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<ol><li>Li, X. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global%2C+regional%2C+and+national+burden+of+ischemic+stroke%2C+1990%E2%80%932021%3A+an+analysis+of+data+from+the+global+burden+of+disease+study+2021%5BTitle%5D)+AND+%22EClinicalMedicine%22%5BJournal%5D)">Global, regional, and national burden of ischemic stroke, 1990–2021: an analysis of data from the global burden of disease study 2021.</a> EClinicalMedicine. , (2024).</li>
<li>Zaki, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-competitive+AMPA+receptor+antagonist+perampanel+inhibits+ischemia-induced+neurodegeneration+and+behavioral+deficits+in+focal+cortical+pial+vessel+disruption+stroke+model%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Non-competitive AMPA receptor antagonist perampanel inhibits ischemia-induced neurodegeneration and behavioral deficits in focal cortical pial vessel disruption stroke model.</a> Cells. , (2025).</li>
<li>Pu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Projected+global+trends+in+ischemic+stroke+incidence%2C+deaths+and+disability-adjusted+life+years+from+2020+to+2030%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Projected global trends in ischemic stroke incidence, deaths and disability-adjusted life years from 2020 to 2030.</a> Stroke. , (2023).</li>
<li>Khan, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+risk+of+stroke+after+transient+ischemic+attack+or+minor+stroke%3A+a+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA%22%5BJournal%5D)">Long-term risk of stroke after transient ischemic attack or minor stroke: a systematic review and meta-analysis.</a> JAMA. , (2025).</li>
<li>Capirossi, C., Laiso, A., Renieri, L., Capasso, F., Limbucci, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology%2C+organization%2C+diagnosis+and+treatment+of+acute+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Radiol+Open%22%5BJournal%5D)">Epidemiology, organization, diagnosis and treatment of acute ischemic stroke.</a> Eur J Radiol Open. , (2023).</li>
<li>Kumar, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Addressing+systemic+complications+of+acute+stroke%3A+a+scientific+statement+from+the+American+Heart+Association%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Addressing systemic complications of acute stroke: a scientific statement from the American Heart Association.</a> Stroke. , (2025).</li>
<li>Khakh, B. S., Sofroniew, M. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diversity+of+astrocyte+functions+and+phenotypes+in+neural+circuits%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Diversity of astrocyte functions and phenotypes in neural circuits.</a> Nat Neurosci. , (2015).</li>
<li>Verkhratsky, A., Parpura, V., Vardjan, N., Zorec, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiology+of+astroglia%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Exp+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">Physiology of astroglia.</a> Adv Exp Med Biol. , (2019).</li>
<li>Chen, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+astrocyte+metabolic+reprogramming+in+ischemic+stroke+%28review%29%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">The role of astrocyte metabolic reprogramming in ischemic stroke (review).</a> Int J Mol Med. , (2025).</li>
<li>Collyer, E., Blanco-Suarez, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Astrocytes+in+stroke-induced+neurodegeneration%3A+a+timeline%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Astrocytes in stroke-induced neurodegeneration: a timeline.</a> Front Mol Med. , (2023).</li>
<li>Wang, Y., Wang, D., Li, D., Ma, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+astrocytes+in+ischemic+stroke+%E2%80%94+mechanisms%2C+functions+and+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">The role of astrocytes in ischemic stroke — mechanisms, functions and treatment.</a> Front Cell Dev Biol. , (2025).</li>
<li>Deng, X. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+insights+into+acute+ischemic+stroke+from+the+perspective+of+spatial+omics%5BTitle%5D)+AND+%22Theranostics%22%5BJournal%5D)">New insights into acute ischemic stroke from the perspective of spatial omics.</a> Theranostics. , (2025).</li>
<li>Zhou, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Membrane+associated+RNA-containing+vesicles+regulate+cortical+astrocytic+microdomain+calcium+transients+in+awake+ischemic+stroke+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Sci+%28Weinh%29%22%5BJournal%5D)">Membrane associated RNA-containing vesicles regulate cortical astrocytic microdomain calcium transients in awake ischemic stroke mice.</a> Adv Sci (Weinh). , (2024).</li>
<li>Mohseni Ahooyi, T. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Network+analysis+of+hippocampal+neurons+by+microelectrode+array+in+the+presence+of+HIV-1+Tat+and+cocaine%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Physiol%22%5BJournal%5D)">Network analysis of hippocampal neurons by microelectrode array in the presence of HIV-1 Tat and cocaine.</a> J Cell Physiol. , (2018).</li>
<li>Ghouse, M., Li, M., Long, C., Jiang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multichannel+extracellular+recording+in+freely+moving+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Multichannel extracellular recording in freely moving mice.</a> J Vis Exp. , (2023).</li>
<li>Montoya, B., Thompson, R. J., Boyce, A. K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+photothrombosis+and+fiber+photometry+to+induce+and+monitor+ischemic+stroke+in+behaving+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Simultaneous photothrombosis and fiber photometry to induce and monitor ischemic stroke in behaving mice.</a> J Vis Exp. (225), e69418(2025).</li>
<li>Labat-gest, V., Tomasi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photothrombotic+ischemia%3A+a+minimally+invasive+and+reproducible+photochemical+cortical+lesion+model+for+mouse+stroke+studies%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Photothrombotic ischemia: a minimally invasive and reproducible photochemical cortical lesion model for mouse stroke studies.</a> J Vis Exp. (76), e50370(2013).</li>
<li>Llovera, G., Pinkham, K., Liesz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modeling+stroke+in+mice%3A+focal+cortical+lesions+by+photothrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Modeling stroke in mice: focal cortical lesions by photothrombosis.</a> J Vis Exp. (171), e62536(2021).</li>
<li>Talley Watts, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rose+Bengal+photothrombosis+by+confocal+optical+imaging+in+vivo%3A+a+model+of+single+vessel+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Rose Bengal photothrombosis by confocal optical imaging in vivo: a model of single vessel stroke.</a> J Vis Exp. (100), e52794(2015).</li>
<li>Seong, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Target+ischemic+stroke+model+creation+method+using+photoacoustic+microscopy+with+simultaneous+vessel+monitoring+and+dynamic+photothrombosis+induction%5BTitle%5D)+AND+%22Photoacoustics%22%5BJournal%5D)">Target ischemic stroke model creation method using photoacoustic microscopy with simultaneous vessel monitoring and dynamic photothrombosis induction.</a> Photoacoustics. , (2022).</li>
<li>Pochechuev, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+fiber-optic+recording+of+acute+ischemic+stroke+signatures%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biophotonics%22%5BJournal%5D)">Real-time fiber-optic recording of acute ischemic stroke signatures.</a> J Biophotonics. , (2022).</li>
<li>Gao, Y. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+disruption+to+remodeling%3A+the+evolution+and+therapeutic+prospects+of+neuroimmune+regulatory+circuitry+after+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">From disruption to remodeling: the evolution and therapeutic prospects of neuroimmune regulatory circuitry after ischemic stroke.</a> Front Immunol. , (2026).</li>
<li>Lee, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optrode+array+for+simultaneous+optogenetic+modulation+and+electrical+neural+recording%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Optrode array for simultaneous optogenetic modulation and electrical neural recording.</a> J Vis Exp. (187), e63460(2022).</li>
<li>Wang, Y. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+for+machine+learning-based+classification+of+neuronal+cell+types+from+spike+waveforms%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol for machine learning-based classification of neuronal cell types from spike waveforms.</a> STAR Protoc. , (2025).</li>
<li>Tian, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+neural+activity+in+worms%2C+flies+and+mice+with+improved+GCaMP+calcium+indicators%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Imaging neural activity in worms, flies and mice with improved GCaMP calcium indicators.</a> Nat Methods. , (2009).</li>
<li>Boyce, A. K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contralesional+hippocampal+spreading+depolarization+promotes+functional+recovery+after+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Contralesional hippocampal spreading depolarization promotes functional recovery after stroke.</a> Nat Commun. , (2025).</li>
<li>Fluri, F., Schuhmann, M. K., Kleinschnitz, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+ischemic+stroke+and+their+application+in+clinical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Des+Devel+Ther%22%5BJournal%5D)">Animal models of ischemic stroke and their application in clinical research.</a> Drug Des Devel Ther. , (2015).</li>
<li>Liu, F., McCullough, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Middle+cerebral+artery+occlusion+model+in+rodents%3A+methods+and+potential+pitfalls%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Middle cerebral artery occlusion model in rodents: methods and potential pitfalls.</a> J Biomed Biotechnol. , (2011).</li>
<li>Shvedova, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modified+middle+cerebral+artery+occlusion+model+provides+detailed+intraoperative+cerebral+blood+flow+registration+and+improves+neurobehavioral+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Modified middle cerebral artery occlusion model provides detailed intraoperative cerebral blood flow registration and improves neurobehavioral evaluation.</a> J Neurosci Methods. , (2021).</li>
<li>Bacigaluppi, M., Comi, G., Hermann, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+ischemic+stroke.+Part+two%3A+modeling+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Open+Neurol+J%22%5BJournal%5D)">Animal models of ischemic stroke. Part two: modeling cerebral ischemia.</a> Open Neurol J. , (2010).</li>
<li>Jiang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishing+a+photothrombotic+%E2%80%9Cring%E2%80%9D+stroke+model+in+adult+mice+with+late+spontaneous+reperfusion%3A+quantitative+measurements+of+cerebral+blood+flow+and+cerebral+protein+synthesis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Establishing a photothrombotic “ring” stroke model in adult mice with late spontaneous reperfusion: quantitative measurements of cerebral blood flow and cerebral protein synthesis.</a> J Cereb Blood Flow Metab. , (2006).</li>
<li>Knezic, A., Broughton, B. R. S., Widdop, R. E., McCarthy, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimising+the+photothrombotic+model+of+stroke+in+the+C57BL%2F6+and+FVB%2FN+strains+of+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Optimising the photothrombotic model of stroke in the C57BL/6 and FVB/N strains of mouse.</a> Sci Rep. , (2022).</li>
</ol>

```html
<table><tbody><tr><td>2% TTC 염색 용액</td><td>Solarbio</td><td>G3005</td><td></td></tr><tr><td>Agorose</td><td>Biosharp</td><td>BS081</td><td></td></tr><tr><td>체온 유지 시스템 / 체온 모니터</td><td>RWD life Science</td><td>69002</td><td></td></tr><tr><td>두개골 나사</td><td>Zhongke Huida</td><td>23092007</td><td></td></tr><tr><td>데이터 수집 및 분석 소프트웨어(파이버 광도계)</td><td>RWD life Science</td><td>ORFs</td><td></td></tr><tr><td>데이터 수집 및 분석 소프트웨어(다중 채널 전기생리학)</td><td>Plexon</td><td>PlexControl, Offline Sorter, Neuroexplorer&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>디지털 실험실 스테레오탁틱 프레임</td><td>RWD life Science</td><td>68804</td><td></td></tr><tr><td>핀셋</td><td>FST</td><td>11252-00</td><td>핀셋 직경 0.005 mm &acute; 0.025 mm</td></tr><tr><td>레이저 전력 미터</td><td>Sanwa</td><td>LP10</td><td></td></tr><tr><td>레이저 스펙클 혈류 이미징 시스템</td><td>Pericam AB</td><td>Pericam PSI NR</td><td></td></tr><tr><td>마우스</td><td>Risemice</td><td>C57BL/6J</td><td></td></tr><tr><td>소형 휴대용 두개골 드릴</td><td>RWD life Science</td><td>78001</td><td></td></tr><tr><td>마우스 바이러스 마이크로 인젝터</td><td>RWD life Science</td><td>68025</td><td></td></tr><tr><td>옵트로드</td><td>사용자 정의</td><td>Kedou</td><td>16개의 텅스텐 전극과 1개의 광섬유로 구성된 사용자 정의</td></tr><tr><td>Prism</td><td>GraphPad</td><td>5.01 버전</td><td></td></tr><tr><td>R studio</td><td>Posit</td><td>버전 4.4.1</td><td></td></tr><tr><td>rAAV-GfaABC1D-GCaMP6s</td><td>BrainVTA</td><td>PT-2560</td><td>성상교세포 특이적 칼슘 표지자</td></tr><tr><td>rAAV-GfaABC1D-opto-vTrap</td><td>BrainCase</td><td>BC-2446</td><td>성상교세포 특이적 광유전학 바이러스 벡터</td></tr><tr><td>로즈 벤갈 염료</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>198250</td><td>혈전 유도용 광민감 염료/Sigma-Aldrich</td></tr><tr><td>트롤리 장착형 마취 워크스테이션</td><td>RWD life Science</td><td>R520</td><td>마우스용 제어 가능한 흡입 마취를 위한 마취기</td></tr></tbody></table>
```

광혈전성 뇌졸중 모델링과 행동하는 쥐의 신경 및 성상세포 활동의 생체 내 옵트로드 기록을 위한 통합 방법

An Integrated Method for Photothrombotic Stroke Modeling and In Vivo Optrode Recording of Neuronal and Astrocytic Activity in Behaving Mice

Investigating astrocyte-neuron dynamics following ischemic stroke is essential for understanding post-stroke recovery mechanisms. However, current ...

본 연구에서는 행동 중인 마우스의 허혈성 뇌졸중 동안 성상교세포와 뉴런의 활동을 동시에 기록하는 통합 방법을 개발했습니다. 기존 방법들은 뉴런 또는 성상교세포를 개별적으로 기록했습니다. 본 프로토콜은 뇌졸중 발생 순간부터 성상교세포와 뉴런의 신호를 동시에 포착합니다.먼저, 깊게 마취된 C57BL/6J 마우스를 마취 마스크가 장착된 정위 고정 틀(stereotaxic frame)로 옮깁니다. 피드백 제어 가열 패드로 마우스의 체온을 36~37.5 °C로 유지하면서 10분마다 마취 깊이를 모니터링합니다. 눈에 안연고를 바른 후, 이어 바(ear bars)와 마우스 바(mouth bar)를 사용하여 마우스를 정위 고정 틀에 고정합니다.머리가 대칭적으로 고정되면 가볍게 확인하여 머리 고정 상태를 점검합니다. 제모 및 피부 무균 처리를 마친 후, 수술용 가위로 중앙 절개를 실시합니다. 생리식염수와 면봉으로 골막을 닦아내어 bregma와 lambda를 노출시킵니다.유리 마이크로피펫을 내려 Bregma와 Lambda에 순차적으로 접촉시킵니다. 디지털 버니어 캘리퍼스에서 Z 좌표를 확인한 후, 두 지점의 차이가 0.04 mm 미만이 될 때까지 마우스 바(mouth bar)를 조절합니다. 유리 마이크로피펫을 내려 Bregma에 접촉시킨 후 디지털 버니어 캘리퍼스를 0으로 리셋합니다.마이크로피펫을 브레그마(bregma) 기준 좌우로 각각 2.3 millimeters씩 차례로 이동시킵니다. Z 좌표를 기록한 후, 양측의 차이가 0.04 millimeters 미만이 될 때까지 이어바(ear bars)를 조정합니다. 브레그마에서 디지털 버니어 캘리퍼스를 0으로 리셋한 다음, 전후(anterior posterior) +1.5 millimeters, 내외(medial lateral) +0.74 millimeters 지점에 운동 피질 전지 영역(motor cortex forelimb area)을 표시합니다.마이크로 드릴과 0.5 millimeter 원형 팁 드릴 비트를 사용하여 표시된 위치에 직경 약 0.5 millimeters의 작은 구멍을 뚫습니다. 주입 전, 두 가지 아데노 부속 바이러스 벡터를 동일한 부피로 혼합하고 샘플을 짧게 원심 분리합니다. 마이크로 주입 펌프에 연결된 유리 마이크로 피펫을 뇌 표면으로부터 배측-복측 깊이 -0.94 millimeters의 표적 부위까지 내립니다.각 벡터 200 nanoliters가 포함된 바이러스 혼합액 400 nanoliters를 분당 50 nanoliters의 속도로 주입합니다. 주입이 완료된 후 10분이 지나면 피펫을 천천히 제거합니다. 4-0 20 millimeter, 3/8 원형 봉합사를 사용하여 두피를 봉합하고, 마우스가 완전히 회복될 때까지 가열 패드 위에 둡니다.바이러스 주입 3~4주 후, 이전에 입증된 절차에 따라 두피 절개 단계까지 진행합니다. 두피 절개 시, 눈 주변에 충분한 피부를 남겨두면서 1.5 centimeters by 1.5 centimeters 크기로 두피를 제거합니다. 과산화수소와 0.9%saline으로 두개골을 세척합니다.브레그마(bregma)를 확인한 후, 디지털 버니어 캘리퍼스를 0으로 리셋합니다. 0.8 millimeter 라운드 팁 드릴을 사용하여 두개골 표면을 가볍게 거칠게 만듭니다. 운동 피질의 전지 영역을 표시합니다.전후 방향으로 1.5 millimeters, 내외측 방향으로 0.74 millimeters 지점을 잡습니다. 표시한 지점을 중심점으로 하여 5 millimeters x 5 millimeters 크기의 정사각형을 그립니다. 약 10,000 rpm의 마이크로 드릴을 사용하여 정사각형의 테두리를 따라 뚫습니다.드릴 경로에 얼음처럼 차가운 식염수를 지속적으로 공급하고, 골편이 느슨해지면 즉시 중단하십시오. 반대측 대뇌 반구와 소뇌에 직경 0.5 millimeter의 작은 구멍 세 개를 뚫습니다. 구멍에 두개골 성형술용 나사를 식립합니다.각 나사가 뇌경질막에 닿되, 뇌 조직의 손상을 방지하기 위해 그 이상 침투하지 않도록 주의하십시오. 포셉을 사용하여 느슨해진 골편을 제거합니다. 뇌 조직과의 직접적인 접촉을 피하면서 두개창의 뇌경질막을 제거하기 위해 0.03 mm x 0.01 mm보다 작은 초미세 팁이 달린 초미세 포셉을 사용하십시오.옵트로드를 스테레오택식 프레임의 마이크로매니퓰레이터 암에 고정하고 두개창 위로 이동시킵니다. 옵트로드의 은색 접지와 참조 전선을 3개의 두개성형술 나사에 단단히 얽어 고정합니다. 멸균 식염수로 두개창 표면을 세척합니다.optro를 10초당 1mm의 속도로 -0.94mm의 목표 배측-복측 깊이까지 천천히 내립니다. 이식 후 두개창 위에 아가로스 층을 도포합니다. 치과용 시멘트를 3~4층으로 도포합니다.치과용 시멘트가 응고되면 3~5일 동안 진통제를 투여하고, 생쥐가 1~2주 동안 회복될 수 있도록 합니다. 이중 또는 삼중 파장 광섬유 광량 측정 시스템을 사용하여 GCaMP6s를 흥분시킵니다. 신호 채널은 470 nanometers로, 제어 채널은 410 nanometers로 설정합니다.샘플링 속도를 초당 60프레임으로 조정하십시오. 이제 모든 기록 시스템 구성 요소를 적절하게 접지하십시오. 기록하는 동안 공통 중간 참조를 사용하십시오.녹화 세션 전반에 걸쳐 노이즈를 모니터링하면서, 녹화 소프트웨어에서 광대역 및 국소 전위(local field potential) 신호가 선택되었는지 확인하십시오. 마우스를 짧게 마취시킨 후, 어댑터를 통해 optro를 녹화 라인에 연결합니다. 녹화를 위해 마우스를 홈케이지와 유사한 환경에 배치하십시오.잠에서 깨어난 후 10분 동안 적응 시간을 줍니다. 5분 동안 분당 1회의 당기기를 수행하도록 하여 마우스의 악력 테스트 과정을 기록합니다. 다채널 및 파이버 포토메트리 시스템 모두에서 행동 테스트의 타임스탬프를 정확하게 기록하십시오.1.5% Rose Bengal 염료 용액을 kg당 10~20 mg의 용량으로 복강 내 투여하고 5분간 대기합니다. 깊은 마취가 유도되고 유지되면 옵트로드(optrode) 프로브를 레이저 광원에 연결합니다. 이식된 옵트로드를 통해 530 nm 레이저 빔을 15 mW의 세기로 5~8분 동안 조사하여 국소 허혈을 유도합니다.광유전학적 자극을 수행하려면 레이저 자극기를 옵트로드(optrode)에 연결하십시오. 488 nanometer 광유전학 레이저 자극기를 켜고 Opto-vTrap을 위해 10 milliwatts로 5분 동안 설정하십시오. 마지막으로, 회복을 위해 마우스를 가열 패드 위에 놓으십시오.기저치와 비교했을 때, 광혈전증 유도 후 뇌혈류량이 감소하였으며 뇌졸중 후 1일 및 7일째에도 계속 억제된 상태를 유지했습니다. 전지 악력은 뇌졸중 후 1일째에 매우 유의미한 감소를 보였으며, 7일째에도 계속 억제된 상태를 유지했습니다. 파이버 포토메트리로 기록한 성상교세포 칼슘 과도 현상과 전기생리학적으로 측정된 뉴런 스파이크는 타임스탬프를 기준으로 정렬되었습니다.광혈전성 뇌졸중 이후, 전완 잡기 과제 수행 중의 기저 발화율과 비교했을 때 피라미드 뉴런과 인터뉴런 모두에서 발화율이 유의하게 억제되었습니다. 기저 상태에서는 성상교세포의 칼슘 일시적 변화가 과제 시작 후 4~6초 이내에 정점에 도달했습니다. 그러나 광혈전성 뇌졸중 이후에는 진폭이 유의하게 감소하였으며, 이는 약화된 칼슘 활성을 반영합니다.래스터 플롯(Raster plots)과 자극 주변 시간 히스토그램(peri-stimulus time histograms)을 통해 광자극 동안의 신경세포 활동 변화를 확인하였습니다. 피라미드 뉴런과 인터뉴런의 발화율 모두 자극 전 기선(baseline)과 비교하여 광자극 후 유의미하게 감소하였으며, 이는 성상교세포 조절이 국소 회로의 흥분성에 측정 가능한 하위 효과를 준다는 것을 확인시켜 줍니다. 본 프로토콜을 통해 급성 징후 발생부터 만성 단계에 이르기까지 뇌졸중 전 과정에 걸쳐 운동 능력과 신경 활동을 중단 없이 기록할 수 있습니다.본 프로토콜의 성공 여부는 정밀하거나 조율된 정렬에 달려 있습니다. 단안 optro 임플란테이션과 수술 전반에 걸친 충분한 바이러스 발현 시간이 중요합니다. 향후 연구에서는 더 넓은 뇌 영역을 모니터링하기 위해 여러 개의 임플란트를 사용하거나, 다양한 행동 분석을 통해 서로 다른 세포 유형을 타겟팅할 수 있습니다.

an-integrated-method-for-photothrombotic-stroke-modeling-vivo-optrode

Research

연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

이 비디오는 감광성 염료 투여 후 손상되지 않은 두개골의 레이저 조명으로 마우스 모델에서 광혈전 스트로크를 생성하는 절차를 보여줍니다.

마우스 모델의 광혈전성 스트로크 모델링: 광혈전증을 유발하기 위해 감광성 염료 투여 후 마우스 두개골을 통한 레이저 조명 기술

출처: Maruoka, H., et. al. 깨어 있는 쥐의 미세아교세포 역학 및 신경 활동의 동시 이미징.J. Vis. Exp. (2022) 이 비디오는 시각적 자극 중 깨어 있는 쥐의 신경 활동과 미세아교세포 역학을 이미징하기 위한 이광자 현미경 절차를 보여주며 칼슘 과도 및 세포 상호 작용을 강조합니다.

깨어 있는 쥐에서 미세아교세포의 역학과 신경 활동의 동시 이미징(Simultaneous Imaging of Microglial Dynamics and Neuronal Activity in an Awake Mouse)

Photothrombosis 매우 재현성 방식으로 관심 분야의 작은 잘 구분 경색을 유도하기위한 빠르고, 최소 침습 기술입니다. 그것은 형질 전환 생쥐에서 뇌의 가소성을 기본 세포 및 분자 반응 연구를 위해 특히 적당하다.

Photothrombotic 국소 빈혈 : 마우스 스트로크 연구를위한 최소 침습 및 재현성 광화학 대뇌 피질의 병변 모델

여기에서는 생체 내 마우스의 체성 감각 피질에서 Rose Bengal 광혈전 혈전을 유도하기 위한 반침습적 광학 현미경 접근 방식을 설명합니다.  이미징 절차의 기술적 측면은 광혈전 이벤트의 유도에서 적용 및 데이터 수집에 이르기까지 설명됩니다.

공 초점 광학 이미징에 의해 로즈 벵갈 Photothrombosis<em&gt; 생체</em&gt; : 단일 선박 스트로크의 모델

이 비디오는 Thy1-GFP 형질전환 라인에서 생체 내 2광자 현미경을 사용하여 마우스 후비장 피질의 뉴런을 만성적으로 이미징할 수 있는 개두술 절차를 보여줍니다. 이 접근법은 mCherry 발현 아데노 관련 바이러스를 배측 해마에 주입하는 것과 결합됩니다. 이러한 기술을 통해 RSC에서 경험 의존적 구조적 가소성을 장기간 모니터링할 수 있습니다.

동시에 두 광자<em&gt; 생체</em&gt; 마우스 Retrosplenial 코어 텍스에서 시냅틱 입력의 이미징 및 시냅스 대상

이 프로토콜은 대뇌 thromboemboli을 시각화 결합 된 근적외선 형광 (NIRF) 이미징 및 마이크로 컴퓨터 단층 촬영 (microCT)의 응용 프로그램을 설명합니다. 이 기술은 혈전 부담과 진화의 정량화 할 수 있습니다. microCT 기술은 금 나노 입자를 사용하여 살아있는 동물 내부 혈전 가시화하면서 NIRF 이미징 기술은 형광 절제 뇌 혈전 표지 가시화.

직접 대뇌 Thromboemboli 시각화를위한 결합 된 근적외선 형광 이미징 및 마이크로 계산 된 단층 촬영

여기에 설명된 광혈증 뇌졸중 모델은 감광성 염료투여 후 레이저 조명을 이용하여 영구 미생물 폐색을 유도하여 손상되지 않은 두개골을 통해 뇌졸중이 생성된다.

마우스에서 뇌졸중 모델링: 포심 피질 병변

여기에서 우리는 깨어 있는 마우스에서 소교세포 역학과 신경 활동의 동시 이미징을 위해 아데노 관련 바이러스 주입과 두개골 창 이식을 결합한 프로토콜을 설명합니다.

깨어 있는 생쥐의 소교세포 역학 및 신경 활동의 동시 이미징

밀리미터 크기의 코일과 결합된 저비용 뇌파 기록 시스템은 생체 내에서 마우스 뇌의 경두개 자기 자극을 유도하기 위해 제안되었습니다. 맞춤형의 유연한 다중 전극 어레이 기판이 있는 기존의 나사 전극을 사용하여 경두개 자기 자극에 대한 반응으로 마우스 뇌에서 다중 부위 기록을 수행할 수 있습니다.

생체 내에서 마우스 뇌를 경두개로 자극하기 위해 밀리미터 크기의 코일과 결합된 저비용 뇌파 기록 시스템

이 프로토콜은 형광 스티렌 미세구를 이용한 생 체 내 2광자 현미경 영상에 최적화된 만성 두개골 창문 및 미세혈관 색전증 마우스 모델에 대한 단계별 접근법을 상세히 설명하고 있습니다.

형광 폴리스티렌 미세구를 이용한 생체 내 2광자 현미경용 미세혈관 색전증 마우스 모델

모든 광학 접근 방식을 사용하여 허혈성 뇌졸중을 유도하는 동시에 깨어 있고 행동하는 마우스의 새로운 뇌졸중 코어에서 형광 바이오센서를 사용하여 신경 Ca2+ 활동을 기록합니다.

행동하는 마우스에서 허혈성 뇌졸중을 유도하고 모니터링하기 위한 동시 광혈전증 및 섬유 측광

133 조회수.  Guangzhou University of Chinese Medicine. 우리의 연구는 행동하는 생쥐의 허혈성 뇌졸중 동안 항성교세포와 뉴런 활동을 동시에 기록하는 통합 방법을 개발합니다. 이전 방법은 뉴런이나 항성교세포를 별도로 기록했습니다. 우리의 프로토콜은 뇌졸중 발생 순간부터 항성교세포와 뉴런 신호를 동시에 포착합니다.시작하기 위해, 깊은 마취를 받은 C57BL/6J 생쥐를 마취 마스크가 장착된 스테레오탁시 프레임으로 ?...

광혈전성 뇌졸중 모델링과 행동하는 쥐의 신경 및 성상세포 활동의 생체 내 옵트로드 기록을 위한 통합 방법

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