td><td>BD Microlance&nbsp;</td><td>1,25 x70mm</td><td></td></tr><tr><td>Isathal 10mg/g</td><td>Dechra</td><td>Zul.-Nr. 400216.00.00</td><td>Fucidin</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Sedana medical</td><td>N001254</td><td></td></tr><tr><td>Mili-Q Water Filter</td><td>Elga</td><td>PURELAB flex 3</td><td></td></tr><tr><td>Needle Holder (4)</td><td>FST</td><td>12501-13</td><td>Tungsten Carbide 13cm</td></tr><tr><td>Octenisept</td><td>Sch&uuml;lke &amp; Mayr</td><td></td><td>Antiseptic solution&nbsp;</td></tr><tr><td>Paper Filter (4*)</td><td>Carl Roth GmbH + Co. KG</td><td>AP75.1</td><td></td></tr><tr><td>Parafilm</td><td>Sigma Aldrich</td><td>HS234526C</td><td></td></tr><tr><td>Platinum anchor</td><td>3Brain</td><td>3Brain</td><td></td></tr><tr><td>Retractor Tip (14)</td><td>FST</td><td>18200-10</td><td>2.5mm</td></tr><tr><td>Reused Electrode (11)</td><td>Microprobes</td><td>SNEX-100</td><td>For Coordinates</td></tr><tr><td>Ringer</td><td>B. Braun</td><td>3570030</td><td></td></tr><tr><td>Scissor (1)</td><td>FST</td><td>14078-10</td><td>Stainless Steel 10cm</td></tr><tr><td>Scissor (2)</td><td>Aesculap</td><td>BC144R</td><td></td></tr><tr><td>Scissor (3)</td><td>FST</td><td>14058-09</td><td>Stainless Steel 9cm</td></tr><tr><td>Scissor (9*)</td><td>FST</td><td>91401-12</td><td>Stainless Steel 12cm</td></tr><tr><td>Screw (12)</td><td>Online-Schrauben.de</td><td>DIN 84 A2 M 1x2</td><td></td></tr><tr><td>Shaver</td><td>Exacta</td><td>GT415</td><td></td></tr><tr><td>STELLA (software defined implantable modular platform) stimulation system</td><td>non-commercial; developement of the University of Rostock</td><td>open source (https://github.com/SFB-ELAINE/STELLA)</td><td>battery-driven DBS stimulator</td></tr><tr><td>Sterelizer 250</td><td>FST</td><td>18000-45</td><td></td></tr><tr><td>Stereotaxic</td><td>Narishige</td><td>Model SR-AR</td><td></td></tr><tr><td>Super glue</td><td>UHU</td><td>64212</td><td></td></tr><tr><td>Tear cream (Panthenol Nose Cream)</td><td>Jenapharm</td><td>5541249</td><td></td></tr><tr><td>Vibratome&nbsp;</td><td>Laica</td><td>VT12005</td><td></td></tr><tr><td>Xylocain Gel 2%</td><td>Aspen Pharma</td><td>1138060</td><td></td></tr><tr><td>Weigh Boat</td><td>Carl Roth GmbH + Co. KG</td><td>HYT9.1</td><td></td></tr><tr><td>Weigher</td><td>Voltcraft</td><td>TS-5000/1</td><td></td></tr><tr><td>Compounds used for solutions preparation</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Calcium chloride (CaCl2)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>10043-52-4</td><td></td></tr><tr><td>D-Glucose(C6H12O6)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>50-99-7</td><td></td></tr><tr><td>Magnesium Chloride (MgCl2)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>7786-30-3</td><td></td></tr><tr><td>Potassium Chloride(KCl)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>7447-40-7</td><td></td></tr><tr><td>Sodium Bicarbonate (NaHCO3)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>144-55-8</td><td></td></tr><tr><td>Sodium Chloride (NaCl)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>7647-14-5</td><td></td></tr><tr><td>Sodium phosphate monobasic (NaH2PO4)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>7558-80-7</td><td></td></tr><tr><td>Sucrose</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>57-50-1</td><td></td></tr></tbody></table>
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고밀도 미세전극 배열을 이용한 망백 심부 뇌 자극의 네트워크 전반 메커니즘 조사

Investigating The Network-Wide Mechanisms of Pallidal Deep Brain Stimulation Using High-Density Microelectrode Arrays

Dystonia is a neurological movement disorder characterized by abnormal muscle control affecting voluntary movements and sustained postures. Although ...

우리는 담창백핵(globus pallidus)의 뇌심부 자극이 소뇌의 네트워크 활동을 어떻게 변화시키며, 이를 통해 근긴장증(dystonia)의 신경 세포 기능을 어떻게 회복시키는지 연구합니다. 고밀도 미세전극 어레이를 통해 운동 루프 회로를 동시에 기록함으로써 근긴장증과 같은 운동 장애에서 뇌심부 자극의 네트워크 전반에 걸친 효과를 조사할 수 있습니다. 우선, STELLA 자극 시스템의 전자 장치를 맞춤형 3D 프린팅 폴리에틸렌 테레프탈레이트 글리콜(PETG) 캡슐에 수납하십시오.실리콘을 사용하여 덮개와 캡슐 사이 및 케이블 출구의 하우징 영역을 밀봉합니다. 건조 후 실리콘에 눈에 보이는 틈이 있는지 검사하고, 틈이 있다면 밀봉 과정을 반복합니다. 실리콘이 완전히 경화된 후, 에폭시 수지를 중량비 100:35의 혼합 비율로 준비합니다.Vevor RS-1.5를 사용하여 진공 상태에서 레진의 기포를 제거하십시오. 조립 전, 맞춤형 실리콘 몰드의 접합면에 바셀린을 얇게 도포하십시오. 자극기 캡슐을 몰드 안에 넣으십시오.스티뮬레이터와 케이블 접합부가 완전히 덮일 때까지 에폭시 수지를 천천히 채우되, 채우는 동안 기포가 생기지 않도록 주의합니다. 수지가 경화된 후 몰드에서 캡슐을 제거합니다. 고운 줄(file)이나 연마 도구를 사용하여 에폭시 표면을 매끄럽게 다듬고 날카로운 모서리를 제거합니다.캡슐을 액체 실리콘에 담가 마지막으로 얇게 실리콘 코팅을 입힙니다. 플라스틱 피펫을 사용하여 접합부 근처의 케이블 주변에 실리콘을 추가로 도포합니다. 코팅 두께가 너무 두꺼워지는 것을 방지하기 위해 경화 전 스틱을 사용하여 과잉 도포된 실리콘을 제거합니다.수술적 이식 또는 실험적 사용 전 캡슐화 후 기능 테스트를 수행하려면, STELLA 자극 시스템을 링거액(Ringer's solution)에 넣고 내장된 자기 자가 진단 기능을 활성화하십시오. 2x2 형태의 발광 다이오드 또는 LED 점멸 패턴을 확인하여 자극 출력이 적절한지 확인하고, 단락, 개방 회로 또는 배터리 부족 상태 여부를 판별하십시오. 테스트 후에는 배터리 절약을 위해 장치의 전원을 끄십시오.해부 도구, 자당 용액, 페트리 접시 및 바이브라톰 설정을 통해 작업 공간을 준비합니다. 바닥에 거름종이가 깔린 페트리 접시에 얼음처럼 차갑고 걸쭉한 자당 용액을 넣고, 뇌 추출 및 절편 제작을 위해 지속적으로 카보젠 처리를 유지합니다. 11일간의 심부 뇌 자극(DBS) 기간 후 15분 이내에 적출한 뇌를 얼음처럼 차갑고 걸쭉한 자당 용액이 담긴 준비된 페트리 접시로 옮깁니다.교각(pons)을 통해 각막 절개를 하여 소뇌를 제거합니다. 그다음 시상방 절개를 통해 소뇌 반구를 제거합니다. 순간접착제 한 방울을 사용하여 바이브라톰 플레이트를 준비합니다.페트리 접시에서 소뇌를 조심스럽게 꺼냅니다. 접착하기 전에 필터 페이퍼로 시상옆단면(parasagittal section plane) 부위를 가볍게 눌러 건조시킵니다. 바이브라톰 플레이트를 트레이에 넣습니다.소뇌가 완전히 잠길 정도로 충분한 양의 반슬러시 상태 자당 용액을 트레이에 채웁니다. 트레이에 카보젠(carbogen) 가스를 주입합니다. 0.08 millimeters per second의 일정한 속도로 두께 200 micrometers의 소뇌 시상방향 절편(parasagittal slices)을 절단합니다.절편을 상온에서 카보젠(carbogen)을 지속적으로 주입하는 비커 속의 인공 뇌척수액(artificial cerebrospinal fluid) 또는 ACSF에 보관하십시오. 기록 전 재가온 및 안정화를 위해 고밀도 미세전극 어레이(high-density microelectrode array) 또는 HD-MEA로 옮기기 전, 상온의 탄산화 ACSF에서 절편을 약 40분 동안 회복시키십시오. 금도금 패드는 100% ethanol로, 전극 어레이는 70% ethanol과 부드러운 브러시로 세척하십시오.그런 다음, 전극 어레이를 Milli-Q water로 헹굽니다. 조직 절편을 배치하기 전에 CorePlate single well을 기록 장치에 삽입합니다. CorePlate TM single well이 장착된 HD-MEA를 기록 시스템에 연결합니다.공기 방울이 생기지 않도록 약 2 milliliters의 ACSF를 웰에 피펫팅합니다. BrainWave 5 또는 BW5 소프트웨어에서 라이브 획득을 시작하고 Cockpit Mode 및 Tissue Model과 같은 파라미터를 설정합니다. 배경 노이즈가 9-20 microvolts의 최적 범위 내에 있는지 확인합니다.최소 30초 동안 기록하십시오. 기록을 중단한 후, 저장된 파일을 열어 분석합니다. 노이즈 인터페이스를 분석하려면 Results를 클릭하고 Playback을 선택하십시오.미디어 내보내기(Media Export)를 클릭하고 원시 트레이스(Raw Traces) 드롭다운 메뉴에서 액티비티 맵(Activity Map)을 선택하여 피크 간 진폭과 표준 편차를 분석함으로써 기저 소음을 결정합니다. 다음으로, 파스퇴르 피펫을 사용하여 현미경 하에서 조직 절편을 CorePlate 단일 웰의 중앙에 배치하고 ACSF를 제거합니다. 절편을 고정하기 위해 앵커를 절편 위에 위치시킵니다.3 milliliter 파스퇴르 피펫을 사용하여 ACSF 한 방울을 떨어뜨렸다가 제거하는 방식으로 슬라이스를 5-10회 세척합니다. 꼬인 종이 심지를 사용하여 잔류 ACSF를 제거합니다. 최적의 기록을 위해 슬라이스와 전극 사이의 접촉을 개선하려면 웰 중앙에 ACSF를 몇 방울 떨어뜨립니다.유입 라인을 슬라이스 위에 위치시키고 유출 라인은 슬라이스에서 멀리 배치합니다. 데이터 수집 및 분석을 진행하기 전에 접지 전극에서 기포를 제거하십시오. 소뇌 피질의 분자층, 푸르키네 세포층 및 과립 세포층에서의 총 스파이크 수를 분석한 결과, 근긴장이상증 조직 슬라이스에서는 스파이크 발생 수가 유의하게 적었으나, 창백핵 DBS를 통해 건강한 대조군과 유사한 수준으로 스파이크 수가 증가함을 확인했습니다.Kruskal-Wallis H 검정을 통해 치료를 받지 않은 긴장이상증 그룹 및 긴장이상증 가짜 자극 그룹 모두와 비교했을 때, 긴장이상증 DBS 그룹의 소뇌 피질 분자층 내 스파이크 수가 통계적으로 유의하게 증가했음을 추가로 확인하였습니다. 또한, 긴장이상증 DBS 그룹은 푸르키니에 세포층과 과립 세포층에서도 스파이크 증가를 보였으며, 이는 대조군과 유사한 수준에 도달하였습니다. 적절한 접지, 양호한 전극 접촉 및 저소음 실험 조건을 통해 모든 측정 과정에서 안정적인 HD-MEA 기록을 유지하는 것이 매우 중요합니다.본 프로토콜은 소뇌 네트워크 활동과 심부 뇌 자극에 의한 변조 효과를 고해상도로 측정할 수 있게 합니다.

investigating-network-wide-mechanisms-pallidal-deep-brain-stimulation

Research

연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

이 문서에서는, 우리는 기본 네트워크에 뇌 자극의 효과를 조사하기 위해 TMS와 fMRI의 조합과 관련된 방법론과 고려 사항을 검토하십시오.

기본 모드 네트워크를 검사하기 위해 Transcranial 자석 자극과 fMRI를 결합

이 문서에서는, 우리는 연약한 X 증후군과 자폐증 스펙트럼에서 개인의 고통 개인의 대뇌 피질의 소성에 세타 - 버스트 TMS의 자극의 효과를 검사합니다.

TMS : 연약한 X 증후군 및 자폐증과 개인의 소성의 Mechasnism를 탐험하는 세타 - 버스트 프로토콜을 사용하여

이 문서에서는, 우리는 Neuronetics NeuroStar TMS 장치를 사용하여 FDA 승인을 우울증 치료 프로토콜과 관련된 방법론과 고려 사항을 검토하십시오.

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이 문서에서는, 우리는 수술 절차를 설명하고 마우스 모델에서 고밀도 encephalography (EEG)의 취득에 마우스 두개골에 울트라 얇은 polyimide 기반 microelectrode 배열 (PBM - 배열)의 주입을위한 도움말을 취급.

Polyimide 기반 Microelectrode를 사용하여 자유롭게 이동 마우스의 고밀도 뇌파 레코딩

ChR2을 표현 성인에서 태어난 뉴런은 후각 신경 회로의 기능들에 대한 그들의 기여를 검토하기 위해 슬라이스 electrophysiological 준비로 조작할 수 있습니다.

뉴런의 사진 자극에 저렴한 LED 배열을 사용하여

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적외선 신경 자극의 메커니즘을 조사하는 전체 세포 패치 클램프

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에있는 후각 수용체 뉴런의 전체 마운트 Immunolabeling<em&gt; 초파리</em&gt; 안테나

이 프로토콜은 설치류에서 동시에 기능성 자기 공명 영상과 깊은 두뇌 자극을위한 표준 방법을 설명합니다. 이러한 실험 도구를 함께 사용은 거의 모든 뇌 대상에 전기 자극에 대한 응답으로 글로벌 다운 스트림 활동의 탐사 할 수 있습니다.

설치류에 동시 fMRI를 깊은 뇌 자극

뇌심부자극술(DBS) 수술의 치료 효과의 기저에 있는 메커니즘에 대한 조사가 필요합니다. 본 원고에 제시된 방법은 DBS 수술 후 신경발생을 촉진할 수 있는 후보 유전자의 유전자 발현 프로파일을 분석하여 DBS에 의해 유발되는 세포 이벤트를 조사하는 실험적 접근 방식을 설명합니다.

전방 시상 핵의 깊은 뇌 자극 후 쥐 해마의 유전자 발현 변화 분석

쥐의 시상하핵(STN)에 전극을 이식하는 방법을 설명합니다. STN의 더 나은 위치 파악은 마이크로 기록 시스템을 사용하여 달성되었습니다. 또한, 동물의 머리와 자극기 사이의 오래 지속되는 연결을 특징으로 하는 자극 설정이 제공됩니다.

미세 전극은 장기 깊은 뇌 자극 쥐의 Subthalamic 핵에 전극의 주입을 가이드

University Medical Center Rostock.  여기서는 생체 내에서 받은 디스토닉 햄스터 모델의 급성 소뇌 절단에서 체외 고밀도 마이크로전극 배열 기록을 위한 프로토콜을 설명합니다. 11일간 연속 창백 심부 뇌 자극.

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