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<table><tbody><tr><td>0.45 마이크론 필터</td><td>시그마</td><td>S2HVU02RE</td><td></td></tr><tr><td>12k 또는 92k 올리고 칩</td><td>Customarray Inc. (Genscript)</td><td></td><td></td></tr><tr><td>15 cm 세포 배양 플레이트</td><td>코닝</td><td>CLS353004</td><td></td></tr><tr><td>293FT</td><td>인비트로겐</td><td>R70007</td><td></td></tr><tr><td>293NT</td><td>시스템 바이오사이언스</td><td>LV900A-1</td><td></td></tr><tr><td>알칼리성 포스파타제</td><td>NEB</td><td>M0290L</td><td></td></tr><tr><td>앰플리실린</td><td>피셔 사이언티픽</td><td>BP1760-25</td><td></td></tr><tr><td>ATP</td><td>NEB</td><td>9804S</td><td></td></tr><tr><td>ATP</td><td>NEB</td><td>P0756S</td><td></td></tr><tr><td>Cutsmart 버퍼</td><td>NEB</td><td>B6004S</td><td></td></tr><tr><td>딥 시퀀싱 (Next-Seq 또는 Hi-Seq)</td><td>일루미나</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DNAesy 혈액 및 조직 DNA 추출 키트</td><td>Qiagen</td><td>69506</td><td></td></tr><tr><td>듈베코의 수정된 이글 배지</td><td>Wisent</td><td>319-015-CL</td><td></td></tr><tr><td>엔두라 전기전도성 세포</td><td>루시겐</td><td>60242-1</td><td></td></tr><tr><td>EpiCult-B 마우스 배지 키트</td><td>스템셀 테크놀로지스</td><td>05610</td><td></td></tr><tr><td>Esp3I</td><td>NEB</td><td>R0734L</td><td></td></tr><tr><td>태아 소 혈청</td><td>Wisent</td><td>090-150</td><td></td></tr><tr><td>겔 DNA-정제 키트</td><td>자이모 리서치</td><td>D4008</td><td></td></tr><tr><td>Gene Pulser/MicroPulser 전기 충격 큐벳</td><td>바이오레드</td><td>1652089</td><td></td></tr><tr><td>젠틀 콜라겐아제/히알루로니다제</td><td>스템셀 테크놀로지스</td><td>7919</td><td></td></tr><tr><td>H11-Cas9</td><td>잭슨 랩러토리</td><td>JAX#028239</td><td></td></tr><tr><td>고속 원심분리기</td><td>벡만 코우터</td><td>MLS-50</td><td></td></tr><tr><td>김와이퍼</td><td>킴벌리-클락</td><td>34155</td><td></td></tr><tr><td>LB 아가</td><td>와이센트 테크놀로지스</td><td>800-011-LG</td><td></td></tr><tr><td>마이크로파이펫 풀러</td><td>사터 인스트루먼트</td><td>P97</td><td></td></tr><tr><td>미니-프레핑 플라즈미드 키트</td><td>프로가 바이오</td><td>PDH300</td><td></td></tr><tr><td>NE버퍼 3.1 (버퍼 포 BsmBI)</td><td>NEB</td><td>R0580L</td><td></td></tr><tr><td>올리고 클린 앤 콘센트레이터</td><td>자이모 리서치</td><td>D4061</td><td></td></tr><tr><td>올리고 클린업 키트</td><td>자이모 리서치</td><td>D4060</td><td></td></tr><tr><td>PAGE 정제된 일루미나 시퀀싱 프라이머</td><td>IDT DNA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>PCR 마이크로파이펫</td><td>드러먼드</td><td>5-000-1001-X10</td><td></td></tr><tr><td>PEI (폴리에틸렌이민)</td><td>시그마</td><td>408727-100ML</td><td></td></tr><tr><td>페니실린 및 스트렙토마이신</td><td>와이센트</td><td>450-201-EL</td><td></td></tr><tr><td>pLKO-Cre</td><td>애드진</td><td>158032</td><td></td></tr><tr><td>pMD2.G</td><td>애드진</td><td>12259</td><td></td></tr><tr><td>폴리-L-리신</td><td>시그마</td><td>P2636-100MG</td><td></td></tr><tr><td>psPAX2</td><td>애드진</td><td>12260</td><td></td></tr><tr><td>pXPR502-PPH-Cre</td><td>애드진</td><td>256776</td><td></td></tr><tr><td>Q5 폴리머레이즈 2x 마스터 믹스</td><td>NEB</td><td>M0494L</td><td></td></tr><tr><td>퀴빗 형광 정량</td><td>인비트로겐</td><td>Q33327</td><td></td></tr><tr><td>R26-LSL-Cas9-EGFP</td><td>잭슨 랩러토리</td><td>JAX#024857</td><td></td></tr><tr><td>R26-LSL-TdTomato 마우스</td><td>잭슨 랩러토리</td><td>JAX#007909</td><td></td></tr><tr><td>SapI</td><td>NEB</td><td>R0569L</td><td></td></tr><tr><td>T4 DNA 리가제</td><td>NEB</td><td>M0202L</td><td></td></tr><tr><td>울트라 원심분리기 튜브</td><td>벡만 코우터</td><td>344058</td><td></td></tr><tr><td>진공 필터 유닛</td><td>피셔 사이언티픽</td><td>SCHVU02RE</td><td></td></tr></tbody></table>

마우스 유선에서 유전자 결색 및 활성화의 병행 생체 내 스크리닝

Parallel In Vivo Screening of Gene Knockout and Activation in the Mouse Mammary Gland

Forward genetics screens are routinely employed to perturb thousands of genetic elements in a pooled fashion with the goal of producing large-scale ...

parallel-vivo-screening-gene-knockout-activation-mouse-mammary

Research

연구

JoVE Journal

Genetics

유전학

이 방법은 생쥐에서 유선 개발 및 기능을 해부하다하고 평가하는 방법에 대해 설명합니다. 우유 방출은 옥시토신 기반 myoepithelial 세포 수축 분석을 사용하여 평가하는 동안 Excised 내유 분비가 전체 마운트를 사용하여 개발의 정도에 대한 평가입니다.

마우스 모델에서 유선 개발 및 기능 평가

시간 경과 영상은 특정 행동 매개 변수 독특한 유전 적 병변 사이에 상관 관계가 있는지 확인하기 위해 유방암 위험 유전자 변형 마우스 모델에서 파생 된 기본 preneoplastic 유방 상피 세포의 행동을 평가하는 데 사용됩니다.

기본 Preneoplastic 유방 상피 세포의 시간 경과 영상은 유방암의 유전자 변형 마우스 모델에서 파생

마우스 유방 동맥에 수성 시약의 비 침습성 췌관 전달을위한 프로토콜이 설명되어 있습니다. 이 방법은 특히 유방 덕트를 대상으로 유 방 땀 샘의 젖꼭지로 지역화 주입을 활용합니다. 이 기술은 siRNA를, 화학 요법 제와 작은 분자를 포함한 화합물의 다양한 적응할 수있다.

마우스 유선 화 된 약물 전달을위한 췌관 주입

임상 적으로 전이성 유방암에서 유방 유관 시스템 결과에 아데노 바이러스 크레와 잠재 돌연변이의 활성화. YFP 발기인의 설립은 말초 전이성 종양 세포의 추적을 할 수 있습니다. 이 모델은 잠재 전이, 항 종양 면역, 유방암을 치료하는 새로운 면역 요법을 디자인을 공부하는 데 유용합니다.

유방암의 소설 형질 전환 마우스 모델 : 아데노 바이러스 크레와 유관 상피의 대상으로 전이성 유방암의 개시

암 종양 주변 조직뿐만 아니라 로컬 프 및 항 염증 매개 의해 영향 복잡한 질환이다. 따라서, 오히려 피하 모델보다 이방성 주입 모델은 방식으로 더 잘 모방 인간의 병리 암의 진행을 연구하기 위해 유용 할 수 있습니다.

마우스의 유방 지방 패드에 유방암 세포의 소성 주입은 종양의 성장을 연구한다.

여기 우리가 전체 마우스 배아 초기에 β-galactosidase 활동의 검출을 위한 표준 프로토콜 및 파라핀 단면화 및 counterstaining에 대 한 방법을 설명 합니다. 이것은 개발 조직 단면도에 또한 적용 될 수 있는 유전자 발현을 모니터링 하는 간단 하 고 빠른 절차 기관 또는 배양된 세포.

전체 마우스 배아에서 β-galactosidase 활동의 감지를 통해 유전자 발현 추적

이 프로토콜의 목표는 마우스 유방 땀샘으로 Cre 발현 아데노바이러스의 자궁 내 주입에 기초한 새로운 유방암 모델링 접근을 기술하는 것입니다. 이 접근은 세포 모형 및 기관 특정 조작을 시간적으로 통제한 방식으로 oncogenic 사건을 둘 다 허용합니다.

마우스 유방 동맥에 Cre 발현 아데노 바이러스의 경막 주사를 통해 유방암 모델링

환자 유래 제노이식(PDX) 모델과 이식 가능한 유전자 조작 마우스 모델은 인체 질환을 충실히 재구성하고 기본 및 번역 형 유방암 연구를 위한 선호 모델입니다. 여기서, 종양 생물학을 연구하고 약물 반응을 평가하기 위해 유방 지방 패드로 유방 종양 단편을 정형전으로 이식하는 방법이 설명된다.

유방암을 위한 전임상 모형으로 유방 종양의 정형소 이식

이 프로토콜은 교체 가능한 뚜껑 (R.MIW)이있는 새로운 유방 이미징 창을 설명합니다. R.MIW의 이식 후 생체 내 현미경 검사는 다른 발달 단계에서 세포 해상도로 건강하고 병든 유선의 종방향 및 다일 이미징을 허용합니다.

교체 가능한 뚜껑이있는 유방 이미징 창을 사용하는 종방향 생체 내 현미경 검사

본 프로토콜은 레이저 스캐닝 컨포칼 및 다광자 현미경에 의한 수유 마우스 유선의 생체 내 이미징을 위한 손쉬운 기술을 설명합니다.

Intravital Subcellular Microscopy of the Mammary Gland(유선의 생체 내 세포내 현미경)

본 프로토콜은 유방 상피 세포에 관심 유전자를 전달하기 위해 젖꼭지를 통한 바이러스 벡터의 관내 주입을 설명합니다.

생체 내 유방 관내 주입을 통한 마우스 유방 상피 세포로의 유전자 전달

Mount Sinai Hospital.  이 프로토콜은 마우스 유선에서 유전자 노크아웃 및 활성화 연구를 병행할 수 있는 확장 가능한 관내 CRISPR 스크리닝 접근법을 설명합니다.

마우스 유선에서 유전자 결색 및 활성화의 병행 생체 내 스크리닝

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