쥐의 신장 허혈-재관류 손상 중 레이저 반점 조영 영상으로 모니터링되는 미세혈관 관류

본 연구에서는 레이저 스펙클 대비 영상 시스템을 사용하여 허혈 재관류 중 기니의 미세관류를 모니터링합니다. 이 기술은 고형 장기 이식, 약물 효능, 허혈 연구와 같은 혈류 변화와 관련된 연구에 적용될 수 있습니다. 각 시술 전에 수술대를 소독하기 시작하세요.

멸균된 기구, 면봉, 거즈, 미리 희석된 마취제 등 필요한 모든 물품을 테이블 위에 깔끔하게 정리하세요. 수술 30분 전 체중 1kg당 0.2밀리그램의 피하 주사로 멜록시캄을 투여하여 통증을 완화하세요. 멸균된 식염수를 깨끗한 용기에 부으세요.

가위를 사용해 거즈 한가운데에 적절한 구멍을 내세요. 마취된 쥐를 온열 패드 위에 올려놓고 테이프로 고정하세요. 복부 털을 제거하기 위해 제모 크림을 바르세요.

온열 패드를 사용해 수술 내내 직장 온도를 37도 섭씨로 유지하세요. 면봉으로 수술 부위를 먼저 75% 알코올로 소독한 뒤, 그 다음 요오도포르로 소독한 후 이 과정을 두 번 더 반복하세요. 그 다음 집게로 쥐 발가락을 꼬집어 통증 반응이 없음을 확인하세요.

가위로 복부 중앙에 수직 절개를 하세요. 복막에서 피부를 부드럽게 분리한 후 복막을 절개하여 복강 안으로 들어가세요. 가시성을 높이기 위해 리트랙터를 부착하세요.

수술 부위를 거즈로 덮어 복강과 맞춰 입구를 맞추세요. 거즈를 생리식염수로 적셔. 면봉으로 장을 부드럽게 한쪽으로 옮겨 오른쪽 신장과 주변 조직을 노출시킵니다.

거즈를 접어 장을 덮고, 건조를 막기 위해 식염수로 적셔야 합니다. 다음으로, 각진 겸자를 사용해 오른쪽 요관을 들어 올립니다. 요관에 6-0 봉합실 두 개를 통과시키고 두 군데에서 결찰하세요.

미세가위를 사용해 두 결찰 사이의 요관을 절단합니다. 그 후 생리식염수에 젖은 면봉을 가늘게 겸자로 들고 간을 부드럽게 위로 밀어 올립니다. 솜으로 간을 고정해 신장과 오른쪽 혈관을 노출시켜.

다음으로, 각도가 있는 겸자를 사용해 신장 주위 지방 패드를 둔하게 분리하여 신동맥과 정맥이 완전히 노출되도록 합니다. 조심스럽게. 겸자를 신장 동맥과 정맥 아래로 밀어 넣어 채널을 만듭니다. 6-0 실크 꼬인 봉합사를 양측 혈관 주위에 감고 결찰합니다. 막힌 신장 동맥과 신장 근처의 정맥을 절단하세요.

부착 조직이 있는 신장을 제거하세요. 그 다음 간을 고정하는 솜뭉치를 제거하세요. 레이저 스펙클 대비 영상 시스템을 켜고 전용 소프트웨어를 실행하세요.

원본 이미지를 클릭한 후 미리보기로 생생한 수술 현장 이미지를 보여줍니다. 마우스 위치를 다시 잡으세요. 원본 이미지를 볼 때 카메라 배율을 조절하여 목표 신장을 선명하게 볼 수 있습니다.

그 후 실시간 혈류 영상을 확인하려면 동시 디스플레이를 클릭하세요. 배율을 2.5배로 설정하고 자동 혈류 조절을 선택하세요. 그 다음 혈류 매개변수를 고정하세요.

녹화를 5,000밀리초마다 한 프레임씩 캡처하도록 설정하세요. 다음으로, 정사각형 면적 크기 매개변수를 112로 설정하고 신장 이미지에 다섯 개의 정사각형 영역을 균일하게 배치합니다. 실시간 영상 등록을 클릭하고 기록하여 혈류 기록을 시작하세요.

30분 기초 기록 후 왼쪽 신장 혈관 주변의 지방 조직을 무딘 분리로 분리합니다. 지혈 겸자를 사용해 좌측 신동맥과 폐문(hilum) 근처 정맥에 마이크로클램프를 끼웁니다. 실시간 모니터링을 30분 더 계속하세요.

마이크로클램프를 풀어 재관류를 시작하세요. 신장 미세혈관 혈류의 실시간 회복을 모니터링하고 기록합니다. 재주류 상태를 최소 60분 이상 모니터링한 후 기록을 중단하고 복부 절개 부위를 닫으세요.

탈수를 막기 위해 복막 내 주사로 1밀리리터 생리식염수를 투여하세요. 마우스를 온열 패드 위에 올려놓고 의식을 회복하고 스스로 자세를 바로잡을 때까지 모니터링하세요. 초기 30분 동안 신장 미세혈관 혈류는 점차 기준선에서 안정되었습니다.

허혈 이전에 관심 부위 간 관류 수준 이질성이 관찰되었습니다. 신장 동맥과 정맥을 집정한 후 혈류가 급격히 감소하고 신장 미세순환은 관류 없이 전환되었습니다. 클램프를 풀자마자 혈류가 즉시 최고조에 달했다가 점차 감소했다가 비교적 안정적인 수준으로 회복되었다.

재관류 60분 동안 미세혈관 관류량은 허혈 이전보다 훨씬 낮았습니다. 우리는 레이저 스펙클 대조 영상 시스템을 통해 신장 미세관류의 혈류를 얻을 수 있습니다. 이를 통해 허혈 과정과 재관류를 검증합니다.

깨끗하고 조영제가 좋은 신장을 얻으려면 인내심을 가지고 신장을 주변 자원과 조직과 분리하는 데 시간을 투자해야 합니다. 앞으로 병태생리의 추가 지표를 도입하여 신장 허혈에 미치는 약물 효과를 모니터링하는 데 활용될 수 있습니다.